A61K35/04 A61K38/12 A61P35/00
1.式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐在人的乳腺癌和/或骨转移灶的中 的用途。
2.根据权利要求1的肽，其中所述包括以500mg至12500 mg每周(和每人)的量施用环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐于所述人。
3.根据权利要求1和/或权利要求2的肽，其中所述包括施 用环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐于所述患者至少一次每周持续至少3个连续周。
4.根据权利要求1、2和/或3的肽，其中乳腺癌和/或骨转移灶 的还包括施用一种或多种癌综合剂于所述人。
5.根据权利要求4的肽，其中所述一种或多种癌综合剂选 自下组：
a)激素调节剂，
b)破骨细胞活性调节剂，
c)癌化疗剂，和
d)放射疗法。
6.根据权利要求5的肽，其中
i)根据a)的所述激素调节剂选自下组：抗雌激素药、芳香酶抑 制剂和GnRH analoga，
ii)根据b)的所述破骨细胞活性调节剂选自下组：双膦酸盐和 RANK/RANKL/OPG调节剂，
iii)根据c)的所述癌化疗剂选自下组：烷化化疗剂、VEGF/VEGFR 抑制剂、EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、细胞生长抑制性生物碱、细 胞毒性抗生素，和抗代谢药，和/或
iv)放射疗法，其选自外线束放射疗法/放射、近距离放射疗法和 全身性放射性同位素疗法。
7.根据权利要求5和/或6的肽，其中
i)根据a)的激素调节剂包括：
α)一种或多种化合物，其选自抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、 巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和 氟维司，
β)一种或多种化合物，其选自芳香酶抑制剂阿那曲唑、来曲唑、 依西美坦、伏氯唑、福美坦和法倔唑，和/或
γ)一种或多种化合物，其选自GnRH analoga亮丙瑞林、戈舍 瑞林和布舍瑞林；
ii)根据b)的破骨细胞活性调节剂包括：
δ)一种或多种化合物，其选自双膦酸盐依替膦酸、氯膦酸盐、 替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、 伊班膦酸盐、利塞膦酸盐和唑来膦酸盐，
和/或
ε)RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单抗；
和/或
iii)根据c)的癌化疗剂包括：
ζ)一种或多种化合物，其选自烷化化疗剂顺铂、卡铂、奥沙利 铂、环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺，
η)一种或多种化合物，其选自VEGF/VEGFR抑制剂贝伐珠单抗 (rhuMAb‑VEGF)、索拉非尼、舒尼替尼、凡德他尼(ZD6474)，
θ)一种或多种化合物，其选自EGF/EGFR抑制剂曲妥珠单抗、西 妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非 替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，
ι)一种或多种化合物，其选自PARP抑制剂奥拉帕利和Iniparib (BSI‑201)，
κ)一种或多种化合物，其选自细胞生长抑制性生物碱依托泊苷、 替尼泊苷、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、多西他赛、紫 杉醇、伊立替康、托泊替康和伊沙匹隆，
λ)一种或多种化合物，其选自细胞毒性抗生素柔红霉素、多柔 比星、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、放线菌素‑D、博来霉素和丝 裂霉素‑C，
和/或
μ)一种或多种化合物，其选自抗代谢药吉西他滨、甲氨喋呤、 雷替曲塞、培美曲塞、6‑巯嘌呤、6‑硫鸟嘌呤、2’‑脱氧肋间型霉素、 磷酸氟达拉滨、2‑氯脱氧腺苷、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、胞嘧啶阿拉 伯糖苷、二氟脱氧胞苷和羟基脲。
13.受试对象中乳腺癌和/或骨转移灶的方法，优选人受试对 象，包括施用于所述受试对象式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的 肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。
14.受试对象中乳腺癌和/或骨转移灶的方法，优选人受试对 象，包括施用于所述受试对象式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的 肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和一种或多种癌综合剂。
16.根据权利要求14和/或15的方法，其中所述一种或多种癌综 合剂选自根据权利要求5、6和/或7的剂、化合物、抑制剂 和/或调节剂。
15.受试对象中乳腺癌和/或骨转移灶的方法，优选人受试对 象，包括施用于所述受试对象式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的 肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和一种或多种癌综合剂，其选自下组：
a)激素调节剂，
b)破骨细胞活性调节剂，
c)癌化疗剂，和
d)放射疗法。
17.受试对象中骨转移灶的方法，优选人受试对象，包括或 组成如下：施用于所述受试对象式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。
18.根据权利要求17的方法，还包括施用于所述人一种或多种癌 综合剂。
19.根据权利要求18的方法，其中所述一种或多种癌综合剂 选自根据权利要求5、6、7、15和/或16的一项或多项的剂、化 合物、抑制剂和/或调节剂。
20.根据权利要求17、18和/或19的方法，其中所述一种或多种 癌综合剂选自
a)破骨细胞活性调节剂，
和/或
b)放射疗法。
21.根据权利要求17、18和/或19的方法，其中所述一种或多种 癌综合剂选自
a)激素调节剂，
和/或
放射疗法。
肽在乳腺癌和/或骨转移灶的中的用途
技术领域：
本发明涉及癌特别是肿瘤和肿瘤转移灶的特别形式，其 包括施用式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐用于人的乳腺癌和/或骨转移灶， 任选地与癌综合剂或与其它癌综合的形式一起，当它们 与所述肽一起施用时优选附加或协同地增强效果，诸如化疗剂，免疫 剂，包括抗体、放射免疫轭合物和免疫细胞因子和或放射疗法。 更特别地，本发明涉及式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的至少一 种肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐用于制造人 的乳腺癌和/或骨转移灶的药物的用途，其中所述药物任选地与下列物 质组合
a)激素调节剂，
b)破骨细胞活性调节剂，
c)癌化疗剂，和/或
d)放射疗法。
此外，本发明涉及使用所述药物的方法。优选，所述药物的 施用可以时间控制的方式进行。使用一种或多种癌综合剂或其它 癌综合的形式的所述疗法将优选导致对肿瘤细胞和肿瘤内皮 细胞增殖的各个剂的抑制效果的协同可能性的增加，优选比单独、 加合施用各个组分或在其它疗法方案而非本发明方案产生更有效的治 疗。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐是在本文中使用的术语“特异整联蛋白 配体”的有效实例。
发明背景：
已知血管内皮细胞包括至少三种RGD‑依赖性整联蛋白，包括玻连 蛋白受体αvβ3或αvβ5以及I和IV型胶原受体αvβ1和α2β1、层粘 连蛋白受体α6β1和α3β1，和纤连蛋白受体α5β1(Davis等人，1993， J.Cell.Biochem.51，206)。已知平滑肌细胞包括至少六种RGD‑ 依赖性整联蛋白，包括αvβ3和αvβ5。
使用针对各种整联蛋白α或β亚基的免疫特异性单克隆抗体在体 外进行细胞粘附的抑制牵涉在各种细胞类型包括微血管内皮细胞的细 胞粘附过程中的玻连蛋白受体αvβ3(Davis et al.，1993，J.Cell. Biol.51，206)。
已知整联蛋白是结合细胞外基质蛋白的一类细胞受体并介导细胞 ‑细胞外基质和细胞‑细胞之间的反应，一般涉及细胞粘附活动。整联 蛋白受体构成具有非共价键连接的α和β亚基形成的杂二聚体糖蛋白 复合物的共同结构特性的蛋白质家族。玻连蛋白受体，由其倾向于结 合玻连蛋白的最初特征命名，现已知涉及到四种不同的整联蛋白，命 名为αvβ1、αvβ3、αvβ5和αvβ8。αvβ1结合纤连蛋白和玻连蛋白。 αvβ3结合很多种类的配体，包括纤维蛋白、纤维蛋白原、层粘连蛋白、 凝血酶敏感蛋白、玻连蛋白和维勒布兰德因子。αvβ5结合玻连蛋白。 显然存在具有不同生物功能的不同整联蛋白以及具有共同生物特异性 和功能的不同整联蛋白和亚基。在许多整联蛋白的配体中的一个重要 的识别位点是Arg‑Gly‑Asp(RGD)三肽序列。在所有以上被鉴别为玻 连蛋白受体整联蛋白的配体中具有RGD。被αvβ3识别的RGD分子基础 被确定(Xiong等人，2001)。该RGD识别位点可通过包含RGD序列 的线(多)肽和环(多)肽模拟。此种RGD肽已知分别为整联蛋白功 能的抑制剂或拮抗剂。重点关注的是，然而，取决于RGD肽的序列和 结构，抑制的特异性可针对目标特定整联蛋白而变化。对于变化的整 联蛋白特异性的各种RGD多肽已有描述，例如Cheresh等人，1989， Cell 58，945，Aumailley et al.，1991，FEBS Letts.291，50，和 数目众多的专利申请和专利(例如美国专利4,517,686、4,578,079、 4,589,881、4,614,517、4,661,111、4,792,525；EP 0770 622)。
新血管的产生或血管发生在恶性疾病的生长中起重要作用，并由 此对开发抑制血管发生的试剂产生了许多关注。
无论如何，尽管使用可能的血管发生抑制剂的各种组合疗法处于 研究、临床实验和市场中，这些疗法的并不足够地成熟。因此，本领 域依然存在需求以开放能显示提高的功效和减少的副作用的其它组 合。
目前已知肿瘤血管系统不同于健康组织的血管系统。该血管系统 是肿瘤特有的并区别于健康组织的稳定的、不活跃的血管系统。通常 表现为增加的表达和引发α‑v‑整联蛋白系列特别是αvβ3和αvβ5的 特异性细胞粘附分子。一旦这些整联蛋白被激活，则增强了驱使血管 发生的针对生长因子(例如VEGFA和FGF2)的细胞应答：VEGFA最初 被称作血管通透性因子，和通过SRC激酶路径起作用以提高局部的血 管通透性。VEGRF2，一旦被激活，则增强了αvβ3整联蛋白的活性。
此外，实体瘤依赖于宿主的被诱发的且侵占的(cooped)血管系 统而发展。这种血管系统具有区别于正常宿主血管系统的不寻常的分 子性质：其倾向于被激活，即使得整个细胞周期受肿瘤衍生的因子如 VEGFs、FGFs和其它的影响，并表达内皮激活标志如ICAM、VCAM和α ‑v‑系列整联蛋白，例如αvβ3和αvβ5，配体感受态。其具有缺陷的 细胞外基质并被分类地描述为缺漏(leaky)。值得注意的是，由于不 正常的肿瘤血管系统的性质，肿瘤通常对通过血流的全身性疗法有抗 性。
转移过程是多步活动并代表癌的最可怕一面。在诊断时，癌通常 在其自然史中已进展得很远，且转移灶的存在是普遍现象。事实上， 在临床诊断时约30％的患者具有可检测到的转移灶，另外30％的患者 具有隐性转移灶。转移灶可以是散布的且它们可同时侵染不同组织， 或集中于特定器官。在局灶性病的情况下，外科手术是的选择； 然而复发和预后取决于许多条件：可治愈性、患者的临床状况和转移 灶的数目。
在切除后，复发是普遍的，说明在诊断时存在微转移病灶。全身 性化疗法是理想的办法但仅极少患者经此痊愈，对于大多数全身性化 疗法是失败的。许多生理屏障和药动力学和药动力学参数起了降低其 功效的作用。
肝、肺和淋巴结是过滤组织并因此倾向于转移。转移灶特别是结 直肠来源的转移灶的低化学敏感性迫使许多研究者采用增加药物时间 和浓度的方法。针对这些重要的且精致的器官减少或限制副作用引导 肝隔离地灌流抗肿瘤药剂的技术的开发。(K.R.Aigner，Isolated liver perfusion.In：Morris DL，McArdle CS，Onik GM，eds. Hepatic Metastases.Oxford：Butterworth Heinemann，1996. 101‑107)。自1981，已经连续引入了变化方案和技术改善。肝转移 灶可以是不同来源的且它们的化学敏感性可根据组织学类型及其对于 热的反应而变化。
对于开发针对癌特别是全身性转移灶的的新策略，本领 域依然存在增长的需求。
本发明的目的因此是开发这种新策略。其应当对于全身性可 施用的，并应当降低待施用的癌剂的剂量和/或增强其功效。另一 项目的是使肿瘤血管系统正常化以增强全身性肿瘤剂的递送，即 向非肿瘤组织的血管系统的功能性复原肿瘤血管系统。
因此，本发明的优选目的是提供对于人体(特别是遭受乳腺癌和/ 或骨转移灶优选不依赖于其来源的乳腺癌和/或骨转移灶的人癌患者) 更有效、更好耐受的，因此优选导致提高的总体存活率(OS)、 无恶化存活(PFS)、生活质量(QOL)和/或提高的生存中值。
本发明概述：
本发明优先首次描述一种基于乳腺癌和/或骨转移灶疗法中的新 观念的新颖的药物，其以有效量将特异性整联蛋白配体施用 于个体，所述特定整联蛋白是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的 肽和其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，任选地与在本文中描 述的一种或多种专用化疗剂和/或癌综合剂组合。有利的是可优选 按照本文中所描述的一种或多种方案实施。
因此，本发明的主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和 其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐在制造用于乳腺癌和/ 或骨转移灶的药物中的用途，其中任选地所述药物与不同于所述肽的 一种或多种癌综合剂组合，所述癌综合剂优选选自下组：
a)激素调节剂，
b)破骨细胞活性调节剂，
c)癌化疗剂，和
d)放射疗法，
和使用所述药物乳腺癌和/或骨转移灶的方法。所述激素调节 剂、破骨细胞活性调节剂和/或癌化疗剂优选如下所述。
令人惊奇地可显示出，通过如本文中所描述的全身性施用的式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，肿瘤血管系统可被功能正常化。所述肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐优选增加本文中所描述的癌综合 剂和特别是选自下组的癌综合剂：激素调节剂、破骨细胞活性调 节剂和癌化疗剂，进入肿瘤的量。激素调节剂、破骨细胞活性调节剂 和/或癌化疗剂优选如下所述。另外，所述肽和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐可优选显示出提高在全身性免疫细胞因子疗法 后白细胞进入肿瘤的数目，且可直接或间接地增加抗肿瘤抗体疗法中 抗体进入肿瘤区域的量，或增加对抗肿瘤疫苗的接触。
此外，相信肿瘤血管系统的功能正常化将导致肿瘤代谢的改变， 例如肿瘤中较高的氧浓度，并因此允许氧依赖性疗法如外线束放射疗 法变得更有效。
相信所增加的癌综合剂局部量有助于克服肿瘤抗性机制，并 提高指数。
在一个实施方式中，本发明涉及包含作为综合剂的活性 化合物和看情况可包含的能提高所述综合剂功效或减少所述综合 剂副作用的其它药理学活性化合物的组合物，所述综合剂优 选选自下组：细胞毒素剂、化疗剂和免疫毒素剂。
根据本发明活性组合物还可通过药物试剂盒的方式提供，所 述试剂盒包含至少含有式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/ 或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的包装，和在单独包装或 分开的容器中的一种或多种癌综合剂，优选如本文中所描述的， 例如本文中所描述的激素调节剂、破骨细胞活性调节剂和/或癌化疗 剂。具有这些组合的疗法可任选地包括进一步的放射。所述激素 调节剂、破骨细胞活性调节剂和/或癌化疗剂优选如下所述。
本发明进一步涉及用于人体中乳腺癌和/或骨转移灶的新的 形式，包括在放射疗法之前或之后优选之前施用式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐。
在包括放射疗法之前施用式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的 肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐用于人体中乳 腺癌和/或骨转移灶的这种形式中，优选的特征是在其它癌综合治 疗剂之前施用所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。 在上下文中，根据本发明，放射，或，放射疗法被理解为一种癌综合 剂。
一般地，这种在先应用发生于应用其它癌综合剂之前1至8 小时(h)，优选1至5h和更优选1至3h。甚至更优选，这种在先 应用发生于应用其它癌综合剂之前2至8小时(h)、优选2至6 h，和更优选2至4h，如应用其它癌剂之前1至2h、2至3h、 3至6h、2至5h或3至7h。与本发明相关，这种在先应用或施用 也被引述为“定时施用”或“定时应用”。
如包含于本申请中的数据显示，如果这种在先应用优选发生于应 用其它癌综合剂之前1至8小时(h)，优选1至5h，和更优选 1至3h；且甚至更优选这种在先应用发生于应用其它癌综合剂之 前2至8小时(h)，优选2至6h，和更优选2至4h，如应用其它 癌剂之前1至2h、2至3h、3至6h、2至5h或3至7h，在 非人的动物(特别是大鼠)中实现了根据本发明的效果。与本发明相 关，这种在先应用或施用也被引述为“定时施用”或“定时应用”。
然而，人动物实验中的数据优选显示，上述/下述和所讨论的“在 先应用”的时间可被延迟或乘以1至4和特别是2至4倍。这种在非 人动物(特别是啮齿类动物如大鼠)与人动物之间的应答或应答时间 差异在本领域中是已知的并且是已充分讨论的。申请人不希望受这种 表象的束缚，他相信这种差异至少部分是由于不同的物种的不同药动 力学行为引起的，其间接反映不同动物种类中不同的半衰期(t1/2)。 例如对于化合物如环肽类，大鼠中的半衰期通常为10‑30分钟，而对 于相同化合物人动物的半衰期在2至6小时和特别是3至4小时之内。
据此，本申请的主题是上述/下述的方法和/或制造方法，其 中所述在先应用优选发生于应用其它癌综合剂之前1至32小时 (h)，优选2至32h，更优选2至24h，甚至更优选4至24h，甚 至更优选6至20h和特别是6至16h；或可选地，优选这种在先应 用发生于应用其它癌综合剂之前6至32小时(h)，优选10至 24h，和更优选12至20h。与本发明相关，这种在先应用或施用也 被引述为“定时施用”或“定时应用”。
本申请的另一个主题是上述/下述的方法和/或制造方法，其 中所述在先应用优选发生于应用其它癌综合剂之前18至23h小 时(h)，优选20至23h，更优选20至22h；或可选地，优选这种 在先应用发生于应用其它癌综合剂之前25至32h小时(h)，优 选25至30h，和更优选26至30h。与本发明相关，这种在先应用或 施用也被引述为“定时施用”或“定时应用”。
然而，在本发明更优选的方面中，所述特异性整联蛋白配体的所 述定时施用(无论患者是人还是非人动物)发生于在一种或多种癌综 合剂的应用之前1至10小时(h)，优选2至8h，更优选2至6 h，甚至更优选3至8h，甚至更优选3至6h和特别是4至8h，例 如1至2h、1至3h、1至4h、2至3h、2至4h、2至6h、2至 8h、2至10h、3至4h、3至10h、4至6h、4至10h、5至8或 5至10h。这是特别优选的如果所述一种或多种癌综合剂包括外 线束放射或由外线束放射组成。与本发明相关，这种在先应用或施用 也被引述为“定时施用”或“定时应用”。
与(所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的) 定时施用或定时应用相关，就所述在先施用或应用给出的小时而言， 优选涉及各施用或应用的开始或启动。据此，例如，特异性整联蛋白 配体的施用在各种癌综合剂的应用之前三小时根据本发明被认为 是在一种或多种癌综合剂的应用之前3h的定时施用或定时应用， 即使是历经一小时或两小时完成的通过静脉内输液来施用所述特异性 整联蛋白配体。在先应用/在先施用的这种定义与本领域技术人员的理 解是完全一致的。
如果以本文中所描述的定时将所述肽和/或其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐施用给患者，优选鉴于所联合的一种或多种癌综 合剂定时。至于所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐与两种或更多种癌综合剂组合的定时施用，优选鉴于所述两 种或更多种癌综合剂定时，更优选鉴于所述癌综合剂的至少 一种定时。如果一种或多种癌综合剂包括放射疗法，特别是本文 中所描述的放射疗法，所述定时施用优选至少涉及到放射疗法。
特别优选，所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或 盐的所述定时施用涉及作为时间‑相关的癌综合的放射疗法。据 此，在定时施用中，所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐的所述在先施用优选涉及施用放射疗法之前的时间。然而，在许 多情况下，可能有利的是在所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐的定时施用和放射疗法的施用或提供所给定的时间窗口 内还施用不同于放射疗法的一种或多种癌综合剂。
更优选，所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐 的定时施用涉及所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或 盐和放射疗法的施用，且另外的癌综合剂优选在所述肽和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的施用之后，如该肽和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的施用之后1至2或1至3小时 施用，但优选在放射疗法的施用或提供之前施用，优选在放射疗法的 施用或提供之前一小时内，且更优选在放射疗法的至少1小时前，例 如在放射疗法的施用或提供之前1至2或1至3h施用。
应当理解的是，然而，本发明任意组合的施用可任选地伴随放射 ，其中放射可优选在所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐的施用之后进行。根据本发明的组合疗法的不同剂 的施用可任选地基本上同时或先后地进行。
已知肿瘤为其发育和生长引发多种可选途径。如果一种途径被阻 断，它们通常有能力通过表达和利用其它受体和信号传递路径切换到 其它途径。因此，本发明的医药组合可阻断许多肿瘤的这种可能的发 育策略并因此优选提供各种益处。根据本发明的所述联合优选有 用于和防治肿瘤、肿瘤样和瘤形成病症和肿瘤转移灶，更优选乳 房和肿瘤转移灶的肿瘤、肿瘤样和瘤形成病症，甚至更优选乳房的肿 瘤、肿瘤样和瘤形成病症和它们的肿瘤转移灶，和特别是通过存在于 肿瘤细胞表面上的其相应的激素受体的激活发展和生长的那些。
优选，以低剂量施用本发明的不同组合的剂，即低于在临床 状态下常规使用的剂量。降低本发明施用于个体的化合物、组合物、 剂和疗法的剂量的益处包括减小与较高剂量相关的不良反应的影 响程度。例如，相比于较高剂量所观察到的，通过降低上述和下述治 疗剂的剂量将导致恶心和呕吐的频率和严重度的减小。通过降低不良 反应的影响程度，可期待癌患者的生活质量的改善。降低不良反应的 影响程度的进一步的益处包括患者顺应性的改善、需要不良反应 的医院收容数目的减少，和施用用于与不良反应相关的疼痛的镇 痛剂的减少。可选地，本发明的方法和联合还可最大化于较高剂量下 的效果。
肿瘤，优选表现出增加的表达和引发在其血管系统中的α‑v‑整联 蛋白系列(特别是αvβ3和.αvβ5)的特异性细胞粘附分子的那些， 通过根据本发明的联合和方案可被成功地。根据本发明的药 物内的联合优选表现出惊人的协同效果。在药物联合的使用中， 经临床研究可观察到确实的肿瘤缩小和分解而无可检测到的显著的不 良药物反应。
本发明进一步的实施方式优选涉及：
作为用于癌的组合疗法的定时和联合使用的药物的制备方 法，上述药物包含，优选以两种不同(分开)的应用形式，
包含至少一种特异性整联蛋白配体的组合物，和
包含一种或多种烷化化疗剂的组合物，和任选地
不同于a)的至少一种特异性整联蛋白配体且不同于b)的一种或 多种烷化化疗剂的至少一种其它癌综合剂。
用于受试对象的癌的方法，其包括
a)向受试对象施用至少一种特异性整联蛋白配体，
b)向受试对象施用一种或多种烷化化疗剂，和任选地
c)向受试对象施用不同于a)的至少一种特异性整联蛋白配体且 不同于b)的一种或多种烷化化疗剂的至少一种其它癌综合剂。
所述药物或方法，其中上述至少一种整联蛋白配体选自下组：αv 整联蛋白抑制剂，优选αvβ3抑制剂，最优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)，其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐。
所述药物或方法，其中至少一种癌‑综合剂选自下组：化疗剂、 细胞毒素剂、免疫毒素剂和放射疗法。
用于人体中乳腺癌和/或骨转移灶的药剂盒(set)，其包括 下列的独立剂型：
a)有效量的式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/ 或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)，
b)和任选地选自下组的一种或多种癌综合剂：
i)激素调节剂，
ii)破骨细胞活性调节剂，
和/或
iii)癌化疗剂，
任选地其中a)在根据b)的至少一种癌综合剂的应用之前1 至8小时(h)，优选2至7h，和最优选1至3h施用。所述激素调 节剂、破骨细胞活性调节剂和/或癌化疗剂优选如下所述。
所述药剂盒的进一步特征为，将有利的是对上述肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐及其如何使用提供详细说明，和/或 对与所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐相结合的 一种或多种癌综合剂及其如何使用提供详细说明，优选以特别包 装、特定包装插入物和类似的形式。
因此，本发明另一优选的实施方式是药物，其由所述肽和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐作为活性成分(针对在人乳腺癌 和/或骨转移灶的中的使用，任选地针对与其它癌综合剂例如 放射疗法联合的使用，而设计的)组成，并容纳于容器或类似物中， 所述容器以印有针对在中如何使用所述药物与种癌综合剂的 组合的详细说明书和/或其它技术信息的形式提供，例如关于上述的应 用时间表。
本发明另一优选的实施方式是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)在制造用于人的癌的药物中的用 途，
其中所述药物将与一种或多种癌综合剂，优选两种或更多种 癌综合剂，更优选三或更多的癌综合剂联合使用，且特别是 与一、二、三或四种癌综合剂联合使用，
其中所述癌综合剂选自下组：
i)激素调节剂，
ii)破骨细胞活性调节剂，
和/或
iii)癌化疗剂。
在所述实施方式中，所述激素调节剂、破骨细胞活性调节剂和/ 或癌化疗剂优选如下所述。在所述实施方式中，提供所述肽和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)，和一种或多种癌综合剂和/或配 制成分开的(discrete)应用形式。在所述实施方式中，所述癌优选 本文中所描述的和更优选选自乳腺癌、骨转移灶、乳腺癌及其骨转移 灶、乳腺癌的骨转移灶、不同于乳腺癌的实体癌骨转移灶，和骨髓瘤 和/或其骨病损。
本发明另一个优选的实施方式涉及以上、以下和权利要求书中定 义的医药组合物或药物试剂盒用于制造人的乳腺癌和/或骨转移 灶的药物的用途。
使用根据本发明的医药组合物和试剂盒的药物可伴随着、同 时地或前后地进行放射疗法。
本发明的医药组合和方法提供各种益处。根据本发明的组合优选 在和防治肿瘤、肿瘤样和瘤形成病症中是有用的。优选，本发明 不同组合的剂以低剂量联合施用，即低于在临床状态下常规使用 的剂量。降低本发明施用于哺乳动物的化合物、组合物、剂和疗 法的剂量的益处包括减小与较高剂量相关的不良反应的影响程度。例 如，降低下列化疗剂的剂量如甲氨喋呤(methotrexate)、多柔比星 (doxorubicin)、吉西他滨(gemcitabine)、多西他赛(docetaxel)、 紫杉醇、博来霉素、顺铂(cisplatin)和/或美法仑，相比于较高剂 量所观察到的，将导致恶心和呕吐的频率和严重度的减小。对于本发 明的与整联蛋白拮抗剂联合的化合物、组合物、剂和疗法组合预 期有类似的益处。通过降低不良反应的影响程度，可预期癌患者的生 活质量的改善。降低不良反应的影响程度的进一步的益处包括患者顺 应性的改善、需要不良反应的医院收容数目的减少，和施用用于 与不良反应相关的疼痛的镇痛剂的减少。可选地，本发明的方法 和联合还可最大化于较高剂量下的效果。
附图简述
附图1由图1A‑D组成，显示MDA‑231细胞的整联蛋白在体外的 表达(A‑C)和在骨转移灶中的表达(D)。MDA‑MB‑231细胞用识别α v链(17E6；A)、αvβ3(LM609；B)或αvβ5(P1F6；C)整联蛋白 复合物的抗体染，且通过流式细胞计数(open曲线)评价表达，由 于第二层反应剂，染被最小化(closed曲线)。原始数据曲线为展 示而经平滑处理。对αvβ3(红)、αvβ5(绿)和DAPI(蓝)染 的对照动物的软组织免疫组织学切片(D)。展示了合并的图像(αv β3，αvβ5，DAPI)以及αvβ3和αvβ5的单信道。条长，100μm。 539x396mm(72x72DPI)。(参见实施例1)。
附图2由图2A、B组成，显示实验的骨转移灶的骨溶性病损和软 组织肿瘤的体积分析(A)以及平均相对参数A和kep的量化(B)： 对比未处理的和西仑吉肽(cilengitide)处理的大鼠。以百分比给出 值，以相对于在接种癌细胞并开始西仑吉肽疗法30天后测定的初始值 的平均值表示。Y轴，以百分比表示的平均相对值(100倍)；X轴， 癌细胞接种后的天数；误差条，SEM；*，p＜0.05；**，P＜0.01。 452x173mm(72x72 DPI)。(参见实施例1)。
附图3由图3A‑C组成，显示赋形剂处理的和西仑吉肽处理的实验 的骨转移灶形态学特性。通过VCT和MRI获得的图像的分析分别确定 骨溶性病损(A，C)和软组织肿瘤(B)的体积，于癌细胞注射后的第 30、35、45和55天。在第30天成像后开始用西仑吉肽。在赋形 剂处理的(A，B：上列)以及导致骨质溶解和骨形成的抑制的西仑吉 肽处理的动物之间对比遭受骨损和软肿瘤的差异(A、B：下列；C)。 展现的VCT图像：3D骨表面重构，和MRI：T2加权成像的轴向层面。 箭头，后腿的胫骨近端。323x402mm(72x72 DPI)。(参见实施例 1)
附图4由图4A，B组成，显示DCE‑MRI获取的描述骨转移灶的功 能参数幅值A(A)和交换速率常数kep(B)的彩图：于癌细胞接种后 的第30、35、45和55天对比未处理的和西仑吉肽处理的大鼠。在第 30天成像后开始西仑吉肽。患有MDA‑MBE‑231骨转移灶的大鼠于 第30天成像，然后随之对照(上列)或西仑吉肽(下列)处理。使用 DynaLab软件计算这些彩图，红表示所给的参数值高(h)，蓝表 示值低(1)。相同的尺度范围被用于为实验的和对照动物制造这些图 像。440x351mm(72x72 DPI)。(参见实施例1)。
附图5由图5A‑D组成，显示实验的未处理的和西仑吉肽处理的 大鼠的乳腺癌骨转移灶的组织学分析。苏木素/曙红染的切片对照大 鼠中骨溶性病损(A；t，肿瘤细胞；b，骨；箭头，破骨细胞)和在经 处理的大鼠中的新骨形成(B；b，箭头，破骨细胞)。对照动物的软 组织组分的免疫组织学切片(C)和西仑吉肽处理的大鼠(D)。绿 显示IV型胶原蛋白染而红表示平滑肌肌纤蛋白的结构染；蓝 ，细胞核。箭头指出具有部分共区域化的平滑肌肌纤蛋白和IV型胶 原蛋白的大血管，而双箭头表示没有清晰的绿和红染共区域化的小 血管。下面展示突出显示的结构的放大图像(A’，B’，C’，C”， D’，D”)。A‑D，条长100μm；A’‑D”，条长50μm。478x371mm (72x72 DPI)。(参见实施例1)
附图6由附图6A、B组成，显示组织学分析的量化。平滑肌肌纤 蛋白(SMA)和IV型胶原蛋白(Col.IV)的染的分次(fractional) 平均面积值以所测试的总面积的百分比表示(A)，而血管直径以平均 值以μm表示(B)。误差条，SEM；*，p＜0.05；**，p＜0.01.548x152mm (72x72 DPI)。(参见实施例1)
附图7显示患有原位人成胶质细胞瘤U251的裸大鼠衍化的卡普 兰‑迈耶存活曲线。黑方块表示没受辐射的动物的存活。(参见实施例 2)。
附图8显示伴随放射疗法的西仑吉肽(＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val))和替莫唑胺的I/IIa期实验的结果。 之后在新诊断为成胶质细胞瘤(GBM)的患者中替莫唑胺和西仑吉肽维 持疗法。研究达到了其基础终点。整联蛋白抑制剂RGD肽西仑吉肽和 TMZ/RT的联合是良好耐受的，于第6个月的PFS是非常有利的。MGMT 基因启动子甲基化提供了甚至更好的预后。(参见实施例3)。
附图9和10显示分别使用NSCLC(A549)和内皮细胞(HUVEC) 的增殖测定的结果。(参见实施例4)。
附图11显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与紫杉醇(paclitaxel) 或长春瑞滨(vinorelbine)的组合在HUVEC细胞增殖上的效果。(参 见实施例4)
附图12显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与紫杉醇或长春瑞滨的组 合在NSCLC细胞上的效果。(参见实施例4)。
