一、名词解释（20）
1、植物组织培养: 是指用无菌方法，使植物体的离体器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、分生组织、花药组织、韧皮部、皮层等）和细胞（体细胞和生殖细胞）在人为提供的条件下生长和发育的培养技术的总称。 2、细胞全能型: 离体的体细胞，具有母体植株的遗传物质，在适宜的条件下，能按其母株的表型完整地加以表达。在形态建成上具有再生成完整植株的潜势，在代谢上具有合成原植物体所含有的代谢产物的能力。
3、培养基: 人工配制的、适合于植物生长发育的“人工土壤”。它含有植物生长所需的各种无机营养元素、有机营养元素、水分、植物生长调节物质以及培养基的支持体等。 4、母液（贮备液）: 在组织培养工作中，配制培养基是日常工作，为简便起见，将配方中的药品一次称量供一段时间使用，即配一些浓溶液，用时稀释，这种浓溶液就是贮备液或母液
5、外植体: 组织培养的外植体，大致可分为带芽的外植体和由分化组织构成的外植体两大 类。带芽的外植体：茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等组织。由分化组织构成的外植体：根、茎、叶等营养器官及花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官，它们是由薄壁组织构成的外植体，通过培养，大都有一个分化状态回复到分生组织状态的脱分化过程。
6、快速繁殖: 在无菌条件下，利用植物体的一部分，包括细胞，组织或器官，在人为控制的营养和环境条件下快速繁殖植物的方法.
7、腋芽（顶芽）萌发 : 腋芽萌发又称器官型再生，是指由培养的顶芽或腋芽直接萌发形成小茎后，再诱导小茎生根而形成完整植株的过程。
8、胚状体发生型: 是指外植体在适宜的培养环境中，形成类似于合子胚结构的胚状体或体细胞胚。
9、不定器官发生型: 离体培养条件下不定器官的发生可以通过直接或间接途径由外植体表面分化出不定芽或不定根等器官，并进一步发育成完整植株。
10、原球茎形成型 : 原球茎形成型是兰属植物特有的再生植株途径。兰属植物外植体接种于培养基上，经过一段时间的培养便能形成原球茎，然后每一个原球茎可以进一步发育成
完整植株，且原球茎可以进一步增殖。
11、原球茎 :基部带有原根的小球体
12、玻璃化: 是指无菌苗生长异常，茎叶呈透明或半透明的水浸状，植株矮小肿胀、失绿、叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎的现象。
13、褐变: 指外植体在培养过程中，自身组织从表面向培养基释放褐物质，以致培养基逐渐变成褐，外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。
二填空（20）
1、植物组织培养根据培养对象的不同大致可分为六种类型:器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养、组织培养、植株培养
2、从所用培养基的角度来分，植物组织培养可分为:固体培养 、液体培养
3、组织培养室培养条件包括:温度、湿度、光照
4、培养基的分类: 固体培养基、液体培养基 ，培养基的组成 : 基本培养基、附加成分
5、有机营养元素包括: 碳水化合物（糖类）、维生素类、氨基酸类等
6、植物组织培养中常用的植物生长调节物质有: 生长素类、细胞分裂素类、赤霉素
7、外植体消毒原则:（1）能全都杀灭外植体附带的微生物；（2）不能伤害材料的生活力；（3）能够易于去除。
8、无性繁殖的四个阶段:无菌培养体系建立阶段、继代增殖阶段、生根成苗阶段、移栽成活阶段。
9、引起植物材料褐变有哪几方面原因:植物材料（基因型、材料年龄、取材部位、取材时期、外植体大小及受伤害程度）光照温度培养基（培养基状态、无机盐、植物生长调节剂、抗氧化剂、吸附剂、螯合剂、pH值）培养方式（外植体在培养基中的放置方式、转瓶周期）
10、防止病毒病的方法有哪几种: 物理学方法（热水处理 热空气处理）、化学方法（使用农药）、生物学方法(茎尖分生组织培养)
11、茎尖苗病毒检测的方法有哪几种: 生物检测、电镜观察、血清学检测、开花鉴定
三简答(30)
1、根据培养对象的不同大致可分为六种类型
器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养、组织培养、植株培养
2、培养基配置步骤
先在洁净的不锈钢锅里放入蒸馏水，加入所需要的琼脂和糖，最好能在水浴锅里将琼脂溶化，如果直接加热应不停地搅拌，防止在锅底烧焦或沸腾溢出。
加入贮备液，按需要加入植物激素和其它准备加入的物质。
加蒸馏水将最终体积调整到要求的体积。
充分混合好以后，用1N HCl（或NaOH）调整pH值到所需值（借助精密pH试纸或酸度计）。
趁热将培养基分注到瓶子或试管中，按容器的大小和培养要求放入适当量的培养基。分装时注意不要把培养基沾附到瓶口或管口接近的内壁上，以免今后引起因污染。
包扎覆盖物。
高压灭菌后取出，放至室温即可使用。
3、灭菌方法分为
常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类：
