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第15卷 第7期 2013 年 7 月
直柄立铣刀
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 15 No. 7 Jul .，2013
溃疡性结肠炎（UC）是一种慢性非特异性炎症
性肠病，主要累及直肠和乙状结肠，常迁延不愈，严重影响了患者的工作与生活，且该病与结肠癌密切相关，被世界卫生组织列为现代难治之病[1]。七味
白术散来源于宋代钱乙的《小儿药证直诀》，具有益
气补中、和胃生津的功效，现代多用于小儿腹泻[2]。笔者以七味白术散为基础加入红藤、白及，形成“九味白术汤（JWBZ）”，用于UC 的初显疗效。本研
九味白术汤对溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α及IL-4水平的影响 彭树灵1，杨淑君2
（1.佛山市第二人民医院，广东 佛山 528000；2.佛山市妇幼保健院，广东 佛山 528000）
摘 要：目的：观察九味白术汤（JWBZ）对溃疡性结肠炎（UC）大鼠血清TNF-α及IL-4水平的影响。方法：
48只大鼠完全随机分为正常对照组，模型组，柳氮磺胺吡啶（SASP）组，九味白术汤高、中、低剂量组；采用2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）复制大鼠溃疡性结肠炎；连续给药10 d 后，观察UC 大鼠结肠黏膜损伤指数（CMDI）、血清 TNF-α及IL-4水平的变化。结果：CMDI 评分：模型组大鼠显著高于正常对照组（P <0.01）
，JWBZ 低、中、高剂量组及SASP 组均显著低于模型组（P <0.05或P <0.01）
，JWBZ 中剂量组显著低于SASP 组（P <0.05）；血清TNF-α水平：模型组显著高于正常对照组（P <0.01），JWBZ 低、中、高剂量组及SASP 组显著低于模型组（P <0.01），JWBZ 中剂量组显著低于SASP 组；血清IL-4水平：模型组显著低于正常对照组（P <0.01），JWBZ 低、中、高剂量组及SASP 组显著高于模型组（P <0.01），中剂量组显著高于SASP 组（P <0.01），而低剂量组显著低于SASP 组（P <0.05）。结论：JWBZ 对UC 大鼠结肠损伤具有良好的修复作用，其机制可能通过调
节促炎因子TNF-α与抗炎因子IL-4的平衡实现。
肉模关键词：九味白术汤；溃疡性结肠炎；大鼠；结肠黏膜损伤指数；肿瘤坏死因子α；白介素-4
中图分类号：R574.62 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 07- 0040- 03
收稿日期：2013-01-15
作者简介：彭树灵（1981-），男，广东梅州人，主治医师，博士，研究方向：中西医结合消化病的临床与基础研究。
Effect of Jiuwei Baizhu Decoction on Serum Levels of TNF-α and
IL-4 in Ulcerative Colitis Rats PENG Shuling 1，YANG Shujun 2
（1.Foshan Second People's Hospital，Foshan 528000，Guangdong，China ；2.Maternal
and Child Health Hospital of Foshan City，Foshan 528000，Guangdong，China）
Abstract ：
Objective ：To observe the effect of Jiuwei Baizhu Decoction（JWBZ）on serum levels of interleukin-1β（TNF-α）and interleukin-10（IL-4）in ulcerative colitis rats. Methods ：48 rats were randomly divided into 6 groups ：normal group，model group，salazosulfapyridine（SASP）group，low-，middle- and high-dose JWBZ groups. Ulcerative colitis rat model was copied by 2，4，6-TNBS.After 10 days' treatment，the changes of colonic mucosal damage index（CMDI），serum levels of TNF-α and IL-4 were observed. Results ：Compared to normal group，the CMDI of model group was significantly increased（P <0.01）；compared to model group，the CMDI of treatment groups was decreased significantly （P <0.05 or P <0.01）；compared to SASP group，the CMDI of middle-dose JWBZ group was significantly decreased（P <0.05）.Compared to normal group，the serum TNF-α level of model group was increased significantly（P <0.01），while IL-4 level was decreased significantly（P <0.01）.The serum TNF-α level of treatment groups was decreased significantly（P <0.01），compared with model group，while IL-4 level was increased significantly（P <0.01）.Compared to SASP group，the serum TNF-α level of middle-dose JWBZ group was decreased significantly（P <0.01）；the serum IL-4 level of middle-dose JWBZ group was increased significantly （P <0.01），while it decreased significantly of low-dose JWBZ group （P <0.05）.
