一种重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

一种重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途

技术领域

本发明属于药物学和制药学领域，涉及重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液、其制备方法及用途。

背景技术

重酒石酸长春瑞滨（Vinorelbine Bitartrat），为长春碱半合成衍生物，主要通过抑制微管蛋白的聚合，使细胞分裂停止于有丝分裂中期，是一细胞周期特异性的药物，临床中用于非小细胞肺癌、转移性乳腺癌、晚期卵巢癌、恶性淋巴瘤等疾病的。重酒石酸长春瑞滨毒性较强，可导致神经毒性和血液毒性，静脉炎，局部皮肤坏死等，将其制备成静脉脂质微球注射液，减少药 物在注射部位的局吸收，降低了药物在注射部位可能产生的毒性及刺激性（李红英，张洪瑶，王智军，等，（2006）沈阳药科大学学报，23:749-753）。

脂质微球，又称脂肪乳或亚微乳，是目前医药领域发展较快的剂型，它主要是以脂肪油为软基质，将药物溶解在脂肪油里，通过磷脂乳化作用将其包裹于磷脂膜包封的乳球中。能保护被包被的药物，可提高药物稳定性、延长药物作用时间、降低副作用等，具有一定的缓释性和靶向性，是一种理想的药物载体。

脂肪乳在热力学及动力学上均属于不稳定体系，工业生产中脂肪乳通过两步乳化法制备，涉及初乳制备、高压均质，制备过程对设备、工艺参数、辅料配比等有着严格的要求，温度、乳化时间、均质压力、循环次数和生产设备都对产品质量产生影响。这是由于直接将脂肪乳的组成成分（磷脂、油、水等物料混合后，会发生油水分离现象，只有将这些物料，经过专用的均质设备处理，如高压均质机，才能形成稳定均一的乳液，在均质过程中，物料受到高频振动、空穴、剪切，以及冲击等协调作用，最终被打散或细化为液体中的不溶相颗粒Hiroko Shibata, et al. (2009) Int. J. Pharm. 378: 167-176；Dirk L. Teagarden, et al.（1996）Adv. Drug. Deliv. Rev. 20：155-164），另外脂肪乳需要采用高压灭菌法（李红英，张洪瑶，王智军，等，（2006）沈阳药科大学学报，23:749-753）。

一种理想的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳，是制备工艺简单、无需特殊设备，可以通过微孔滤膜方式除菌，以减低制备成本。同时，临床应用方便，加入生理盐水等注射溶液，经轻微振荡后能自发乳化，乳化后的制剂，平均粒径在0.2μm左右，保持典型的脂肪乳特性。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，本发明人惊奇地发现，本发明的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，与水混合后，不经过均质手段，即可形成稳定的乳液，可以有效地克服油-水分离现象。并且本发明产品能有效地克服不同辅料间的密度差而带来的制剂分层现象，由此获得单相、透明、稳定，遇水后能够自发乳化的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。由此提供了下述发明：

本发明涉及一种重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其包含：

主药：重酒石酸长春瑞滨，

油：中链脂肪酸甘油酯，

助溶剂：1, 2-丙二醇，

低HLB值表面活性剂（4≤HLB≤9）：磷脂，和

高HLB值表面活性剂（HLB≥12）：聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯和/或聚氧乙烯醚(35)蓖麻油；

可选地，所述油还包含大豆油；

可选地，所述低HLB值表面活性剂还包含聚甘油油酸酯；

可选地，所述高HLB值表面活性剂还包含吐温80。

根据本发明任一项所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（5）项中的任意一项或者多项： 

（1）所述重酒石酸长春瑞滨的含量为0.1－10%（w/w）；优选为0.5－5%（w/w）；

（2）所述油的含量为45－85％（w/w）；优选为50－70％（w/w）；

（3）所述助溶剂的含量为5－30%（w/w）；优选为5－20%（w/w）；

（4）所述低HLB值表面活性剂的含量为5%－15％（w/w）；

（5）所述高HLB值表面活性剂的含量为5%－20％（w/w）。

根据本发明任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（9）项中的任意一项或者多项：

（1）所述重酒石酸长春瑞滨的含量为0.5－5%（w/w），优选为1－2%（w/w）；

（2）所述中链脂肪酸甘油酯的含量为20％－70%（w/w），优选为25％－70%（w/w）；

（3）所述大豆油的含量为0－50%（w/w），优选为0－30%（w/w）；

（4）所述1, 2-丙二醇的含量为5％－15％（w/w），优选为8％－12％（w/w）；

（5）所述磷脂的含量为5％－15％（w/w），优选为7％－12％（w/w）；

（6）所述聚甘油油酸酯的含量为0－8％（w/w），优选为0－5％（w/w）；

（7）所述聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯的含量为0－15％（w/w），优选为0－11％（w/w）；

（8）所述吐温80的含量为0－15％（w/w），优选为0－10％（w/w）；

（9）所述聚氧乙烯醚(35)蓖麻油的含量为0－15％（w/w），优选为0－10％（w/w）。

根据本发明任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其特征在于如下的（1）－（7）项中的任意一项或者多项：

