第16卷 第2期江西科学Vol.16 No.2 1998年6月J I ANG XI SCIE NCE J un,1998
廖延雄ΞΞ 傅筱冲
(江西省科学院 南昌 330029)循环流化床锅炉技术
【摘 要】 根据《伯杰氏系统细菌学手册》，提出了芽孢杆菌属(B acill us)的二分检索表，并附芽孢杆菌属的新种以及相关的新属。 【关键词】 芽孢杆菌属 二分检索表 分类
【分类号】 Q939.1 R378.7
芽孢杆菌广泛地存在于自然界，许多能水解淀粉，分解蛋白质、果胶、藻酸盐等，工业上用于提取淀粉酶、蛋白酶、果胶酶等。它们有的产生抗菌素，有的能致人畜疾病，有的能引起植物腐败。它们存在于土壤、水和空气中，与自然界物质转化、土壤肥力、环境卫生均密切相关，从事专业的微生物工作者均会接触到，遇上芽孢杆菌属的鉴定问题。
通常鉴定，多依照《伯杰氏细菌鉴定手册》。该手册第1～7版均采用二分检索表(dichoto2 mous key)。二分法检索以某一两项性状的“+”、“-”来区分检索。例如，水解或不水解淀粉; V.P反应阳性或阴性等。二分法应用方便，但有时该反应不规律，给工作造成困难。数值分类法出现后，将每个生物性状摆在同等重要的位置上，测试性状项目数以百计，将鉴定菌与已知菌比较，求得诸多性状中有多少性状相同。相同95%以上者通常认为同种。与此同时，还从DNA分子碱基中G+C的摩尔分数、核酸杂交、16SrRNA序列分析等，求细菌之间的同源性。也许是由于以上这些原因,《伯杰氏细菌鉴定手册》[1]从第8版起，检索不再使用二分法了。
笔者在工作中，做通常的芽孢杆菌鉴定时，以《伯杰氏系统细菌学手册》卷二[2]为依据，自拟了一个二分检索表。拟定此表时，如果某性状有不同，则两处均列。例如，第10号细菌为环状芽孢杆菌(B.ci rculans)，芽孢的位置可能在中央也可能端生，在编制此检索表时,“芽孢中央”有10号菌;“芽孢一端”也有10号菌。同样，有的细菌可以还原硝酸盐或不还原硝酸盐。如果是这种情况，两处都列，以利检索。现将根据《伯杰氏系统细菌学手册》卷二中芽孢杆菌属自拟的二分法检索表列于表1。检索表中阿拉伯数字为细菌编号，各菌号所表示的菌种名列于表2。
江西省自然科学基金资助项目部分工作
Ξ
ΞΞ简介：男，教授。1922年4月生,1943年8月本科毕业于原国立中央大学农学院,1951年2月于美国堪萨斯立大学研究生院获博士学位。现任江西省科学院名誉院长。
本文于1997-09-19收到
表1 芽孢杆菌属(B acill us )二分检索表
A 1直径小于1μm 1,2,3,4,6,7,8,10,11,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,26,27,28,29,30,31,32,33
B 1芽孢圆形 14,15,23,26,27,31,32
C 1芽孢小于菌体 15,23
D 1葡萄糖产酸“-”，明胶液化“-”，硝酸盐还原“-”15 DD 1葡萄糖产酸“+”，明胶液化“+”，硝酸盐还原“d ”23 CC 1芽孢大于菌体 14,26,27,31,32 D 1芽孢中央(无) DD 1芽孢一端 14,26,27,31,32
E 1好氧 14,31,32
F 1接触酶“-”(无) FF 1接触酶“+” 14,31,32
G 1V.P 反应“+”
(无) GG 1V.P 反应“-” 14,31,32 H 1硝酸盐还原“+” 14,31 I 1葡萄糖产酸“+”，产气“-” 14 II 1葡萄糖产酸“-”，产气“-” 31 HH 1硝酸盐还原“-” 14,32 I 1葡萄糖产酸“+”，产气“-” 14 II 1葡萄糖产酸“-”，产气“-” 32 EE 1兼氧 26,27 F 1接触酶“-”(无) FF 1接触酶“+” G 1V.P 反应“+”(无) GG 1V.P 反应“-” 26,27 H 1淀粉水解“+”，硝酸盐还原“±”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”26 HH 1淀粉水解“-”，硝酸盐还原“-”，吲哚产生“±”，葡萄糖产酸或产酸产气“+”27 BB 1芽孢椭圆 1,2,3,4,6,7,8,10,11,13,16,17,18,19,20,21,22,26,28,29,30,33 C 1芽孢小于菌体 1,2,3,7,11,13,19,20,26,30 D 1芽孢中央 1,11,13,19,20,30 E 1好氧 1,13,19,30