附图13显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与紫杉醇或长春瑞滨的组 合在肾癌细胞增殖上的效果。(参见实施例5)。
附图14显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与长春瑞滨或依托泊苷 (etoposide)的组合在SCCHN细胞增殖(Detroit562)上的分别效果。 (参见实施例5)。
附图15显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与多西他赛的组合在 HUVEC细胞增殖上的效果。在于完全EGM MV培养介质中生长的HUVEC 内皮细胞上，多西他赛/紫杉醇和西仑吉肽联合的定比(constant ratio)测定，各组合的图和等效线图解法(isobologram)的分析均 显示协同效果(联合指数(CI)＜1)。(参见实施例6)。
附图16显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与紫杉醇的组合在A549 NSCLC细胞增殖上的效果。联合指数(CI)＜1(在此：CI＝0.33) 显示各组合的协同效果。(参见实施例7)。
附图17显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与博来霉素(bleomycin) /奥沙利铂(oxaliplatin)/紫杉醇的组合在A549NSCLC细胞增殖上 的效果。(参见实施例8)。
附图18显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与Paxlitaxel/长春碱 (vinblastine)的组合在各种NSCLC细胞系上的效果：西仑吉肽与紫 杉醇的组合在NSCLC细胞系Calu 6上的效果；西仑吉肽与长春碱/紫 杉醇的组合在NSCLC细胞系H460上的效果；在10uM西仑吉肽(三 角)的存在下系列稀释的长春碱/紫杉醇的效果(方块)。(参见实施 例9)。
附图19显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与5‑FU/紫杉醇的组合在 各种EGFR依赖性细胞系上的效果；在西仑吉肽(三角)的存在下系列 稀释的5‑FU/紫杉醇(方块)的效果；5‑FU或Paxlitaxel在肾细胞系 ACHN上的效果，西仑吉肽恒定量于2μM；5‑FU或Paxlitaxel在肾 细胞系A498上的效果，西仑吉肽恒定量于2μM；5‑FU或Paxlitaxel 在肾细胞系Caki 1上的效果，西仑吉肽恒定量于2μM。(参见实施 例10)。
附图20显示αv整联蛋白配体西仑吉肽与Erbitux(西妥昔单抗 (cetuximab))的组合在癌异种移植物中的效果。(参见实施例11)。
附图21显示西仑吉肽&Erbitux在癌异种移植物中的联合功效， 任选地与放射疗法(Rx)组合；A431人表皮样癌s.c.在balb c nu nu 小鼠上；Erbitux：25mg/kg(＝0.5mg/动物)i.p.d1(4h pre Rx)， d8，d15，d22；西仑吉肽：25mg/kg i.p.20x 5/w 1‑2h pre Rx.(参 见实施例11)。
附图22显示西仑吉肽&Erbitux在A431/HDMVEC/U87增殖测定 中的联合功效，任选地组合放射疗法(Rx)。(参见实施例12)。
附图23显示αv整联蛋白配体西仑吉肽和依托泊苷在HUVEC细胞 增殖上的效果。存在或不存在西仑吉肽和各化疗剂单独或组合的情况 下，在包含2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质199中在玻连蛋白‑ 涂覆的孔上培养HUVEC细胞。通过阿拉玛蓝还原测定相对细胞数。西 仑吉肽和依托泊苷协同抑制HUVEC内皮细胞增殖。以图表呈现的数据 还以等效线图解法表示。Dm＝介质效应下的药物浓度。联合指数(CI) ＜1(在此：CI＝0.4)标示协同。(参见实施例13)。
附图24显示αv整联蛋白配体西仑吉肽和药物依托泊苷、多柔比 星(doxorubicine)、长春新碱(vincristine)或美法仑(melphalan) 在HUVEC细胞增殖上的效果。存在或不存在西仑吉肽和各化疗剂单独 或组合的情况下，在包含2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质199 中在玻连蛋白‑涂覆的孔上培养HUVEC细胞。西仑吉肽的恒定浓度(IC50 或IC70)。通过阿拉玛蓝还原测定相关的细胞数目。(参见实施例14)。
附图25显示αv整联蛋白配体西仑吉肽和药物5‑FU、顺铂或喜 树碱在HUVEC细胞增殖上的效果。存在或不存在西仑吉肽和各化疗剂 单独或组合的情况下，在包含2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质 199中在玻连蛋白‑涂覆的孔上培养HUVEC细胞。西仑吉肽的恒定浓度 (IC50或IC70)。通过阿拉玛蓝还原测定相关的细胞数目。(参见实施 例15)。
附图26显示在于完全EGM MV培养介质中生长的HUVEC细胞上， 依托泊苷和西仑吉肽联合的定比测定，根据Chou和Talalay进行分析。 Dm＝根据CalcuSyn软件分析介质效应下的药物浓度。(参见实施例 16)。
附图27显示定比增殖测定；在依托泊苷或顺铂单独或以固定比与 西仑吉肽的组合的存在下培养细胞72小时。通过阿拉玛蓝还原测定细 胞数。X轴显示所使用的化疗剂的浓度。西仑吉肽浓度比：依托泊苷∶ 西仑吉肽为0.4∶1和顺铂∶西仑吉肽为1∶0.5。(参见实施例17)。
附图28显示用所有三个剂量组(75、150和300mg/kg)中，EMD 121974(西仑吉肽)的日抑制了MDA‑MGB‑468肿瘤的原生肿瘤 (primary tumour)生长。(参见实施例18)。
发明详述
如果没有另外指出，本发明中使用的术语和短语具有以下给出的 含义和定义。此外，这些定义和含义更详细地描述了本发明，包括优 选的实施方式。
如果没有另外指出，根据本发明所使用的化合物的述及优选包括 其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的述及。如果没有另外指出， 整联蛋白配体、整联蛋白拮抗剂、整联蛋白激动剂的述及，以及癌综 合剂的述及是化合物，优选化学衍化的化合物，优选包括它们的 制药可接受的衍生物、溶剂合物和盐。甚至更优选，整联蛋白配体环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的述及还包括它们的制药可接受的衍生 物、溶剂合物和盐，更优选它们的药物溶剂合物和盐和特别优选它们 的制药可接受的盐，如果没有另外说明。
“组合疗法”优选标示至少两种不同化合物、剂或形式 的联合以组合成一个单一的方案，优选以相续的和/或同时的方 式。组合疗法因此可包括两种或更多种化合物、剂或形式， 三种或更多种的化合物、剂或形式，四种或更多种的化合物、 剂或形式，如二、三、四、五或六种化合物、剂或 形式。
在本发明优选的实施方式中，这表示所述肽和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐与一、二、三或四种，优选一、二或三种其 它综合剂的组合。重要的是注意“组合疗法”优选不表示独特的 和/或单一的医药组合物或药物。相反，在本发明优选的实施方式中所 述肽和其它综合剂被提供于分开的容器、包装、药品、配制剂或 等同物中。同样，所述肽与放射疗法或放射的组合优选在本发明 “组合疗法”的意义内。
“形式”优选为用于本领域中已知的癌的任意手段、使 用和/或配制剂。术语“独特形式”因此表示组合了用于癌的 两种不同手段、使用和/或配制剂。在本发明的上下文中，优选的是待 应用的第一种形式具有抗整联蛋白的活性(同义词：整联蛋白配 体)并且优选为所述肽，且在第二形式之前应用，优选遵循上面 详述的时间表。
术语“包括放射疗法的组合”优选简单地表示所述肽之后应用放 射疗法。因此，术语“包括放射疗法的组合”在本发明的上下文中优 选不理解为这样的一种医药组合物上，但是理解为将与放射疗法组合 的医药组合物。
“癌‑综合剂”或“癌综合剂”优选表示细胞毒性、化疗 或免疫毒素剂。更优选，用于根据本发明的用途，每种癌综合剂 独立地选自
i)激素调节剂，
ii)破骨细胞活性调节剂，
iii)癌化疗剂，
和/或
iv)放射疗法。
据此，用于根据本发明的用途的癌综合剂的优选实例是放射 疗法。术语“癌‑综合剂”和/或“癌综合剂”优选还包括靶 向剂、靶向特异性剂和/或靶向特异性试剂。然而在此使用的 术语“癌‑综合剂”和/或“癌综合剂”优选不同于本文中所 描述的特异性整联蛋白配体，并因此优选不包括这样的特异性整联蛋 白配体。
在此使用的术语“癌‑综合剂”和/或“癌综合剂”优选 不同于在此描述的式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，并因此优选不包括式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐配体。
“受体”或“受体分子”优选是包含一个或多个与配体结合形成 受体配体复合体的结构域的可溶的或膜结合的或膜相关的蛋白或糖蛋 白。通过结合可以是激动剂或拮抗剂的配体，该受体被激活或失活并 可引发或阻断信号路径。
“配体”或“受体配体”优选表示结合受体分子形成受体‑配体复 合体的天然或合成的化合物。术语配体包括激动剂、拮抗剂，和具有 部分激动剂/拮抗剂活性的化合物。
“激动剂”或“受体激动剂”优选是结合受体形成受体‑激动剂复 合体的天然或合成的化合物，分别激活受体和受体‑激动剂复合体、引 发信号路径和进一步的生物过程。
“拮抗剂”或“受体拮抗剂”优选表示具有与激动剂相反生物效 果的天然或合成的化合物。拮抗剂结合受体并通过与受体的激动剂竞 争来阻断受体激动剂的作用。拮抗剂由其猪肚激动剂的作用的能力定 义。受体拮抗剂还可以是抗体或其免疫的有效片段。根据本发明 优选的拮抗剂在下文引用并讨论。
术语“整联蛋白拮抗剂/抑制剂”或“整联蛋白受体拮抗剂/抑制 剂”优选涉及天然或合成的分子，优选合成的分子，其阻断和抑制整 联蛋白受体。在某些情况下，该术语包括意指整联蛋白的配体(如针 对αvβ3：玻连蛋白、纤维蛋白、纤维蛋白原、维勒布兰德因子、凝血 酶敏感蛋白、层粘连蛋白；针对αvβ5：玻连蛋白；针对αvβ1：纤连 蛋白和玻连蛋白；针对αvβ6：纤连蛋白)的受体拮抗剂。根据本发明 优选涉及整联蛋白受体的拮抗剂。整联蛋白(受体)拮抗剂可以是天 然或合成的肽、非肽、假肽(peptidomimetica)、免疫球蛋白，如抗 体或其功能性片段，或免疫轭合物(融合蛋白)。优选本发明的整联 蛋白抑制剂涉及αv整联蛋白的受体(例如αvβ3，αvβ5，αvβ6和亚 类)。优选的整联蛋白抑制剂αv拮抗剂，和特别是αvβ3拮抗剂。优 选根据本发明的αv拮抗剂是RGD肽、假肽(非肽)拮抗剂和抗整联蛋 白受体抗体如阻断αv受体的抗体。
示例地，非免疫的αvβ3拮抗剂描述于US 5,753,230和US5,766,591的教导。优选的拮抗剂是线性的和环状的含有RGD的肽。环肽原则上是更稳定的并引起增强的血清半衰期。本发明最优选的整联蛋白拮抗剂然而是环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)(EMD 121974，西仑吉肽，Merck KGaA，德国；EP 0770 622)其有效阻断整联蛋白受体αvβ3、αvβ1、αvβ6、αvβ8、αIIbβ3，和优选特别是对于整联蛋白受体αvβ3和/或αvβ5有效的。对于本领域技术人员清楚的是环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)在本发明的上下文中还可以以生理功能衍生物、生理可接受的衍生物、其溶剂合物和/或盐的形式应用。优选也同样地应用所有其它在本发明上下文中使用的化合物或活性成分。
在此术语“抗体”或“免疫球蛋白”优选以最宽的意义使用并特 别地覆盖完整的单克隆抗体、多克隆抗体、由至少两种完整抗体形成 的多特异性抗体(例如双特异性抗体)，和抗体片段，只要它们展现 所希望的生物活性。术语概括性地包括由连接到一起的不同结合特异 性的两种或更多种抗体或它们的片段组成的异种抗体。
取决于它们恒定区的氨基酸序列，完整的抗体可分成不同“抗体 (免疫球蛋白)类型”。有五种主要的完整抗体类型：IgA、IgD、IgE、 IgG，和IgM，和这些类型中许多可进一步划分成“亚型”(同种型)， 例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA，和IgA2。相应于抗体的不同类 型的重链恒定域被分别称为α，δ，ε，γ和μ。根据本发明优选的抗体 的主要类型是IgG，更详细地是IgG1和IgG2。
抗体通常是具有分子量约150,000的糖蛋白，由两个一致的轻(L) 链和两个一致的重(H)链组成。每个轻链通过共价二硫键链接到重链 上，而二硫链接的数量在不同免疫球蛋白同种型的重链中变化。每个 重和轻链还具有规则间隔的外链二硫桥。每个重链在一端具有随多个 恒定域之后的可变域(VH)。可变区包括含有抗原结合位点并提供抗 体的特异性高变区或“CDR”区，和鉴于抗体的亲和性/亲和力重要的 “FR”区。所述高变区一般性包括源自“互补决定区”或“CDR”的氨 基酸残基(例如在轻链可变域中的残基24‑34(L1)，50‑56(L2)和 89‑97(L3)和在重链可变域中的残基31‑35(H1)，50‑65(H2)和 95‑102(H3))；和/或源自“高变袢”的那些残基(例如在轻链可变 域中的残基26‑32(L1)，50‑52(L2)和91‑96(L3)和在重链可变域 中的残基26‑32(H1)，53‑55(H2)和96‑101(H3)；Chothia和Lesk J.Mol.Biol.196：901‑917(1987))。所述“FR”残基(框架区) 是不同于在此定义的高变区残基的那些可变域残基。每个轻链具有位 于一端(VL)的可变域和位于另一端的恒定域。所述轻链的恒定域与 重链的第一恒定域匹配，且轻链可变域与重链的可变域匹配。据信， 特定的氨基酸残基形成轻链和重链可变域之间的界面。基于它们恒定 域的氨基酸序列，任何脊椎动物物种的抗体的“轻链”可分成两种明 确类型之一，称为kappa(κ)和lambda(λ)。
在此使用的术语“单克隆抗体”优选涉及获自基本上同质性抗体 的种的抗体，即，种所包含的各个抗体的是一致的除了可能天然 出现的少量存在的突变。单克隆抗体是高度特异性的，针对性对抗单 个抗原位点。此外，与包含针对性对抗不同决定簇(表位)的不同抗 体的多克隆抗体制剂不同，每个单克隆抗体针对性对抗抗原上的单一 决定簇。除了它们的特异性之外，单克隆抗体有利的是可通过其它抗 体无污染地合成。用于制造单克隆抗体的方法包括Kohler和Milstein (1975，Nature 256，495)描述的和“Monoclonal Antibody Technology， The Production and Characterization of Rodent and Human Hybridomas”(Burdon et al.，Eds，Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology，Volume 13，Elsevier Science Publishers，Amsterdam)中的杂交瘤方法，或可以通过熟知的重组DNA 的方法(参见例如US 4,816,567)制造。单克隆抗体还可以例如使用 Clackson et al.，Nature，352：624‑628(1991)and Marks et al.， J.Mol.Biol.，222：58，1‑597(1991)中描述的技术从噬菌体抗体库 分离。
术语“嵌合抗体”优选表示其中重和/或轻链部分与源于特定物种 的抗体中相应的序列是一致的或同质或属于特定抗体类型或亚型，而 链的剩余部分与源于其它物种的抗体中的相应序列是一致或同质的或 属于其它抗体类型或亚型的抗体，以及此种抗体的片段，只要它们展 示所希望的生物活性(例如：US 4,816,567；Morrison等人，Proc.Nat. Acad.Sci.，USA，81：6851‑6855(1984))。制造嵌合和人源化抗体 的方法也是本领域中已知的。例如，制造嵌合抗体的方法包括Boss (Celltech)和Cabilly(Genentech)(US 4,816,397；US 4,816,567) 的专利中描述的那些。
“人源化抗体”优选非人(例如啮齿类动物)嵌合抗体的形式， 其包含源自非人免疫球蛋白的最小化序列。就最多的部分而言，人源 化抗体是人免疫球蛋白(接受者抗体)，其中接受者高变区(CDRs) 的残基被非人物种(供体抗体)如小鼠、大鼠、家兔或非人灵长类的 具有所希望的特异性、亲和性和能力的高变区残基置换。在某些情况 下，人免疫球蛋白的框架区(FR)残基被响应度非人残基置换。此外， 人源化抗体可包含在接受者抗体或在供体抗体中所没有的残基。这些 改变被用于进一步细化抗体功能。一般而言，人源化抗体将包含至少 一种且特别是两种可变域的基本全部，其中高变袢的全部或基本全部 相应于非人免疫球蛋白的那些，且FR的全部或基本全部是人免疫球蛋 白序列的那些。人源化抗体任选地还将包含免疫球蛋白(特别是人免 疫球蛋白)恒定区(Fc)的至少一部分。制造人源化抗体的方法被描 述于例如Winter(US 5,225,539)和Boss(Celltech，US 4,816,397) 中。
“抗体片段”优选包括完整抗体的一部分，优选包括抗原结合区 或其可变区。抗体片段的实例包括Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv和Fc 片段、双特异抗体、线性抗体、单链抗体分子；和由抗体片段形成的 多特异性抗体。“完整”抗体是包含抗原结合可变区以及轻链恒定域 (CL)和重链恒定域，CH1、CH2和CH3的抗体。优选，完整抗体具有 一种或多种效应子功能。抗体的木瓜蛋白酶消化产生两个一致的抗原 结合片段，称为“Fab”片段，每个包含单个抗原结合位点和CL和CH1 区，和残基“Fc”片段，其名称反映了其易于结晶的能力。抗体“Fc” 区包含，原则上IgG1或IgG2抗体主类型的CH2、CH3和铰链区。铰链 区是将CH1区与CH2‑CH3区结合的约15个氨基酸残基的基团。胃蛋白 酶处理获得具有两个抗原结合位点并仍然能交联抗原的“F(ab’)2” 片段。“Fv”是包含完整抗原识别位点和抗原结合位点的最小抗体片 段。该区由一个重链可变域和一个轻链可变域以紧密的、非共价结合 的二聚体组成。在该构型中每个可变域的三个高变区(CDRs)相互作 用以定义在VH‑VL二聚体表面上的抗原结合位点。整体而言，六个 高变区赋予了对抗体的抗原结合特异性。然而，甚至单一可变域(或 包含特异于抗原的仅三个高变区的半个Fv)具有识别和结合抗原的能 力，尽管比完全的结合位点的亲和性小。Fab片段还包含轻链的恒定 域和重链的第一恒定域(CH1)“Fab”片段通过在包含抗体铰链区的 一个或多个重链半胱氨酸的CH1结构域的羧基末端添加一些残基而彼 此区分。F(ab’)2抗体片段最初以之间具有铰链半胱氨酸的Fab’片 段对产生。抗体片段的其它化学偶联也是已知的(参见例如Hermanson， Bioconjugate Techniques，Academic Press，1996；US 4,342,566)。 “单链Fv”或“scFv”抗体片段优选包含所述V和抗体的V结构域 (comprise the V，and V，domains of antibody)，其中这些结构 域呈单多肽链。优选，Fv多肽进一步包含VH和VL结构域之间的多肽 连接子，其使得scFv形成对于抗原结合所希望的结构。单链FV抗体 例如已知于Pl ückthun(The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，Vol.113，Rosenburg and Moore eds.，Springer‑Verlag， New York，pp.269‑315(1994))，WO 93/16185；US 5,571,894；US 5,587,458；Huston等人(1988，Proc.Natl.Acad.Sci.85，5879) 或Skerra和Plueckthun(1988，Science 240，1038)。
“双特异性抗体”优选是单价、二价抗体(或其免疫性有效 片段)，其具有两种不同特异性抗原结合位点。例如第一抗原结合位 点针对血管发生受体(例如整联蛋白或VEGF受体)，而第二抗原结 合位点针对ErbB受体(例如EGFR或Her 2)。双特异性抗体通过化 学技术制备(参见例如Kranz等人(1981)Proc.Natl.Acad.Sci. USA 78，5807)、通过“polydoma”技术制备(参见US 4,474,893) 或通过重组DNA技术制备，它们都是本身已知的。进一步的方法被描 述于WO 91/00360，WO 92/05793和WO 96/04305中。双特异性抗体 还可以由单链抗体制备(参见例如Huston等人(1988)Proc.Natl. Acad.Sci.85，5879；Skerra和Plueckthun(1988)Science 240， 1038)。这些是制备成单多肽链的抗体可变区类似物。为形成双特异 性结合剂，单链抗体可化学偶联到一起或通过本领域中已知的基因工 程方法偶联到一起。还可能的是通过使用亮氨酸拉链序列制备根据本 发明的双特异性抗体。所采用的序列源自转录因子Fos和Jun的亮氨 酸拉链区(Landschulz et al.，1988，Science 240，1759；for review， see Maniatis and Abel，1989，Nature 341，24)。亮氨酸拉链是 约20‑40个残基长典型地在每第七个残基出现亮氨酸的特别氨基酸序 列。此种拉链序列形成两亲的α‑螺旋，亮氨酸残基列于二聚体构型的 疏水侧。优选相应于Fos和Jun蛋白的亮氨酸拉链的肽形成异二聚体 (O′Shea等人，1989，Science 245，646)。包含双特异性抗体的拉 链和制备它们的方法也公开于WO 92/10209和WO 93/11162。如上所 述相对于具有单特异性的抗体，根据本发明的双特异性抗体可以是针 对VEGF受体和αvβ3受体的抗体。
“异种抗体”优选是连接到一起的两种或更多种抗体或抗体，它 们的每一个具有不同结合特异性。异种抗体可通过将两种或更多种抗 体或抗体片段偶联到一起来制备。优选的异种抗体包含交联的 Fab/Fab′片段。各种偶联剂或交联剂可以用于偶联抗体。实例是蛋白 A、碳酰亚胺、N‑琥珀酰亚胺基‑S‑乙酰基‑硫代乙酸盐(SATA)和N‑ 琥珀酰亚胺基‑3‑(2‑吡啶基二硫代)丙酸盐(SPDP)(参见例如 Karpovsky等人(1984)J.EXP.Med.160，1686；Liu et a.(1985) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82，8648)。其它方法包括Paulus， Behring Inst.Mitt.，No.78，118(1985)；Brennan et a.(1985) Science 30 Method：81或Glennie等人(1987)J.Immunol.139，2367 描述的那些。另一种方法使用邻苯二马来酰亚胺(oPDM)用于偶联三 个Fab′片段(WO 91/03493)。在本发明的上下文中多特异性抗体也 是适宜的并可例如根据WO 94/13804和WO 98/50431的教导制备。
术语“融合蛋白”优选涉及由一种或多种蛋白或肽或它们的片段 组成的天然或合成的分子，所述蛋白或肽或它们的片段具有任选地通 过连接分子融合到一起的不同特异性的。作为特定实施方式，该术语 包括融合构件，其中至少一个蛋白或肽是免疫球蛋白或抗体，分别地 或其部分(“免疫轭合物”)。
术语“免疫轭合物”优选分别涉及抗体或免疫球蛋白，或它们的 免疫有效片段，其通过共价连接至非免疫有效分子而被融合。优选该 融合对象是可糖基化的肽或蛋白。所述非抗体分子可被链接至抗体的 恒定重链的C‑末端或链接至可变轻和/或重链的N‑末端。所述融合对 象可经连接分子连接，其原则上是含有3‑15个氨基酸残基的肽。 根据本发明的免疫轭合物由免疫球蛋白或其免疫性有效片段组 成，其针对受体酪氨酸激酶，优选ErbB(ErbB1/ErbB2)受体和整联 蛋白拮抗肽，或血管生成受体，优选整联蛋白或VEGF受体和TNFα或 基本上由TNFα和IFNγ或者其它适宜的细胞因子组成的融合蛋白，其 将其N‑末端连接到所述免疫球蛋白的C末端优选其Fc部分。该术语 也包括含有二或多特异性的免疫球蛋白(抗体)或其片段的相应的融 合构件。
根据本发明的理解，术语“功能完整的衍生物”优选表示化合物、 肽、蛋白、抗体(免疫球蛋白)、免疫轭合物等的片段或部分、修饰、 变体、同系物或去免疫形式(修饰，其中提供免疫应答的表位被去除)， 其原则上具有与最初的化合物、肽、蛋白、抗体(免疫球蛋白)、免 疫轭合物等相同的生物和/或功能。然而，该术语还包括引起降低 或增强的功效的此种衍生物。
术语“细胞因子”优选是由异种细胞落释放的作为细胞间传递 质作用于另一种细胞蛋白。此种细胞因子的实例是淋巴因子、单核因 子和传统的多肽激素类。包括于细胞因子的是生长激素如人生长激素， N‑蛋氨酰人生长激素，和小牛生长激素；副甲状腺激素；甲状腺素； 胰岛素；胰岛素原；松弛素；松弛素原；糖蛋白激素类如促卵泡激素 (FSH)，促甲状腺激素(TSH)，和促黄体激素(LH)；肝生长因子；成 纤维细胞生长因子；催乳素；胎盘催乳激素；小鼠促性腺素关连肽； 抑制素；激活素；血管内皮生长因子(VEGF)；整联蛋白；血小板生成 素(TPO)；神经生长因子如NGFβ；血小板‑生长因子；转化生长因子 (TGFs)如TGFα和TGFβ；红细胞生成素(EPO)；干扰素类如IFNα， IFNβ，和IFNγ；集落刺激因子如M‑CSF，GM‑CSF和G‑CSF；白细胞介 素类如IL‑1，IL‑1a，IL‑2，IL‑3，IL‑4，IL‑5，IL‑6，IL‑7，IL‑8， IL‑9，IL‑10，IL‑11，IL‑12；和TNFα或TNFβ。根据本发明优选的 细胞因子是干扰素类和TNFα。
在此使用的术语“细胞毒素剂”优选涉及抑制或阻止细胞的功能 和/或引起细胞毁灭的物质。该术语优选意图包括放射性的同位素，化 疗剂，和毒素如细菌、真菌、植物或动物来源酶活性毒素或其片段。 该术语还包括细胞因子家族成员，优选IFNγ以及也具有细胞毒性活性 的抗肿瘤剂。
根据本发明的理解，术语“化疗剂”、“化疗剂”或“抗肿瘤剂” 被认为优选作为如上所说明的“细胞毒素剂”的成员，并包括化学剂， 其发挥抗肿瘤效果，即预防赘生细胞的发展、成熟或扩散，直接作用 于肿瘤细胞，例如通过细胞生长抑制剂或细胞毒性效果，和非间接地 通过机制如生物应答修饰。根据本发明适宜的化疗剂优选是天然或合 成的化学化合物，但并不表示排除生物分子如蛋白质、多肽等。大量 抗肿瘤剂是在商业用途中、临床评价中和前期临床开发中可获得的， 其可被包括在本发明通过如上所述的用TNFα和抗血管形成剂任选地 用其它剂如EGF受体拮抗剂进行的组合疗法中用于肿瘤/瘤 形成。应当指出的是所述化疗剂可任选地与上述药物联合施用。化疗 剂或剂的实例包括烷化剂，例如氮芥，乙烯亚胺化合物，烷基磺 酸盐和其它具有烷化作用的化合物如亚类，顺铂和达卡巴嗪 (dacarbazine)；抗代谢药，例如叶酸，嘌呤或嘧啶拮抗剂；有丝分 裂抑制剂，例如长春花生物碱和鬼臼毒素的衍生物；细胞毒性抗生素 和喜树碱(camptothecin)衍生物。优选的化疗剂或化疗法包括氨磷 汀(amifostine)(阿密磷定(ethyol))，顺铂和/或其它铂化合物， 优选包括卡铂(carboplatin)和/或奥沙利铂，达卡巴嗪(DTIC)， 放线菌素D(dactinomycin)，氮芥(mechlorethamine)(氮芥菜)， 链佐星(streptozocin)，环磷酰胺(cyclophosphamide)，carrnustine (BCNU)，洛莫司汀(lomustine)(CCNU)，多柔比星(阿霉素 (adriamycin))，多柔比星脂质体(doxil)，吉西他滨(gemzar)， 柔红霉素(daunorubicin)，柔红霉素脂质体(daunoxome)，丙卡巴 肼(procarbazine)，丝裂霉素(mitomycin)，阿糖胞苷(cytarabine)， 依托泊苷，甲氨喋呤，5‑氟尿嘧啶(fluorouracil)(5‑FU)，长春 碱，长春新碱，博来霉素，紫杉醇(taxol)，多西他赛(taxotere)， 阿地白介素(aldesleukin)，天冬酰胺酶(asparaginase)，白消安 (busulfan)，卡铂，克拉屈滨(cladribine)，喜树碱，CPT‑11， 10‑羟基‑7‑乙基‑喜树碱(SN38)，达卡巴嗪，氟尿苷(floxuridine)， 氟达拉滨(fludarabine)，羟基脲，异环磷酰胺(ifosfamide)，伊 达比星(Idarubicin)，美司钠(mesna)，干扰素α，干扰素β，伊 立替康(irinotecan)，米托蒽醌(mitoxantrone)，托泊替康 (topotecan)，亮丙立德(leuprolide)，甲地孕酮(megestrol)， 美法仑，巯嘌呤(mercaptopurine)，普卡霉素(plicamycin)，米 托坦(mitotane)，培门冬酶(pegaspargase)，喷司他丁 (pentostatin)，哌泊溴烷(pipobroman)，普卡霉素，链佐星，他 莫昔芬(tamoxifen)，替尼泊苷(teniposide)，睾内酯 (testolactone)，硫鸟嘌呤(thioguanine)，塞替派(thiotepa)， 乌拉莫司汀(uracil mustard)，长春瑞滨，苯丁酸氮芥(chlorambucil) 和它们的组合。
术语“免疫毒性的”优选涉及将免疫分子例如抗体或其功能等价 体的特异性与毒性部分例如如上定义的细胞毒性功能组合的剂。
癌综合剂进一步的实例且优选的化疗剂、细胞毒素剂、免疫调节剂和/或免疫毒素剂优选包括抗体，其对抗一个或多个靶，优选选自下组：HER，HER2，PDGF，PDGFR，EGF，EGFR，VEGF，VEGFR和/或VEGFR2，其中所述抗体优选选自赫赛汀(Herceptin)、贝伐珠单抗(bevacizumab)(rhuMAb‑VEGF，Avastin)、西妥昔单抗(Erbitux)、帕尼单抗(panitumumab)和/或尼妥珠单抗(nimotuzumab)，和更优选选自赫赛汀、贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF，Avastin)、西妥昔单抗(Erbitux)和帕尼单抗，和优选小分子或NCEs，其对抗所述靶的一个或多个，优选选自下组：索拉非尼(sorafenib)(Nexavar)、舒尼替尼(sunitinib)(Sutent)、ZD6474(ZACTIMATM)、吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)，和更优选选自下组：索拉非尼(Nexavar)、舒尼替尼(Sutent)和ZD6474(ZACTIMATM)和/或选自下组：吉非替尼和厄洛替尼。
在本发明优选的方面中，所述癌综合剂，优选包括，但不限 于化疗剂、细胞毒素剂、免疫调节剂和/或免疫毒素剂，选自下组的一 种或多种：
a)烷化剂，
b)抗生素，
c)抗代谢药，
d)生物制剂和免疫调节剂，
e)激素调节剂，包括激素类和它们的拮抗剂，
f)芥子气衍生物，
g)生物碱，
h)破骨细胞活性调节剂，和/或
i)蛋白激酶抑制剂。
在本发明更优选的方面，所述癌综合剂，优选包括，但不限 于化疗剂、细胞生长抑制剂剂、细胞毒素剂、免疫调节剂和/或免疫毒 素剂，选自下组的一种或多种：
a)烷化剂，选自白消安，美法仑，卡铂，顺铂，环磷酰胺，达 卡巴嗪，卡莫司汀(carmustine)(BCNU)，尼莫司汀(nimustin) (ACNU)，洛莫司汀(CCNU)，异环磷酰胺，替莫唑胺和六甲蜜胺 (altretamine)，
b)抗生素，选自leomycin，多柔比星，阿霉素，伊达比星，表 柔比星(epirubicin)和普卡霉素，
c)抗代谢药，选自磺酰胺类，叶酸拮抗剂，吉西他滨，5‑氟尿 嘧啶(5‑FU)，亚叶酸(leucovorine)，亚叶酸与5‑FU，5‑FU与亚 叶酸钙，和亚叶酸(leucovorin)，卡培他滨(capecitabine)，巯 嘌呤，克拉屈滨，pentostatine，甲氨喋呤，雷替曲塞 (Raltitrexed)，培美曲塞(pemetrexed)，硫鸟嘌呤，喜树碱衍生 物(托泊替康，伊立替康)
d)生物制剂和免疫调节剂，选自干扰素a2A，白细胞介素2和 左旋咪唑(levamisole)，
e)激素调节剂，包括抗雌激素药阿莫昔芬(Afimoxifene)，阿佐昔芬(Arzoxifene)，巴多昔芬(Bazedoxifene)，拉索昔芬(Lasofoxifene)，奥美昔芬(ormeloxifene)，雷洛昔芬(raloxifene)，他莫昔芬，托瑞米芬(toremifene)和氟维司(fulvestrant)，芳香酶抑制剂阿那曲唑(anastrozole)(例如瑞宁得(Arimidex))，来曲唑(letrozole)(例如弗隆(Femara))，依西美坦(exemestane)(例如阿诺新(Aromasin))，伏氯唑(vorozole)(例如Rivizor)，福美坦(formestane)(例如兰他隆(Lentaron))和法倔唑(fadrozole)(例如Afema)，GnRH类似药亮丙瑞林(leuprorelin)(例如EligardEnantone)，戈舍瑞林(goserelin)(例如Zoladex)和布舍瑞林(buserelin)(例如Profact)，和/或激素类和它们的拮抗剂，如氟他胺(flutamide)，戈舍瑞林，米托坦和他莫昔芬，
f)芥子气衍生物，选自美法仑，卡莫司汀和氮芥菜，
g)生物碱，选自紫杉烷类，多西他赛，紫杉醇，依托泊苷，长春 新碱，长春碱和长春瑞滨
h)破骨细胞活性调节剂，选自双膦酸盐依替膦酸(etidronate)(例如Didronel)，氯膦酸盐(Clodronate)(例如固令(Bonefos)，Loron)，替鲁膦酸盐(Tiludronate)(例如Skelid)，帕米膦酸盐(Pamidronate)(例如APD，阿可达(Aredia))，奈立膦酸盐(Neridronate)，奥帕膦酸盐(Olpadronate)，阿仑膦酸盐(alendronate)(例如福善美维D(Fosamax))，伊班膦酸盐(Ibandronate)(例如Boniva)，利塞膦酸盐(risedronate)(例如Actonel)和唑来膦酸盐(Zoledronate)(例如Zometa，Aclasta)，和RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单抗(Denosumab)(例如Prolia)。
根据本发明所使用的癌化疗剂优选包括，但不限于，一种或多种、 两种或更多种、三种或更多种或四种或更多种化合物，选自烷化化疗 剂、细胞毒性抗生素、抗代谢药、细胞生长抑制性生物碱、细胞生长 抑制剂酶、VEGF/VEGFR抑制剂、PARP抑制剂和EGF/EGFR抑制剂。
在此方面烷化化疗剂优选包括：
氮芥衍生物，更优选选自氮芥衍生物白消安和苯丁酸氮芥；
