剖析分光光度法测定大米中直链淀粉含量

剖析分光光度法测定大米中直链淀粉含量
尹凤芝
【摘 要】To crumble to dust of the rice, To smash the specimen to skim, adding NaOH solutions to the skim the sample, then add the Iodine reagents, spectrophotometry determination of the absorbance at 720 nm o Make use of amylose and amglooectin to do calibration curve, from calibration curve it can be know amylose content of the sample o%将大米粉碎后,再对粉碎试样脱脂,脱脂后的试样加入氢氧化钠溶液,然后再加入碘试剂,用分光光度法在720nto处测定吸光度。利用马铃薯直链淀粉和支链淀粉的混合标样制作校正曲线,从校正曲线中可知样品中直链淀粉含量。
【期刊名称】《生命科学仪器》
【年(卷),期】2012(010)001
虚拟房间【总页数】4页(P10-13)
【关键词】直链淀粉;支链淀粉;碘试剂;分光光度法;校正曲线
【作 者】尹凤芝
【作者单位】农业部乳品质量监督检验测试中心哈尔滨,黑龙江哈尔滨150078
【正文语种】中 文
【中图分类】TS212.7
直链淀粉含量是评 价大 米品质的一个重要指标,与蒸煮品质、食味品质的好坏有着密切关系。大米直链淀粉含量适当的口感较好。大米直链淀粉含量还与米饭的粘性、光泽等食味鉴定值、淀粉糊化特性值关系密切.含量越高米饭越硬、口感越差。 其含量受开花后5~l0天的气温影响较大。有研究表明,此期气温较低,成熟后籽粒直链淀粉含量较高,反之,气温较高,直链淀粉含量较低 .但不随稻谷收获后贮藏时间长短的变化而变化 ,也不随品种籽粒大小或粒形的变化而变化,稻谷在收获后可尽早测定.也可稍后较空闲时测定。
一 、原理
拉线抱箍将大米粉碎至细粉以破坏淀粉的胚乳结构,使其易于完全分散及糊化,并对粉碎试样脱脂,
脱脂后的试样分散在氢氧化钠溶液中,向一定量的试样分散液中加入碘试剂,然后使用分光光度计于720nm 处测定显复合物的吸光度。
考虑到支链淀粉对试样中碘-直链淀粉复合物的影响,利用马铃薯直链淀粉和支链淀粉的混合标样制作校正曲线,从校正曲线中读出样品的直链淀粉含量。
二 、试验方法
怎么自制纳米胶1 试剂
除非另有说明,仅使用确认为分析纯的试剂,所用的水为蒸馏水或除去矿物质的水或同等纯度的水。
1.1 85%甲醇溶液
1.2 95%乙醇溶液
1.3 氢氧化钠溶液
1.3.1 1.0mol/L氢氧化钠溶液
1.3.2 0.09 mol/L氢氧化钠溶液
1.4 1mol/L乙酸溶液
1.5 碘试剂
bdav
用具盖称量瓶称取2.000g±0.005g碘化钾,加适量的水以形成饱和溶液,加入
0.200 g±0.001g碘,碘全部溶解后将溶液定量移至100mL容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,现配现用,避光保存。
1.6 马铃薯直链淀粉(市面有售 正规生产商)标准溶液:不含支链淀粉,浓度为1mg/mL
调漆设备称取100mg±0.5mg经脱脂及水分平衡后的直链淀粉于100mL锥形瓶中,小心加入1.0mL乙醇(1.2),将粘在瓶壁上的直链淀粉冲下,加入9.0mL氢氧化钠溶液(1.3.1),轻摇使直链淀粉完全分散开。随后将混合物在(2.6)沸水浴中加热10min以分散马铃薯直链淀粉。分散后取出冷却到室温,转移至100mL容量瓶中,加水至刻度,剧烈摇匀。1mL此标准分散液含1mg直链淀粉。
1.7 支链淀粉(市面有售 正规生产商)标准溶液:浓度为1mg/mL
用支链淀粉代替直链淀粉,按照1.6,制备支链淀粉标准溶液,1mL支链淀粉标准溶液含1mg支链淀粉。
2 仪器和用品
2.1 粉碎机
可将大米粉碎并通过150μm~180μm (80目~100目)筛,推荐使用配置0.5mm筛的旋风磨。
2.2 筛子:150μm~180μm (80目~100目)筛。
2.3 分光光度计
具有1 cm比皿,可在720 nm处测量吸光度。
2.4 抽提器
能采用甲醇回流抽提样品,速度为5滴/s~6滴/s。
2.5 容量瓶:100mL
2.6 水浴锅
2.7 锥形瓶:100mL
2.8 分析天平:分度值0.0001g
3.操作步骤:
压铸机料筒的设计3.1 空白溶液的制备
采用与测定样品时相同的操作步骤及试剂,但使用5.0mL0.09mol/L氢氧化钠溶液(1.3.2)替代 样品制备空白溶液。
3.2 校正曲线的绘制
3.2.1 系列标准溶液的制备
按照表1混合配制直链淀粉(1.6)和支链淀粉标准分散液(1.7)及0.09mol/L氢氧化钠溶液(1.3.2)的混合液。
表1 系列标准溶液?
3.2.2 显和吸光度测定
准确移取5.0mL系列标准溶液(3.2.1)到预先加入大约50mL水的100 容量瓶(2.5)中,加1.0mL乙酸溶液(1.4),摇匀,再加人2.0mL.碘试剂(1.5),加水至刻度,摇匀,静置10min。
分光光度计(2.3)用空白溶液(3.1)调零,在720nm处测定系列标准溶液的吸光度。
3.2.3 绘制校正曲线
以吸光度为纵坐标,直链淀粉含量为横坐标,绘制校正曲线。直链淀粉含量以大米干基质量分数表是示。(如图一)
由校正曲线可以看出:该曲线的线性较好。
3.3 试样的制备
图1
取至少10g精米,用旋风磨(2.1)粉碎成粉末,并通过规定的筛网(2.2)。用甲醇(1.1)对样品进行脱脂,以5滴/s~6滴/s的速度回流抽提4h~6h。脱脂后将试样在盘子或表面皿上铺成一薄层,放置2d,以挥发残余甲醇,并平衡水分。
3.4 样品溶液的制备
称取100mg±0.5mg试样(3.3)于100mL锥形瓶(2.7)中,小心加入1mL乙醇溶液(1.2)到试样中,将粘在瓶壁上的试样冲下。移取9.0mL氢氧化钠溶液(1.3.1)到锥形瓶中,并轻轻摇匀,随后将混合物在沸水浴(2.6)中加热10min以分散淀粉。取出冷却至室温,转移到100mL容 量瓶(2.5)中,加蒸馏水定容并剧烈振摇混匀。

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