F 1接触酶“-”
(无) FF 1接触酶“+” 1,13,19,30 G 1V.P 反应 “+” 1,30 H 1硝酸盐还原“+”，淀粉水解“+”，葡萄糖产酸“+”，吲哚产生“+”1 HH 1硝酸盐还原“-”，淀粉水解“-”，葡萄糖产酸“+”，吲哚产生“+”30 GG 1V.P 反应 “-” 13,19 H 1阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”，葡萄糖产酸“+”，吲哚产生“+”，硝酸盐还原“-”13 HH 1阿拉伯糖产酸“+”，木糖产酸“+”，葡萄糖产酸“+”，吲哚产生“+”，硝酸盐还原“±”19 EE 1兼氧 11,20 F 1明胶液化“-”，接触酶“+”,V.P 反应“+”，硝酸盐还原“±”，吲
哚产生“-”，淀粉水解“+”，葡
萄糖产酸“+”11
FF 1明胶液化“+”，接触酶“+”,V.P 反应“+”，硝酸盐还原“+”，吲哚产生“-”，淀粉水解“+”,
葡萄糖产酸“+”20
DD 1芽孢一端 2,3,7,11 E 1好氧 2,3,7 F 1接触酶“+” 3,7 G 1葡萄糖产酸“+”，阿拉伯糖产酸“+”，木糖产酸“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”,V.P 反
应“-”，靛基质“-”3
GG 1葡萄糖产酸“-”，阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”，明胶液化“d ”，淀粉水解“-”,V.P 反
应“-”，靛基质“-”7
FF 1接触酶“-” 2
数码理疗仪·
911·第2期 廖延雄等：芽孢杆菌属(B acill us )二分检索表
G 1葡萄糖产酸“ND ”，阿拉伯糖产酸“ND ”，木糖产酸“ND ”，明胶液化“ND ”，淀粉水解“+”,V.P
反应“-”，靛基质“-”2
电磁屏蔽罩
EE 1兼氧 11 F 1接触酶“+”,V.P 反应“+”，葡萄糖产酸“+”，阿拉伯糖产酸“±”，木糖产酸“±”，明胶液化
“-”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用“±”11
CC 1芽孢大于菌体 4,6,8,10,11,16,17,18,21,22,26,28,29,33 D 1芽孢中央 4,10,11,16,17(芽孢侧位),18,29 E 1好氧 10,16 F 1接触酶“-”,V.P 反应“-”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“-”16 FF 1接触酶“+”,V.P 反应“-”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“±”，淀粉水解“+”10 EE 1兼氧 4,10,11,17,18,29 F 1接触酶“+” 4,10,11,17 G 1V.P 反应“-” 10,17 H 1葡萄糖产气“+”，明胶液化“±”，淀粉水解“-”，柠檬酸盐利用“-”17 HH 1葡萄糖产气“-”，明胶液化“±”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用“±”10 GG 1V.P 反应“+” 4,11 H 1吲哚产生“+”，明胶液化“+”，硝酸盐还原“-”，葡萄糖产酸“+”，淀粉水解“-”，柠檬酸
盐利用“-”4
HH 1吲哚产生“-”，明胶液化“-”，硝酸盐还原“±”，葡萄糖产酸“+”，淀粉水解“-”，柠檬
酸盐利用“-”11
FF 1接触酶“-” 18,29 G 1在2%NaCl 中生长“-” 18 H 1V.P 反应“-”，硝酸盐还原“-”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“-”，淀粉水解“-”，柠檬酸
盐利用“-”18
GG 1在2%NaCl 中生长“+” 29 H 1V.P 反应“-”，硝酸盐还原“-”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“-”，淀粉水解“-”，柠檬酸
盐利用“-”29