亚衍生物，更优选选自亚衍生物尼莫司汀 (nimustine)，卡莫司汀和洛莫司汀；
氧氮磷环类(Oxazaphosphorines)，更优选选自氧氮磷环类环磷 酰胺，异环磷酰胺和曲磷胺(trofosfamide)；
铂衍生物，更优选选自铂衍生物顺铂，卡铂和奥沙利铂；
四嗪类，更优选选自四嗪类达卡巴嗪(Dacarbacine)和替莫唑胺；
氮丙啶类，更优选塞替派，和
其它，优选选自安吖啶(amsacrine)，雌莫司汀磷酸钠 (Estramustinphosphate)丙卡巴肼和曲奥舒凡(Treosulfane)；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在此方面细胞毒性抗生素优选包括：
蒽环类，更优选选自蒽环类柔红霉素(Daunorubicine)，多柔比 星，表柔比星(epirubicine)和伊达比星(Idarubicine)；
蒽二酮类，更优选米托蒽醌，和
其它，优选选自放线菌素(actinomycin)‑D，博来霉素 (Bleomycine)和丝裂霉素‑C；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
抗代谢药在此方面优选包括：
抗叶酸剂，更优选选自抗叶酸剂甲氨喋呤，雷替曲塞，和培美曲 塞；
嘌呤拮抗剂，更优选选自嘌呤拮抗剂6‑巯嘌呤，6‑硫鸟嘌呤，2’ ‑脱氧肋间型霉素(Desoxycoformicine)，磷酸氟达拉滨 (Fludarabinphospate)和2‑氯脱氧腺苷；
嘧啶拮抗剂，更优选选自嘧啶拮抗剂5‑氟尿嘧啶，吉西他滨，卡 培他滨，胞嘧啶阿拉伯糖苷和二氟脱氧胞苷；和
核糖核酸还原酶抑制剂(RNR抑制剂)，更优选羟基脲；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在此方面细胞生长抑制性生物碱优选包括：
鬼臼毒素衍生物，更优选选自鬼臼毒素衍生物依托泊苷和替尼泊 苷；
长春花生物碱，更优选选自长春花生物碱长春氟宁(Vinflunine)， 长春碱，长春新碱，长春地辛(vindesine)和/或长春瑞滨，甚至更 优选选自长春花生物碱长春碱，长春新碱，长春地辛和长春瑞滨；
紫杉烷类，更优选选自紫杉烷类多西他赛，紫杉醇，卡巴他赛 (Cabazintaxel)和/或Abraxane，甚至更优选选自紫杉烷类多西他 赛和紫杉醇；和
喜树碱衍生物，更优选选自喜树碱衍生物伊立替康(Irinotecane) 和托泊替康(Topotecane)；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
优选，在此使用的术语紫杉烷类优选还包括蛋白结合的多西他赛和/ 或蛋白结合的紫杉醇，和特别优选还包括Abraxane。
在此方面的细胞生长抑制剂酶优选包括：
L‑天冬酰胺酶；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在此方面的EGF/EGFR抑制剂优选包括：
抗EGFR生物制剂，更优选选自抗EGFR生物制剂西妥昔单抗，帕 尼单抗，扎芦木单抗(zalutumumab)，尼妥珠单抗和马妥珠单抗 (matuzumab)；和
抗EGFR化学衍化的化合物，更优选选自抗EGFR化学衍化的化合 物吉非替尼，厄洛替尼和拉帕替尼(lapatinib)；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
对于以上和/或以下给出的癌综合剂的给药和优选标准施用 时间表是本领域中已知的。
术语“癌”和“肿瘤”优选涉及到或表示哺乳动物和特别是人中 的生理病症，其表征为不能调节的细胞生长。在此方面癌优选选自实 体癌，优选包括其转移灶，实体癌的骨转移灶，骨髓瘤，如多发性骨 髓瘤，及其骨病损。通过根据本发明的医药组合物的手段可的癌 或肿瘤选自乳房、心、肺、小肠、结肠、脾、肾、膀胱、头和颈、卵 巢、前列腺、脑、胰腺、皮、骨、骨髓、血、胸腺、子宫、睾丸、子 宫颈和肝的癌或肿瘤。更特别地所述肿瘤选自下组：腺瘤、血管肉瘤、 星形细胞瘤、上皮癌、生殖细胞瘤、成胶质细胞瘤、神经胶质瘤、错 构瘤、血管内皮瘤、血管肉瘤、血肿、肝胚细胞瘤、白血病、淋巴瘤、 成神经管细胞瘤、黑素瘤、成神经细胞瘤、骨肉瘤、视网膜母细胞 瘤、横纹肌肉瘤、肉瘤和畸胎瘤。
具体而言，肿瘤/癌选自下组：肢端雀斑样黑素瘤，光化性角化 病，腺癌，腺样囊性癌，腺瘤，腺肉瘤，腺鳞状癌，星形细胞肿瘤， 巴托兰腺癌，基底细胞癌，支气管腺癌，毛细血管，类癌瘤，癌，癌 肉瘤，多穴的，胆管‑癌，chondosarcoma，choriod plexus乳头状瘤 /癌，透明细胞癌，囊腺瘤，内胚窦肿瘤，子宫内膜增生，子宫内膜间 质肉瘤，子宫内膜样腺癌，室管膜，类上皮，Ewing′s肉瘤，纤维板 层状，局部性结节性增生，胃泌素瘤，生殖细胞肿瘤，成胶质细胞瘤， 胰高血糖素瘤，hemangiblastomas，血管内皮瘤，血管瘤，肝腺瘤， 肝腺瘤病，肝细胞癌，胰岛素瘤，上皮内瘤形成，上皮间鳞状细胞瘤 形成，浸润性鳞状细胞癌，大细胞癌，平滑肌肉瘤，雀斑痣恶性黑 素瘤，恶性黑素瘤，恶性间皮肿瘤，成神经管细胞瘤，髓上皮瘤， 黑素瘤，脑膜，间皮，转移癌，粘液性表皮样癌，成神经细胞瘤， 神经上皮腺癌结节性黑素瘤，燕麦细胞癌，少突胶质细胞，骨肉瘤， 胰多肽，乳头状浆液性腺癌，松果体细胞，垂体肿瘤，浆细胞瘤，假 性肉瘤，肺胚细胞瘤，肾细胞癌，视网膜母细胞瘤，横纹肌‑肉瘤，肉 瘤，浆液性癌，小细胞癌，软组织癌，生长抑素‑分泌型肿瘤，鳞状癌， 鳞状细胞癌，submesothelial，表面扩散型黑素瘤，未分化癌，眼 素层黑素瘤，疣状癌，胰腺瘤，分化良好的癌，和Wilm′s肿瘤。 更优选，所述肿瘤/癌选自下组：大脑内癌，头‑和‑颈癌，直肠癌，星 形细胞瘤，优选II、III或IV级星形细胞瘤，成胶质细胞瘤，优选多 形性成胶质细胞瘤(GBM)，小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)， 优选非小细胞肺癌(NSCLC)，转移黑素瘤，转移非雄激素依赖型前 列腺癌(AIPCa)，转移雄激素依赖型前列腺癌(ADPCa)和乳腺癌。 甚至更优选，所述肿瘤/癌选自下组：星形细胞瘤，优选II、III或 IV级星形细胞瘤，成胶质细胞瘤，优选成多形性胶质细胞瘤，小细胞 肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)，优选非小细胞肺癌(NSCLC)， 转移黑素瘤，转移非雄激素依赖型前列腺癌(AIPCa)，转移雄激素 依赖型前列腺癌(ADPCa)。还更优选，所述肿瘤/癌选自转移灶，优 选脑转移灶，小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)，优选非 小细胞肺癌(NSCLC)，转移黑素瘤，转移非雄激素依赖型前列腺癌 (AIPCa)，转移雄激素依赖型前列腺癌(ADPCa)和乳腺癌。
根据本发明优选的实体癌包括癌乳房、心、肺、小肠、结肠、脾、 肾、膀胱、头和颈、卵巢、前列腺、脑、胰腺、皮、骨、胸腺、子宫、 睾丸、子宫颈和/或肝。
待处理的根据本发明的优选的骨转移灶优选包括实体癌的骨转移 灶、更优选乳房、心、肺、小肠、结肠、脾、肾、膀胱、头和颈、卵 巢、前列腺、脑、胰腺、皮、骨、胸腺、子宫、睾丸、子宫颈和/或肝 的实体癌的骨转移灶。
待处理的根据本发明的更优选的骨转移灶优选包括乳、肺、头和 颈、结肠和/或前列腺的癌的骨转移灶。
待处理的根据本发明的更优选的骨转移灶优选还包括骨病损，优 选骨溶性和/或骨原性骨病损，更优选骨溶性骨病损，甚至更优选骨髓 瘤、恶性骨髓瘤和/或多发性骨髓瘤的骨病损，和特别是骨髓瘤、恶性 骨髓瘤和/或多发性骨髓瘤的骨溶性骨病损。
本发明所述的“医药组合物”可包括减轻或避免与本发明的组合 疗法相关的副作用的剂(“辅助疗法”)，包括但不限于例如降 低抗癌药物的毒性效果的那些剂，例如骨吸收抑制剂、心脏保护 剂。所述辅助剂预防或减轻与化疗法、放射疗法或手术相关的恶心和 呕吐的发生，或减小与施用骨髓抑制抗癌药物相关的感染的发生。辅 助剂本领域中熟知的。根据本发明的免疫剂可额外地与佐剂如 BCG和免疫系统刺激剂一起施用。此外，所述组合物可包括含有细胞 毒性有效的放射标志的同位素或其它细胞毒素剂如细胞毒性肽(例如 细胞因子)或细胞毒物等的免疫剂或化疗剂。
在此使用的所述术语“药物试剂盒”优选涉及包装盒且，原则上， 在此描述的癌或肿瘤和特别是人的乳腺癌和/或骨转移灶的 方法中使用的反应剂的说明书。在本发明的试剂盒中的反应剂典型地 被配制成组合物，例如本文中所描述的，并因此可以是任何适于 以试剂盒分发的形式品种。此种形式可包括液体、溶液、粉剂、片剂、 悬浮液等配制剂用于提供用于根据本发明的用途的特定的化合物或治 疗剂。所述配制剂、化合物或剂可以适于根据本方法分开施用的 分开的容器提供，或可选地，可与包装内单独容器中的组合物一起提 供。所述包装盒可根据在此描述的方法包含对于一个或多个剂量 的反应剂足够的量。本发明的试剂盒还包含包含于包装和中的材料的 “使用说明书”。
在此使用的术语“制药可接受的”及其语法变形，当它们涉及到 组合物、载体、稀释剂和反应剂，是可以互换使用的并表示所述材料 能够施用于哺乳动物而不产生不希望的生理效果如恶心、头晕、胃不 舒服等。包含其中溶解的或分散的活性成分的药理学组合物的制备是 本领域中熟知的，且不需要基于配制剂进行限定。典型地，此种组合 物被制备成可注射的液体溶液或悬浮液，然而，也可以制备成适于溶 液或悬浮液、在使用前在液体中的固体形式。所述制剂也可以被乳化。 活性成分可以与制药可接受的且与所述活性成分相容的赋形剂混合， 并以适用于在此描述的方法中使用的量。适宜的赋形剂是例如水、 盐水、葡萄糖、甘油、乙醇或类似物和它们的组合。另外，如果希望， 所述组合物可包括少量助剂物质如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等，其 提高活性成分的有效性。本发明的组合物可包含在此所述组分的 制药可接受的盐。制药可接受的盐包括用无机酸形成的酸加成盐(与 多肽的自由氨基基团形成)。所述无机酸例如盐酸或磷酸酸，或这样 的有机酸如乙酸、酒石酸、苦杏仁酸等。与羧基基团形成的盐还可以 由无机碱衍生，例如钠、钾、铵、钙或正铁的氢氧化物，且这样的有 机碱如异丙基胺、三甲胺、2‑乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因 (procaine)等。当用于制备环多肽αv拮抗剂时，特别地优选的是 盐酸盐。生理耐受的载体是本领域中熟知的。液体载体的示例是无菌 水溶液，其不含有活性成分和水之外的材料或以生理pH值包含缓冲剂 如磷酸钠、生理盐水或这两者如磷酸盐缓冲的盐水。此外，含水载体 可包括多于一种缓冲剂盐，以及诸如氯化钠和氯化钾的盐、葡萄糖、 聚乙二醇和其它溶质。液体组合物还可以除了水之外包含液体相和不 含水之外包含液体相。此种额外的液体相的示例是甘油、植物油如棉 籽油和水‑油乳液。
典型地，以例如抗体或抗体片段或抗体缀合物形式的免疫剂 的有效量是当以生理耐受的组合物施用时足以达到血浆浓度约 0.01微克(μg)每毫升(ml)至约100μg/ml，优选约1μg/ml至 约5μg/ml和通常约5μg/ml的量。不同地注明，所述剂量可在对于 一天或多肽的一个或多个日剂量施用中由约0.1mg/kg至约300 mg/kg，优选约0.2mg/kg至约200mg/kg，最优选约0.5mg/kg至约 20mg/kg变化。当免疫剂以单克隆抗体的片段或缀合物的形式， 所述量可容易地基于片段/缀合物相对于完整抗体的质量进行调节。以 摩尔浓度计，优选的血浆浓度是约2微摩尔(μM)至约5毫摩尔(mM) 并优选约100μM至1mM的抗体拮抗剂。根据本发明的非免疫肽 或蛋白多肽(例如I FN‑α)或其它相似大小的小分子的剂的 有效量，典型地是当以生理耐受的组合物施用时足以到达血浆浓度约 0.1微克(μg)每毫升(ml)至约200μg/ml，优选约1μg/ml至约 150μg/ml的多肽的量。基于具有质量为约500g/mol的多肽，优选 的血浆浓度以摩尔浓度计约2微摩尔(μM)至约5毫摩尔(mM)和优 选约100μM至1mM多肽拮抗剂。优选为根据本发明的化学拮抗剂或 (化学的)化疗剂(既不是免疫剂也不是非免疫肽/蛋白)的 活性剂的典型的剂量是10mg至1000mg、优选约20至200mg和更 优选50至100mg每公斤体重每天。优选为根据本发明的化学拮抗剂 或(化学的)化疗剂(既不是免疫剂也不是非免疫肽/蛋白) 的活性剂的优选剂量是0.5mg至3000mg每患者每天，更优选10至 2500mg每患者每天，和特别是50至1000mg每患者每天，或，每公 斤体重，优选约0.1至100mg/kg，和更优选1mg至50mg/kg，优选 每剂量单位和更优选每天，或，每平米体表，优选0.5mg至2000mg/m2， 更优选5至1500mg/m2，和特别是50至1000mg/m2，优选每剂量单 位和更优选每天。
术语“有效”或“有效量”涉及药物哺乳动物疾病 或障碍有效的量。在癌的情况下，药物的有效量减少癌细胞的数 量；减小肿瘤的大小；抑制(即，某种程度的减慢且优选停止)癌细 胞浸润到外周组织；抑制(即，某种程度的减慢且优选停止)肿瘤癌 转移；某种程度上抑制肿瘤生长；和/或某种程度上减轻一种或多种与 癌相关的征状。可预防生长和/或杀死存在的癌细胞的药物的范围，可 以是细胞生长抑制的和/或细胞毒性的。对于癌，功效可例如通过 总存活(OS)或无恶化存活(PFS)，通过评估到疾病恶化的时间(TTP) 和/或测定应答率(RR)来测量。可选地，优选，功效可例如通过评估 到疾病恶化的时间(TTP)和/或测定应答率(RR)来测量。
在此使用的，术语“生理功能性衍生物”优选涉及根据本发明待 使用的化合物的任何制药可接受的衍生物，例如酯或酰胺，其施用至 哺乳动物能够(直接或间接地)提供本发明的化合物或其活性代谢物。 此种衍生物对于本领域技术人员而言是清楚的，无需不适当的实验， 且参照Burger′s Medicinal Chemistry和Drug Discovery，5th Edition，Vol 1：Principles and Practice的教导，其通过引用教 导生理功能性衍生物的部分并入本文。
在此使用的，术语“溶剂合物”优选涉及由溶质(在本发明中， 杀死肽(和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐)和/或癌综 合剂)(或其盐或生理功能性衍生物))与溶剂形成的可变的化 学计量学复合体。出于本发明的目的的此种溶剂不可与溶质的生物活 性相干扰。适宜的溶剂的实例包括但不限于水、甲醇、乙醇和乙酸。 优选所使用的溶剂是制药可接受的溶剂。适宜的制药可接受的溶剂的 实例包括而无限制地是水、乙醇和乙酸。适宜的制药可接受的溶剂的 优选实例是水和/或乙醇。最优选所使用的溶剂是水。根据本发明待使 用的化合物的制药可接受的盐及其制备是本领域中已知的。如果所述 化合物其本身不是盐，其可通过添加制药可接受的酸或制药可接受的 碱容易地转化成盐。制药可接受的酸和碱是本领域中已知的，例如出 自在此引用的文献。
根据本发明待使用的化合物，优选包括式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐，和/或如本文中所描述的一种或多种癌综合剂， 可一般性地以本领域中对于各化合物或化合物类已知的形式或途径或 方式施用给患者，例如本文中所描述的或如描述于在此所引用的文献。
式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽优选以制药可接受的盐应 用，更优选药理学可接受的盐酸盐，和特别优选地以内盐(其为化合 物环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)诸如此类)应用。
关于式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽，以下书写名称的类 型优选被视为等同：
环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)＝
环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑[NMe]Val)＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑[NMe]‑Val)＝环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal) ＝环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)＝
环(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)＝环(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) ＝cRGDfNMeV＝c(RGDfNMeV)。
式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽也被引述为西仑吉肽，其 为所述化合物的INN(International Non‑propriety Name)。
式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽还被描述于同一申请人的 EP 0 770 622 A，US 6,001,961，WO 00/15244和PCT/US07/01446中， 其公开内容通过参考明确地并入本申请中。
近期结果显示抑制共同地被表达于各种癌性细胞中的整联蛋白， 特别是αvβ3和/或αvβ5，可显著地降低化学抗性或放射抗性的癌 性细胞对化疗剂和/或电离放射的抗性和/或可引起癌性细胞对化疗剂 和/或电离放射提高的敏感度。
据此，特异性整联蛋白配体，特别是根据本发明特异于αvβ3和/ 或αvβ5整联蛋白的整联蛋白配体和特别是式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐可成功地应用以改善各种癌综合剂的功效。
例如以按比例上升的剂量使用西仑吉肽各种脑肿瘤(NABT 9911)的阶段I的临床研究。在该研究中的某些GBM患者中，见到应 答的指征。相比当前使用中的大多数癌剂，西仑吉肽(＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)非常显著地具有非常良性的副作用特 征，而物已知的在人中的MTD，且是非常耐受的。
除了在GBM患者基本上100％死亡率(2年存活率约25％)之外， 神经病并发症发病率迅速低生活质量(QOL)。
例如多形性成胶质细胞瘤的标准，关联放射疗法和替莫唑胺 仅具有提高的切除后的患者的生存中值2.5个月(12.1→14.6个月) 相比于单是放射疗法(Stupp等人，2005)。然而，根据本发明与至 少一种特异性整联蛋白配体组合，优选选自Vitaxin、Abegrin，CNTO95 和环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，更优选选自Vitaxin、Abegrin 和环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)和特别优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，该标准显示出鉴于提高的提高 的生存中值和生活质量明显改善的功效。在该段中引用的文献通过参 考明确地并入本申请的公开内容。
乳腺癌：
术语乳腺癌或恶性乳腺肿瘤通常用作源于乳组织的癌的总称，最 常见源于输乳管内衬或将奶供给导管的小叶。源于导管的癌通常称为 导管癌；源于那些的癌小叶通常称为小叶癌。然而，有许多不同类型 的乳腺癌，处于不同阶段(扩散)、侵占和基因构成；存活的在很大 程度上取决于那些因子而变化。乳腺癌发生在妇女身上的可能性比男 性多约超过100倍，尽管男性因为诊断延迟倾向于具有更差的结果。
乳腺癌(BRCA)是世界范围内妇女中最常见的癌，约占所有妇女癌 症的30％。这表现为一项主要的公共健康问题，主要由于其发生率高， 死亡率和上的挑战。每年全世界多于一百一十万妇女被诊断为 BRCA，和多于400.000死于该疾病。约75％的所有新确诊的患者是处 于BRCA早期的妇女。
通常，选择包括外科手术，基于药物的疗法，包括但不限于 激素疗法和/或化疗法，和放射。某些乳腺癌需要激素水平上升，如雌 激素和/或孕酮，和具有针对那些激素的受体。外科手术后那些癌用干 扰那些激素和/或阻断在卵巢或其他地方产生所述激素的药物。此 种药物通常称为激素拮抗剂或激素阻断剂。
然而，尽管进行外科手术和使用辅助疗法如化疗法、激素疗法、 放射疗法和靶向药物如曲妥珠单抗(trastuzumab)，许多这些患者会 死于局部或远端复发。转移性乳腺癌的五年存活率在25％的范围内。
从以上可见，BRCA的管理过去一直很难并且现在仍然很难。例如， 针对大多数妇女，早期BRCA的包括结合外科手术模式疗法，继之 以辅助放射疗法、化疗法、激素疗法或生物/靶向疗法如曲妥珠单抗。 关于使用辅助的决定是基于疾病复发的风险。根据St.Gallen 标准，复发的风险取决于淋巴结状况、肿瘤阶段、等级、淋巴或血管 的肿瘤入侵、HER2扩大、年龄和激素受体状况。
对于晚期(转移，局部晚期或复发)BRCA没有明确指定的护理标 准。激素、各种化疗剂和靶向药物联合如曲妥珠单抗和贝伐珠单 抗被当前用于这些患者。由于晚期BRCA被认为是潜在的不能治愈 的疾病，本质上主要是缓解性且目的特别是提高生活质量、无恶 化和总存活。
激素
激素疗法或内分泌疗法是被广泛接受的模式，针对妇女具有 激素敏感、雌激素‑受体阳性(ER+)和/或孕酮‑受体阳性(PR+)的乳腺癌 (约70％)。特别是针对具有有限的内脏参与的绝经后妇女，且主要 在皮肤、软组织、骨的转移灶和有限数目的肺转移灶，内分泌疗法是 首要的选择。
对于绝经前的妇女GnRH‑Analoga和他莫昔芬组合是当前的 选择。绝经后妇女可以用他莫昔芬、芳香酶抑制剂(如依西美坦、 来曲唑和阿那曲唑)，选择性雌激素‑受体调节剂(如氟维司)或在 特殊情况下用孕激素。第一线的内分泌据报道导致约30％的缓解 率和中值6‑10个月无恶化存活，其中芳香酶抑制剂在无恶化存活和缓 解率方面优于他莫昔芬，例如Mouridsen等人，Journal of Clinical Oncology，Vol 21，No 11(June 1)，2003：pp 2101‑2109，其公开 内容以其整体包含于本申请中。与此相反，第二线的内分泌的临 床活性被报道是远远不如的，具有10‑20％的缓解率和只有3‑6个月的 恶化中值时间，例如Buzdar等人，Journal of Clinical Oncology， Vol 19，No 14(July 15)，2001：pp 3357‑3366，其公开内容以其 整体包含于本申请中。
所有接受激素的晚期疾病妇女将最终发展成需要化疗的 激素‑抗性疾病。与内分泌相比，化疗法通常与大量的全身性毒性 相关，因此拖延时间至第一化疗法和提高总存活的新的选择是得 到很好保证的。
化疗法
化疗法适用于患有晚期BRCA且ER‑和PR‑阴性疾病的妇女或在一 个或数个之前的内分泌法中恶化了的妇女。原则上化疗法可以作 为单个‑或包括两种或更多种医药组合的综合化学疗法施用。
对于疾病缓慢或中度恶化的妇女，单一疗法是优选适用的。对于 不良预后、快速恶化或扩大的内脏参与、具有很高的医疗需要以快速 缓解的妇女，应当考虑综合化学疗法。最常使用的药物包括 anthrazyklines，特别是脂质体的anthrazyklines，紫杉烷类，长春 瑞滨，卡培他滨，米托蒽醌，吉西他滨和/或铂‑衍生物。对于首选级 别使用紫杉烷类的单一疗法的缓解率和恶化时间，据报道分别是 20‑30％和3‑6个月，例如Jones等人，Journal of Clinical Oncology， Vol 23，No 24(August 20)，2005：pp 5542‑5551)，其公开内容以 其整体包含于本申请中。对于综合化学疗法报道的缓解率更高 (50‑70％)，然而与单一疗法相比这些并不必然地改善无恶化和总存活。 一般而言，综合化学疗法与更高的血液和非血液毒性有关。
HER2‑靶向药物
具有HER2‑阳性的晚期BRCA妇女(优选由IHC 3+或FISH分析决 定)应当是施用HER2‑靶向药物。这些当前包括单克隆抗体，如曲妥 珠单抗，和酪氨酸激酶‑抑制剂，如拉帕替尼。
曲妥珠单抗，例如可以作为单一疗法施用(缓解率‑20％)，然而 更多经常地与化疗法组合，优选选自紫杉烷类和长春瑞滨。与单独的 化疗法相比，曲妥珠单抗和化疗法组合被报道导致无恶化和总存活的 明显改善例如Slamon等人，N Engl J Med，Vol.344，No.11(March 15，2001)783‑792)，其公开内容以其整体包含于本申请中。
具有激素‑敏感、HER2‑阳性的晚期BRCA妇女也受益，如果内分泌 疗法(例如芳香酶抑制剂)与曲妥珠单抗组合(据报道例如Kaufmann 等人，Journal of Clinical Oncology，Vol 27，No 33(November 20)， 2009：pp 5529‑5537，其公开内容以其整体包含于本申请中)。拉帕 替尼特别适用于第二线与卡培他滨组合。通过该组合，与单独使 用卡培他滨相比，恶化的中值时间据报道改善了4个月，例如Geyer 等人，N Engl J Med 2006；355：2733‑43，其公开内容以其整体包含 于本申请中。
抗血管生成
特别是对于具有HER2‑阴性疾病的妇女，贝伐珠单抗已表明组合 时可改善无恶化存活，当与多西他赛组合时(据报道例如Miles等人， Journal of Clinical Oncology，2008 ASCO Annual Meeting Proceedings(Post‑Meeting Edition)Vol 26，No 15S(May 20 Supplement)，2008：LBA1011，其公开内容以其整体包含于本申请中)。 或与紫杉醇组合时(Miller等人，N Engl J Med 2007；357：2666‑76， 其公开内容以其整体包含于本申请中)。然而，迄今没有证实组合治 疗改善了总存活。近期数据支持贝伐珠单抗的活性对于各种医药组合 在无恶化存活方面的改善(据报道，例如Robert等人，2009 ASCO Annual Meeting Abstract No：1005；Citation：J Clin Oncol 27：15s， 2009(suppl；abstr 1005)，其公开内容以其整体包含于本申请中)。
据此新药物的开发和特别是目的在于改善患有晚期BRCA的妇女 的总存活的新靶向的药物很急需。
支持
70％患有晚期乳腺癌的妇女在疾病过程中发展骨转移灶。这些显 著影响生活质量并与受影响的妇女的高发病率相关。最经常的并发症 是疼痛、病理性骨折和脐带压迫，所有这些都潜在地导致不能行动。 这些并发症引起干预的需要，如外科手术和/或放射疗法。
当前护理所有具有骨转移灶的妇女的标准是双膦酸盐，其被证明 可以减少上述与骨骼‑相关的事件的发生率。根据新近公开的III阶段 数据(Stopeck等人，European Journal of Cancer Supplements，Vol. 7，No 3，September 2009，Page 2)其公开内容以其整体包含于本 申请中，相当新颖的单克隆RANKL‑抗体地舒单抗可能优于双膦酸盐。
然而，仍存在高的未满足的医疗需要来减少由骨转移灶导致的发 病，特别是患有晚期BRCA的妇女。
备选方案
外科手术之后，低风险、激素‑敏感性乳腺癌可以单独施以激素疗 法和放射。无激素受体或那些已经扩散到淋巴结或表达遗传特性的乳 腺癌，是高风险的，因此通常采用更具进攻性的。例如一种标准 方案，主要在美国流行，是环磷酰胺和多柔比星(阿霉素)的组合， 称为CA。有时，加上一种紫杉烷药物如多西他赛，此方法称为CAT。 一种相同的，主要流行于欧洲，是环磷酰胺与甲氨喋呤和/或氟尿 嘧啶的组合(还分别称为CM、CF或CMF)。在许多案例中，放射被加 入到外科床上来控制被外科手术遗漏的癌细胞，其通常延长存活。
骨转移灶：
骨的癌转移灶是一个主要的临床关注，其显著限制患者的生活质 量和寿命。具有骨转移灶的患者经常行动不便、疼痛和骨头脆弱(这 使他们易患病理性骨折，骨髓硬膜外压缩和骨髓衰竭)。
骨转移灶，还优选指骨病损、转移病损或仅仅是病损，在诊断时 经常是多发性的。成人中，骨转移灶或病损通常发生在中轴骨骼和其 它有残余的红骨髓的位点上，尽管骨转移灶或病损可能在骨骼体系 的其他位点被发现。常见的骨转移灶或病损的位点是椎骨、骨盆、股 骨的邻近部分，肋骨、肱骨的邻近部分和头盖骨。多于90％的骨转移 灶或病损在该分布区。
成像在检测、诊断、预测、计划和后续的骨转移灶或病损监 视中起重要的作用。
骨转移灶的真正发生仍然是具有很多争论的主题，并且没有被完 全了解。源自原发位点的骨癌转移概率只需知道癌的扩散及其对骨的 偏好就可以被估测。因此，骨转移灶的频率取决于癌在特定的体中 的扩散。骨转移灶的发生还取决于数据的来源。例如，来自解剖研究 和来自骨闪烁法研究的结果对于新近诊断、确诊和晚期癌是不同的。
骨的小环境，特别是ECM(细胞外基质)，在通过特定的癌(主 要是前列腺和乳腺癌)优先转移到骨起了主要作用。最常转移到骨的 癌的类型包括前列腺、乳和肺癌，尽管所有类型的癌都可以这样。
当转移病损在髓腔发展时，周围的骨通过破骨性或成骨性过程被 重塑。所有这些是正常骨重建机制失调的结果，是由肿瘤宿主细胞相 互作用引起的。骨胚细胞瘤通过骨细胞外基质(ECM)蛋白的直接分泌 和成骨细胞的间接刺激引起骨的不正常的形成。骨溶性肿瘤通过蛋白 水解酶和通过对破骨细胞的作用引起骨的不正常吸收。骨质溶解可以 从ECM中释放隐蔽生长因子，导致周期的反馈回路，这导致破骨细胞 的进一步刺激和持续的骨吸收。当骨量失去，肿瘤就可以在它们的地 方继续繁殖和增大。
取决于原发性肿瘤的类型，可以使用局部放射疗法、化疗法和破 骨细胞活性调节剂，包括双膦酸盐和/或RANK/RANKL/OPG调节剂。如 果癌只扩散到骨的一个位点，可以采用放射骨。一般而言，这将 减轻疼痛和预防该位点的骨折。如果癌已扩散到骨的数个位置，放射 所有的位点可能是不可能的，因为受到可以安全放射的总量的限 制。经历骨痛的患者应当被施以疼痛药物。双膦酸盐和/或 RANK/RANKL/OPG调节剂促进破骨细胞发生细胞凋亡，并因此用于 扩散到骨的癌。然而，通常这些针对骨癌转移的是缓解性的。
多发性骨髓瘤
多发性骨髓瘤，还称为MM，骨髓瘤、血浆细胞骨髓瘤或卡勒疾病 是一种白细胞(也称浆细胞)癌。多发性骨髓瘤是终末分化的B‑淋巴 细胞(血浆细胞)的克隆扩充，特征是单克隆免疫球蛋白(“副蛋白 (paraprotein)”)，骨质溶解，肾功能障碍，和免疫缺损。多发性 骨髓瘤是第二最普遍的血癌(10％)，位于非霍奇金淋巴瘤之后。它代 表了约1％的所有癌和2％的所有癌死亡。尽管多发性骨髓瘤发作的高 峰年龄是65至70岁，最近的数据表明更多的发病率和更早的发作年 龄。
多发性骨髓瘤通常被认为是不能治愈的，但可以通过策略缓 解，包括，但不限于类固醇、化疗法、沙利度胺(thalidomide)、来 那度胺(lenalidomide)、硼替佐米(bortezomib)和/或干细胞移植。
多发性骨髓瘤的集中在疾病控制和抑制。如果该疾病是完全 无症状的，称为郁积型多发性骨髓瘤，(即存在副蛋白和不正常骨髓 落，但无终末器官损伤)，可能被推迟。这些患者被密切监视 向多发性骨髓瘤的发展。
患者的不稳定的多发性骨髓瘤通常需要立即。最初的选 择取决于该患者病症的严重性(基于高风险对基于标准‑风险)和干细 胞移植的合格中选条件。移植合格中选条件由该患者的年龄和一般健 康决定。某些患者可能有机会参与新颖的临床试验。
不符合干细胞移植资格的患者通常被施以给定的组合化疗法，三 种通常采用的方案中的一种。这些包括但不限于：
i)美法仑、泼尼松(prednisone)、沙利度胺(也称为MPT)，
ii)硼替佐米(Velcade)、美法仑、泼尼松(也称为VMP)，和
iii)来那度胺加低剂量地塞米松(dexamethasone)。
选择取决于该患者的临床病症和疾病的风险状况。年长的患者或 体弱的患者可能不可以经受这些疗法，通常会开不同药物组合或从以 上讨论的方案中抽选，如仅仅是美法仑和泼尼松(也称为MP)。
如果患者有条件进行骨髓移植，血液学家可能推荐其作为初步治 疗或建议首先尝试其他。最近的研究表明无论移植先发生(在最 初的化疗法之后)或延迟至疾病第一次再来(第一复发)时进行，存 活率可能近似。当选择早期还是延迟移植时，患者需求和愿望会被考 虑。不管移植是立即移植还是延迟移植，等待移植的患者典型地以四 轮化疗法开始来杀灭癌细胞。在最初的化疗法之后，从患者的骨髓里 收集干细胞。针对那些希望延迟移植的患者化疗法可能接着继续。
自身的干细胞疗法包括将患者自己的未成熟的血细胞替代病变或 受损的骨髓的输血法。尽管干细胞移植不能治愈骨髓瘤，他可以延长 存活。对第一次移植没有充分应答的患者可以提供第二次移植。观察 最初的移植取得了完全或很好的应答的患者或有时提供临床试验调查 维持的选择。第二次移植被保留作为以防复发的选择。
复发性骨髓瘤的
几乎患骨髓瘤的所有患者最终都会复发。如果在停止疗法之后超 过六个月复发，最初的化疗法方案通常被重新启动。移植可能向以前 收集并保存过干细胞的患者推荐。针对复发的推荐药物根据其严重性 而不同。因为骨髓瘤不能被治愈，患有复发性疾病的患者通常继续一 种药物或方案直到复发或产生有害的副作用，然后尝试下一种选择。
支持
在化疗法之外，局部的放射疗法和破骨细胞活性调节剂，包括双 膦酸盐和/或RANK/RANKL/OPG调节剂，可以用于由多发性骨髓瘤 引起的骨病损。
SCCHN：
头和颈的鳞状细胞癌(也称为头和颈的Squamous Cell Carcinoma)：
全世界每年头和颈的鳞状细胞癌的发生率据估计是500,000患 者；在美国和欧洲每年被诊断出118.000新患者。SCCHN更主要以男 性为主，男女比例是2∶1‑4∶1。在吸烟习惯，酒精消费和头颈癌之间 存在正相关。约90％的头和颈恶性肿瘤是鳞状细胞组织学的(SCCHN)。 多数患者在50‑70岁时被诊断患有SCCHN。
大多数患者(75％)在诊断时具有原位的晚期疾病。那些患者主要 接受放射疗法和在某些情况下外科手术。更新的策略如诱导化疗法或 化放疗可以提供较好的存活；然而，5年存活率保持在大约30％，60％ 的患者将在首次的两年内经历原位或远端复发。
患有复发性疾病和/或新近被诊断为远端转移灶，例如骨转移灶的 患者组，具有非常异质的疾病特性。然而，他们的生存中值时间保持 在约6‑8个月且生活质量低。该不良的预后在过去的30年都没有改 变。
针对复发的和/或转移SCCHN的标准化疗包括药物如甲氨喋 呤、博来霉素、5‑氟尿嘧啶(5‑FU)和铂化合物。充满希望的II阶段 新的药剂如紫杉烷类的结果不能在III阶段研究中被证实。顺铂是最 广泛使用的复发的和/或转移SCCHN的药物。就此，被认为是该 指导中的标准。
总的来说，所有公开的随机试验表明，与单个药剂和多数其它的 联合相比，顺铂和5‑FU组合产生了更高的应答率。一般而言，组合疗 法伴有更高的血液和非血液的毒性。顺铂和5‑FU的组合较单一疗法产 生了小但未必准确的改善，即生存中值6‑8个月。包含卡铂+5‑FU的 方案也被经常使用，因为它们较好的安全特征(相比顺铂有较低的肾、 耳、神经和胃肠毒性)。应答率和存活与基于顺铂的方案没有统计上 的不同。卡铂因此被批准作为在多个欧洲国家SCCHN。