Conclusion ：JWBZ treated UC rats effectively by regulating the balance of pro-and anti-inflammatory cytokines.
Key words ：Jiuwei Baizhu Decoction ；ulcerative colitis ；rat ；colonic mucosal damage index ；TNF-α；IL-4
15卷辽宁中医药大学学报
究旨在观察JWBZ对实验性UC大鼠的作用，并探讨该方对UC大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）与白介素4（IL-4）水平的影响，初步研究JWBZUC的作用机制，为临床应用JWBZUC提供实验依据。
1 材 料
1.1 动物
SPF级Wistar大鼠48只，体重180~220 g，雌雄各半。由南方医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（粤）2011-0015。
1.2 药品与试剂
九味白术汤（JWBZ）组成：党参20 g，白术15 g，茯苓15 g，藿香15 g，甘草5 g，葛根30 g，木香10 g，红藤30 g，白及15g；柳氮磺胺吡啶（SASP）（上海三维制药有限公司，国药准字H31020450）；2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）（美国Sigma公司）；大鼠TNF-α与IL-4 ELISA试剂盒（上海基米生物科技有限公司）。
1.3 仪器
ELX800通用酶标仪（美国BioTek公司），Avanti J-26XP离心机（美国Beckman公司），UWB-10P恒温水浴箱（常州诺基仪器有限公司）。
2 方 法
2.1 分组
大鼠适应性喂养1周后，按完全随机化原则分为6组：正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶（SASP）组（西药对照组）、JWBZ高剂量组、中剂量组、低剂量组，每组8只。
2.2 造模
采用2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）造模法制备大鼠UC模型。各组大鼠禁食不禁水24 h，乙醚麻醉，
以直径2 mm的乳胶管经肛门轻轻插入深约8 cm，用注射器往模型组、SASP组及中药高、中、低剂量组大鼠的肠腔内注入25 g/L的TNBS 50%乙醇溶液，2 mL/kg；注完后将大鼠的尾部提起，倒置30 s后平放，待其自然清醒，术后常规饲养；正常对照组肠腔内注入等量生理盐水。
2.3 给药剂量
①JWBZ常用剂量转换成大鼠的等效剂量为
16.28 g/kg，以此剂量为中剂量；低剂量为中剂量1/2，即8.14 g/kg；高剂量为中剂量的2倍，即32.55 g/kg。②柳氮磺胺吡啶（SASP）：按标准体重成人每日剂量50 mg/kg，大鼠等效剂量为315 mg/kg。
2.4 药液制备
①供试液：将JWBZ适当粉碎，加入10倍量蒸馏水浸泡半小时后，常规煎煮1 h，过滤，滤渣再加入8倍量蒸馏水，同第1次煎煮，过滤，弃药渣，合并2次水煎液，常规浓缩1.6 g/mL，置于4 ℃冰箱保存备用；给药时用37 ℃水浴，原浓度作为高剂量给药浓度，部分稀释至0.8 g/mL作为中剂量给药浓度，部分稀释至0.4 g/mL作为低剂量给药浓度。②SASP对照液：取片剂，用刀刮除外部肠溶衣，研成细粉，临用时以蒸馏水制成15.8 mg/mL 的混悬液。
2.5 给药
造模2 d后，SASP组按20 mL/kg灌胃给予SASP
混悬液，连续给药10 d；JWBZ高、中、低剂量组分别按相应剂量灌胃给予相应浓度的药液20 mL/kg，连续给药10 d；正常对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水，连续给药10 d。
2.6 指标观测
末次给药后，大鼠禁食不禁水12 h，按1.0 g/kg的剂量腹腔注射20%乌拉坦麻醉，开腹腹腔静脉取血约5 mL，置无菌试管中静置2 h，37 ℃水浴孵育20 min，以4000 r/min离心10 min，分离血清，于-20 ℃冰箱保存，用ELISA法测定TNF-α与IL-4水平。大鼠取血后分离结肠，沿肠系膜缘剪开肠腔，生理盐水冲净后，平铺于玻璃板上，对结肠黏膜损伤指数（CMDI）进行评分。评分标准为：0：无损伤；1：黏膜充血、水肿，未出现溃疡；2：黏膜充血、水肿，轻度糜烂，无溃疡；3：黏膜充血、水肿，中度糜烂，有单个溃疡；4：黏膜充血、水肿，高度糜烂，有多处溃疡；5：黏膜充血、水肿，重度糜烂，有直径＞1 cm 溃疡。
