药学实践杂志2006年第24卷第4期
物依赖性杂志,2000,9(1):4.
5:GlickSD,MaisomemeIM,PearlSM.nidel"efor'rolesofkap pa—opioidandNMDAre('eptorsintilenlechallismofa('tionibo
gaine[J].BrainRes,1977,749:340.
6:PopikP,IerRT,SkolniekP.100.;earsofibogaine:neul0
【]wmi(-alandpharmacologicalactionsofaputati~eantiaddk'tive
drug[J].PharmacolRe;,1995,47:235.
[7]傅秋生，黄矛.云南狗牙花总碱对依赖小鼠位置偏爱
冉现的阻断作Ⅲ[J].解放军药学,2004,20(5):352.
收稿日期:2006—01—16
电导法测定多硫酸肝素钠中硫酸基含量
机床顶针金艳一，崔慧斐，凌沛学一，张天民':(1.山东大学药学院，山东济南250012;2.山东省生物药物研究院博士后科
研丁作站，山东济南250108)
摘要目的：建立一种测定多硫酸肝素钠中硫酸基含量的方法方法：将多硫酸肝素钠通过H型阳离子树
脂，用氢氧化钠对其洗脱液进行滴定，通过电导率的变化确定滴定终点，并用氯代十六烷基吡啶对结果进行 校正，测定其硫酸基含量.结果：硫酸基的平均加样回收率为100.18%,RSD为3.67%.结论：本法简便准
确，重复性较好:
关键词多硫酸肝素钠；硫酸基；氯代十六烷基吡啶；含量测定
中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006—0ll1(2006)04—0205—02 Determinationofsulfategroupsinpolysulfatedheparinsodiumwithconductometry
JINY an一,CUIHui—fei,LINGPei.xue.'.,
ZHANGTian—rain..(1.SchoolofPharmacy,ShandongUniversity,Jinan250012,kingStationforPostdoctoralScientificReseareh,InstituteofBiopI1arma(uIicalsofSha ndongProvince,Jinan250108,China)
ABSTRACTObjective:Toestablishamethodforthedetemunationofthecontentsofsulfateg roupsinpolysulfatedheparinsodium.
瞬态电压抑制器Methods:Thecontentsofsulfategroupsweredeterminedby(on,erringtheNaofpolysulfated heparinsodiumintoHwithcationex—changeresinandtitratingwithsodiumhydroxide.Thetitrationend—pointwasascertainedbyvarianceofconductivityandtheresults werectifiedbycetylpyridiniumchloride.Results:TheaveragerectoeD'was100.18%,RSD= 3.67%.Conclusion:Thismthodwas
simple,reproducibleandaccurate. KEYWOWDSpolysulfatedheparinsodium;sulfategroup;cetylpyridiniumchloride;assay 多硫酸肝素钠是类肝素的一种，系由食用动物
(主要为牛)的包括气管软骨在内的肺脏提取，纯化
和修饰所得，以干燥品计含D一葡糖醛酸19.0%～
24.0%，氮1.6%～2.0%及有机硫酸基25.8%～
37.3%.2j日本药局方外医药品成分规格中规定
该产品的有机硫酸基由测得的总硫酸基的量与游离
硫酸基的差值求得.本研究通过H型阳离子
交换树脂，将其分子中的Na转变为H，用氢氧化
钠滴定其洗脱液，根据电导率的变化确定滴定终点,
并利用氯代十六烷基吡啶与多硫酸肝素钠形成沉淀
的性质，对结果进行校正，以测定其硫酸基含量
1实验材料
耐腐蚀热电偶
DDS一11A型数字电导率仪(上海大普仪器有
作者简介：金艳(1972一)，女，博士研究生.Tel:(0531)88779140
E-lnail:bmxhzh~@l63corn.
限公司)，阳离子交换柱(1cmX10cm)(上海六一
玻璃仪器厂),732型苯乙烯强酸型阳离子交换树脂(上海汇脂树脂厂).
多硫酸肝素钠(自制)；硫酸钠，氢氧化钠，氯代
十六烷基吡啶均为分析纯.