表皮的生长因子受体(EGFR)在几乎所有SCCHN中都有表达。EGFR表达带有强烈的预后意义，提供使用EGFR‑靶向剂的基本原理，如西妥昔单抗(Erbitux)，在该指导中(Burtness，JCO 2005；Bourhis，JCO 2006)。Erbitux被批准在美国作为转移疾病的单一疗法，和与放射疗法组合不可切除的SCCHN，其中它证明了可延长存活20个月。
采用组合顺铂或碳铂、5‑FU和Erbitux的III阶段试验已经证明 显著延长了局部SCCHN复发/转移的患者的生存中值时间。观察到的生 存中值时间是10.1个月，属于这些患者在阶段III试验中报告的最长 时间之一。该段所引述的文献通过参考被明确地并入本申请。
NSCLC：非小细胞肺癌
肺癌是世界范围内引起癌死亡的主要原因。在美国一个国家该疾 病每年引发约170,000新的肺癌病例和160,000死亡。NSCLC约占所 有肺癌的80％。
在诊断时，约30％的NSCLC患者有局部晚期疾病，40％患有转移 疾病，包括转移到骨的疾病。较早的阶段的手术疗效比其它肿瘤类型 差(在阶段I‑II约40％的反复)。转移疾病中，化疗法是选择的治 疗，但存活益处一直是中等，导致40％的1年存活，五年存活少于15％。
普遍认为针对晚期疾病(具有恶性肿瘤性胸腔积液的阶段IV和 IIIb)的标准包括基于铂(顺铂或卡铂)的化疗法。然而，在管 理这些患者方面有许多未决问题，如组合疗法方案的作用，这些方案 包括多于二药物，非基于铂的疗法，和新型靶向方法。
目前，约20％‑30％的应答率和6至11个月的生存中值时间已经在 转移NSCLC的中观察到了。几种化疗法联合使用具有可比的功 效。顺铂/卡铂加上长春瑞滨、吉西他滨、紫杉醇或多西他赛的组合属 于转移NSCLC第一线疗法中最常用的方案。
阶段III试验是基于随机阶段II试验的结果开始的，阶段II试 验中86位患者用顺铂/长春瑞滨加上西妥昔单抗对比单独使用顺 铂/长春瑞滨。该阶段II试验显示了西妥昔单抗组合在整体应答 率方面的优势(53％实验arm和32％对照arm[Gatzemeier，ASCO 2003， abstract#2582])。阶段III试验计划包括1100患者(550每arm)， 并有动力证明中值总存活7个月(标准arm)增加至10个月(与 Erbitux的组合)。该研究已经完成了人员编入(enrollment)，最 初结果将很快出来。该段所引述的文献通过参考被明确地并入本申请。
SCLC：小细胞肺癌
小细胞肺癌(SCLC)占世界上所有肺癌病例的15‑20％的，相当于 每年约80,000新患者。美国监察、流行病学和最终结果数据库 (Surveillance，Epidemiology and End Results database)最新 的分析确认了在美国，小细胞肺癌患者的比例在1998年已经从约20％ 降至13.8％，可能是由于贯彻戒烟计划。然而，该成功在一定程度上 被世界上其他地区吸烟高和一直上升的流行性(prevalence)胜过了。
在显现时SCLC通常是扩散的，在显现时约60％至70％患者具有已 扩散(扩大阶段)的疾病。因此，外科手术几乎不是一种选择，外科 手术只能应用于带有局部化(有限的)疾病的患者。SCLC复发和死亡 甚至在接受手术切除的患者中都是迫在眉睫的。外科手术之外而无其 它疗法，处在SCLC扩大阶段的患者存活为2个月，处于局限阶段SCLC 的患者存活为3个月(Green，Am J Med 1969)。
在疾病的局限和扩大阶段，全身性组合化疗法仍然是SCLC 的主要方法。20多年来，依托泊苷和顺/卡铂被认为是用于首选 西方世界SCLC患者的组合中的当前标准剂。使用多于二药物的组合疗 法在临床试验中导致更高的应答率，但也导致更高的毒性，且没有导 致临床相关的总存活受益。一个组合方案包括环磷酰胺、多柔比星和 长春新碱被证明与铂/依托泊苷组合同等有效，但因为包含蒽环霉素而 有更多的不利的毒性特征。在日本试验产生了有利的总存活之后，在 日本顺铂加上伊立替康被更经常作为SCLC的首选。然而西半球的 研究不能证实那些结果，因此，该方案没有被广泛用于世界的那个部 分。
在SCLC的扩大阶段，化疗法的总应答率范围在40％至70％。到疾 病恶化的时间短，大多数患者在结束化疗法的3个月恶化或甚至在开 始化疗法的3‑5个月内恶化。生存中值是7至11个月。少于5％的患 者存活超过2年。特别可怕的是对于发展了骨转移灶的患者的预后。 该段所引述的文献通过参考被明确地并入本申请。
因此甚至鉴于过去几年得到的结果，关于多数癌性的疾病的患者 的预后仍很可怕。这特别适用于对于转移癌性的疾病和特别是那些已 经转移到骨的人。因此，有必要改善药剂，疗法方法和方案。
本发明的目的是提供此种改善的药剂，疗法方法和方案。
因此，本发明的主题是：
[1]式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)， 用于人的乳腺癌和/或骨转移灶。
式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)， 用于人的乳腺癌和/或其骨转移灶。
术语乳腺癌的含义是本领域中熟知和理解的并优选在此按照本领 域使用，在本发明的上下文中，它涉及乳的肿瘤、肿瘤样和瘤形成病 症，更优选乳的恶性肿瘤，肿瘤样和瘤形成病症和其转移灶，优选包 括其骨转移灶。
术语骨转移灶的含义是本领域中熟知和理解的并优选在此按照本领域使用，在本发明的上下文中和如果没有另外明确表明，它涉及受试对象(优选为人)骨室中任何来源的转移灶。优选地，骨癌转移的来源可以是任何癌或肿瘤，更优选任何实体癌或肿瘤。术语实体癌或肿瘤的含义是本领域中熟知和理解的并优选在此按照本领域使用，在本发明的上下文中，术语实体癌或肿瘤涉及乳癌或心、肺、小肠、结肠、脾、肾、膀胱、头和颈、卵巢、前列腺、脑、胰腺、皮、骨、骨髓、胸腺、子宫、睾丸、子宫颈和/或肝的肿瘤，更优选乳、心、肺、小肠、结肠、脾、肾、膀胱、头和颈、卵巢、前列腺、脑、胰腺、皮、胸腺、子宫、睾丸、子宫颈和/或肝的肿瘤，甚至更优选乳、肺、结肠、肾、头和颈、卵巢、前列腺、脑、胰腺、皮、子宫、睾丸、子宫颈和/或肝的肿瘤。然而，在本发明的上下文中，骨病损，优选骨溶性和/或成骨的骨病损，更优选骨溶性骨病损，优选还被视为骨转移灶。在本发明的上下文中，骨病损，优选骨溶性和/或成骨的骨病损，更优选骨溶性骨病损，癌优选还被视为骨转移灶。特别优选，骨病损，优选骨溶性和/或成骨的骨病损，更优选骨溶性骨病损，选自下组的癌：骨髓瘤、转移黑素瘤、多发性骨髓瘤和/或病，在本发明的上下文中被视为骨转移灶。
[2]本文中所描述的乳腺癌和/或骨转移灶的中的用途，所述 优选包括将环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)、其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐施用于所述人，以500mg至12500mg每周 (和每人)的量，更优选以1000mg至10000mg每周(和每人)的量， 甚至更优选1800mg至8000mg每周(和每人)，甚至更优选2500mg 至6000mg每周(和每人)和特别是3000mg至5000mg每周(和每 人)，如约600mg每周，约800mg每周，约1600mg每周，约2000 mg每周，约3200mg每周，约4000mg每周或约6000mg每周。所给 定的量优选被视为“平”量，即没有调适或鉴于待的对象的个头、 体重和/或体表面的因素。优选，以上所给定的量被施用于人对象12 岁或更大、更优选16岁或更大和特别是18岁或更大。特别优选，所 给定的量适于成年人对象。如果式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 的肽被部分或完全作为其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐应 用，所述量优选基于在所述其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐 所含有的环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的量计算。
[3]本文中所描述的乳腺癌和/或骨转移灶的中的用途，所述 优选包括将环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐施用于所述人至少一次每周和更优选至少两 次每周或至少三次每周，至少3个连续周，更优选至少六个连续周和 特别是至少16个连续周。
关于所给的周量的优选方案，每周施用次数和/或关于所述连续周 施用期间的每周施用次数，在下文进行更详细的说明。
[4]本文中所描述的乳腺癌和/或骨转移灶的中的用途，所述 优选还包括将一种或多种癌综合剂施用于各个人受试对象。
适宜的癌综合剂原则上是本领域中已知的，例如来自已存在 的或当前开发的用于乳腺癌和/或骨转移灶的疗法。据信，式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐在乳腺癌和/或骨转移灶的中的使用，对于当前可 用的或当前开发的方案可增加有利效果并优选为协同效果。
优选的是如本文中所描述的所述肽和/或其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐与一种或多种、两种或更多种、三种或更多种或四种 或更多种癌综合剂的联合。
[5]更优选的用于与所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合 物和/或盐联合的癌综合剂选自下组：
a)激素调节剂，
b)破骨细胞活性调节剂，
c)癌化疗剂，和
d)放射疗法。
如果两种或更多种癌综合剂选自所述组a)至d)，该选择优选 这样进行，即仅一种或两种癌综合剂选自所述组a)至d)中的相同 组。例如选择所述组的总数是两种癌综合剂且所选的第一种癌综 合剂是根据a)的激素调节剂，则待选择的第二种癌综合剂可 以是
i)根据a)的另一种激素调节剂(但不同于第一种)或
ii)一种癌综合剂，其选自根据b)的破骨性活性调节剂的， 选自根据c)的癌化疗剂或选自根据d)的放射疗法。
如果三种或更多种癌综合剂选自所述组a)至d)，优选同样地 应用，即仅一种或两种癌综合剂选自组a)至d)的相同组，且其它 的每次选自剩余组的不同组。
通常，所述不包括选自d)的放射疗法的两种不同类型的组 合。然而，如果需要或有利的，放射疗法的不同类型可被组合， 如放射同位素与外线束放射组合，等。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选激素受体阳性乳腺癌和/或激素受 体阳性转移灶)的中使用的激素调节剂是本领域中已知的。对于 在根据本发明的中的使用优选的激素调节剂优选包括选自下组的 一种或多种化合物：抗雌激素药、芳香酶抑制剂和GnRH analoga。如 果对于在根据本发明的中的使用选择了激素调节剂，优选仅一种 或两种激素调节剂被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本 发明的中的使用选择了两种激素调节剂，优选或者两种不同抗雌 激素药被选择在根据本发明的中同时使用，或者一种抗雌激素药 与一种GnRH analogon的组合被选择在根据本发明的中同时使用。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选激素受体阳性乳腺癌和/或激素受 体阳性转移灶)的中使用的抗雌激素药是本领域中已知的。根据 本发明的用途优选的抗雌激素药优选选自下组：阿莫昔芬、阿佐昔芬、 巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和 氟维司和特别优选选自他莫昔芬和/或氟维司，且优选其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使 用选择了抗雌激素药，优选仅一种或两种抗雌激素药被同时用于根据 本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了抗雌激 素药，更优选仅一种抗雌激素被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选激素受体阳性乳腺癌和/或激素受体阳性转移灶)的中使用的芳香酶抑制剂是本领域中已知的。根据本发明的用途优选的芳香酶抑制剂优选选自下组：阿那曲唑(例如瑞宁得)、来曲唑(例如弗隆)、依西美坦(例如阿诺新)、伏氯唑(例如Rivizor)、福美坦(例如兰他隆)和法倔唑(例如Afema)和特别优选选自阿那曲唑、来曲唑和/或依西美坦，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了芳香酶抑制剂，优选仅一种或两种芳香酶抑制剂被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了芳香酶抑制剂，更优选仅一种芳香酶抑制剂被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选激素受体阳性乳腺癌和/或激素受体阳性骨转移灶)的中使用的GnRH analoga是本领域中已知的。根据本发明的用途优选的GnRH analoga优选选自下组：亮丙瑞林(例如EligardEnantone)、戈舍瑞林(例如Zoladex)和布舍瑞林(例如Profact)和特别优选选自亮丙瑞林和/或戈舍瑞林，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了GnRH analoga，优选仅一种或两种GnRH analoga被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了GnRH analoga，更优选仅一种GnRH analogon被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选骨转移灶，所述骨转移灶优选包括 骨髓瘤的骨病损)的中使用的破骨细胞活性调节剂是本领域中已 知的。对于在根据本发明的中的使用优选的破骨细胞活性调节剂 优选包括选自下组的一种或多种化合物：双膦酸盐和RANK/RANKL/OPG 调节剂。如果对于在根据本发明的中的使用选择了破骨细胞活性 调节剂，优选仅一种或两种破骨细胞活性调节剂被同时用于根据本发 明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了两种破骨细 胞活性调节剂，优选或者两种不同的双膦酸盐被选择在根据本发明的 中同时使用，或者一种双膦酸盐和一种RANK/RANKL/OPG调制剂被 选择在根据本发明的中同时使用。
在乳腺癌和/或骨转移灶(优选骨转移灶，所述骨转移灶优选包括骨髓瘤的骨病损)的中使用的双膦酸盐是本领域中已知的。根据本发明的用途优选的双膦酸盐优选选自下组：依替膦酸(例如Didronel)、氯膦酸盐(例如固令Loron)、替鲁膦酸盐(例如Skelid)、帕米膦酸盐(例如APD、阿可达)、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐(例如福善美维D)、伊班膦酸盐(例如Boniva)、利塞膦酸盐(例如Actonel)和唑来膦酸盐(例如ZometaAclasta)和特别优选选自氯膦酸盐、帕米膦酸盐、伊班膦酸盐和/或唑来膦酸盐，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了双膦酸盐，优选仅一种或两种双膦酸盐被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了双膦酸盐，更优选仅一种双膦酸盐被同时用于根据本发明的。
RANK/RANKL/OPG调节剂在乳腺癌和/或骨转移灶(优选骨转移灶，所述骨转移灶优选包括骨髓瘤的骨病损)的中使用的是本领域中已知的。根据本发明的用途的RANK/RANKL/OPG调节剂优选选自下组：地舒单抗(例如Prolia)，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了RANK/RANKL/OPG调节剂，优选仅一种RANK/RANKL/OPG调制剂被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的癌化疗剂是本领域中已 知的。对于在根据本发明的中的使用优选的癌化疗剂优选选自在 本文中描述的化疗剂。更优选，对于在根据本发明的中使用的癌 化疗剂优选包括选自下组的一种或多种化合物：烷化化疗剂、 VEGF/VEGFR抑制剂、EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、细胞生长抑制 性生物碱、细胞毒性抗生素和抗代谢药。甚至更优选，对于在根据本 发明的中使用的癌化疗剂优选包括选自下组的至少一种化合物、 至少两种化合物或至少三种化合物：烷化化疗剂、VEGF/VEGFR抑制剂、 EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、细胞生长抑制性生物碱、细胞毒性抗 生素和抗代谢药。如果两种或更多种化合物选自所述组，优选各亚组 的仅一种或两种化合物被选择，即亚组烷化化疗剂、VEGF/VEGFR抑制 剂、EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、细胞生长抑制性生物碱、细胞毒 性抗生素和抗代谢药，例如一种烷化化疗剂与一种细胞生长抑制性生 物碱组合(即包含两种癌化疗剂的组合)，两种EGF/EGFR抑制剂被组 合(即包含两种癌化疗剂的组合)，一种EGF/EGFR抑制剂与一种细胞 毒性抗生素和一种抗代谢物质药的组合(即包含三种癌化疗剂的组 合)，或两种EGF/EGFR抑制剂与细胞生长抑制性生物碱组合(即包含 三种癌化疗剂的组合)。如果两种或更多种化合物选自所述组，更优 选各亚组的仅一种化合物被选择，即亚组烷化化疗剂、VEGF/VEGFR抑 制剂、EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、细胞生长抑制性生物碱、细胞 毒性抗生素和抗代谢药，例如一种烷化化疗剂与一种细胞生长抑制性 生物碱组合(即包含两种癌化疗剂的组合)，一种EGF/EGFR抑制剂与 一种细胞毒性抗生素和种抗代谢物质药组合(即包含三种癌化疗剂的 组合)。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的烷化化疗剂是本领域中 已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的烷化化疗剂优选选 自本文中描述的烷化化疗剂。更优选，对于在根据本发明的中使 用的烷化化疗剂优选包括选自下组的一种或多种化合物：顺铂、卡铂、 奥沙利铂、环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺，更优选顺铂、卡铂、奥 沙利铂、环磷酰胺和特别优选选自卡铂和/或环磷酰胺，且优选其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于根据本发明的用途选择 了烷化化疗剂，优选一种或两种，更优选仅一种烷化化疗剂被同时用 于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的VEGF/VEGFR抑制剂是本领域中已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的VEGF/VEGFR抑制剂优选选自本文中所描述的VEGF/VEGFR抑制剂。更优选，对于在根据本发明的中使用的VEGF/VEGFR抑制剂优选包括选自下组的一种或多种化合物：贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF、Avastin)、索拉非尼(Nexavar)、舒尼替尼(Sutent)、凡德他尼(vandetanib)(ZD6474、Zactima)和特别优选选自贝伐珠单抗，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了VEGF/VEGFR抑制剂，优选仅一种或两种VEGF/VEGFR抑制剂被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了VEGF/VEGFR抑制剂，更优选仅一种VEGF/VEGFR抑制剂被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的EGF/EGFR抑制剂是本领域中已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的EGF/EGFR抑制剂优选选自本文中所描述的EGF/EGFR抑制剂。更优选，对于在根据本发明的中使用的EGF/EGFR抑制剂优选包括选自下组的一种或多种化合物：曲妥珠单抗(例如赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼和特别优选选自曲妥珠单抗和/或拉帕替尼，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了EGF/EGFR抑制剂，优选一种或两种EGF/EGFR抑制剂被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了EGF/EGFR抑制剂，更优选曲妥珠单抗和/或拉帕替尼被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的PARP抑制剂是本领域中 已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的PARP抑制剂优选选 自本文中所描述的PARP抑制剂。更优选，对于在根据本发明的中 使用的PARP抑制剂优选包括选自下组的一种或多种化合物：奥拉帕利 (Olaparib)和Iniparib(BSI‑201)，且优选其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐。如果对于根据本发明的用途选择了PARP抑制 剂，优选仅一种PARP抑制剂被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的细胞生长抑制性生物碱 是本领域中已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的细胞生 长抑制性生物碱优选选自本文中所描述的细胞生长抑制性生物碱。更 优选，对于在根据本发明的中使用的细胞生长抑制性生物碱优选 包括选自下组的一种或多种化合物：依托泊苷、替尼泊苷、长春碱、 长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、多西他赛、紫杉醇、伊立替康、托 泊替康和伊沙匹隆(Ixabepilone)，更优选依托泊苷、长春碱、长春 新碱、长春瑞滨、多西他赛、紫杉醇、伊立替康、托泊替康和伊沙匹 隆和特别优选选自长春瑞滨、多西他赛、紫杉醇，和/或伊沙匹隆，且 优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发 明的中的使用选择了细胞生长抑制性生物碱，优选一种或两种细 胞生长抑制性生物碱被同时用于根据本发明的。如果对于在根据 本发明的中的使用选择了细胞生长抑制性生物碱，更优选一种细 胞生长抑制性生物碱被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的细胞毒性抗生素是本领 域中已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的细胞毒性抗生 素优选选自本文中所描述的细胞毒性抗生素。更优选，对于在根据本 发明的中使用的细胞毒性抗生素优选包括选自下组的一种或多种 化合物：柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、放 线菌素‑D、博来霉素和丝裂霉素‑C，更优选柔红霉素、多柔比星、表 柔比星、伊达比星、米托蒽醌和博来霉素和特别优选选自多柔比星、 表柔比星和/或米托蒽醌，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了细胞毒性抗生 素，优选仅一种或两种细胞毒性抗生素被同时用于根据本发明的。 如果对于在根据本发明的中的使用选择了细胞毒性抗生素，更优 选仅一种细胞毒性抗生素被同时用于根据本发明的。
在乳腺癌和/或骨转移灶的中使用的抗代谢药是本领域中已知的。对于在根据本发明的中的使用优选的抗代谢药优选选自本文中所描述的抗代谢药。更优选，对于在根据本发明的中使用的抗代谢药优选包括选自下组的一种或多种化合物：甲氨喋呤、雷替曲塞、培美曲塞、6‑巯嘌呤、6‑硫鸟嘌呤、2’‑脱氧肋间型霉素、磷酸氟达拉滨、2‑氯脱氧腺苷、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨(例如Gemzar)、胞嘧啶阿拉伯糖苷、二氟脱氧胞苷和羟基脲，更优选甲氨喋呤、雷替曲塞、培美曲塞、磷酸氟达拉滨、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨(例如Gemzar)、胞嘧啶阿拉伯糖苷、二氟脱氧胞苷和羟基脲和特别优选选自甲氨喋呤、培美曲基、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨和/或吉西他滨，且优选其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。如果对于在根据本发明的中的使用选择了抗代谢药，优选仅一种或两种抗代谢药被同时用于根据本发明的。如果对于在根据本发明的中的使用选择了抗代谢药，更优选仅一种抗代谢药被同时用于根据本发明的。如果同时使用两种抗代谢药，特别优选甲氨喋呤与5‑氟尿嘧啶的组合。
[6]甚至更优选的用于与所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐联合的癌综合剂，其中
i)根据a)的激素调节剂，其包括选自下组的一种或多种化合物： 抗雌激素药、芳香酶抑制剂和GnRH analoga，
ii)根据b)的破骨细胞活性调节剂，其包括选自下组的一种或 多种化合物：双膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调节剂，
iii)根据c)的癌化疗剂，其包括选自下组的一种或多种化合物： 烷化化疗剂、VEGF/VEGFR抑制剂、EGF/EGFR抑制剂、PARP抑制剂、 细胞生长抑制性生物碱、细胞毒性抗生素，和抗代谢药，和/或
iv)放射疗法，其选自外线束放射疗法/放射、近距离放射疗法和 全身性放射性同位素疗法。
[7]特别优选的用于与所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐联合的癌综合剂，其中
i)根据a)的激素调节剂，其包括：
α)一种或多种化合物，其选自抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、 巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和 氟维司，
β)一种或多种化合物，其选自芳香酶抑制剂阿那曲唑(例如瑞 宁得)、来曲唑(例如弗隆)、依西美坦(例如阿诺新)、伏氯唑(例 如Rivizor)、福美坦(例如兰他隆)和法倔唑(例如Afema)，和/ 或
γ)一种或多种化合物，其选自GnRH analoga亮丙瑞林(例如EligardEnantone)、戈舍瑞林(例如Zoladex)和布舍瑞林(例如Profact)；
ii)根据b)的破骨细胞活性调节剂，其包括：δ)一种或多种 化合物，其选自双膦酸盐依替膦酸(例如Didronel)、氯膦酸盐(例 如固令、Loron)、替鲁膦酸盐(例如Skelid)、帕米膦酸盐(例如 APD、阿可达)、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐(例如福善美 维D)、伊班膦酸盐(例如Boniva)、利塞膦酸盐(例如Actonel) 和唑来膦酸盐(例如Zometa、Aclasta)，
和/或
ε)RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单抗(例如Prolia)；
和/或
iii)根据c)的癌化疗剂，其包括：
ζ)一种或多种化合物，其选自烷化化疗剂顺铂、卡铂、奥沙利 铂、环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺，
η)一种或多种化合物，其选自VEGF/VEGFR抑制剂贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF，例如Avastin)、索拉非尼(例如Nexavar)、舒尼替尼(例如Sutent)、凡德他尼(例如ZD6474、Zactima)，
θ)一种或多种化合物，其选自EGF/EGFR抑制剂曲妥珠单抗(例如赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，
ι)一种或多种化合物，其选自PARP抑制剂奥拉帕利和Iniparib (BSI‑201)，
κ)一种或多种化合物，其选自细胞生长抑制性生物碱依托泊苷、 替尼泊苷、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、多西他赛、紫 杉醇、伊立替康、托泊替康和伊沙匹隆，
λ)一种或多种化合物，其选自细胞毒性抗生素柔红霉素、多柔 比星、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌、放线菌素‑D、博来霉素和丝 裂霉素‑C，
和/或
μ)一种或多种化合物，其选自抗代谢药吉西他滨、甲氨喋呤、 雷替曲塞、培美曲塞、6‑巯嘌呤、6‑硫鸟嘌呤、2’‑脱氧肋间型霉素、 磷酸氟达拉滨、2‑氯脱氧腺苷、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、胞嘧啶阿拉 伯糖苷、二氟脱氧胞苷和羟基脲；
和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。
通常，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐和/或一种或多种癌综合剂(包括 所述放射疗法)可以如本领域中对于各化合物和/或形式已知的量 和/或方案施用于或应用于人。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐和/或一种或多种癌综合剂(包括 所述放射疗法)可以如上述和/或下述对于各化合物和/或形式已 知的量和/或方案施用于或应用于人。
本发明上下文中所使用的术语“乳腺癌”优选包括：
激素受体阴性乳腺癌，
激素受体阳性乳腺癌，
HER2阴性乳腺癌，
HER2阳性乳腺癌，
激素受体阴性、HER2阴性乳腺癌，
激素受体阳性、HER2阴性乳腺癌，
激素受体阴性、HER2阳性乳腺癌，和/或
激素受体阳性、HER2阳性乳腺癌。
本发明上下文中所使用的术语“乳腺癌”优选包括“正常乳腺癌” 或“非转移性乳腺癌”，和/或“转移性乳腺癌”。
术语“非转移性乳腺癌”优选包括：
非转移性激素受体阴性乳腺癌，
非转移性激素受体阳性乳腺癌，
非转移性HER2阴性乳腺癌，
非转移性HER2阳性乳腺癌，
非转移性激素受体阴性、HER2阴性乳腺癌，
非转移性激素受体阳性、HER2阴性乳腺癌，
非转移性激素受体阴性、HER2阳性乳腺癌，和/或
非转移性激素受体阳性、HER2阳性乳腺癌。
术语“转移性乳腺癌”优选选自：
转移性激素受体阴性乳腺癌，
转移性激素受体阳性乳腺癌，
转移性HER2阴性乳腺癌，
转移性HER2阳性乳腺癌，
转移性激素受体阴性、HER2阴性乳腺癌，
转移性激素受体阳性、HER2阴性乳腺癌，
转移性激素受体阴性、HER2阳性乳腺癌，和/或
转移性激素受体阳性、HER2阳性乳腺癌。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽在以上所给出的乳腺癌类型 的一种或多种的用途中是有利的，且特别是在基本上所有以上给 出的乳腺癌类型的用途中是有利的。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐对于骨转移灶的是有利的，和更优 选对于源自乳腺癌的骨转移灶的是有利的。
[8]优选的主题因此是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐在下列癌中的用 途
i)乳腺癌，
ii)激素‑受体阳性、HER2阴性乳腺癌，
iii)激素‑受体阳性、HER2阳性乳腺癌，
iv)激素‑受体阴性、HER2阴性乳腺癌，和
v)激素‑受体阴性、HER2阳性乳腺癌；
和/或
vi)它们的骨转移灶。
因此，本发明优选的主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，在乳腺癌和/或其骨转移灶的治 疗中的用途。
据此，本发明更优选的主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，在转移性乳腺癌和/或其骨转移 灶的中的用途。
据此，本发明特别优选的主题是式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐，更优选式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽在转 移性乳腺癌的骨转移灶的中的用途，优选包括下列乳腺癌的骨转 移灶：
转移性激素受体阴性乳腺癌，
转移性激素受体阳性乳腺癌，
转移性HER2阴性乳腺癌，
转移性HER2阳性乳腺癌，
转移性激素受体阴性、HER2阴性乳腺癌，
转移性激素受体阳性、HER2阴性乳腺癌，
转移性激素受体阴性、HER2阳性乳腺癌，和/或
转移性激素受体阳性、HER2阳性乳腺癌。
(1)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选激素受 体阳性乳腺癌，甚至更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优 选转移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和任选地
b)一种或多种激素调节剂或两种或更多种激素调节剂，优选激素 调节剂选自
i)抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美 昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和氟维司，
ii)芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)、依西 美坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆)和法倔唑(Afema)， 和/或
iii)GnRH analoga亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)。