2.7 统计学方法密目式安全网
所有计量资料以均数±标准差（x—±s）表示，运用SPSS13.0进行统计分析。多组比较采用单因素方差分析（One-Way ANOVA），检验水平α=0.05（双侧）。3 结 果
见表1。
3.1 各组大鼠 CMDI 评分比较
与正常对照组比较，模型组大鼠CMDI评分显著增加（P<0.01）；与模型组比较，JWBZ低、中、高剂量组及SASP组CMDI评分均显著降低（P<0.05或P<0.01）；与SASP组比较，JWBZ中剂量组显著降低（P<0.05）。
3.2 各组大鼠血清TNF-α及IL-4水平比较
与正常对照组比较，模型组大鼠血清TNF-α水平显著升高（P<0.01），而血清IL-4水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，JWBZ高、中、低剂量组及SASP组血清TNF-α水平均显著降低（P<0.01）；而血清IL-4水平显著升高（P<0.01）。与SASP组比较，JWBZ中剂量组血清TNF-α水平显著降低（P<0.01），血清IL-4水平显著升高（P<0.01）；而低剂量组血清IL-4水平显著低于SASP组（P<0.05）。
表1 JWBZ对溃疡性结肠炎大鼠CMDI评分、
血清TNF-α及IL-4水平的影响（x—±s）
组别n CMDI TNF-αIL-4正常对照组80.25±0.46 1.17±0.16283.79±74.96
模型组8 3.38±1.06** 1.89±0.15** 85.89±9.77**
中药高剂量组8 1.63±0.92△△ 1.20±0.11△△233.64±76.63△△
中药中剂量组8 1.50±0.53△△▲1.03±0.12△△▲▲274.94±40.83△△▲▲
中药低剂量组8 2.50±0.93△ 1.21±0.13△△163.83±60.53**△△▲
SASP组8 2.38±0.74△ 1.22±0.24△△202.37±50.81**△△注：与正常对照组比较，**P<0.01；与模型组比较，△P<0.05，△△P<0.01；与SASP组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01。4 讨 论
溃疡性结肠炎（UC）的药物主要有5-氨基水杨酸（5-ASA）制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂等，这些药物对UC的远期疗效不肯定，需长期用药，且不良反应明显。SASP用于UC使用广泛，作用机制与效果明确，但不良反应发生率较高（10%~45%），患者因不能耐受而停药。中药UC具有良好的效果，中草药制剂正逐渐成为欧美患者的选择[3]。
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辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
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溃疡性结肠炎属中医学“痢疾”“泄泻”“便血”“肠风”及“脏毒”等范畴。本病主要病变在于脾胃与大小肠，脾虚、湿盛是本病的重要致病因素。JWBZ 由七味白术散加红藤与白及而成，方中党参益气补脾；白术健脾燥湿；茯苓渗湿健脾；甘草甘缓和中；藿香芳香化湿、和胃健脾；木香行胃肠气滞，能健脾胃；葛根退热生津止渴，又升发清阳，鼓舞脾胃之气上行，而止泄泻；红藤清热解毒，活血通络，败毒散瘀；白及止血消肿，生肌敛疮。诸药合用，共奏健脾化湿、行气止痢、化瘀生新之效，对溃疡性结肠炎起到良好的作用。本研究结果显示，不同剂量的JWBZ 可显著降低UC 大鼠结肠黏膜损伤指
数（CMDI）评分（P <0.01）
，且JWBZ 中剂量组CMDI 显著低于SASP 组，表明该方对UC 大鼠结肠损伤具有良好的修复作用。
免疫异常是UC 的重要病因，其中细胞因子是UC 免疫反应和炎症过程重要参与因素[4]。TNF-α主要由单核细胞和巨噬细胞产生，与细胞表面的TNF 受体结合，具有多种生物学功能，如激活中性粒细胞、巨噬细胞等炎症细胞，增强其吞噬功能，刺激其他细胞因子（IL-1、IL-8、IFN 等）释放并激活单核细
胞，诱导其趋化，促进炎症的发生，导致组织的损伤。IL-4 主要由激活的淋巴细胞合成，对淋巴细胞和巨噬细胞发挥免疫调节作用，具有抑制炎症的特性；能抑制单核巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α，
