过氧化氢酶(CAT)酶活测定方法

柴油抗磨剂过氧化氢酶酶活测定方法
配溶液:
1. 1.5% NaBO3·4H2
称取1.5g  NaBO3·4H2O溶于100ml纯水
2. 0.067M 磷酸盐缓冲:
称取磷酸氢二钠 2.398g溶于100ml纯水,另称取磷酸二氢钠 1.05g溶于100ml 纯水中,按配方配置成PH6.8PBS
3. 1M硫:
10.87ml浓硫酸加入200ml纯水中
4. 0.05M高锰:
0.79g高锰酸钾溶于100ml纯水中。
5. HCl溶液:调PH
仪器37°水浴箱,,滴定管,PH试纸,移液器,15ML的离心管,烧杯
步骤
1.预先用HCLpH调至6.81.5%NaBO3电动刻字笔·4H2O  8mL加入含有智能自吸泵1.5mL 0.067M ph6.8的磷酸盐缓冲液的烧杯中。
2.37℃下保持20min后,实验组加入0.5ml酶,对照组加入等量的缓冲液,混合摇匀。
书立35分钟后,加入到10ml1M硫酸中挂面纸
4. 在烧瓶中用0.05M高锰酸钾滴定。
5. 结果表示为硼酸单位/充能绿柱石怎么做每克酶
计算公式
酶活力=(Vblank—Vsample)×0.05×稀释倍数/(样品浓度×0.5) ×(1000/5min)×1000(U/g)   

本文发布于:2024-09-21 14:51:38,感谢您对本站的认可!

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