(2)更优选的方法人的乳腺癌的方法，更优选激素受体 阳性乳腺癌，甚至更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优选 转移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种激素调节剂，优选选自下列的一种激素调节剂
i)抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美 昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和氟维司，
ii)芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)、依西 美坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆)和法倔唑(Afema)， 和/或
iii)GnRH analoga亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)。
(3)更优选的是人的乳腺癌的方法，更优选激素受体阳性乳 腺癌和特别优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述 人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)两种激素调节剂，其为
i)一种抗雌激素药，优选一种抗雌激素选自阿莫昔芬、阿佐昔芬、 巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和 氟维司，和特别优选他莫昔芬；
和
ii)一种GnRH analogon，优选一种GnRH analogon选自亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)，和特别是亮丙瑞林或戈舍瑞林。
(4)甚至更优选的是人的乳腺癌的方法，更优选激素受体阳 性乳腺癌，甚至更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优选转 移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)两种激素调节剂，其为
i)一种抗雌激素药，优选一种抗雌激素选自阿莫昔芬、阿佐昔芬、 巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和 氟维司，和特别优选他莫昔芬；
和
ii)一种GnRH analogon，优选一种GnRH analogon选自亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)，和特别是亮丙瑞林或戈舍瑞林。
上述给出的四种方法在激素受体阳性乳腺癌和特别是激素受体阳 性和HER2阴性乳腺癌，和/或其骨转移灶的中是优选的。上述给 出的四种方法在转移性激素受体阳性乳腺癌和特别是转移性激素受体 阳性和HER2阴性乳腺癌，和/或其骨转移灶的中甚至是更优选的。
骨转移灶的存在下，所述方法可优选与一种或多种破骨细胞活性 调节剂优选本文中所描述的破骨细胞活性调节剂的施用组合。
(5)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选HER2 阳性乳腺癌和特别是转移性HER2阳性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
任选地与
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂的组合，优选选自下组的一种或多种EGF/EGFR抑制剂：曲妥珠单抗(赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，和特别是曲妥珠单抗和/或拉帕替尼。
(6)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选HER2 阳性乳腺癌，甚至更优选HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌和特别是转 移性HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选选自下组的一种或多种EGF/EGFR抑制剂：曲妥珠单抗(赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，和特别是曲妥珠单抗和/或拉帕替尼，
任选地与
b)一种或多种激素调节剂或两种或更多种激素调节剂的组合，优 选所述激素调节剂选自
i)抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美 昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和氟维司，
ii)芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)、依西 美坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆)和法倔唑(Afema)， 和/或
iii)GnRH analoga亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)。
(7)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选HER2 阳性乳腺癌，甚至更优选HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌和特别是转 移性HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选所述一种或多种EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗(赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，和特别是曲妥珠单抗和/或拉帕替尼，
任选地与
b)一种或多种激素调节剂的组合，优选所述一种或多种激素调节 剂选自
i)芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)、依西美 坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆)和法倔唑(Afema)， 更优选阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)和依西美坦(阿诺新)， 和/或
ii)他莫昔芬。
优选，仅选择一种激素调节剂。
上述给出的三种方法(方法(4)至(7))在HER2阳性乳腺癌和 特别是HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌，和/或其骨转移灶的中 是优选的。上述给出的三种方法在转移性HER2阳性乳腺癌和特别是转 移性HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌，和/或其骨转移灶的中甚 至是更优选的。
骨转移灶的存在下，所述方法可优选与一种或多种破骨细胞活性 调节剂优选本文中所描述的破骨细胞活性调节剂的施用组合。
(8)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选激素受 体阳性乳腺癌，甚至更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优 选转移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
任选地与
b)一种或多种激素调节剂或两种或更多种激素调节剂的组合，优 选所述激素调节剂选自
i)抗雌激素药阿莫昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美 昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬和氟维司，
ii)芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗隆)、依西 美坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆)和法倔唑(Afema)， 和/或
iii)GnRH analoga亮丙瑞林(EligardEnantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林(Profact)，
和/或
c)一种或多种化合物，其选自VEGF/VEGFR抑制剂，优选选自VEGF/VEGFR抑制剂贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF、Avastin)、索拉非尼(Nexavar)、舒尼替尼(Sutent)、凡德他尼(ZD6474、Zactima)，和特别是贝伐珠单抗。
(9)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，更优选激素受 体阳性乳腺癌，甚至更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优 选转移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌，包括施用于所述人：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
任选地与
b)一种或多种激素调节剂或两种或更多种激素调节剂的组合， 优选激素调节剂选自芳香酶抑制剂阿那曲唑(瑞宁得)、来曲唑(弗 隆)、依西美坦(阿诺新)、伏氯唑(Rivizor)、福美坦(兰他隆) 和法倔唑(Afema)，和特别是来曲唑，
和/或
c)一种或多种化合物，其选自VEGF/VEGFR抑制剂，优选选自VEGF/VEGFR抑制剂贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF、Avastin)、索拉非尼(Nexavar)、舒尼替尼(Sutent)、凡德他尼(ZD6474、Zactima)，和特别是贝伐珠单抗。
(10)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，其包括施用 化疗法，优选在第一线药物方案中，所述方法包括施用：
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种或多种癌化疗剂，优选至少二种或至少三种癌化疗剂， 更优选一、二或三种癌化疗剂，优选癌化疗剂选自下组组成：
i)一种或多种烷化化疗剂，优选一种烷化化疗剂，优选本文中 所描述的烷化化疗剂，和更优选选自下组的烷化化疗剂：顺铂、卡铂、 奥沙利铂、环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺，和特别是环磷酰胺，
ii)一种或多种细胞生长抑制性生物碱，优选一种细胞生长抑制 性生物碱或两种细胞生长抑制性生物碱，优选本文中所描述的细胞生 长抑制性生物碱，和更优选选自下组的细胞生长抑制性生物碱：依托 泊苷、替尼泊苷、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、多西他 赛、紫杉醇、伊立替康、托泊替康和伊沙匹隆，和特别是多西他赛或 紫杉醇，
iii)一种或多种细胞毒性抗生素，优选一种细胞毒性抗生素或两 种细胞毒性抗生素，优选本文中所描述的细胞毒性抗生素和更优选细 胞毒性抗生素选自下组：柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、 米托蒽醌和博来霉素，和特别是多柔比星、表柔比星或米托蒽醌，
和/或
iv)一种或多种抗代谢药，优选一种抗代谢物质药或两种抗代谢 药，优选本文中所描述的抗代谢药和更优选抗代谢药选自下组：吉西 他滨、甲氨喋呤、雷替曲塞、培美曲塞、磷酸氟达拉滨、5‑氟尿嘧啶 和卡培他滨，和特别是甲氨喋呤和/或5‑氟尿嘧啶，
于所述人。
该方法优选应用于患有转移性乳腺癌、激素受体阳性和HER2阴性 乳腺癌、激素受体阴性和HER2阴性乳腺癌、转移性激素受体阳性和 HER2阴性乳腺癌的人的，和/或
转移性激素受体阴性和HER2阴性乳腺癌，优选在第一线药物方案中。该方法可以与一种VEGF/VEGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种VEGF/VEGFR抑制剂，更优选选自下组的一种VEGF/VEGFR抑制剂的施用组合：贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF、Avastin)、索拉非尼(Nexavar)、舒尼替尼(Sutent)和凡德他尼(ZD6474、Zactima)，并特别是与贝伐珠单抗的施用组合给予所述人。
上述给出的三种方法(方法(8)至(10))在HER2阴性乳腺癌， 更优选激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和特别优选激素受体阳性、 HER2阴性和/或VEGF/VEGFR阳性乳腺癌，和/或其骨转移灶的中 是优选的。上述给出的三种方法(方法(8)至(10))甚至在转移性 HER2阴性乳腺癌，更优选转移性激素受体阳性和HER2阴性乳腺癌和 特别优选转移性激素受体阳性、HER2阴性和/或VEGF/VEGFR positve 乳腺癌，和/或其骨转移灶的中是更优选的。骨转移灶的存在下， 所述方法可优选与一种或多种破骨细胞活性调节剂优选本文中所描述 的破骨细胞活性调节剂的施用组合。
(11)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，优选包括施 用化疗法，优选在第一线药物方案中，所述方法包括施用：
(I)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)多西他赛或紫杉醇，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，
和
c)多柔比星、表柔比星或米托蒽醌，和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐；
(II)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，和
b)多西他赛或紫杉醇，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，
任选地组合
c)贝伐珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(III)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)多柔比星，表柔比星或米托蒽醌，和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐，
任选地组合
c)贝伐珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(IV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)烷化化疗剂，优选本文中所描述的烷化化疗剂和特别是选 自下组的烷化化疗剂：环磷酰胺、顺铂和卡铂，和更优选选自下组： 环磷酰胺和卡铂，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
c)一种或两种抗代谢药，优选一种或两种抗代谢药本文中所 描述的和特别是一种或两种抗代谢药选自甲氨喋呤和5‑氟尿嘧啶，和 /或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(V)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)烷化化疗剂，优选烷化化疗剂本文中所描述的和特别是选 自下组的烷化化疗剂：环磷酰胺、顺铂和卡铂，和更优选选自下组： 环磷酰胺和卡铂，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
任选地组合
c)细胞毒性抗生素，优选本文中所描述的细胞毒性抗生素， 更优选细胞毒性抗生素选自下组：多柔比星、表柔比星和米托蒽醌， 和特别是多柔比星或表柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合 物和/或盐
和/或
d)一种或两种抗代谢药，优选本文中所描述的一种或两种抗 代谢药和特别是选自甲氨喋呤和5‑氟尿嘧啶，和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐的一种或两种抗代谢药；
(VI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)烷化化疗剂，优选本文中所描述的烷化化疗剂和特别是烷 化化疗剂选自下组：环磷酰胺、顺铂和卡铂，和更优选选自下组：环 磷酰胺和卡铂，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
任选地组合
c)细胞毒性抗生素，优选本文中所描述的细胞毒性抗生素， 更优选细胞毒性抗生素选自下组：多柔比星，表柔比星和米托蒽醌， 和特别是多柔比星或表柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合 物和/或盐
和/或
d)细胞生长抑制性生物碱，优选本文中所描述的细胞生长抑 制性生物碱和特别是选自多西他赛和紫杉醇，和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐的细胞生长抑制性生物碱；
(VII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
c)甲氨喋呤(Methotrexat)，和/或其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐，
和
d)5‑氟尿嘧啶，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(VIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
c)多柔比星(Doxirubicine)，和/或其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐，
和
d)5‑氟尿嘧啶，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(IX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
c)多柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
d)多西他赛，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(X)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，和
c)多柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
c)表柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
或(XII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)环磷酰胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
c)表柔比星，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
d)5‑氟尿嘧啶，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
于所述人。
方法(I)至(XII)是优选的方案选择，其在转移性乳腺癌、 激素受体阳性乳腺癌、激素受体阴性乳腺癌、激素受体阳性HER2阴性 乳腺癌和/或激素受体阴性HER2阴性乳腺癌，更优选转移性乳腺癌、 激素受体阴性HER2阴性乳腺癌、激素受体阳性HER2阴性乳腺癌和特 别是转移性乳腺癌和/或激素受体阴性HER2阴性乳腺癌的中是优 选有利的。它们在第一线疗法方案中是特别优选的。
(12)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，优选包括施 用EGF/EGFR和/或HER2靶向化合物，优选在第一线药物方案中， 所述方法包括施用：
(XIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种或多种EGF/EGFR抑制剂和特别优选EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗(赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，和特别是曲妥珠单抗和/或拉帕替尼，
任选地组合
c)细胞生长抑制性生物碱，优选本文中所描述的细胞生长抑 制性生物碱和特别是细胞生长抑制性生物碱选自多西他赛和紫杉醇， 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XIV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种 或多种EGF/EGFR抑制剂，和特别优选曲妥珠单抗，和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
组合
c)多西他赛，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
或(XV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种 或多种EGF/EGFR抑制剂，和特别优选曲妥珠单抗，和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
组合
c)紫杉醇，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
于所述人。
(13)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，优选包括施用 化疗法，优选在第二线或较后的方案中，所述方法包括施用：
(XVI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
组合
b)一种或多种细胞生长抑制性生物碱，优选本文中所描述的 一种或多种细胞生长抑制性生物碱和更优选一种或多种细胞生长抑制 性生物碱选自依托泊苷、长春碱、长春新碱、长春瑞滨、多西他赛、 紫杉醇、伊立替康和伊沙匹隆，和特别是长春瑞滨、多西他赛、紫杉 醇或伊沙匹隆，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
和/或
c)一种或两种抗代谢药，优选一种或两种抗代谢药本文中所 描述的和特别是一种或两种抗代谢药选自下组：甲氨喋呤、雷替曲塞、 培美曲塞、5‑氟尿嘧啶、吉西他滨和卡培他滨，和特别是吉西他滨和/ 或卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XVII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
组合
b)一种或多种化合物，其选自PARP抑制剂，优选本文中所 描述的PARP抑制剂和特别是选自奥拉帕利和Iniparib(BSI‑201)， 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的一种或两种PARP 抑制剂；
(XVIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种或多种化合物，其选自PARP抑制剂，优选本文中所 描述的PARP抑制剂，更优选PARP抑制剂选自下组：奥拉帕利和 Iniparib(BSI‑201)，和特别是Iniparib(BSI‑201)，和/或其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
与
c)烷化化疗剂组合，优选本文中所描述的烷化化疗剂，更优 选烷化化疗剂选自下组：环磷酰胺、顺铂和卡铂，和特别是、顺铂或 卡铂，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和/或
d)一种或两种抗代谢药，优选本文中所描述的一种或两种抗 代谢药和特别是选自下组的一种或两种抗代谢药：甲氨喋呤、雷替曲 塞、培美曲塞、5‑氟尿嘧啶、吉西他滨和卡培他滨，和特别是吉西他 滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XIX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)伊沙匹隆，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)伊沙匹隆，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和/或
c)卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XXI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)一种或多种化合物，更优选选自下组的一、二或三种化合 物：紫杉醇、多西他赛、长春瑞滨和卡培他滨，和/或其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XXII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)紫杉醇、紫杉醇‑白蛋白、多西他赛、长春瑞滨或卡培他 滨；
(XXIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)长春瑞滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
和
c)卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XXIV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)长春瑞滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
和
c)吉西他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XXV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)吉西他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
和
c)紫杉醇或多西他赛，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐；
(XXVI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
和
c)紫杉醇或多西他赛，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐；
(XXVII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)奥拉帕利，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
或(XXVIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，′
b)Iniparib(BSI‑201)，和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐；
c)环磷酰胺，顺铂或卡铂，优选顺铂或卡铂，和/或其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
d)5‑氟尿嘧啶、吉西他滨或卡培他滨，优选吉西他滨，和/ 或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
于所述人。
(14)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，优选包括施 用EGF/EGFR抑制剂，优选在第二线或较后的方案中，所述方法包 括施用：
(XXIX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种或多种EGF/EGFR抑制剂和特别优选EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗(例如赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，和特别是曲妥珠单抗和/或拉帕替尼，
任选地组合
c)一种或两种抗代谢药，优选一种或两种抗代谢药本文中所 描述的和特别是选自下组的一种或两种抗代谢药：甲氨喋呤、雷替曲 塞、培美曲塞、5‑氟尿嘧啶、吉西他滨和卡培他滨，和特别是卡培他 滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XXX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，′
b)曲妥珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
c)拉帕替尼，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XXXI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
和
b)曲妥珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
(XXXII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，b)曲妥珠单抗，和/或其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
c)卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
或(XXXIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)拉帕替尼，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
c)卡培他滨，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
于所述人。
(15)本发明优选的主题是人的乳腺癌的方法，优选包括施 用激素调节剂，优选在第一线或较后的方案中，所述方法包括施 用：
(XXXIV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种抗雌激素药，优选本文中所描述的一种或多种 抗雌激素药，更优选选自下组的一种或多种抗雌激素药：阿莫昔芬、 阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、 托瑞米芬和氟维司，和特别是他莫昔芬和/或氟维司，和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐
和
c)一种或多种GnRH analoga，优选本文中所描述的一种或 多种GnRH analoga，更优选选自下组的一种或多种GnRH analoga： 亮丙瑞林、戈舍瑞林和布舍瑞林，和特别是亮丙瑞林或戈舍瑞林，和/ 或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XXXV)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种芳香酶抑制剂，优选本文中所描述的一种或多 种芳香酶抑制剂，更优选选自下组的一种或多种芳香酶抑制剂：阿那 曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美坦和法倔唑，和特别是阿那 曲唑(瑞宁得)、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐；
(XXXVI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)他莫昔芬，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
和
c)亮丙瑞林或戈舍瑞林，和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐；
(XXXVII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种芳香酶抑制剂，优选本文中所描述的一种或多 种芳香酶抑制剂，更优选选自下组的一种或多种芳香酶抑制剂：阿那 曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美坦和法倔唑，和特别是阿那 曲唑、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐，
和
c)一种或多种EGF/EGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种 或多种EGF/EGFR抑制剂和特别优选EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥 珠单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠 单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼，更优选选自下组：曲妥珠单 抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉 帕替尼，和特别是曲妥珠单抗或拉帕替尼，和/或其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐；
(XXXVIII)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)阿那曲唑、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，
和
c)曲妥珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，
