1目的 规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理. 2. 适用范围 本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。 3. 职责 3。1 检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基. 4。使用程序 4.1培养基的储存 4.1。2灭菌后的培养基应置适当条件下保存至规定的有效期,并对保存条件进行确证，详见表1。 表1 培养基2～8℃条件保存期限[2］［3］
多功能制水机4。2琼脂培养基的融化 4。2.1将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高压锅中的蒸汽，如105℃）使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间，避免过度加热。 4.2。2培养基融化后放入47℃±2℃的恒温水浴锅或恒温培养箱中保温,直至使用. 4.2。3融化后的培养基应尽快使用,放置时间一般不应超过4h，不可二次融化。 4.3培养基的脱气 必要时，将培养基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器的盖子；加热后盖紧，并迅速冷却至使用温度. 4。4添加成分的加入 对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃±2℃时再加入。灭菌的添加成分在加入之前,应先放置到室温，避免冷的液体造成琼脂凝结或形成片状物.将加入添加成分的培养基缓慢充分混匀，尽快分装到待用的容器中。 一叶荻4。5平板的制备和储存 4.5.1倾注融化的培养基到平皿中，使之在平皿中形成一个至少2mm厚的琼脂层（直径90mm的平皿通常要加入15mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。 4。5。2为了避免产生冷凝水,平板应冷却后再装入袋中。贮存前不要对培养基表面进行干燥处理。 4.5.3凝固后的培养基应立即使用或放于暗处和(或）4℃～12℃冰箱中，储存期限见“4。1培养基的储存”。 并在外包装上贴好相应的标签，标明名称，编号，制备日期和有效 | |||||||||||||||||||||
期等内容。 4。5。4对于采用表面接种形式培养的固体培养基.应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿盖，将平板倒扣于烘箱/培养箱中（温度设为25℃～50℃）；或放在有对流风的无菌净化台中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商业化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。 4.6培养 4。6。1培养时每垛最多堆放六个平板，平板间要留有空隙以保证空气流通，使培养物的温度尽快与培养箱温度达到一致。 4。6。2在培养过程中，培养基会损失水分.当水分损失的量大于培养基总量的15％时，就会影响微生物的生长。造成培养基水分损失的因素较多，如培养基成分，平皿中培养基总量和培养箱的类型等（如使用带风扇的培养箱，培养箱中的湿度偏低，平板在培养箱中位置靠近培养箱内壁等），操作时应注意避免。 4。7培养基的弃置 培养基废弃前，实验室采用121℃、15分钟蒸汽灭菌，或煮沸消毒30分钟。 5．参考文献 5哺乳服装。1 SN/T1538。1-2005.培养基制备指南 第一部分:实验室培养基制备质量保证通则[S]。 5。2王宏明．微生物检验技术操作规程与质量控制及检测数据分析处理实用手册［M]．北京:卫生科技出版社,2007．5． 5.3汪穗福．微生物检测验证技术[M］．北京：中国医药科技出版社，2005.5． | |||||||
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