DD 1芽孢一端 6,8,10,11,16,18,21,22,26,28,33 E 1好氧 6,8,10,33 F 1接触酶“-” 6,33 G 1明胶液化“+”，淀粉水解“+”,V.P 反应“-”，葡萄糖产酸“+”，柠檬酸盐利用“+”33 GG 1明胶液化“-”，淀粉水解“-”,V.P 反应“-”，葡萄糖产酸“+”，柠檬酸盐利用“+”6 FF 1接触酶“+” 8,10,33 G 150℃～65℃生长“+”，阿拉伯糖产酸“±”，木糖产酸“±”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”,
柠檬酸盐利用“±”,V.P 反应“-”，硝酸盐还原“±”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”33
GG 150℃～65℃生长“-” 8,10 H 1酸脱氨“+”,V.P 反应“-”，硝酸盐还原“±”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”，明
胶液化“+”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用“±”，阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”8
HH 1酸脱氨“-”,V.P 反应“-”，硝酸盐还原“±”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”,
明胶液化“+”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用“±”，阿拉伯糖产酸“+”，木糖产酸“+”10
监测网站
EE 1兼氧 10,11,16,18,21,22,26,28 F 1接触酶“-” 16,18 G 1明胶液化“+”，硝酸盐还原“±”,V.P 反应“-”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”，淀粉水解“-”，柠檬酸
盐利用“-”，阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”16
GG 1明胶液化“-”，硝酸盐还原“-”,V.P 反应“-”，吲哚产生“-”，葡萄糖产酸“+”，淀粉水
解“-”，柠檬酸盐利用“-”，阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”18
FF 1接触酶“+” 10,11,21,22,26,28 G 1V.P 反应“+” 11,28 H 1葡萄糖产酸“+”，明胶液化“-”，淀粉水解“+”，吲哚产生“-”，柠檬酸盐利用“±”，硝酸
盐还原“±”11
HH 1葡萄糖产酸、产气“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”，吲哚产生“-”，柠檬酸盐利用
丰胸乳液“-”，硝酸盐还原“-”28
GG 1V.P 反应“-” 10,21,22,26
·021·江西科学 1998年第16卷
H 1硝酸盐还原“+” 10,21,26 I 1葡萄糖产酸“+” 10,26 J 1阿拉伯糖产酸“+”，木糖产酸“+”，柠檬酸盐利用“±”，吲哚产生“-”10 JJ 1阿拉伯糖产酸“-”，木糖产酸“-”，柠檬酸盐利用“-”，吲哚产生“-”26 II 1葡萄糖产酸、产气“+” 21 J 1阿拉伯糖产酸“+”，木糖产酸“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”21 HH 1硝酸盐还原“-” 10,22,26 I 1阿拉伯糖产酸“+” 10 J 1木糖产酸“+”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“±”，淀粉水解“+”10 II 1阿拉伯糖产酸“-” 22,26 J 1木糖产酸“+”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“-”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用
“-”，吲哚产生“-”22
JJ 1木糖产酸“-”，葡萄糖产酸“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用
“-”，吲哚产生“-”26
