一、实验目的
1.了解吸液管的操作原理和熟练掌握吸液管的操作方法
2.了解吸液管的校准方法和保证实验的精确度
二、实验原理
微量移液器（有的称“移液”、“取液器”）是一种取样量连续可调的精密取液仪器，其基本原理是依靠活塞的上下移动。其活塞移动的距离是由调节轮控制螺杆机构来实现的，推动按钮带动推杆是活塞向下移动、排出了活塞腔内的气体。松手后，活塞在复位弹簧的作用下恢复其原位，从而完成一次吸液过程。
微量移液器移动液体的是以微升为基本单位，在操作过程中因空气的进出介入相关动作，都会影响实验的精确度，必须考虑 温度、密闭性、轴心移动速度、试剂的蒸汽。 三、实验材料
仪器 | 试剂 |
吸液管 ( P1000/ P200 / P20 ) | 蒸馏水 |
尖端管 ( 1000入/ 200入 ) | |
电子天平 | |
防水膜(Parafilm) 管理ip | |
| |
抛丸机除尘四、实验步骤
（一）实验前的准备工作
1、选择1000P、200P、20P的吸液管。
2、反复练习怎样使用吸液管。
3、将防水膜放到电子天平中，并将天枰调零。
（二）实验步骤
1、轻轻转动微量移液器的调节轮，使读数显示为所要取液体的体积。
2、把白套筒顶端插入吸头，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转一下。（切记力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。P1000 使用蓝微量移液器头，P200 及P20 使用黄微量移液器头。 ） 3、轻轻按下推动按钮，推到第一档。
4、手握移液器，将吸液尖垂直浸入蒸馏水中，浸入深度为2~4mm。
多媒体中央控制器
5、经2~3s后缓慢松开推动按钮，即从第一挡还原。
第一次我们用量程为P1000的微量吸移器分别量取1000μL, 500μL., 200μL蒸馏水，每组量取三次。
第二次我们用P20分别量取20μL, 10μL, 5μL蒸馏水,每组量取三次。
第三次我们用P200的微量吸移器分别量取200μL, 100μL, 50μ蒸馏水，每组量取三次。
6、将微量移液器垂直放在天枰上，按动推动按钮到第一挡，液体泄出，再继续按动推动按钮到第二挡，使吸液尖末端残留液体完全泄出，放松按钮，使推动按钮复原。
7、观察电子天枰，并记录数值。
分别为：
量程为P1000的微量吸液器的1000μL, 500μL., 200μL.蒸馏水。
量程为P20的微量吸液器的20μL, 10μL, 5μL蒸馏水。
量程为P200的微量吸液器的200μL, 100μL, 50μL蒸馏水。
8，每次用天枰读取数值后要清零。
9，每次完成测取数值后，要把防水膜中的取出，放到收容器中。
10，按下吸液管活塞下侧的按钮，将尖端管退到垃圾桶中。
五、实验结果
* 在25摄氏度下，一毫升液态水的重量为一克。体积=质量/密度 由于在本次实验中，所称量的液体（蒸馏水）的密度为1。所以体积=质量。我们就可以通过电子天枰，测出所求液体的质量，求出液体的体积。并通过测出的质量和微量移液器取出的体积，可以 算出误差值。
* 横轴：微量移液器的种类以及实验的次数、所称取的数值
* 纵轴：所称蒸馏水的量
1000p | 1 | 2 | 3 | 平均 | 误差值 |
1000μL. | 0.9900g | 1.0000g | 0.9900g | 0.9933g | -0.667% |
500μL. | 0.4900g | 0.5000g | 0.5000g | 0.4967g | -0.660% |
200μL. | 0.2100g | 0.2000g | 0.2100g | 0.2067g | 3.350% |
| | | | | |
实验1
误差率：<=0.8
实验2
20p | 1 | 2 | 3 | 平均 | 误差值 |
20μL. | 0.0180g | 0.0200g | 0.0190g | 0.0190g | -5.00% |
10μL. | 0.0100g | 0.0090g | 0.0100g | 0.0097g | -3.00% |
5μL. | 0.0050g | 0.0050g | 0.0050g | 0.0050g | 0%静音冷却塔 |
| | | | | |
误差率：<=1
实验三
200p | 1 | 2 | 3 | 平均 | 误差值 |
200μL. | 0.2100g游戏同步器 | 0.2000g | 0.2100g | 0.2067g | 3.350% |
100μL. | 0.1100g | 0.1100g | 0.0900g | 0.1033g | 3.300% |
50μL. | 0.0500g | 0.0500g | 0.0500g | 0.0500g | 0% |
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误差率：<=0.8
实验误差：
误差值=【（平均体积-理想体积）/理想体积】X100
P1000： （0.9933-1.000）/1.000*100%=-0.667%
(0.4967-0.5）/0.5*100%=-0.660%
( 0.2067-0.2）/0.2*100%=3.350%
P200： (0.2067-0.20）/0.2*100%=3.350%
电子签名设备
(0.1033-0.10）/0.1*100%=3.300%
(0.0500-0.05）/0.05*100%=0%
P20： (0.0190-0.02）/0.02*100%=-5.00%
(0.0097-0.01）/0.01*100%=-3.00%
(0.005-0.005)/0.005*100%=0%
六、讨论及注意事项
（一）实验误差分析
1、吸液过程中，使移液器倾斜，导致移液不准确(应该垂直吸液，慢吸慢放)。
2、在实验过程中没有换吸头，使用了带有残余液体吸头的移液器，导致出现误差。
3、在实验过程中一直在使用同一个微量移液器头，使吸头中有溶液的残留，在进行下一次量取的时候，导致释放液体的时候量取的液体过多，出现误差。
4、在吸取液体时由于过快的放开按钮，使溶液吸入过快、过多，导致误差的出现。
5、在实验称量的过程中，由于没有及时将防水膜中的液体吸出，而进行下一次实验，导致了误差的出现。
6、实验时，在量取溶液后，在微量移液器头外壁上会有残留液，在释放液体是外壁溶液也会被吸附下来，释放到天平上的容器中，产生误差。
7、在试验过程中可能因为温度的关系，导致出现了误差。 在室温较低的情况下，移液器手握的部分温度较高，外界空气进入后会引起体积膨胀，温度较低的液体吸进后，与液体接触的空气又会发生密度改变，这些细微变化有时会影响计量的精确度。
＊注意事项
1、设定移液体积：从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度。
2、装配移液头：将移液垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样操作回导致移液器的零件因撞击而松散，严重会导致调节刻度的旋钮卡住。
3、吸液及放液：垂直吸液，吸头尖端浸入液面3mm以下，吸液前头先在液体中预润洗，慢吸慢放，放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁。
4、吸有液体的移液不应平放，头内的液体很容易污染内部而可能导致的弹簧生锈。
5、移液在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液的使用寿命。
6、吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
7、为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差。
8、浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
9、可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1ml 蒸馏水20℃时重0.9982g。
10、在设置量程时，请注意旋转到所需量程数字清清楚楚在显示窗中，所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。
11、移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。
12、严禁使用移液器吹打混匀液体。
13、不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作。
七、参考文献
1、张维铭 主编、2003，《现代分子生物学实验手册》，（第一章基础篇，第二节通用实验设备及其使用方法，）北京：科学出版社 P12~P15
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