（1）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液不含水或含水量低于1％；

（2）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液不含糖类；

（3）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液不含糊精；

（4）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液其制备方法不包含除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥）；

（5）可选地，所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液还包含抗氧化剂；具体地，所述抗氧化剂选自油酸、油酸钠、维生素E和维生素A的任意一种或多种；

（6）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液为透明、单相溶液；

（7）所述重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液采用0.22μm微孔滤膜方式除菌。

根据本发明任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面1）－2）组中的任意一组所示：

1）

重酒石酸长春瑞滨                1~2克

中链脂肪酸甘油酯                25~70克

大豆油                          0~30克

1, 2-丙二醇                      8~12克

大豆卵磷脂                     7~12克

聚甘油油酸酯                     0~5克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯       7~11克

吐温80                         4~10克

油酸                              0~0.3克

油酸钠                          0~0.3克

维生素E                          0~0.3克；

2）

重酒石酸长春瑞滨                     1~2克

中链脂肪酸甘油酯                     65~70克

1, 2-丙二醇                           8~12克

大豆卵磷脂                          7.5~12克

聚甘油油酸酯                         0~5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油                  8~10克

油酸                                   0~0.3克

油酸钠                               0~0.3克

维生素E                               0~0.3克。

根据本发明任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，其组分和含量如下面的（1）－（4）组中的任意一组所示：

（1）

重酒石酸长春瑞滨                                1.8克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol GTCC）             28克

大豆油                                         28克

1, 2-丙二醇                                     8.9克

大豆卵磷脂                                    10克

聚甘油油酸酯                                    3.3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     10.5克

吐温80                                         9克

油酸                                              0.2克

维生素E                                         0.3克；

（2）

重酒石酸长春瑞滨                                  2克

中链脂肪酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）           66克

1, 2-丙二醇                                       8.2克

大豆卵磷脂                                     7.3克

聚甘油油酸酯                                      4.1克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     8.2克

吐温80                                           4.1克

油酸钠                                            0.1克；

（3）

重酒石酸长春瑞滨                                   1克

中链脂肪酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）            67克

1, 2-丙二醇                                         10.5克

大豆卵磷脂                                        11.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）        9.7克

油酸钠                                            0.1克

维生素E                                             0.2克；

（4）

重酒石酸长春瑞滨                                   1.4克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol GTCC）                 67克

1, 2-丙二醇                                         9.9克

大豆卵磷脂                                         7.5克

聚甘油油酸酯                                        5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）         9.1克

油酸                                                 0.1克。

需要说明的是，上述的1）－2）组或者（1）－（4）组中的单位克表示各组分之间的比例，如果修改为其它的重量单位，包括但不限于，例如千克和毫克等，也均在本发明的保护范围之内。

本发明的再一方面涉及一种注射用重酒石酸长春瑞滨脂肪乳，其由本发明中任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液加水或水溶液自乳化制得；具体地，所述注射用重酒石酸长春瑞滨脂肪乳平均粒径为0.05－0.7μm；优选为0.1－0.4μm；更优选地，为0.16-0.22μm。

本发明的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液遇水稀释后，可自发乳化为符合注射要求的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液的制备方法，包括下述步骤：

1）在20－45℃，将低HLB值表面活性剂加入油，在2000－20000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在20－45℃条件下，将助溶剂、重酒石酸长春瑞滨加入步骤1）产物，并在200－2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在20－45℃条件下，将高HLB值表面活性剂以及可选的抗氧化剂加入步骤2）产物，并在200－800rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。

关于步骤1）或步骤2）或步骤3）中所使用的油、低HLB值表面活性剂、高HLB值表面活性剂和助溶剂，其中水分含量要低于1%，或者没有游离水的存在。

步骤3）中的产品，在不经过除去或者降低水分的步骤（例如旋转蒸发、喷雾干燥或冷冻干燥），含水量低于1％（按重量百分比计）。

本发明的再一方面涉及本发明中任一项所述的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液或者本发明的注射用重酒石酸长春瑞滨脂肪乳在临床中用于非小细胞肺癌、转移性乳腺癌、晚期卵巢癌、恶性淋巴瘤等疾病的。

本发明涉及的部分术语的解释：

脂肪乳，又称脂质微球是指，乳液或脂肪乳浓缩液乳化后，形成的一种以脂肪油为软基质并被磷脂膜包封，平均粒径为0.2μm左右的微粒分散体系。

本发明中，对于各个组分的含量的百分比，如果没有特别说明，均指占药物组合物总重量的重量百分比（w/w）。

发明的有益效果

本发明产品流动性好，不挂壁，外观呈单相、透明、清亮状，能够接受澄明度检测，反复冻融后不会发生制剂分层现象；本发明的产品遇水形成重酒石酸长春瑞滨脂肪乳体系过程中，无需均质处理，仅需要轻微振荡即能自发乳化，临床使用时经生理盐水或葡萄糖溶液等水溶液稀释并轻微振荡后，能够自发乳化为符合注射要求的脂肪乳体系，在优选条件下，乳化后平均粒径0.2μm左右，粒径分布狭小充分体现注射脂肪乳特性。