AA 1直径大于1μm 2,5,7,9,12,15,23,24,25,34 B 1芽孢圆形 15,23 C 1芽孢小于菌体 (无) CC 1
芽孢大于菌体 15,23 D 1芽孢中央 15 DD 1芽孢一端 15,23 E 1葡萄糖产酸“-”，明胶液化“-”，好氧,V.P 反应“-”，淀粉水解“-”，柠檬酸盐利用“-”，吲哚产
生“-”，硝酸盐还原“-”15
EE 1葡萄糖产酸“+”，明胶液化“+”，好氧,V.P 反应“-”，淀粉水解“-”，柠檬酸盐利用“-”，吲哚
产生“-”，硝酸盐还原“-”23
BB 1芽孢椭圆 2,5,7,9,12,24,25,34 C 1芽孢大于菌体 2 D 1芽孢一端, 2 E 1好氧，接触酶“d ”,V.P 反应“-”，柠檬酸盐利用“-”，硝酸盐还原“ND ”，葡萄糖产酸“ND ”，明胶
液化“ND ”2
CC 1芽孢小于菌体 5,7,9,12,24,25,34 D 1芽孢一端 12 E 1好氧，接触酶“+”,V.P 反应“N G ”，柠檬酸盐利用“-”，硝酸盐还原“-”，吲哚产生“-”，葡萄糖
产酸培养基“N G ”，明胶液化“-”12
DD 1芽孢中央 5,7,9,12,24,25,34 E 1好氧 7,12,24 F 1淀粉水解“+”，柠檬酸盐利用“+”,V.P
反应“-”，接触酶“+”，葡萄糖产酸“-”24 FF 1淀粉水解“-”，柠檬酸盐利用“-” 7,12 G 150℃生长“+”,10℃生长“-”,V.P 反应“-”，接触酶“+”，葡萄糖产酸“-”7 GG 150℃生长“-”,10℃生长“+” V.P 反应“-”，接触酶“+”，葡萄糖产酸“-”12 EE 1兼氧 5,9,25,34
此四菌均为V.P 反应“+”，葡萄糖产酸“+”，接触酶“+”，明胶液化“+”，淀粉水解“+”，硝酸盐还原“+”，吲哚产生“-”，柠檬酸盐利用“d ”。它们的区别见表3。
注：表中“+”示阳性;“-”示阴性;“ND ”示无数据;“N G ”示不生长;“d ”示不定。下同
笔者在工作中，检查芽孢的方法，是先将24h 内培养物涂片作革兰氏染，已见芽孢者留下，未见芽孢者继续培养隔日观察，同时将培养物移植于液体培养基两管后，一管不加热直接培养作对照；另一管则加热至80℃维持20min ，取出再培养。凡芽孢杆菌，两管均能生长。分离出的芽孢杆菌涂片作革兰氏染，观察染情况、菌体排列的同时，除观察芽孢形状(圆形或椭圆)、位置(居中央与否)以及芽孢是否比菌体直径大等外，还以测微器测量菌体直径。生理
生化项目的测定参照盛氏实验指导[3]、微生物学方法[4]及何氏《卫生防疫检验》[5]进行。
·
121·第2期 廖延雄等：芽孢杆菌属(B acill us )二分检索表
表2 表1中各菌号所表示的菌种名
菌号
菌种拉丁学名
中文学名菌号菌种拉丁学名
中文学名1 B.subtilis
枯草芽孢杆菌18 B.lentimorbus 缓病芽孢杆菌2 B.acidocaldarius 酸温芽孢杆菌19 B.lentus
缓慢芽孢杆菌3 B.alcalophilus 嗜碱芽孢杆菌20 B.lichenif ormis 地衣芽孢杆菌4 B.alvei 蜂房芽孢杆菌21 B.m acerans
浸麻芽孢杆菌5 B.anthracis 芽孢杆菌22 B.m acquariensis 马阔里芽孢杆菌6 B.azotof orm ans 成氮芽孢杆菌23 B.m arinus 海洋芽孢杆菌7 B.badius 栗褐芽孢杆菌24 B.megaterium 巨大芽孢杆菌8 B.brevis 短芽孢杆菌25 B.mycoides
蕈状芽孢杆菌9 B.cereus 蜡状芽孢杆菌26 B.pantothenticus 泛酸芽孢杆菌10 B.circulans 环状芽孢
杆菌27 B.pasteurii 巴氏芽孢杆菌11 B.coagulans 凝结芽孢杆菌28 B.polymyx a 多粘芽孢杆菌12 B.f astidiosus 挑剔芽孢杆菌29 B.popilliae 日本甲虫芽孢杆菌13 B.f irm us 坚强芽孢杆菌30 B.pumilus 短小芽孢杆菌14 B.globisporus 圆孢芽孢杆菌31 B.schlegelii 施氏芽孢杆菌15 B.insolitus 异常芽孢杆菌32 B.sphaericus
球形芽孢杆菌16 B.larvae
幼虫芽孢杆菌33 B.stearothermophilus 嗜热脂肪芽孢杆菌17
B.