(XXXIX)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)阿那曲唑、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，和
c)拉帕替尼，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
(XL)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)一种或多种芳香酶抑制剂，优选本文中所描述的一种或多 种芳香酶抑制剂，更优选选自下组的一种或多种芳香酶抑制剂：阿那 曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美坦和法倔唑，和特别是阿那 曲唑、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐，
和
c)一种VEGF/VEGFR抑制剂，优选本文中所描述的一种 VEGF/VEGFR抑制剂，更优选选自下组的一种VEGF/VEGFR抑制剂：贝 伐珠单抗、索拉非尼、舒尼替尼和凡德他尼，和特别是贝伐珠单抗， 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐；
或(XLI)
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，更优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，
b)阿那曲唑、来曲唑或依西美坦，和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，
和
c)贝伐珠单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐；
于所述人。
骨转移灶的存在下，所述方法可优选与一种或多种破骨细胞活性 调节剂优选本文中所描述的破骨细胞活性调节剂的施用组合。
本发明优选的主题是方法骨转移灶，优选人的骨转移灶，包 括施用式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐于受试对象，优选人受试对象。
术语“骨转移灶”的含义是本领域中熟知并理解的。通常，该术 语包括任何来源的骨转移灶。根据本发明，术语骨转移灶优选包括但 不限于本文中所描述的癌，更优选实体癌，更优选选自下组癌的骨转 移灶：乳、心、肺、小肠、结肠、脾、肾、膀胱、头和颈、卵巢、前 列腺、脑、胰腺、皮、骨、胸腺、子宫、睾丸、子宫颈，和/或肝的癌。 根据本发明，术语骨转移灶优选还包括骨病损，优选骨溶性和/或骨原 性骨病损，更优选骨溶性骨病损，甚至更优选骨髓瘤、恶性骨髓瘤和/ 或多发性骨髓瘤的骨病损，和特别是骨髓瘤、恶性骨髓瘤和/或多发性 骨髓瘤的骨溶性骨病损。
根据本发明，术语骨转移灶优选还包括病的骨病损，优选病的骨溶性和/或骨原性骨病损，更优选病的骨溶性骨病损。
根据本发明的骨转移灶更优选包括选自下组癌的骨转移灶：乳腺 癌、肺癌、结肠癌、结直肠癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、卵巢癌、前 列腺癌、脑癌、胰腺癌、皮癌、胸腺癌、子宫癌、睾丸癌、子宫颈癌 和肝癌。
根据本发明的骨转移灶甚至更优选包括选自下组癌的骨转移灶： 乳腺癌、肺癌，优选NSCLC和/或SCLC、头颈癌，优选SCCHN、结肠癌、 结直肠癌、前列腺癌和多发性骨髓瘤。
根据本发明的骨转移灶特别优选包括乳腺癌的骨转移灶，或由乳 腺癌的骨转移灶构成。
本发明更优选的主题是方法骨转移灶，优选人的骨转移灶， 包括施用
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
b)一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选本文中所描述的一种或 多种破骨细胞活性调节剂和特别优选选自下组的一种或多种破骨细胞 活性调节剂：双膦酸盐类和RANK/RANKL/OPG调节剂，优选本文中所描 述的双膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调节剂，
于受试对象，优选人受试对象。
本发明更优选的主题是方法骨转移灶，优选人的骨转移灶， 包括施用
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
b)一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选一种或两种破骨细胞活 性调节剂，其选自下组：双膦酸盐类依替膦酸、氯膦酸盐、替鲁膦酸 盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班膦酸 盐、利塞膦酸盐和唑来膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单抗，和 /或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
本发明甚至更优选的主题是骨转移灶的方法，优选人的骨转 移灶，包括施用
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
b)一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选选自下组的一种或两种 破骨细胞活性调节剂：双膦酸盐类依替膦酸、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、 帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班膦酸盐、 利塞膦酸盐和唑来膦酸盐，更优选氯膦酸盐、伊班膦酸盐、帕米膦酸 盐和唑来膦酸盐，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
本发明还更优选的主题是骨转移灶的方法，优选人的骨转移 灶，包括施用
a)式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和
b)地舒单抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
然而，在骨转移灶的中，可有必要的或有利的是根据上述方 法不仅骨转移灶，还额外地或抑制疾病源例如原发肿瘤和/ 或它的其它转移灶的活性。
据此，可有必要的或有利的是将本文中描述的骨转移灶的方 法与一种或多种优选一种本文中描述的方案组合，其不包括下列 方案
a)施用式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，和/或
b)施用破骨细胞活性调节剂，优选破骨细胞活性调节剂本文中所 描述的。
因此，优选的方面涉及骨转移灶的方法，优选本文中所描述 的骨转移灶，包括或还包括施用一种或多种破骨细胞活性调节剂，优 选一种或两种破骨细胞活性调节剂，优选本文中所描述的破骨细胞活 性调节剂。该方法特别优选于人受试对象。
因此，更优选的方面涉及骨转移灶的方法，优选本文中所描 述的骨转移灶，包括额外地施用一种或多种破骨细胞活性调节剂，优 选一种或两种破骨细胞活性调节剂，优选本文中所描述的破骨细胞活 性调节剂，
于本文中描述的方案，优选本文中描述的方案，其还没 有包括破骨细胞活性调节剂，优选本文中所描述的破骨细胞活性调节 剂的施用。该方法特别优选于人受试对象。
甚至更优选的骨转移灶的方法，优选本文中所描述的骨转移 灶，包括应用
a)如描述于方法(I)至(XLI)的一种或多种方案，
和
b)施用一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选本文中所描述的一 种或多种破骨细胞活性调节剂和特别优选选自下组的一种或多种破骨 细胞活性调节剂：双膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调节剂，优选本文中所 描述的双膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调节剂，
于受试对象，优选人受试对象。
甚至更优选的骨转移灶的方法，优选本文中所描述的骨转移 灶，包括
a)应用如描述于方法(I)至(XLI)的一种或多种方案，
和
b)施用一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选一种或两种破骨细 胞活性调节剂，其选自下组：双膦酸盐类依替膦酸、氯膦酸盐、替鲁 膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班 膦酸盐、利塞膦酸盐和唑来膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单 抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
甚至更优选的骨转移灶的方法，优选骨转移灶本文中所描述 的，包括
a)应用方案，其选自
i)方法(I)至(XII)，
ii)方法(XIII)至(XV)，
iii)方法(XVI)至(XXVIII)，
iv)方法(XXIX)至(XXXIII)，和/或
v)方法(XXXIV)至(XLI)
和
b)施用一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选一种或两种破骨细 胞活性调节剂，其选自下组：双膦酸盐类依替膦酸、氯膦酸盐、替鲁 膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班 膦酸盐、利塞膦酸盐和唑来膦酸盐和RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单 抗，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
在此方面特别优选的破骨细胞活性调节剂选自下组：氯膦酸盐、 伊班膦酸盐、帕米膦酸盐、唑来膦酸盐和地舒单抗和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐。
用于乳腺癌和/或骨转移灶的以上所描述的方法，优选人 的乳腺癌和/或骨转移灶，可有利地与应用放射疗法组合施用于个受试 对象，优选各人受试对象。优选应用于所述受试对象的放射疗法类型 包括但不限于外线束放射疗法或外线束放射、近距离放射疗法，和/ 或全身性放射性同位素疗法。
[9]因此，主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或 其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐在乳腺癌和/或骨转移灶的 中的用途，优选骨转移灶和特别是乳腺癌的骨转移灶，其中所述 包括或还包括以下的施用：
a)或更多的癌综合剂，其选自下组：破骨细胞活性调节剂， 优选本文中所描述的破骨细胞活性调节剂，
和/或
b)放射疗法，优选本文中所描述的放射疗法和特别是放射疗法 选自下组：外线束放射疗法或外线束放射、近距离放射疗法，和全身 性放射性同位素疗法，
于受试对象，优选人受试对象。
甚至更优选的主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和 /或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐在乳腺癌和/或骨转移灶 的中的用途，优选骨转移灶和特别是乳腺癌的骨转移灶，其中所 述包括或还包括以下的施用：
a)一种或多种破骨细胞活性调节剂，优选选自下组的一种或两 种破骨细胞活性调节剂：依替膦酸、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦 酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、阿仑膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦 酸盐、唑来膦酸盐和地舒单抗，更优选下组：氯膦酸盐、帕米膦酸盐、 伊班膦酸盐、唑来膦酸盐和地舒单抗，
和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，
和/或
b)放射疗法，优选放射疗法本文中所描述的和特别是放射疗法 选自下组：外线束放射疗法或外线束放射、近距离放射疗法，和全身 性放射性同位素疗法
于受试对象，优选人受试对象。
[12]优选，所述骨转移灶的包括或还包括施用：
一种或多种癌综合剂，选自下组：顺铂、卡铂、奥沙利铂、 环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，
于受试对象，优选人受试对象。
[10]优选，激素‑受体阳性乳腺癌包括施用式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐和还包括施用：
i)至少一种化合物，优选一种或两种化合物，选择下组：阿莫昔芬、阿佐昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、他莫昔芬、托瑞米芬、氟维司、阿那曲唑(例如瑞宁得)、来曲唑(例如弗隆)、依西美坦(例如阿诺新)、伏氯唑(例如Rivizor)、福美坦(例如兰他隆)和法倔唑(例如Afema)、亮丙瑞林，(例如EligardEnantone)、戈舍瑞林，(例如Zoladex)和布舍瑞林(例如Profact)；
任选地组合
ii)至少一种化合物，其选自下组：贝伐珠单抗rhuMAb‑VEGF，(例如Avastin)、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼、曲妥珠单抗(例如赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼；
和/或
iii)放射疗法；
于受试对象，优选人受试对象。
优选，亮丙瑞林可以醋酸亮丙瑞林施用和/或戈舍瑞林可以醋酸戈 舍瑞林施用。
[11]优选，激素‑受体阴性乳腺癌包括施用式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐，且还包括施用：
i)至少一种化合物，其选自下组：贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF，例如Avastin)、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼、曲妥珠单抗(例如赫赛汀)、西妥昔单抗、帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗、马妥珠单抗、吉非替尼、厄洛替尼和拉帕替尼；
任选地组合
ii)至少一种化合物，其选自下组：柔红霉素、多柔比星、表柔 比星、伊达比星、米托蒽醌、放线菌素‑D、博来霉素和丝裂霉素‑C，
iii)至少一种化合物，其选自下组：依托泊苷、替尼泊苷、长 春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、多西他赛、紫杉醇、伊立替 康、托泊替康和伊沙匹隆，
iv)至少一种化合物，其选自下组：奥拉帕利和Iniparib (BSI‑201)，
和/或
v)一种或多种化合物，其选自抗代谢药吉西他滨、甲氨喋呤、 雷替曲塞、培美曲塞、6‑巯嘌呤、6‑硫鸟嘌呤、2’‑脱氧肋间型霉素、 磷酸氟达拉滨、2‑氯脱氧腺苷、5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、胞嘧啶阿拉 伯糖苷、二氟脱氧胞苷和羟基脲；
于受试对象，优选人受试对象。
本申请另一个且特别优选的方面是于受试对象中，
a)降低受试对象中骨吸收的方法，优选降低破骨细胞‑媒介的 骨吸收，优选人受试对象，
b)诱发新骨形成的方法，优选骨溶性病损的新骨形成，
c)用于破骨细胞活性的调节或正常化的方法，
d)用于骨形成恢复的方法，
和/或
e)诱导骨再生或骨的部分再生的方法，
优选人受试对象，更优选患有骨转移灶且特别是患有骨转移灶的 人受试对象，
所述方法包括或由施用式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐组成。
任选地，所述方法可包括或还包括施用一种或多种癌综合剂， 优选一种或多种癌综合剂。在所述方法只能够，优选本文中所描 述的骨转移灶。
根据本发明，一种或多种烷化化疗剂优选包括选自下组的一种或 多种化合物：含有铂的化疗剂和/或选自氧氮磷环类组。
根据本发明的一种实施方式，所述乳腺癌和/或骨转移灶是 EGF/EGFR依赖性的。
根据本发明的一种实施方式，所述乳腺癌和/或骨转移灶是 VEGF/VEGFR依赖性的。
根据本发明的一种实施方式，所述乳腺癌和/或其骨转移化的是 HER2依赖性的。
根据本发明的一种实施方式，所述待处理的骨转移灶是乳腺癌， 肺癌和/前列腺癌的骨转移灶。
根据本发明的一种实施方式，所述待处理的骨转移灶是骨转移灶 癌是头颈癌，优选头和颈的鳞状细胞癌(SCCHN)。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，和/或一种或多种癌综合剂如本 文中对于各化合物且优选对于各种癌和/或骨转移灶所描述的量和/或 方案施用。
优选，本文中所描述的乳腺癌还包括在受试对象的其它组织或身 体部分的转移灶。倾向于发展转移灶的受试对象的其它组织或身体部 分的实例是包括但不限于肺、骨、肝、脑、肾、肾上腺、淋巴结(包 括淋巴管癌(lymphangiosis carcinomatosa))、心和皮，更优选 肺、肝、脑、肾、肾上腺、淋巴结(包括淋巴管癌(lymphangiosis carcinomatosa))、心和皮。
根据本发明，一种或多种烷化化疗剂优选包括一种或多种化合物， 其选自下组：含有铂的化合物顺铂、卡铂和奥沙利铂，和/或选自下组： 氧氮磷环类环磷酰胺、异环磷酰胺和曲磷胺。
优选，在本文中所描述的/方法中的使用的癌综合剂 包括选自下组的一种或多种化合物：
i)EGF/EGFR抑制剂，
ii)VEGF/VEGFR抑制剂
iii)细胞生长抑制性生物碱，
iv)细胞毒性抗生素，和
v)抗代谢药，
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
优选，在本文中所描述的/方法中的使用的癌综合剂 包括选自下组的一种或多种化合物：
i)EGF/EGFR抑制剂，其选自抗EGFR生物制剂和化学衍生的化合 物，
ii)细胞生长抑制性生物碱，其选自podophylotoxines、长春花 生物碱、紫杉烷类和喜树碱类，
iii)细胞毒性抗生素，其选自蒽环类，和
iv)抗代谢药，其选自嘧啶拮抗剂和抗叶酸剂，
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
抗EGFR生物制剂在此方面优选选自曲妥珠单抗、西妥昔单抗、 帕尼单抗、扎芦木单抗、尼妥珠单抗和马妥珠单抗；
抗EGFR化学衍化的化合物在此方面优选选自吉非替尼、厄洛替尼 和拉帕替尼；
鬼臼毒素衍生物在此方面优选选自依托泊苷和替尼泊苷；
长春花生物碱在此方面优选选自长春碱、长春新碱、长春地辛和 长春瑞滨；
紫杉烷类在此方面优选选自多西他赛和紫杉醇；喜树碱衍生物在 此方面优选选自伊立替康和托泊替康；
蒽环类在此方面优选选自柔红霉素、多柔比星、表柔比星和伊达 比星；
抗叶酸剂在此方面优选选自甲氨喋呤、雷替曲塞，和培美曲塞；
嘧啶拮抗剂在此方面优选选自5‑氟尿嘧啶、吉西他滨、卡培他滨、 胞嘧啶阿拉伯糖苷和二氟脱氧胞苷；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
更优选，在本文中所描述的/方法中的使用的癌综合 剂包括选自下组的一种或多种化合物：
i)EGF/EGFR抑制剂，其选自下组：西妥昔单抗、帕尼单抗、扎 芦木单抗、尼妥珠单抗和马妥珠单抗和/或选自下组：吉非替尼、厄洛 替尼和拉帕替尼，
ii)细胞生长抑制性生物碱，其选自下组：依托泊苷、长春碱和 替尼泊苷，其选自下组：长春瑞滨、长春新碱和长春地辛，其选自下 组：多西他赛和紫杉醇，和/或选自下组：伊立替康和托泊替康，
iii)细胞毒性抗生素，其选自下组：多柔比星、伊达比星、柔红 霉素、表柔比星和戊柔比星(valrubicin)，和
iv)抗代谢药，其选自下组：5‑氟尿嘧啶、卡培他滨、阿糖胞苷 胞嘧啶和二氟脱氧胞苷和/或选自下组：培美曲塞、甲氨喋呤和雷替曲 塞，
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
优选地，将式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，和/或其制 药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽，施用于受试对象，优选人受试 对象，特别是患者，以每周250mg至12500mg的量，更优选每周500 mg至10000mg的量，甚至更优选每周900mg至9000mg的量，甚至 更优选每周1200mg至7000mg的量和特别是每周2000至6000mg 的量，如每周2500mg至5000mg的量。
优选地，将含铂的化疗剂顺铂、卡铂和奥沙利铂施用于受试对象， 优选人受试对象和特别是患者，以100至1000mg的量以一或多份在 2至4周的时间段内施用。
癌的，至少在最广意义上用化疗剂癌，是一个持久的问 题。因此，化疗剂癌通常包括长时间接受一种或多种各化疗剂。 考虑到大多数化疗剂，当以有效的剂量施用时，对患者的身体是有毒 性的，化疗剂(除非它们表明任何或几乎没有任何急性毒性)通常在 特定的，有限的时间用药，之后一个时间段无各种化疗剂的施用，在 这个时间内，患者的身体可以从所述化疗剂的毒性中恢复。通常，该 方案包括各化疗剂的施用时间段和施用各化疗剂之后的恢复时间 段，该方案被重复一次或多次，优选数次。该种方案通常被本领 域技术人员称为“周期”，每一周期包括各化疗剂的施用时间段和施 用各化疗剂之后的恢复时间段。施用时间段和/或应用化疗后的恢复时 间段的期间通常取决于各化疗剂的性质。据此，不同化疗剂可以有不 同的施用时间段和/或应用化疗后的恢复时间段的期间。因此，不同化 疗剂的周期长度或期间可以不同。通常，周期的长度介于1周和12 周，更优选一周至六周和特别是2至4周。优选地，各化疗剂每个周 期以一定的量的剂量给药，允许理疗师根据患者的状况调整实际的施 用，即每个周期的量是否一次施用或分成两个部分或更多个部分在该 周期的不同时间施用。在组合的环境下包括两种或更多种化疗剂， 通常两种或更多种周期(具有相同或不同长度)同时进行。如果化疗 剂在一个周期以两个或更多个部分施用给患者，每个部分优选在所述 周期的不同一天施用。至于施用的化疗药物的每一种，通常多于一个 周期，优选两个或更多周期，甚至更优选三或更多周期施用给患者， 优选实质地没有间断。通常，不超过24个周期实质地无间断地施用于 患者。约6个周期实质地而无间断地施用于患者对每一施用的化疗药 物对在此描述的许多化疗药物来说是整体上的一个标准。
据此，在此描述的2至4周时间段内，将含铂的化疗剂顺铂，卡 铂和奥沙利铂100至1000mg的量以一种或多种部分施用于患者(在 所述2至4周时间段内)，优选地被认为是一个周期。更优选，时间 段或周期其中含铂的剂在约三周(约21天)里被施用。针对奥沙 利铂，以下的施用也是优选的：奥沙利铂被优选地以50至500mg的 量，以一个部分或多个部分的形式，施用于患者，优选一个部分，在 约二周的时间段内。据此，针对奥沙利铂周期期间优选约二周。
通常，正如本领域中已知的，顺铂可以施用于患者。
优选地，顺铂在一个周期内以50mg至500mg的量施用于患者， 更优选一个周期内80mg至300mg。优选地，施用于患者的顺铂的量 以mg每平方米(患者表面面积)给出，即以mg/m2。据此，顺铂被优 选地施用于患者的量是一个周期内50至150mg/m2，更优选80至120 mg/m2和特别是约100mg/m2。
顺铂的量可以一种或多种部分施用，更优选1至5部分，甚至更 优选的1至3和特别优选一天一部分。通常顺铂以静脉输液的方式施 用。
通常，正如本领域中已知的，卡铂可以施用于患者。 优选地，卡铂一个周期内以200mg至1000mg的量施用于患者，更优 选一个周期内300mg至800mg和特别是一个周期内400至700mg。 甚至更优选地，卡铂以AUC(曲线下面积)方案施用于患者，更特别 地以AUC 4‑8方案(4‑8mg/ml/min)，优选AUC 5‑7方案(5‑7mg/ml/ min)。AUC方案的原则或剂量是本领域中已知的。优选地，在AUC方 案中要施用于患者的量根据本发明使用Calvert式和/或Chatelut式 计算，优选Calvert式。
Calvert式：
卡铂用量(mg)＝AUC x(CrCl(ml/min)+25)；
其中：
AUC＝曲线下的面积((mg/ml x min))
x＝乘以
CrCl＝肌酸酐清除率(各患者的)
Chatelut式：
卡铂剂量(mg)＝AUC(mg/ml x min)x卡铂清除率(ml/min)；
其中：
AUC＝曲线下的面积
用于Chatelut式中的适于评价患者的卡铂清除率的式：
对于雄性＝(0.134x重量)+(218x重量x(1‑0.00457x年 龄)/血清肌酸酐。)
对于雌性＝(0.134x重量)+0.686x(218x重量x(1‑0.00457 x年龄)/血清肌酸酐。)
年龄＝岁数
x＝乘以
重量＝以kg计算的血清肌酸酐＝肌酸酐的血清浓度
卡铂的量可以以一种或多种部分施用，更优选1至5个部分，甚 至更优选的1至3和特别优选一天一部分。通常，卡铂以静脉输液的 方式施用。
通常，正如本领域中已知的，奥沙利铂可以施用于患者。 优选地，奥沙利铂在一个周期内以50mg至500mg的量施用于患者， 更优选一个周期内80mg至300mg。如果一个周期的期间是约三或约 五周，奥沙利铂优选地以100至500mg的量施用于患者。如果一个周 期的期间是约二周，奥沙利铂优选地以50至250mg的量施用于患者。 优选地，施用于患者的奥沙利铂的量以mg每患者表面的平方米给出， 即以mg/m2。据此，奥沙利铂优选地在一个周期内以80至150mg/m2 的量施用于患者，例如一个周期内约130mg/m2，特别是如果周期的期 间是约三或约四周。可选地，奥沙利铂在一个周期内优选地以50至 100mg/m2的量施用于患者，例如在一个周期内约85mg/m2，特别是如 果周期期间是约二周。
奥沙利铂的量可以以一种或多种部分施用，更优选1至5个部分， 甚至更优选的1至3和特别优选一天一部分。通常奥沙利铂以静脉输 液的方式施用。
针对以上和/或以下所给出的癌综合剂的剂量和优选标准施用 时间表优选本领域中已知的。
甚至更优选，癌综合剂可以以本领域中对各化合物或化合物类 别的已知的形式和方法或方式施用于患者，例如本文中所描述的或如 描述于此处引用的文献的。
抗雌激素药，优选抗雌激素药选自下组：阿莫昔芬，阿佐昔芬，巴 多昔芬，拉索昔芬，奥美昔芬，雷洛昔芬，他莫昔芬，托瑞米芬和氟 维司，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领 域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者， 或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描 述于此处引用的文献的。
优选，他莫昔芬和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选他莫昔芬，以一周期内100mg至1000mg的量施用于受试对象， 更优选一周期内300mg至700mg。优选，他莫昔芬和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选他莫昔芬的量是，施用于受试对 象以每天剂量约10至30mg(flat)和特别是约20mg(flat)周期内 约每天或约每隔一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天) 和特别是约三周(约21天)。优选，他莫昔芬和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，优选他莫昔芬施用于受试对象口服(p.o.)。 特别优选，他莫昔芬施用于受试对象口服(p.o.)以周期内约每天约 20mg每天，优选约隔一天，更优选在约3周的周期内的约每天的每天。
优选，氟维司和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选氟维司，施用于受试对象以一个周期或一个月内100mg至1000 mg的量，更优选一个周期或一个月内200mg至600mg和特别是250 至500mg。优选，氟维司和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和 /或盐，优选氟维司的量是，在周期内施用于受试对象一次或在该月 内以200mg至600mg和特别是250至500mg(flat)，优选在所述周 期或月的第一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和月优 选包括29至31天.优选氟维司口服或注射施用，优选经肌肉内 (i.m.)。优选，氟维司和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，优选氟维司，经肌肉内(i.m.)施用。特别优选，氟维司经 肌肉内(i.m.)施用以一天250至500mg的量，优选第一天，每约29 天。
芳香酶抑制剂，优选芳香酶抑制剂选自下组：阿那曲唑(瑞宁得)， 来曲唑(弗隆)，依西美坦(阿诺新)，伏氯唑(Rivizor)，福美坦 (兰他隆)和法倔唑(Afema)，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物 和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方 法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本 文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，依西美坦和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选依西美坦，施用于受试对象以周期内100mg至1000mg的量，更 优选周期内300mg至700mg。优选，依西美坦和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，优选依西美坦的量是，周期内以约每天15至 35mg(flat)的剂量和特别是约每天约25mg(flat)或约每隔一天 施用于受试对象。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别 是of约三周(约21天)。优选，依西美坦和/或其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐，优选依西美坦，施用于受试对象口服(p.o.)。 特别优选，依西美坦施用于受试对象口服(p.o.)以约每天约25mg 每天，优选周期内约每天，更优选在约3周的周期内每天约每天(per day about every day)。
优选，阿那曲唑和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选阿那曲唑，以周期内10mg至50mg的量施用于受试对象，更优选 周期内15mg至40mg。优选，阿那曲唑和/或其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐，优选阿那曲唑的量是，施用于受试对象以周期内约 每天剂量0.5至2mg(flat)和特别是约1mg(flat)约每天或约每 隔一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是约三周 (约21天)。优选，阿那曲唑和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物 和/或盐，优选阿那曲唑，施用于受试对象口服(p.o.)。特别优选， 阿那曲唑施用于受试对象口服(p.o.)以约1mg每天约每天，优选周 期内约每天，更优选约3周的周期内每天约每天。
优选，来曲唑和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优 选来曲唑，施用于受试对象以周期内25mg至120mg的量，更优选周 期内35mg至90mg.优选，来曲唑和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，优选来曲唑的量是，施用于受试对象以约每天剂量1.5 至3.5mg(flat)和特别是周期内约2.5mg(flat)约每天或约每隔 一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是约三周(约 21天)。优选，来曲唑和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选来曲唑，施用于受试对象口服(p.o.)。特别优选，来曲唑施用于 受试对象口服(p.o.)以约每天约2.5mg每天，优选周期内约每天， 更优选约3周的周期内每天约每天。
GnRH analoga，优选GnRH analoga选自下组：亮丙瑞林(Eligard，Enantone)、戈舍瑞林(Zoladex)和布舍瑞林，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，戈舍瑞林和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选戈舍瑞林，以周期内或月内1mg至5mg的量施用于受试对象，更 优选周期内或月内2.5mg至4.5mg和特别是约3.6mg。优选，戈舍瑞 林和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选戈舍瑞林的量 是，周期内施用于受试对象一次或月内以2.5mg至4.5mg和特别是约 3.6mg(flat)，优选所述周期或月的第一天。周期在此方面优选包括 2至4周(14至28天)和月优选包括29至31天。戈舍瑞林优选地口服 或注射施用，优选皮下地(s.c.)。优选，戈舍瑞林和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选戈舍瑞林，皮下施用(s.c.)。 特别优选，戈舍瑞林以一天约3.6mg的量皮下施用(s.c.)，优选第 一天，每约29天。