本发明制备工艺简单，仅需要普通物理搅拌过程，不需要均质工艺，不需要除水工艺，本发明制备的重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液，可以通过0.22μm微孔滤膜除菌。本发明具有制备工艺简单、生产成本低廉，易于运输、储存的优势，极具应用前景。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液样品1的制备

其组成成分如下：

重酒石酸长春瑞滨                                1.8克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol GTCC）             28克

大豆油                                         28克

1, 2-丙二醇                                     8.9克

大豆卵磷脂                                    10克

聚甘油油酸酯                                    3.3克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     10.5克

吐温80                                         9克

油酸                                              0.2克

维生素E                                         0.3克

该重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在20℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯和大豆油中，在20000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在20℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、重酒石酸长春瑞滨加入步骤1）产物，并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在20℃条件下，将上述重量的吐温80、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯、油酸及维生素E加入步骤2）产物，并在200rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。

实施例2：重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液样品2的制备

其组成成分如下：

重酒石酸长春瑞滨                                  2克

中链脂肪酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）           66克

1, 2-丙二醇                                       8.2克

大豆卵磷脂                                     7.3克

聚甘油油酸酯                                      4.1克

聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯（Solutol HS 15，BASF）     8.2克

吐温80                                           4.1克

油酸钠                                            0.1克

该重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在45℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯，在2000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在35℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、重酒石酸长春瑞滨加入步骤1）产物，并在1000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在30℃条件下，将上述重量的吐温80、聚乙二醇十二羟基硬脂酸酯及油酸钠加入步骤2）产物，并在800rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。

实施例3：重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液样品3的制备

其组成成分如下：

重酒石酸长春瑞滨                                   1克

中链脂肪酸甘油酯（Miglyol 812，SASOL）            67克

1, 2-丙二醇                                         10.5克

大豆卵磷脂                                        11.5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）        9.7克

油酸钠                                            0.1克

维生素E                                             0.2克

该重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在30℃，将上述重量的大豆卵磷脂加入中链脂肪酸甘油酯，在10000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在45℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、重酒石酸长春瑞滨加入步骤1）产物，并在1000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在45℃条件下，将上述重量的聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、油酸钠，及维生素E加入步骤2）产物，并在500rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。

实施例4：重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液样品4的制备

其组成成分如下：

重酒石酸长春瑞滨                                   1.4克

中链脂肪酸甘油酯（Crodamol GTCC）                 67克

1, 2-丙二醇                                         9.9克

大豆卵磷脂                                         7.5克

聚甘油油酸酯                                        5克

聚氧乙烯醚(35)蓖麻油（Cremophor ELP，BASF）         9.1克

油酸                                                 0.1克

该重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液制备方法如下：

1）在25℃，将上述重量的大豆卵磷脂、聚甘油油酸酯加入中链脂肪酸甘油酯，在8000rpm条件下，搅拌至形成透明清亮溶液；

2）在25℃条件下，将上述重量的1, 2-丙二醇、重酒石酸长春瑞滨加入步骤1）产物，并在2000rpm搅拌条件下持续搅拌，直至整个体系呈透明清亮状；

3）在25℃条件下，将上述重量的聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、油酸加入步骤2）产物，并在500rpm搅拌条件下持续搅拌，直至形成单相、透明清亮的均匀制剂，经0.22μm微孔滤膜除菌后，最终获得重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液。

实施例5：光密度测定试验

用日立U-2001紫外可见分光光度计，在室温条件下，600nm处测定光密度。其中重酒石酸长春瑞滨脂肪乳浓缩液为按照实施例1－4制备步骤所得的样品1－4，结果如表1所示。

表1：不同样品溶液的光密度值

光密度表示光的透过性，数值越低，表明样品越澄清均一，由结果可知，本发明产品外观均一、清亮、透明。

实施例6：稳定性试验

实施例1－4制备的样品1－4。

实验方法：将不同样品在-20℃冷冻过夜后，放置于20℃自然解冻，如此反复冻融6次，环境条件下观察样品外观，试验结果见表2。

表2：不同样品经冻融后，样品外观变化

由表2可见，样品1－4均具有极好的稳定性，经过反复冻融，外观仍能保持透明均一相，不挂壁、不分层，具有良好的流动性。

实施例7：粒径测定

本发明实施例1－4制备的样品1－4，采用Mastersizer 2000粒度分析仪检测粒径，样品加入10倍体积的生理盐水，经轻微振荡自发乳化后测定。

表3：不同样品乳化后粒径分布

注：d（0.1）表示样品的累计粒度分布数为10%对应的粒径， d（0.5）、d（0.9）、d（1）依此类推。

其粒径分布如表3所示，四个实施例的粒径分布在0.1-0.8μm之间，平均粒径0.2μm，充分体现脂肪乳特征。四个实施例产品的d（0.9）均小于0.6μm，满足注射脂肪乳粒径要求。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。