laterosporus
侧孢芽孢杆菌34
B.thuringiensis 苏云金芽孢杆菌
表3 4种兼氧芽孢杆菌的区别
菌号
菌种学名
运动力
人畜致病荚膜(在组织中)10℃生长卵磷脂酶
伴孢晶体V.P 反应
柠檬酸盐利用
5
B.anthracis 芽孢杆菌-++-+-+d 9 B.cereus 蜡状芽孢杆菌+--d +-++25 B.mycoides 蕈状芽孢杆菌
---d d -++34
B.
thuringiensis 苏云金芽孢杆菌
+
-
-d
d
+
d
+
有关芽孢杆菌分类检索，笔者采用自拟的二分法检索表。该检索表方便，可检索出34个种，较1973年戈登(G ordon R.E.)等编写的芽孢杆菌属[6]晚13年。虽然戈登等的著作，也有二分法检索表，但从中只能检索出18个种，故相对而言，此检索表比戈登等的检索表要新。在《伯杰系统细菌学手册》卷二出版后两年,1988年Priest 等[7]又发表了基于数值分类法的论文《芽孢杆菌属的数值分类》，将芽孢杆菌属分为A ～F 六个，共列有43个种和6个未定种，共49个。此文又较新，笔者自拟的二分法检索表未将Priest 等的工作列入，但Priest 等氏的工作值得进一步参考。到1997年4月止，又有一些芽孢杆菌属的新种或新定的属(有些是从原属中分出新命名的属)，列于表4和表5，以供同道参考。
表4 芽孢杆菌属(B acill us )的新种
新种细菌名
年代著 者
原载杂志，卷(期)：页B.
acidoterrest ris 酸土芽孢杆菌1987Deinhard G ,et al Syst Appl Microbiol ,10:47～53B.agaradhaerans 粘醇芽孢杆菌1995Nielsen P ,et al Microbiology ,141:1745～1760B.agri 农田芽孢杆菌
1993Nakamura L K Int J Syst Bact ,43(1):20～25B.alginolyticus 溶藻酸芽孢杆菌高纯硝酸钾
1987Nakamura L K Int J Syst Bact ,37(3):284～286B.amyloliquef aciens 液化淀粉芽孢杆菌1987Priest F G ,et al Int J Syst Bact ,37(1):69～71B.aneurinolyticus 溶维生素B 1芽孢杆菌1994Shida O ,et al Int J Syst Bact ,44(1):143～150B.at rophaeus 黑棕芽孢杆菌1989Nakamura L K ,Int J Syst Bact ,39(3):295～300B.benzoevorans 解苯芽孢杆菌1984Pichinoty F ,et al Ann Microbiol ,135B :209～217B.borstelensis 波城芽孢杆菌1995Shida O ,et al Int J Syst Bact ,45(1):93～100B.carboniphilus 嗜碳芽孢杆菌1996Fujita J ,et al Int J Syst Bact ,46(1):116～118B.
cent rosporus 中央芽孢杆菌1993Nakamura L K ,Int J Syst Bact ,43(1):20～25
·221·江西科学 1998年第16卷
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