物理方法：干热(烘烤和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗等措施；
化学方法：使用、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精等化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料和目的进行选用。
4、外植体消毒原则
消毒时应掌握三个原则：
（1）能全都杀灭外植体附带的微生物；
（2）不能伤害材料的生活力；
（3）能够易于去除。
5、植物组织无菌操作的一般步骤
外植体取材----自来水冲洗（1h自动感应垃圾桶或更长）-----70％酒精表面消毒（20～60s）----无菌水冲洗-----消毒剂处理----- 无菌水充分洗净（ 3～4次）------ 骑马机切割接种
6、快速繁殖的特点
（1） 繁殖系数高、繁殖速度快
（2） 用材少
（3） 占用空间小
（4） 周年生产
（5） 便于种质保存和交换
（6） 有利于无病毒苗的培育
（7） 有利于其他的相关科学研究
7、离体繁殖再生植株途径
腋芽（顶芽）萌发
胚状体发生型
不定器官发生型
原球茎形成型
8、快速繁殖比较完善的五个阶段
阶段 0 选择和栽培管理母株，用于起始培养动力电池模拟电源
阶段统一认证管理系统Ⅰ 启动和建立无菌培养（主要步骤：分离外植体、表面杀菌、清洗和接种到适当的培养基上）
阶段Ⅱ 利用特定的培养基，增殖茎芽或快速诱导体细胞胚形成
阶段Ⅲ 体细胞胚萌发和/或离体再生苗生根
阶段Ⅳ 生根苗移栽，在温室条件下炼苗（该阶段也包含再生苗在土壤基质中生根，跳过阶段Ⅲ）
9、玻璃化苗与正常苗的对比、玻璃化起因、产生玻璃化苗的因素
玻璃化苗与正常苗相比有以下特点：
（1）外表呈玻璃状，茎叶透明；
（2）玻璃化苗含水量增加，干鲜重比例下降，出现畸形；
（3）生长缓慢，甚至死亡；
（4）生根率、移栽成活率低。
玻璃化的起因是细胞生长过程中的环境变化，试管苗为了适应变化了的环境而呈玻璃状。
产生玻璃化苗的因素：主要有激素浓度、琼脂用量、温度、离子水平、光照时间、通风条件等。
10、病毒病的危害有哪些
病毒的危害是多方面的：
⑴ 寄主代谢异常，使激素的正常平衡受到破坏，造成抑制植物生长的现象；
⑵ 形态畸变，产生皱缩、花叶、杂斑等许多症状，产量大幅度下降；
⑶品质（如花、花数、果实商品性等）变劣。
病毒特别对无性繁殖作物，例如薯类、花卉、林木和果树等危害尤甚。一经浸染，病毒能随繁殖代数增加而增加，不仅能绵延不绝，还会日益增加。其结果能使植物发生退化，甚至导致某些品种的绝灭。盖型螺母
11、愈伤组织培养获得无病毒植株的原理
在一个被感染的愈伤组织中，并非全部细胞都清一地带有病原，有些细胞能够逃脱病毒感染，可利用这些细胞培养获得无病毒植株。这些细胞能够逃脱病毒感染的原因可能有两种：（1）病毒复制速度赶不上细胞增殖的速度。
（2）通过发生诱变，某些细胞获得了对病毒感染的抗性。能够抵抗病毒浸袭的细胞甚至与对病毒敏感的细胞共存于同一组织中。
12、无病毒植株培养程序
母株选择----剥离大小合适的茎尖----接种、培养------再生植株-------切段或其它繁殖形成无性系------病毒鉴定-------大量繁殖------无病毒原原种------扩大繁殖生产体系------供给农户
四问答题(30)
1、植物组织培养的应用现状
植物组织培养研究和应用范围十分广泛，其基础理论研究：采用组织和细胞培养法可以进行植物细胞发育生理学、生物化学、细胞遗传学及分子生物学等方面的研究。
应用研究：（1）无性系快速繁殖（2）植物脱病毒（3）种质保存（4）植物育种（5）有用次生代谢物质生产
2、组织培养室设计及基本设备
建筑设施：资料室、培养基配制室（准备室）、接种室、培养室、驯化室
培养基配制室（准备室、前处理室），主要用于器具的洗涤、干燥、培养基的制作、植物材料的粗调整等。主要仪器设备：药品柜、试验台、天平（药物天平、托盘式扭力天平、分析天平）、冰箱（普通冰箱、低温冰箱）、烘箱、电热蒸馏水器、磁力搅拌器 、数卡器pH计、高压消毒锅 、电炉（电磁炉）、锅（或其它容器）、玻璃器皿（试管、三角瓶、L型管、T型管、培养皿、罐头瓶、其它（烧杯、试剂瓶、量筒、容量瓶、移液管等）。
接种室（无菌室），主要用于植物材料的后期处理，杀菌接种，继代培养时移植等。无菌室面积不宜过大，最好建成小套间，外间用作更衣和放置工作服、拖鞋、工作帽等 。无菌室内壁要求光滑清洁，地板光滑无缝，密封程度高，门一般为双重拉门。为了保较好的无菌状态，无菌室内（含外间）应安装紫外灭菌灯，一般每3－4m2安装两只。主要设备：超
净工作台 （按吸尘方向可区分为水平式和垂直式两种，按供操作人员使用情况可分为单人、双人和多人等种类）、解剖镜、显微镜、器械类（镊子、弯头镊子、钝头镊子、尖头镊子、解剖刀、解剖针、打孔器）、紫外灯、低速离心机 、抽气泵、细菌过滤器、磨砂口玻璃瓶、酒精灯。
培养室，需要有一定的照明设备。培养室的大小可根据生产规模和现有条件来设计，为了保证培养材料的正常生长，必需要满足一定的温度、湿度、光照及空气的无菌程度等条件。主要仪器设备：培养架、控温设备、控光设备、培养箱、摇床、转床等
3、培养基中的各种组分在培养中的作用
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