优选，亮丙瑞林和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选醋酸亮丙瑞林，施用于受试对象以70至90天内5mg至15mg的 量，更优选70至90天内9mg至14mg和特别是约11.3mg.优选，亮 丙瑞林和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选醋酸亮丙 瑞林的量是，以10mg至12mg和特别是约11.3mg(flat)的量，70 至90天内施用于受试对象一次，优选所述70至90天和更优选80至 90天的第一天。亮丙瑞林或醋酸亮丙瑞林优选口服或注射施用，优选皮 下地(s.c.)或经肌肉内(i.m.)。优选，亮丙瑞林和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选醋酸亮丙瑞林，经皮下(s.c.)或经 肌肉内(i.m.)施用。特别优选，醋酸亮丙瑞林以一天约11.3mg经肌 肉内(i.m.)或皮下地(s.c.)施用，优选第一天，每约84天。
双膦酸盐，优选双膦酸盐选自下组：阿莫昔芬，阿佐昔芬，巴多昔 芬，拉索昔芬，奥美昔芬，雷洛昔芬，他莫昔芬，托瑞米芬和氟维司 ，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中 对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可 以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于 此处引用的文献的。
优选，氯膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选氯膦酸盐，施用于受试对象以一个周期内15000mg至50000mg的 量，更优选一个周期内25000mg至40000mg。优选，氯膦酸盐和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选氯膦酸盐的量是，以周 期内约每天剂量1000至2500mg(flat)和特别是约每天约或约每隔一 天1600mg(flat)的量施用于受试对象。周期在此方面优选包括2至 4周(14至28天)和特别是约三周(约21天)。优选，氯膦酸盐和/或 其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选氯膦酸盐，施用于受 试对象口服(p.o.)。特别优选，氯膦酸盐施用于受试对象口服(p.o.) 以周期内约每天约1600mg每天的量，优选约每天更优选约3或约4周 的周期内每天约每天。
优选，唑来膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选唑来膦酸盐，施用于受试对象以一个周期内1mg至10mg的量， 更优选一个周期内2mg至6mg.优选，唑来膦酸盐和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选唑来膦酸盐的量是，施用于受试对 象一次或两次，优选一次，优选一天或二天(优选一天)以2mg至6mg (flat)的量和特别是约4mg(flat)，在该周期内，优选所述周期的 第一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是of约 三周(约21天)。优选，唑来膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐，优选唑来膦酸盐，经口服(p.o.)或注射施用于受试对 象，更优选经静脉内(i.v.)。特别优选，唑来膦酸盐以一天约4mg 每天的量经静脉内(i.v.)施用于受试对象，优选周期内一天，更优选 约3或4周的周期内一天，优选所述周期的第一天。
优选，伊班膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选伊班膦酸盐，施用于受试对象以周期内2mg至12mg的量，更优 选一个周期内4mg至8mg.优选，伊班膦酸盐和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，优选伊班膦酸盐的量是，施用于受试对象一 次或两次，优选一次，一天或二天(优选一天)以4mg至8mg(flat) 的量和特别是约6mg(flat)，在该周期内，优选所述周期的第一天。 周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是约三周(约21 天)。优选，伊班膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或 盐，优选伊班膦酸盐，经口服(p.o.)或注射施用于受试对象，更优选经 静脉内(i.v.)。特别优选，伊班膦酸盐以一天约6mg每天的量，经 静脉内(i.v.)施用于受试对象，优选周期内一天，更优选约3或4周 周期内的一天，优选所述周期的第一天。伊班膦酸盐和/或其制药可接 受的衍生物、溶剂合物和/或盐是乳腺癌转移灶特别优选的。
优选，帕米膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选帕米膦酸盐，施用于受试对象以一个周期内70mg至120mg的量， 更优选一个周期内80mg至100mg。优选，帕米膦酸盐和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选帕米膦酸盐的量，施用于受试 对象一次或两次，优选一次，一天或二天(优选一天)以80mg至100mg (flat)的量和特别是约90mg(flat)，在该周期内，优选所述周期 的第一天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是约三 周(约21天)。优选，帕米膦酸盐和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，优选帕米膦酸盐，经口服(p.o.)或注射施用于受试对象， 更优选经静脉内(i.v.)。特别优选，帕米膦酸盐经静脉内(i.v.)以 一天约90mg的量施用于受试对象，优选周期内一天，更优选约3或4 周的周期内一天，优选所述周期的第一天。
The RANK/RANKL/OPG调节剂，优选RANK/RANKL/OPG调制剂地舒单 抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中对 各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可以 来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于此 处引用的文献的。
优选，地舒单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选地舒单抗的量是，以一个周期内30mg至200mg的量施用于受试对 象，更优选一个周期内40mg至150mg。优选，地舒单抗和/或其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选地舒单抗的量是，施用于受 试对象一次或两次，优选一天或二天(优选一天)一次以40mg至150mg (flat)的量和特别是60‑120mg(flat)，在该周期内，优选所述周 期的第一天。A cycle在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别 是of约三周(约21天)。优选，地舒单抗和/或其制药可接受的衍生 物、溶剂合物和/或盐，优选地舒单抗，经口服(p.o.)或注射施用于受 试对象，更优选经皮下(s.c.)。特别优选，地舒单抗经皮下(s.c.)以 一天约60至120mg每天的量施用于受试对象，优选周期内一天，更 优选约3或4周的周期内一天，优选所述周期的第一天。
The VEGF/VEGFR抑制剂，优选VEGF/VEGFR抑制剂选自下组：贝伐珠单抗(rhuMAb‑VEGF，Avastin)，索拉非尼(Nexavar)，舒尼替尼(Sutent)，凡德他尼(ZD6474，Zactima和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，贝伐珠单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选贝伐珠单抗，以一个周期内750mg至2000mg的量施用于受试对 象，更优选一个周期内900mg至1500mg。优选，贝伐珠单抗和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选贝伐珠单抗的量是，施 用于受试对象一次或两次，优选一次，一天或二天(优选一天)以5mg/kg 至25mg/kg的量施用于受试对象；更优选10至20mg/kg和特别是约 15mg/kg，在该周期内，优选所述周期的第一天。周期在此方面优选包 括2至4周(14至28天)和特别是约三周(约21天)。优选，贝伐珠 单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选贝伐珠单抗， 口服(p.o.)或注射施用于受试对象，更优选经静脉内(i.v.)。特别 优选，贝伐珠单抗经静脉内(i.v.)以一天约15mg/kg每天的量施用 于受试对象，优选周期内，更优选约3周的周期内一，优选所述周期的 第一天。
The EGF/EGFR抑制剂，优选EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗(赫赛汀)，_西妥昔单抗，帕尼单抗，扎芦木单抗，尼妥珠单抗，马妥珠单抗，吉非替尼，厄洛替尼和拉帕替尼，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，曲妥珠单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选曲妥珠单抗，在一个周期内以350mg至2000mg的量施用于受试对 象，更优选一个周期内500mg至1600mg.优选，曲妥珠单抗和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选曲妥珠单抗的量是，施 用于受试对象一次或两次，优选一次，一天或二天(优选一天)，以1 mg/kg至10mg/kg的量施用于受试对象；更优选1至10mg/kg和特别是 约6或8mg/kg，在该周期内，优选所述周期的第一天。周期在此方面 优选包括2至4周(14至28天)和特别是约三周(约21天)。
可选地，优选，曲妥珠单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合 物和/或盐，优选曲妥珠单抗的量是，每周一次优选以1mg/kg至10 mg/kg的量施用于受试对象，更优选每周一次2至6mg/kg和特别是约 2或8mg/kg，该周期内的每周，优选所述周的第一天。优选，曲妥珠 单抗和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选曲妥珠单抗， 经口服(p.o.)或注射施用于受试对象，更优选经静脉内(i.v.)。特 别优选，曲妥珠单抗经静脉内(i.v.)以一天约4，6或8mg/kg每天 的量施用于受试对象，优选周期内一天，更优选约3周的周期内一天， 优选所述周期的第一天。可选地，优选，曲妥珠单抗以每周一天约2或 约4mg/kg的量经静脉内(i.v.)施用于受试对象，优选所述星期内一 天，更优选约3周的周期内一天，优选所述周期的每周。
优选，拉帕替尼和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选拉帕替尼，一个周期内以15000mg至50000mg的量施用于受试对 象，更优选一个周期内20000mg至35000mg.优选，拉帕替尼和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选拉帕替尼的量是，以约每 天剂量900至2000mg(flat)施用于受试对象和特别是该周期内约每 天或约每隔一天约1250mg(flat)。周期在此方面优选包括2至4周(14 至28天)和特别是约三周(约21天)。优选，拉帕替尼和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选拉帕替尼，经口服(p.o.)施用 于受试对象。特别优选，拉帕替尼经口服(p.o.)以约每天1250mg每 天的量施用于受试对象，优选周期内约每天，更优选约3或约4周的周 期内约每天。
PARP抑制剂，优选PARP抑制剂选自下组：奥拉帕利和Iniparib (BSI‑201)，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以 本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于 患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或 如描述于此处引用的文献的。
优选，奥拉帕利和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选奥拉帕利，一个周期内以1500mg至40000mg的量施用于受试对象， 更优选一个周期内3000mg至25000mg.优选，奥拉帕利和/或其制药 可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选奥拉帕利的量是，以约每天 剂量100至900mg(flat)施用于受试对象和特别是约100mg或约 400mg(flat)，优选一天一次或一天两次，更优选一天两次，该周期 内约每天。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天)和特别是约 三周(约21天)。优选，奥拉帕利和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，优选奥拉帕利，经口服(p.o.)施用于受试对象。特别 优选，奥拉帕利经口服(p.o.)以约每天两次一天约100或约400mg 施用于受试对象，优选周期内约每天，更优选约3或约4周周期内每天 约每天。
优选，Iniparib(BSI‑201)和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合 物和/或盐，优选Iniparib(BSI‑201)，一个周期内以800mg至3000mg 的量施用于受试对象，更优选一个周期内1000mg至2000mg.优选， Iniparib(BSI‑201)和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐， 优选Iniparib(BSI‑201)的量是，施用于受试对象以3至10mg/kg的 剂量和特别是该周期内约3至5天每天约5.6mg/kg，更优选在所述周 期内4天和特别是所述周期第1，4，8和11天。周期在此方面优选包 括2至4周(14至28天)和特别是约三周(约21天)。优选，Iniparib (BSI‑201)和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，优选 Iniparib(BSI‑201)，经口服(p.o.)或注射施用于受试对象，更优选经 静脉内(i.v.)。特别优选，Iniparib(BSI‑201)经静脉内(i.v.) 施用于受试对象以每天约5.6mg/kg的量在周期内第1，4，8和11天， 更优选约3周的周期。
细胞毒性抗生素，优选细胞毒性抗生素选自下组：柔红霉素，多柔 比星，表柔比星，伊达比星，米托蒽醌，放线菌素‑D，博来霉素和丝 裂霉素‑C，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本 领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或方式施用于患 者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中所描述的或如 描述于此处引用的文献的。
优选，表柔比星和/或制药可接受的衍生物、其溶剂合物盐，优选 表柔比星，经静脉内或口服，更优选经静脉内，以50至150mg/m2的 量施用于受试对象，更优选75至135mg/m2，优选每三或四周，其优选 根据本发明形成周期。可选地，优选，表柔比星和/或制药可接受的衍 生物、其溶剂合物盐，优选表柔比星，经静脉内或口服，更优选经静脉 内，以10至50mg/m2的量施用于受试对象，更优选20至30mg/m2，每 周，优选周期内每周。周期在此方面优选包括2至4周(14至28天) 和特别是约三周(约21天)或约四周(约28天)。
优选，米托蒽醌和/或制药可接受的衍生物、其溶剂合物盐，优选 米托蒽醌，经静脉内或口服，更优选经静脉内以5至25mg/m2的量施 用于受试对象，更优选12至14mg/m2，优选每三或四周，其优选根据 本发明形成周期。
细胞生长抑制性生物碱，优选细胞生长抑制性生物碱选自下组：依 托泊苷，替尼泊苷，长春碱，长春新碱，长春地辛，长春瑞滨，多西 他赛，紫杉醇，伊立替康，托泊替康和伊沙匹隆，和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类 别的已知的形式和方法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不 适当的实验，例如本文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，伊沙匹隆和/或制药可接受的衍生物、其溶剂合物盐，优选 伊沙匹隆，经静脉内或口服，更优选经静脉内，以20至60mg/m2的量施 用于受试对象，更优选约40mg/m2，优选每三或四周和更优选3周，其 优选根据本发明形成周期。
抗代谢药，优选抗代谢药选自下组：吉西他滨，甲氨喋呤，雷替曲 塞，培美曲塞，6‑巯嘌呤，6‑硫鸟嘌呤，2’‑脱氧肋间型霉素，磷酸氟 达拉滨，2‑氯脱氧腺苷，5‑氟尿嘧啶，卡培他滨，胞嘧啶阿拉伯糖苷， 二氟脱氧胞苷和羟基脲，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或 盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式和方法或 方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例如本文中 所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，卡培他滨和/或制药可接受的衍生物、其溶剂合物盐，优选 卡培他滨，经口服以2000至3000mg/m2的量施用于受试对象，更优选约 2500mg/m2，优选三或四周和更优选3周的1至14天的每天，和甚至更 优选每三周1至14天的每天，其优选根据本发明形成周期。
烷化化疗剂，优选烷化化疗剂选自下组：顺铂，卡铂，奥沙利铂， 环磷酰胺，异环磷酰胺和曲磷胺，和/或其制药可接受的衍生物、溶剂 合物和/或盐，可以以本领域中对各化合物或化合物类别的已知的形式 和方法或方式施用于患者，或可以来源于本领域而无不适当的实验，例 如本文中所描述的或如描述于此处引用的文献的。
优选，环磷酰胺和/或制药可接受的衍生物、其溶剂合物盐，优选 环磷酰胺，经口服以80至120mg/m2的量施用于受试对象，更优选约100 mg/m2，优选三或四周和更优选3周内第1至14天的每天，其优选根据 本发明形成周期。可选地，优选，环磷酰胺和/或制药可接受的衍生物、 其溶剂合物盐，优选环磷酰胺，经口服以500至700mg/m2的量施用于受 试对象，更优选约600mg/m2，优选三或四周内第1和第8天和更优选 每三或四周的第1和第8天，其优选根据本发明形成周期。
通常，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，the其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，可以 施用于患者，如本领域中已知的。
优选，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，在一周的时 间段内，以250mg至12500mg的量施用于患者，更优选450至10500mg。 这也被引述为关于环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的每周施用。优选， 在约三周的时间段内，每周施用所给定的量发生两次或多次，优选二或 三次。优选，在约四周的时间段内，每周施用所给定的量发生两次或多 次，优选二、三或四次。优选，每周施用环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val) 发生在该周期的两周或更多周内或与下列有关的周期内
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
甚至更优选，关于环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的每周施用发 生在该周期内的每周或与下列有关的周期内
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
基于环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，将在每周施用中施用的环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的量每周可以是相同或不 同的。
以下剂量或方案在此方面是优选的：
(A)环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)优选地在该 周期内每周以约500mg或约2000mg每周一次的量施用于受试对象， 优选人受试对象和特别是患者，或与下列有关的周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
(B)环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)优选在该周期 内每周以约500mg或约2000mg的量每周两次施用于受试对象，优选 人受试对象和特别是患者周或与下列有关的周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
(C)环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、 溶剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)优选在一个 第一周连续五天的每天以约500mg的量和该周期内的每一其他周的一 天以约500mg的量施用于受试对象，优选人受试对象和特别是患者， 或与下列有关的周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
(D)可选地，优选，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐和优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)优选在一个第一周连续三天的每天以约 2000mg的量和该周期内的每一其他周的一天以约2000mg的量施用于 受试对象，优选人受试对象和特别是患者或与下列有关的周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
(E)优选，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)在该 周期内的每周以每周一次约2000mg的量施用于受试对象，优选人受试 对象和特别是患者或与下列有关的周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法。
优选，基于以下的多于一个周期
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法，
施用于患者。更优选2至12周期和特别是约6个周期施用于受试 对象，优选人受试对象和特别是患者，优选包括方案(A)至(E)的一 种或多种。
甚至更优选，基于一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂和 特别是基于一种或多种癌化疗剂的多于一个周期，施用于受试对象，优 选人受试对象和特别是患者。更优选2至12个周期和特别是约6个周 期施用于患者，优选包括方案(A)至(E)的一种或多种。
优选，多于一个周期包括仅一种方案选自(A)至(E)，即选自(A) 至(E)的同一个方案施用于受试对象，优选在该周期内每一个周期的 人受试对象和特别是患者。更优选选自(A)至(E)的同一个方案施用 于在约6个周期中的每一个周期的患者。
可选地，优选，多于一个周期包括两种或更多种方案选自(A)至
(E)，即以不同的周期选自(A)至(E)的不同方案施用于患者。
优选，其中多于一个周期的病例基于
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法
施用于受试对象，优选人受试对象和特别是患者，联合一种或多种 剂量或方案(A)至(E)还或优选的在此方面：
(F)方案(C)施用于受试对象，优选人受试对象和特别是患者第 一个周期，随后施用方案(A)进行1至11个周期和特别是约5个周期。 优选，在方案(A)中，每周施用包括约500mg。
(G)方案(D)施用于受试对象，优选人受试对象和特别是患者第 一个周期，随后施用方案(A)进行1至11个周期和特别是约5个周期。 优选，在方案(A)中，每周施用包括约2000mg。
优选在此方面和特别是基于方案(A)至(G)的一种或多种，一个 周期中，优选每个周期，约三周(约21天)或约四周(约28天)，更优 选约三周(约21天)。
然而，由于环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)极低 的毒性，它还可以施用于受试对象，优选人受试对象和特别是患者在 该个周期之外基于
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法，
优选剂量或方案如上所述和/或如下所述。这作为维持疗法是特别 有利的，该疗法包含或包括，优选包括施用环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐和优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)一或多个月，例如直至 24个月，甚至基本上无中断。
顺铂，卡铂，奥沙利铂，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，西妥 昔单抗，马妥珠单抗，多柔比星，伊立替康，长春新碱，cyclophamide， 吉西他滨，紫杉醇，多西他赛，培美曲塞和/或5‑氟尿嘧啶典型地以静 脉内输液来施用。
依托泊苷，环磷酰胺和长春瑞滨典型地作为口服或静脉内输液施 用。
然而，其它施用形式可以根据本发明一般性地施用，如果可以利用的。
通常，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐和/或一种或多种癌综合剂或其他癌综 合剂，更优选一种或多种癌化疗剂，可以以如本领域中对各化合物 已知的量和/或方案施用。
优选，式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受 的衍生物、溶剂合物和/或盐和/或一种或多种癌综合剂或其他癌综 合剂，更优选一种或多种癌化疗剂，以上述和/或下述对各化合物 的描述的量和/或方案施用。
烷化化疗剂优选选自：
氧氮磷环类，更优选选自氧氮磷环类环磷酰胺，异环磷酰胺和曲 磷胺；
铂衍生物，更优选选自铂衍生物顺铂，卡铂和奥沙利铂；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
细胞毒性抗生素优选选自：
蒽环类，更优选选自蒽环类柔红霉素，多柔比星，表柔比星和伊达 比星；
蒽二酮类，更优选米托蒽醌，和
其它，优选选自放线菌素‑D，博来霉素和丝裂霉素‑C；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
细胞生长抑制性生物碱优选选自：
鬼臼毒素衍生物，更优选选自鬼臼毒素‑衍生物依托泊苷和替尼泊 苷；
长春花生物碱，更优选选自长春花生物碱长春碱，长春新碱，长春 地辛和长春瑞滨；
紫杉烷类，更优选选自紫杉烷类多西他赛和紫杉醇；和
喜树碱衍生物，更优选选自喜树碱衍生物伊立替康和托泊替康；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
优选，含有铂的化疗剂选自下组：顺铂，卡铂和奥沙利铂，更优选 顺铂和卡铂，
ii)氧氮磷环类是环磷酰胺，
iii)细胞生长抑制性生物碱选自下组：podophylotoxines、长春 花生物碱和喜树碱类，和
iv)细胞毒性抗生素选自蒽环类，
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
鬼臼毒素衍生物优选选自依托泊苷和替尼泊苷；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
长春花生物碱优选选自长春碱，长春新碱，长春地辛和长春瑞滨；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
喜树碱衍生物优选选自伊立替康和托泊替康；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
蒽环类优选选自柔红霉素，多柔比星，表柔比星和伊达比星；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
根据一种实施方式，细胞生长抑制性生物碱选自下组：依托泊苷， 伊立替康和长春新碱，优选依托泊苷，和/或细胞毒性抗生素选自下组： 多柔比星和伊达比星，优选多柔比星；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或其溶剂合物。
通常，依托泊苷，伊立替康，长春新碱，多柔比星和伊达比星可以 施用于患者，如本领域中已知的。
优选，依托泊苷以300mg至1000mg的量施用于患者，更优选500 至900mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段内，其时间段 优选被认为一个周期。更优选，施用于患者的依托泊苷的量(mg)按每 平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选依托泊苷以200mg/m2 至600mg/m2的量施用于患者，更优选250mg/m2至450mg/m2，例如2 至4周的时间段内以约300mg/m2，和优选约三周的时间段内，其时间段 优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的依托泊苷的量分为三 个大约相同的部分，在不同的三天施用于患者，优选连续的三天和更优 选基于依托泊苷的一个周期开始的连续三天。特别优选，依托泊苷以每 天约100mg/m2的量在包含约21天的周期的第1，2和3天施用于患者。 优选，2至12个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期施用于 基于依托泊苷患者，优选基本上无中断。以上描述的基于依托泊苷的整 个过程/方案可以重复一次或多次，优选1至12次和特别是2至6次， 例如约5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
优选，长春新碱以1mg至50mg的量施用于患者，更优选2至10mg， 在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段内，其时间段优选被认为 一个周期。更优选，施用于患者的长春新碱的量(mg)按每平方米(患 者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选施用于患者的长春新碱的量是 1mg/m2至10mg/m2，更优选1mg/m2至2mg/m2，例如约1.4mg/m2的量， 2至4周的时间段内和优选约三周的时间段内，其时间段优选被认为一 个周期。特别优选，长春新碱施用于患者的量是约1.4mg/m2每天，优 选包含约21天的周期的第1天.优选，2至12个周期，更优选4至8 个周期和特别是约6个周期施用于基于长春新碱的患者，优选基本上无 中断。上述描述的基于长春新碱的整个过程/方案可以重复一周或多 周，优选1至12次和特别是2至6次，例如约5次，优选每次过程/ 方案重复时中间有中断。
优选，多柔比星施用于患者的量是20mg至300mg，更优选40至 200mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选 被认为一个周期。更优选，施用于患者的多柔比星的量(mg)按每平方 米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选多柔比星施用于患者的 量是30mg/m2至100mg/m2，更优选40mg/m2至60mg/m2，例如约50mg/m2 的量，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选被 认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的多柔比星的量在一天施用于 患者，优选基于多柔比星的一个周期的开始时。特别优选，多柔比星在 约21天的周期的第一天以约40mg/m2至60mg/m2每天的量施用于患者。 优选，2至12个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期将多柔 比星施用于患者，优选基本上无中断。上述的基于多柔比星的整个过程 /方案可以重复一周或多周，优选1至12次和特别是2至6次，例如约 5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
优选，伊立替康施用于患者的量是20mg至300mg，更优选40至 200mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选 被认为一个周期。更优选，施用于患者的伊立替康的量(mg)按每平方 米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选施用于患者的伊立替康 的量是30mg/m2至100mg/m2，更优选50mg/m2至70mg/m2，例如以约 60mg/m2的量，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间 段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的伊立替康在一天施 用于患者，优选基于伊立替康的一个周期的开始时。特别优选，伊立替 康在约21天的周期的第一天以约40mg/m2至60mg/m2每天的量施用于 患者。优选，2至12个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期 将伊立替康施用于患者，优选基本上无中断。上述的基于伊立替康的整 个过程/方案可以重复一周或多周，优选1至12次和特别是2至6次，例 如约5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