碟形螺母
下调活化的单核巨噬细胞分泌氧自由基的能力，且
存在剂量效应关系；IL-4还能抑制PGE2和IL-8的产生。文献表明，IL-4与UC 的发病相关，可作为监智能分析
测疾病程度的一个指标[5]
。
本实验结果表明，TNBS 所致实验性溃疡性结肠炎大鼠血清TNF-α水平显著升高，而IL-4水平
显著降低（P <0.01）
；经JWBZ 10 d 后，UC 大鼠血清TNF-α水平显著降低，同时IL-4水平显著升
高（P <0.01）
，且效果优于SASP，尤以中剂量JWBZ 为佳。表明JWBZ 可调节促炎因子TNF-α与抗炎因子IL-4的平衡，可能是该方有效UC 的作用机制之一。◆
参考文献
[ 1 ] 中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组.对我国炎症性
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Th2类细胞因子-mRNA 的表达[ J ] .世界华人消化杂志，2003，11 ( 10 )：1524-1527.
生姜对C57小鼠毛发生长影响的研究
刘莉，朱红霞，陈育尧，叶文君，刘强
（南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515）
摘 要：目的：探讨生姜对C57BL/6J 小鼠毛发生长的促进作用。方法：C57BL/6J 小鼠背部脱毛，给予不同浓度
的生姜汁，观察其对小鼠毛发生长周期和生长速度的影响；组织学检查其对毛囊和黑素的影响。结果：14 d 后生姜各组皮肤开始变黑，19 d 后生姜皮肤各组开始长出毛发，29 d 生姜各组均长满毛发。与空白对照组对比，均具有显著性差异，与阳性对照组相比，在生长初期和中期，促毛发生长作用较弱，后期则达到相同的效果；对毛发的生长速度影响在高中剂量的范围内呈现剂量依赖性；病理切片显示，用药组可增加小鼠皮肤真皮层黑素分布，刺激毛囊生长，使其进入生长期，而同期空白组仍然处于毛发休止期。结论：生姜具有明显的促毛发生长作用。
关键词：生姜；C57BL/6J 小鼠；毛发生长
中图分类号：R285 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2013) 07- 0042- 03
收稿日期：2012-12-26
作者简介：刘莉（1979-），女，山东烟台人，副教授，博士，研究方向：中药外用制剂。通讯作者：朱红霞（1972-），女，山东邹平人，主治医师，学士，研究方向：中医临床。E-mail ：sysll@fimmu。
Influence of Rhizoma Zingiberis Recens on Hair Growth of C57BL/6J
LIU Li，ZHU Hongxia，CHEN Yuyao，YE Wenjun，LIU Qiang
（College of Traditional Chinese Medicine，Southern Medical
University，Guangzhou 510515，Guangdong，China）
Abstract ：
Objective ：To study the effects of Rhizoma Zingiberis Recens on hair growth of C57BL/6J mice. Methods ：
Different dose of Rhizoma Zingiberis Recens on hairless mice skin was used to investigate the effects of promoting hair growth ；influence on hair follicle and melanin were observed through histological
examination. Results ：
The skin color of all groups of Fresh Ginger-treated mice turned from pink to black after 14 days. On day 19，all groups of Fresh Ginger-treated mice's hair were growing. After 29 days，all
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