柴油抗磨剂过氧化氢酶酶活测定方法
一 配溶液:
1. 1.5% NaBO3·4H2:
称取1.5g NaBO3·4H2O溶于100ml纯水
2. 0.067M 磷酸盐缓冲:
称取磷酸氢二钠 2.398g溶于100ml纯水,另称取磷酸二氢钠 1.05g溶于100ml 纯水中,按配方配置成PH为6.8的PBS 3. 1M硫:
4. 0.05M高锰:
5. HCl溶液:调PH
二 仪器:37°水浴箱,,滴定管,PH试纸,移液器,15ML的离心管,烧杯
三 步骤:
1.预先用HCL将pH调至6.8的1.5%NaBO3电动刻字笔
·4H2O 8mL加入含有智能自吸泵
1.5mL 0.067M ph6.8的磷酸盐缓冲液的烧杯中。 2.在37℃下保持20min后,实验组加入0.5ml酶,对照组加入等量的缓冲液,混合摇匀。 书立3.5分钟后,加入到10ml1M硫酸中挂面纸
4. 在烧瓶中用0.05M高锰酸钾滴定。
5. 结果表示为硼酸单位/充能绿柱石怎么做每克酶
四 计算公式:
酶活力=(Vblank—Vsample)×0.05×稀释倍数/(样品浓度×0.5) ×(1000/5min)×1000(U/g)