研究生：宋绍华
学科专业：口腔科学（颌面外科）
所在单位：第四军医大学口腔医院领面外科
导师：何黎升金岩教授
资助基金项目：国家高技术研究发展计划（８６３）重大专项组织器官工程
课题编号：２００２ＡＡ２０５０４１
关键词：动物模型组织工程皮肤移植
第四军医大学口腔医学院
电子表单系统２００５年０５月
第四军医大学硕士学位论文
缩略语英文全称ＴＥ
ＡＭ储物盒
Ｆｂ
吸音降噪
ＧＡＧ
ＫＣ
ＥＣＭ
ＥＣ
ＰＬＡ
管
ＰＧＡ
Ｐ．ＡＳ
ＡＤＭ
ＣＫ
ｈＳＥ
ＳＥ
ＴＧＦ缩略语表
Ｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
ｍｌｌｉｒｆｌａｌＭｏｄｅｌ
Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ
Ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ
Ｋｅｒａｔｉｎｏｅｙｔｅ
Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒｍａｔｒｉｘ
Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ
Ｐｏｌｙ］ａｃｔｉｃＡｃｉｄ
Ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｃａｃｉｄ
Ｐｅｒｉｏｄｉｅａｃｉｄ．ｓｃｈｉｆｆ
Ａｃｅｌｌｕｌａｒｄｅｒｍａｌｍａｔｒｉｘ
Ｃｙｔｏｋｉｎｅ
ｈｕｍａｎｂｉｌａｙｅｒｅｄｓｋｉｎｅｑｕｉｖａｌｅｎｔＳｋｉｎｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ
Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ中文全称
组织工程
动物模型
成纤维细胞
乙酰葡萄糖胺
角朊细胞
细胞外基质
内皮细胞
聚乳酸
聚羟基乙酸
糖原染
无细胞真皮基质
细胞因子
双层皮肤代用品
皮肤代用品
转化生长因子
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组织工程皮肤修复急、慢性皮肤缺损的实验研究
硕士研究生：宋绍华
导师：何黎升教授（主任医师）
金岩教授ｆ主任医师Ｐ
第四军医大学口腔医院颌面外科西安７１００３２
＋第四军医大学口腔医院组织病理科西安７１００３２
中文摘要
大面积皮肤缺损的修复至今仍然是临床上比较棘手的问题之一，人们一直在不断的探索理想的皮肤替代物。组织工程技术的诞生，为组织器官缺损的修复提供了新的思路。随着组织工程研究的发展，其产品不断增多，组织工程皮肤已成为组织工程最成功的产品之一。
由于皮肤缺损的致伤原因很多，其修复愈合机理各不相同，因此研究不同类型皮肤缺损的形成过程及
愈合机理对其修复起着关键的指导意义。本实验在建立两种皮肤缺损动物模型的基础上，采用组织工程皮肤进行修复，旨在探讨组织工程皮肤修复急、慢性皮肤缺损的可行性，为其临床应用提供实验理论依据。
１．急性无菌性皮肤缺损动物模型的建立：根据与人皮肤结构功能相似的要求，选用２．５～３月龄白Ｙｕｅｋｅ猪，全麻下剃去背毛，在每只动物脊柱两侧（距脊柱２ｃｍ）制备直径分别为３ｃｍ、４ｃｍ、５ｃｍ三组创面，每只动物制各８～１２个创面，创面用无菌辅料覆盖。观察不同时间点刨面自行愈合的面积和愈合率。实验结果显示：三组创面２ｗ内刨面面积愈合率分别为９７．４７±８．１５％、６７．２５±７．１３％、４１．５２±３．８１％。结果表明，在观察期内直径为３ｃｍ的创面已经接近完全愈合，直径４ｃｍ的创面虽未痊愈但已经有明显的愈合趋势，而直径５ｃｍ的创面愈合面积不到总面积的一半，故该组创面可满足皮肤创伤修复实验的要求。 ２．糖尿病皮肤溃疡动物模型的建立：糖尿病皮肤溃疡发病机制复杂，复制糖尿病溃疡模型需要考虑多重因素。本实验在通过静脉注射四氧嘧啶造成动
第四军医大学硕士学位论文
物体内高血糖的基础上，采用一种压创装置置于动物体表形成皮肤压创，局部组织缺血坏死，从而模拟糖尿病皮肤溃疡的形成。结果证实：２．５～３月龄Ｙｕｅｋｅ猪静注５％四氧嘧啶溶液（２００
ｍｇ／ｋｇ），一般４８ｈ后可致动物空腹血糖达１２０ｍｇ／ｄ１以上；选用压力５ｋｇ、直径５ｅｒａ作用与皮肤表面，１２ｈ即可形成较典型的皮肤溃疡创面。
３．组织工程皮肤修复急性皮肤缺损的实验研究：在动物脊柱两侧（距脊柱２ｃｍ）制备直径为５ｃｍ的皮肤缺损，分别用体外构建的组织工程真皮、组织工程全层皮肤、组织工程真皮复合自体刃厚皮移植修复创面，同时采用自体全厚皮和自体刃厚皮移植作对照。大体观察结果表明：实验组术后在皮片成活率、创面收缩率方面接近于自体全厚皮对照组，但在泽，弹性方面较自体全厚皮组稍差；实验组创面收缩程度方面好于自体刃厚皮对照组；组织学观察结果显示：术后２ｗ即可见组织工程全层皮肤组表、真皮结构，真皮内血管形成，表一真皮交界处可见不连续的基底膜样结构，随时间延长各层结构进一步成熟；组织工程真皮组可见成纤维细胞多，纤维形成明显，血管化较早；通过大体和组织学观察，实验组中组织工程真皮复合自体刃厚皮组的修复效果最佳。
４．组织工程全层皮肤修复糖尿病皮肤溃疡的实验研究：制备糖尿病皮肤溃疡动物模型，溃疡形成１ｗ后彻底清刨，将体外构建的组织工程全层皮肤移植于皮肤缺损创面，设空白和自体全厚皮移植修复作为对照。结果表明：实验组术后大多数创面移植皮片生长良好，开始呈乳白半透明，此后颜逐渐加深，术后８ｗ接近自体全厚皮对照组；创面收缩率实验组明显小于空白对照组。组织学观察结果显示，２ｗ时实验组表皮层细胞数量增多且出现分层，真皮各型胶原形成较明显，表一真皮间出现不连续的基底膜：３ｗ、４ｗ时上皮可见有类似钉突结构的突起，表一真皮交界处可见连续的基底膜；
８ｗ时其组织学结构接近于自体全厚皮组。结果表明：组织工程全层皮肤修复糖尿病皮肤溃疡是可行的。
关键词：组织工程；皮肤缺损；动物模型：猪；糖尿病溃疡；移植；胶原。弹跳高跷
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