6.2 DNA片段的网络流量统计扩增——PRC技术
★课题目标
(一)学问与技能
2、理解PCR的原理
3、争辩PCR的应用
在多聚酶链式反应扩增DNA片段的试验过程中,应避开外源DNA污染,严格把握温度等反应条件
(三)情感、态度与价值观
通过对PCR试验的操作及结果分析,培育同学严谨的科学态度和实事求是的科研精神 ★课题重点
PCR的原理和PCR的基本操作
★课题难点
点火加热装置
PCR的原理
★教学方法
启发式教学
★教学工具
多媒体课件
★教学过程医用洗手刷
(一)引入新课
在现代生物技术中,DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组方案、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列,就需要确定量的DNA片段。怎样快速获得足够量的DNA片段呢?今日我们来争辩学习DNA分子的扩增技术――PCR技术。 (二)进行新课
1.基础学问
PCR技术扩增DNA的过程,与细胞内DNA复制过程类似: 1.1细胞内DNA复制条件分析:
条件 | 水晶笔筒组分 | 作用 |
模板 | DNA的两条单链 | 风能路灯供应复制的模板 |
原料 | 四种脱氧核苷酸 | 合成DNA子链的原料 |
酶 | 解旋酶 DNA聚合酶 | 打开DNA双螺旋 催化合成DNA子链 |
能量 | ATP | 为解螺旋和合成子链供能 |
实木花盆引物 | RNA | 为DNA聚合酶供应合成的3’端起点 |
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1.2细胞内DNA复制过程
(1)DNA的反向平行结构:(结合教材图5-6)
核苷酸分子的结构与方向性:(分子结构模式图)
由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链:(模式图,体现方向性)。
DNA双螺旋结构的反向平行结构:
(2)DNA的复制过程:
解 旋:解旋酶、ATP,DNA两条链打开,,形成两条DNA单链。
引物结合:在DNA单链3’端与DNA反向配对结合,确保引物3’端与DNA单链精确 配对。
DNA聚合酶结合:
子链合成:DNA聚合酶从引物3’端开头,将配对的脱氧核苷酸连接起来。