2方法与结果
2.1原理与操作将H型阳离子交换柱及i蒸
水在4c【=预冷.精密配制25mmL的氯代十六烷基吡啶溶液.取多硫酸肝素钠样品2份，每份约10 mg，精密称定.其中I份(重量为.)用蒸水溶
解，上H型阳离子交换柱，用三蒸水洗脱，同时监
测洗脱液的电导率变化.收集洗脱液至其电导率值升至最大.用微量进样器对洗脱液进行滴定，每次加0.03mol/L氢氧化钠滴定液50L，电导率下降
的最低点为滴定终点.测得氢氧化钠滴定液消耗体积,(mL)另1份(重量为)用i蒸水200L
溶解，精密加入氯代十六烷基吡啶溶液1mL,37
保温15llliIl,13000r/alin离心10rain取L清液400L，加入H型阳离子交换柱，按上述步骤进行
洗脱及滴定测得氢氧化钠消耗体积(mI)：按
下式计算多硫酸肝素钠中硫酸基含量?
硫酸基含量(r/f):
一
(c×3一)Mi]
×80.06
式中c：氢氧化钠滴定液浓度(mol/L);m：每1mL氯代十六烷基吡啶溶液中含有的溶质质量(mg); 80.06:1mmolSO的量(mg);358.01：氯代十六烷
基吡啶的相对分子质量
2.2样品测定按2.1项下方法测定同批多硫酸
肝素钠的硫酸基含量，连续测定6次，其RSD为3.28%：结果见表1.
表1多硫酸肝素钠中硫酸基含量测定结果
2.3加样回收率实验取已测知硫酸基含量的多
硫酸肝素钠5份，每份约10mg，精密称定，用蒸
水溶解，分别加入40,60,80,100,120LNa,SO(以
SO计25.17rag/mL)溶液，上H型阳离子交换柱, 按2.1项下步骤进行洗脱及滴定.另取同批多硫酸肝素钠5份，每份约10mg，精密称定，用三蒸水200 L溶解，精密加入氯代十六烷基吡啶溶液1mL, 37℃保温15rain,13000r/rain离心10rain取上清
液400L，加入H型阳离子交换柱，按2.1项下步
骤进行操作：其RSD为3.67%结果见表2:
表2NaSO(以S0计)加样回收实验结果
2.4日间精密度实验取同一批多硫酸肝素钠样
品按2.1项下方法连续测定7d，其RSD为4.17%, 结果见表3.
表3日间精密度实验结果
3讨论
测定黏多糖中硫酸基含量的方法最常用的是玫
红酸钠法.玫红酸钠法取样量少，灵敏度高，但
操作繁琐，重复性差与玫红酸钠法相比，本法具有取样量适中，操作简单，重复性好等优点.
本法通过监测体系的电导率变化来确定滴定终点.H,Na和OH一的导电能力的相对值为350,保安接线排
鞋楦机
50和198多硫酸肝素钠通过H型离子交换树脂后，其Na转变为H，加入NaOH，则OH一首先与硫酸基上的H结合，余下Na，故滴定体系的电导率
下降：至滴定终点时，电导率下降至最低
多硫酸肝素钠在制备过程中，常引入一些无机
盐，对其硫酸基含量测定造成干扰.本法用氯代十
六烷基吡啶对测定结果进行校正.消除了无机盐杂
质的影响.多硫酸肝素钠中硫酸基和羧基在中性溶
实验室流化床
液中均成一价负离子，可与氯代十六烷基吡啶发生
1:1结合，生成沉淀.将沉淀离心后，上清中仅含
氯代十六烷基吡啶中Cl一与盐类杂质.将此上清上
H型阳离子交换柱后，滴定洗脱液所消耗的NaOH
量为cl一与盐类杂质消耗之和.另测出多硫酸肝素
钠中硫酸基与盐类杂质过H型阳离子交换柱后洗
脱液所消耗的NaOH量之和，二者相对比，即可测出
多硫酸肝素钠中硫酸基含量.其羧基对本法无干
扰
参考文献:
[I]厚生省药务局.日本药局方外医药品成分规格[S],1989. 1044～l()47
[2]张天民.类肝素药物的研究与开发[J].山东医药r业,1999, 18(1):29.
[3]张惟杰.糖复合物生化研究技术[M].杭州：浙江大学出版社,1999411～412.
[4]刘禄娟，王伟，张天民.低分子肝素硫酸基离子与羧酸根离子摩尔比的测定[J].中围生化药物杂志,1998,19(5):330.
收稿日期:2006—01—18
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