优选，将顺铂，卡铂，奥沙利铂，依托泊苷，长春碱和替尼泊苷施 用于患者，如本领域中已知的和甚至更优选上述和/或下述。更优选， 施用于患者的顺铂，卡铂和/或奥沙利铂，如此处描述的。
根据一种实施方式，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)优选地以800 mg至8000mg每周或1500mg至7000mg每周的量施用于受试对象， 优选人受试对象和特别是患者。
环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)和/或其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐，更优选地以每周两次至每周四次的施用图解施用于受 试对象，优选人受试对象和特别是患者，优选每施用包含约500mg或 约2000mg。
根据一种实施方式，顺铂以一个周期内50mg至500mg的量施用 于患者，更优选一个周期内80mg至300mg。优选，顺铂施用于患者的 量(mg)按每平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，顺铂优选地 一个周期内以50至150mg/m2的量施用于患者，更优选80至120mg/m2 和特别是约100mg/m2。
顺铂的量可以以一种或多种部分施用，更优选1至5部分，甚至更 优选的1至3和特别优选一天一部分。通常，顺铂以静脉内输液的方式 施用。
其它特别优选的本发明主题涉及使用环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/ 或盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，用于生产制造上述方 法中的药物。
根据一种实施方式，EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗，西妥 昔单抗，帕尼单抗，扎芦木单抗，尼妥珠单抗和马妥珠单抗和/或选自 下组：吉非替尼，厄洛替尼和拉帕替尼，细胞生长抑制性生物碱选自下 组：长春瑞滨和长春新碱和/或选自下组：伊沙匹隆，紫杉醇和多西他 赛，和抗代谢物质药选自下组：吉西他滨，卡培他滨，5‑FU和甲氨喋呤， 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐。
通常，EGF/EGFR抑制剂选自下组：曲妥珠单抗，西妥昔单抗，帕尼 单抗，扎芦木单抗，尼妥珠单抗和马妥珠单抗和/或选自下组：吉非替 尼，厄洛替尼和拉帕替尼，可以施用于患者，如本领域中已知的。
优选，西妥昔单抗以500mg至3000mg的量施用于患者，更优选 800至2500mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段或约四周， 其时间段优选被认为一个周期。更优选，西妥昔单抗施用于患者的量 (mg)按每平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选施用于 患者的西妥昔单抗的量是500mg/m2至2000mg/m2，更优选750mg/m2 至1500mg/m2，和特别是750mg/m2至1000mg/m2，例如以约750mg/m2， 约1000mg/m2，约900mg/m2，约1000mg/m2，约1150mg/m2或约1600 mg/m2的量，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段或约四周，更 优选三周，其时间段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的 西妥昔单抗的量被分成三或四部分在三或四个不同天施用于患者，优选 选自三或四个连续周内一周一天和更优选三或四个连续周的第一天，优 选以基于西妥昔单抗的一个周期的第一周的第一天开始。特别优选，西 妥昔单抗施用于患者的量分为包括或包含200至500mg/m2的三或四部分 在三或四个不同天施用于患者，优选选自三或四个连续周一周内的一天 和更优选三或四个连续周的每个第一天，优选以基于西妥昔单抗的一个 周期的第一周的第一天开始。特别优选该方案中，西妥昔单抗施用于患 者的量是，三或四个连续周的第一周的第一天，以约250mg/m2或约400 mg/m2每天的量，随后在包含约三周(约21天)或包含约四周(约28 天)的周期中的连续接下来的两周或三周的一天中施用约250mg/m2每 天的量。优选，周期以第一周的第一天首次施用开始。
甚至更优选，西妥昔单抗在包含约21天的周期中是以约400mg/m2 每天的量在第1天和以约250mg/m2每天的量在第8天和第15天施用于 患者。
可选地，西妥昔单抗施用于患者的量在第1，8和15天是约250 mg/m2每天。
优选，马妥珠单抗施用于患者的量是500mg至3000mg，更优选 800至2500mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段或约四周 周，其时间段优选被认为一个周期。更优选，马妥珠单抗施用于患者的 量(mg)按每平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选马妥 珠单抗施用于患者的量是500mg/m2至2000mg/m2，更优选750mg/m2 至1750mg/m2，和特别是800mg/m2至1600mg/m2，例如以约600mg/m2， 约800mg/m2，约1000mg/m2，约1200mg/m2或约1600mg/m2的量，在2 至4周的时间段内和优选约三周的时间段或约四周，更优选三周，其时 间段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的马妥珠单抗的量 分成二或三个部分在二或三个不同天施用于患者，优选选自二或三个连 续周的每周内一天和更优选二或三个连续周的每个第一天，优选以基于 马妥珠单抗的一个周期的第一周内的第一天开始，或总量在约三周或约 四周的时间段内所述时间段的第一周的一天施用，优选所述第一周的第 一天。特别优选，马妥珠单抗施用于患者的量分成包括或包含600至 1000mg/m2的两部分，例如约800mg/m2，在两个不同天施用于患者， 优选选自二个连续周一周内一天(第一周内的一天和第二周内的一天) 和更优选两个连续周的每个第一天，优选以基于马妥珠单抗的一个周期 的第一周的第一天开始。可选地，优选马妥珠单抗在三或四个连续周第 一周的第一天以约1600mg/m2每天的量施用于患者。因此，基于马妥珠 单抗的周期优选包括约三周(约21天)或约四周(约28天)，更优选约 三周(约21天)。优选，周期以第一周第一天的首次施用开始。
甚至更优选，马妥珠单抗在包含约21天的周期中第1和第8天以 约800mg/m2每天的量施用于患者。
可选地，更优选，马妥珠单抗在包含约21天的周期中第1天以1600 mg/m2的量施用于患者。
通常，细胞生长抑制性生物碱，特别是细胞生长抑制性生物碱选自 下组：长春瑞滨，长春新碱，紫杉醇和多西他赛，可以施用于患者，如 本领域中已知的。
优选，长春瑞滨施用于患者的量是25mg至250mg，更优选50至 150mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选 被认为一个周期。更优选，施用于患者长春瑞滨的量(mg)按每平方米 (患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选长春瑞滨施用于患者的量 是20mg/m2至100mg/m2，更优选40mg/m2至60mg/m2，例如以约25mg/m2 的量，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选被 认为一个周期。甚至更优选，施用于患者长春瑞滨的量被分为两个约相 等的部分在二不同天施用于患者，优选第一周内一天和第二周内一天， 优选第一周的第一天和第二周的第一天，例如基于长春瑞滨的一个周 期的第一天和第八天。特别优选，长春瑞滨在包含约21天的周期中的 第一天和第八天以约25mg/m2的量每天施用于患者。优选，基于长春 瑞滨的2至12个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期施用 于患者，优选基本上无中断。上述基于长春瑞滨的整个过程/方案可以 重复一次或多次，优选1至12次和特别是2至6次，例如约5次，优 选每次过程/方案重复时中间有中断。
优选，多西他赛施用于患者的量是50mg至500mg，更优选100 至250mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优 选被认为一个周期。更优选，多西他赛施用于患者的量(mg)按每平方 米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选多西他赛施用于患者的 量是25mg/m2至150mg/m2，更优选50mg/m2至100mg/m2，例如以约 75mg/m2，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优选 被认为一个周期。甚至更优选，在一天施用于患者的多西他赛的量，优 选第一周内第一天，更优选基于多西他赛的一个周期的第一周的第一 天。特别优选，多西他赛在包含约21天的周期的第一天以约75mg/m2 每天的量施用于患者。优选，基于多西他赛的2至12个周期，更优选4 至8个周期和特别是约6个周期施用于患者，优选基本上无中断。上述 基于多西他赛的整个过程/方案可以重复一次或多次，优选1至12次和 特别是2至6次，例如约5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
优选，紫杉醇施用于患者的量是100mg至1000mg，更优选200 至800mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段或约四周，其 时间段优选被认为一个周期。更优选，紫杉醇施用于患者的量(mg)按 每平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选紫杉醇施用于患 者的量是100mg/m2至500mg/m2，更优选120mg/m2至350mg/m2，例 如以约135mg/m2，约150mg/m2，约175mg/m2，约250mg/m2，约270 mg/m2或约300mg/m2的量，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间 段或约四周，其时间段优选被认为一个周期。甚至更优选，紫杉醇施用 于患者的量在一天施用，优选第一周的第一天，更优选基于紫杉醇的一 个周期的第一周的第一天。
可选地，和还优选，施用于患者的紫杉醇的量分成三份约等的部分 在三不同天施用于患者，优选选自三个连续周的每周内的一天和更优选 三个连续周的第一天，优选以基于紫杉醇的一个周期的第一周的第一天 开始。特别优选该方案中，紫杉醇施用于患者的量是，在包含约三周(约 28天)的三个连续周的第一天以80mg/m2至100mg/m2每天的量，优选 在约四周的周期的第一周的第一天开始施用，和以第四周而无施用结束 周期。
特别优选，紫杉醇施用于患者的量是在包含约21天的周期的第一 天以约250mg/m2每天的量，以135mg/m2至175mg/m2每天的量在包含 约21天的周期的第一天，或以80mg/m2至100mg/m2每天的量在包含约 28天的周期的第1，8和15天施用。
例如紫杉醇施用于患者的量是约250mg/m2每天在包含约21天的周 期的第一天以当天超过16至26h(小时)静脉内输液，优选超过约24 h，以135mg/m2至175mg/m2每天的量在包含约21天的周期的第一天以 超过1至6小时静脉内输液，优选在当天超过约3h，或以80mg/m2至 100mg/m2每天的量在包含约28天的周期的第1，8和15天以超过1至 6小时静脉内输液方式施用，优选在当天超过约3h。
优选，基于紫杉醇的2至12个周期，更优选4至8个周期和特别 是约6个周期施用于患者，优选基本上无中断。上述基于紫杉醇的整个 过程/方案可以重复一或多次，优选1至12次和特别是2至6次，例如 约5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
通常，细胞生长抑制性生物碱，特别是细胞生长抑制性生物碱选自 下组：鬼臼毒素衍生物，和特别是鬼臼毒素衍生物依托泊苷 (podophyllotoxinderivative etoposide)，可以施用于患者，如本 领域中已知的。
通常，抗代谢药，特别是抗代谢药选自下组：吉西他滨和培美曲塞， 可以施用于患者，如本领域中已知的。
优选，吉西他滨以800mg至8000mg的量施用于患者，更优选1200 至6000mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优 选被认为一个周期。更优选，吉西他滨施用于患者的量(mg)按每平方 米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选吉西他滨施用于患者的 量是，1000mg/m至5000mg/m2更优选2000mg/m2至3000mg/m2，例 如约2000mg/m2，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时 间段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的吉西他滨的量分 为二个约等的部分在两个不同天施用于患者，优选第一周内一天和第二 周内一天，优选第一周和第一天第二周第一天，例如在基于吉西他滨的 一个周期的第1和8天。特别优选，吉西他滨以约1000mg/m2每天的量 在包含约21天的周期的第1和8天施用于患者。优选，基于吉西他滨 的2至12个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期施用于患 者，优选基本上无中断。上述基于吉西他滨的整个过程/方案可以重复 一或多次，优选1至12次和特别是2至6次，例如约5次，优选每次 过程/方案重复时中间有中断。
优选，培美曲塞施用于患者的量是500mg至2000mg，更优选800 至1500mg，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间段优 选被认为一个周期。更优选，培美曲塞施用于患者的量(mg)按每平方 米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选培美曲塞以300mg/m2 至700mg/m2，更优选400mg/m2至600mg/m2，例如以约500mg/m2的 量施用于患者，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时间 段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者的培美曲塞的量在第 一周的一天施用，优选第一周第一天，例如基于培美曲塞的一个周期第 一天。特别优选，培美曲塞以约500mg/m2每天的量在包含约21天的周 期的第一天施用于患者。优选，基于培美曲塞的2至12个周期，更优 选4至8个周期和特别是约6个周期施用于患者，优选实质地而无中 断.上述基于培美曲塞的整个过程/方案可以重复一次或多次，优选一 to 12次和特别是2至6次，例如约5次，优选每次过程/方案重复时中 间有中断。
在一个实施方式中，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)施用于受试 对象，优选人受试对象和特别是患者，量是400mg至6000mg每周或 1500mg至5000mg每周。
在此处描述的方法中，所述一个或多个周期优选平均一个或多 个周期基本上无中断。
在一个实施方式中，嘧啶拮抗剂优选选自5‑氟尿嘧啶，吉西他滨， 卡培他滨，胞嘧啶阿拉伯糖苷和二氟脱氧胞苷，更优选5‑氟尿嘧啶；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在一个实施方式中，长春花生物碱优选选自长春碱，长春新碱，长 春地辛和长春瑞滨，更优选长春瑞滨；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在一个实施方式中，紫杉烷类在此方面优选选自多西他赛和紫杉 醇，更优选紫杉醇；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在一个实施方式中，抗EGFR生物制剂优选选自西妥昔单抗，帕尼 单抗，扎芦木单抗，尼妥珠单抗和马妥珠单抗，更优选自西妥昔单抗和 马妥珠单抗；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在一个实施方式中，抗EGFR化学衍化的化合物优选选自吉非替尼， 厄洛替尼和拉帕替尼；
和它们的制药可接受的衍生物、盐和/或溶剂合物。
在一个实施方式中，优选基于紫杉醇的2至12个周期，更优选4 至8个周期和特别是约6个周期施用于患者，优选基本上无中断。上述 基于紫杉醇的整个过程/方案可以重复一次或多次，优选1至12次和特 别是2至6次，例如约5次，优选每次过程/方案重复时中间有中断。
通常，5‑氟尿嘧啶可以施用于患者，如本领域中已知的。
优选，5‑氟尿嘧啶以2000mg至15000mg，更优选3000至10000mg 的量施用于患者，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间段，其时 间段优选被认为一个周期。更优选，5‑氟尿嘧啶施用于患者的量(mg) 按每平方米(患者表面)施用，即mg/m2。据此，更优选5‑氟尿嘧啶 施用于患者的量是1500mg/m2至8000mg/m2，更优选2500mg/m2至7500 mg/m2，例如约5000mg/m2，在2至4周的时间段内和优选约三周的时间 段，其时间段优选被认为一个周期。甚至更优选，施用于患者5‑氟尿嘧 啶的量分为五个约等的部分在五个不同天施用于患者，优选五个连续天 和更优选基于5‑氟尿嘧啶的一个周期的开始时的五个连续天。特别优 选，5‑氟尿嘧啶施用于患者以约1000mg/m2每天的量在包含约21天的 周期的第1，2，3，4和5天施用。优选，基于5‑氟尿嘧啶的2至12 个周期，更优选4至8个周期和特别是约6个周期施用于患者，优选基 本上无中断。上述基于5‑氟尿嘧啶的整个过程/方案可以重复一次或多 次，优选1至12次和特别是2至6次，例如约5次，优选每次过程/方 案重复时中间有中断。
根据一种实施方式，基于式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的每周施用或每周施用 图解，施用1至52次基本上无中断。
根据一种实施方式，基于式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽 和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的每周施用或每周施用 图解，施用4至52次，优选6至52基本上无中断，或甚至更长。
在如上所述和/或下述的使用中或如上所述和/或下述的方法 中，所述针对受试对象的施用，优选人受试对象和特别是患者，在2至 4周的时间段，优选重复的1至12次基本上无中断。
优选的是如上所述和/或下述的使用或如上所述和/或下述的 方法，
其中
a)关于式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可 接受的衍生物、溶剂合物和/或盐的每周施用图解，
和
b)针对受试对象的施用，优选人受试对象和特别是患者，在2至4 周的时间段内，关于
i)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂，
和/或
b)放射疗法，
并列施用一次或多次。
最近的体外结果表明在组合肺癌细胞系后，细胞死亡/退化增 加，如A549，H157，H322，H460和/或H1975，具有特异性整联蛋白配 体，如Vitaxin，Abegrin，CNTO95和环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，和癌综合剂，如顺铂，奥沙利铂， 长春碱(vinblastin)，Taxol，吉西他滨，Gleevec，易瑞沙(Iressa)， 和放射疗法，优选外线束放射和/或分开的(fractionated)外线束放 射。结果表明癌综合剂，如放射，可以引起肺癌细胞相关的整联蛋 白表达，和/或所述特异性整联蛋白配体作为功效的放大器，例如无线 电放大器。此外，联合施用至少一种特异性整联蛋白配体和至少一种癌 综合剂，优选放射，导致显著杀死细胞和因此大量减少的各接受治 疗的细胞的存活曲线。据此，联合看起来有效地引起细胞死亡，可能出 于在内皮细胞和肿瘤细胞中凋亡和/或有丝分裂细胞死亡，特别是肺癌 细胞中和特别是在非小细胞肺癌细胞。效果程度可能取决于靶向表达的 程度，即整联蛋白表达。因此，药物和/或本文中所描述的方法可 以有效地用于肺癌，和特别是小细胞肺癌，非小细胞肺癌和/或其 转移灶。
本发明的主题是式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其 制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐，在制造用于乳腺癌和/或 骨转移灶的药物中的使用，其中所述药物被用于组合
a)一种或多种癌综合剂或其他癌综合剂，更优选一种或 多种癌化疗剂
本文中所描述的，
和/或
b)放射疗法，优选外线束放射，其中所述肽和/或其制药可接受的 盐以800mg至7000mg每周的量施用于患者，更优选1200mg to 6000 mg每周，甚至更优选1800mg至6000mg每周，甚至更优选2000mg 至6000mg每周和特别是2500至5000mg每周。
任选地，施用于患者的环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制 药可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的量，每周施用于 患者时以大约等量的约500mg或约2000mg的量施用。
任选地，施用于患者的环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制 药可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的量为约1000mg 每周，约1500mg每周，约2500mg每周，约4000mg每周或约6000 mg每周的量。
任选地，约1000mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药 可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每周 两次的施用方案施用。
任选地，约4000mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药 可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每周 两次的施用方案施用，优选约2000mg的等量每次。
任选地，约6000mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药可接 受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每周三 次的施用方案施用，优选约2000mg的等量每次。
在每周两次的施用方案中，所述施用任选地于第一天和然后第三或 第四天进行。因此，每周两次的施用方案任选地以可选的每第三天/每 第四天的方案进行，或可选的每第四天/每第三天的方案进行，如在周 一和周三施用(作为3/4方案的实例)或周二和周五施用(作为3/4方 案的另一个实例)和，或者在周四和周一施用(作为4/3方案的实例) 或在周五和周二施用(作为4/3方案的另一个实例)。
任选地，如上所述的每周两次或每周三次的施用方案，优选每周两 次或每周三次的施用方案，可应用于患者一次或数次。任选地，应用数 次，优选至少三次或至少六次。例如这些每周的施用方案可连续应用直 到痊愈、稳定疾病或肿瘤的恶化发生。任选地，这些每周的施用方案， 优选如上所述的每周的施用方案，被应用4至156次，如约4次，约8 次，约16次，约24次，约35次，约70次或约104次。鉴于小细胞肺 癌(SCLC)，非小细胞肺癌(NSCLC)和头和颈的鳞状细胞癌(SCCHN)，这 是优选的。
任选地，约1500mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药 可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每 周三次的施用方案施用，优选约500mg的等量每次。
任选地，约6000mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药 可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每 周三次的施用方案施用，优选约2000mg的等量每次。
在每周三次的施用方案中，所述施用任选地于第一天、第三天或第 四天和然后在第6天进行，或者任选地在第一天、第三天和第5天进行， 然后两个连续天不施用。较后的每周三次的施用方案，例如典型地开始 于周一，随后在紧随的周三施用一次和在周五施用一次，而周六和周日 不进行。
所述每周三次的施用方案，优选如上所述的每周三次的施用方案， 可任选地应用于患者一次或数次。任选地，应用数次，优选至少三次或 至少六次。例如所述每周三次的施用方案可连续应用直到痊愈、稳定疾 病或肿瘤的恶化发生。任选地，每周两次的施用方案，优选如上所述的 每周两次的施用方案，应用4至156次，如约4次，约8次，约16次， 约24次，约35次，约70次或约104次。
所述每周三次的施用方案可任选地部分或全部与放射疗法组合，优 选本文中所描述的放射疗法。任选地，所述每周三次施用方案与放射疗 法组合。
任选地，约2500mg环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)和/或其制药 可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的每周的量，以每 周五次的施用方案施用，优选以约500mg的等量每次。在每周五次的 施用方案中，所述施用优选优选在五个连续天进行，优选随后2天不用。 所述“连续的五天施用随后连续的两天不用”的方案可重复一次或数。 优选，实施前述的“连续的五天施用随后连续的两天不用”的方案多于 一次但优选少于18次，更优选2至12次，甚至更优选3至8次和特别 是4至6次，例如2次，3次，4次，5次，6次，8次或12次。特别优 选，所述“连续的五天施用随后连续的两天不用”的方案被实施6次。
任选地，所述“连续的五天施用随后连续的两天不用”的方案与本 文中所描述的放射疗法组合，优选本文中所描述的应用于患者放射疗法 以类似“连续的五天施用随后连续的两天不用”的方案优选并列于另一 个方案进行。优选相同的两天不实施。。
关于本文中所描述的每周施用的量和/或方案，实施根据式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接受的盐，优选环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)，任选地以本文中所描述的定时施用进 行，一般1,5至20小时(h)，优选2至16h，更优选2至12h，甚 至更优选2至10h，甚至更优选3至10h和特别是2至8h先于放射 疗法的应用进行。可选地，实施根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal) 的肽和/或其制药可接受的盐以本文中所描述的定时施用进行，优选1 至10小时(h)，优选1至6，更优选2至8，甚至更优选3至8h，甚 至更优选3至6和特别是4至8h先于放射疗法的应用进行。
任选地，施用实施根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/ 或其制药可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)部分或完 全，优选部分地，与放射疗法的施用或递送组合，其中施用或递送20 至50Gray(Gy)，优选25至40Gy，更优选28至25Gy，例如约28Gy， 约30Gy或约35Gy给患者，优选以0.5至5Gy，更优选0.8至3Gy 和特别是1至2.5Gy的分量，例如约1.0，约1.3Gy，约1.6Gy，约 1.8Gy，约2.0Gy，约2.5Gy或约3.0Gy，每次施用或递送，在进行 放射的施用或递送上其还优选每天放射的量。据此，施用或递送1.5至 2.5Gy和优选1.8至2.2Gy每天进行2或3天于一周内是优选的。据 此，施用或递送of 0.7至1.3Gy和优选0.9至1.2Gy每天进行3至 6天，优选进行5天和更优选5个连续天于一周内也是优选的。通常， 施用或递送1.0至3.0Gy，优选约1.0，约2.0Gy或约3.0Gy每天进 行2或3天于一周内是特别优选的。如上所述的局部性放射疗法的应用 类型在骨转移灶的中是优选，优选本文中所描述的癌类型的骨转移 灶，更优选选自下组的癌类型：小细胞肺癌和非小细胞肺癌，优选非小 细胞肺癌，乳腺癌，转移黑素瘤，转移非雄激素依赖型前列腺癌， 转移雄激素依赖型前列腺癌，和骨髓瘤或多发性骨髓瘤。
典型地，施用或递送约30Gy和约60Gy这两种量给患者于约六个 连续周内。
如果分量的局部性放射疗法被应用于骨转移灶，优选本文中所描述 的癌类型的骨转移灶，优选包括约30至60Gy，更优选30至40gy， 优选以1.0至3.5，更优选1.2至2，例如约1,5Gy或约2Gy的分量递 送，优选经约三至六周的时间段，优选2至5天每周。
本文中所描述的关于方法、所施用的量和/或施用方案涉及实 施根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接受的 盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)，施用(约)500mg或(约)1000 mg的量于每次施用以及针对每周的施用方案给出的(约)1000mg， (约)1500mg，(约)2000mg，(约)2500mg，(约)4000mg和(约)6000mg 的量优选基于化合物环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)计算，就此(其 也被称为环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NmeVal的内盐)。据此，如果不同形 式或衍生物，如根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制 药可接受的盐，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的药理学可接受的 盐和溶剂合物被施用于受试对象，优选你和受试对象和特别是患者，优 选以以上就化合物环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)给出的量的等摩尔 量施用。
在医药环境和和/或施用化合物或药物的靶向环境下，术 语
i)“受试对象”或“受试对象们”，
ii)“人受试对象″或″人受试对象们”
和/或
iii)“患者”或“患者们”
是本领域已知的和理解的。
基于本发明和在本文中所描述的和/或施用的环境下，术语“受 试对象”和“患者”是优选同义词。
与本发明相关，受试对象(优选涉及本文中所描述的施用和/或治 疗)优选人受试对象。
据此，与本发明相关，患者优选人或人患者。
因此，术语“人受试对象”优选还表示患者和更优选表示人患者。 与本发明相关，患者特别是优选人患者。
根据本发明待使用的特异性整联蛋白配体令人惊奇地对患者显示 有利的改善效果，所述患者具有增加的DNA甲基化状态，具有部分或 完全的至少一种MGMT基因的至少一种启动子的甲基化和/或具有MGMT 蛋白的不正常水平，特别是MGMT蛋白的不正常的低水平。据此，本发 明提供可有利地用于与前述效果或缺陷的一种或多种相关的患者 的药物和方法。
因此，本发明的主题是本文中所描述的药物的用途和/或使用所述 药物患者的方法，其中在患者的中待使用的所述药物，所述 患者具有增加的DNA甲基化状态，具有部分或完全的至少一种MGMT 基因的至少一种启动子的甲基化和/或具有MGMT蛋白的不正常水平， 特别是MGMT蛋白的不正常的低水平。此种患者优选称为“甲基化的患 者”。
下面更详细地阐明和讨论这些主题。
DNA‑修复基因O6‑甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶(MGMT)的甲基化 反应，更准确地称为O6‑甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶修复基因或短 MGMT修复基因，引起基因沉默。该后天性饰变在许多不同癌类型的患 者中与有利的预后相关，如成胶质细胞瘤(GBM)，其获得烷化剂，例 如氮芥、乙烯亚胺化合物、烷基磺酸盐和其它具有烷化作用的化合物， 优选选自亚类，优选ACNU、BCNU和CCNU，白消安，美法仑， 卡铂，顺铂，奥沙利铂，环磷酰胺，达卡巴嗪，卡莫司汀，异环磷酰 胺和洛莫司汀，替莫唑胺和六甲蜜胺，或喜树碱。据此，在MGMT启动 子甲基化反应和存活率和对烷化剂的敏感性之间存在关联，所述烷化 剂如替莫唑胺。MGMT酶从鸟嘌呤的O6位(许多化疗法‑诱发的DNA烷 基化反应的位点)移除烷基基团。这些化疗法诱发的烷基化反应导致 在肿瘤细胞中DNA损伤，包括DNA双链断裂和错配，其触发凋亡和细 胞毒性[5，6]。MGMT酶修复DNA损伤，因此妨碍化疗法烷化剂的 效果[7‑10]。MGMT启动子CpG岛的离散区的甲基化反应基因的沉默 相关病和减弱DNA‑修复酶活性[11‑13]。早先的研究指出30‑40％的 GBM患者具有甲基化的MGMT启动子[1‑4]。
MGMT启动子甲基化反应和因此MGMT的甲基化反应状态可有利地 使用对从肿瘤样本提取的DNA的2‑阶段甲基化反应特异性PCR分析来 确定，如在外科手术已经瞬冻的肿瘤样本。所述甲基化反应特异性PCR 分析可根据本领域中的方法容易地实施。优选其可通过Hegi等人， NEJM，2005，352；997‑1003)的方法实施；以下方法已经被成功地用 于评价患者(组织可利用)亚组的甲基化反应状态的III期实验：
DNA提取和甲基化反应特异性聚合酶链反应
从成胶质细胞瘤组织的一或两个石蜡切片分离基因组DNA (Ex‑Wax DNA提取试剂盒S4530，Chemicon)(经最多6小鼠的蛋白 酶消化)。用35μl体积的氢氧化钠使DNA变性并经360μl体积 的亚硫酸氢盐处理(4.4M亚硫酸氢钠和20mM氢醌)五小时于55℃ 和然后纯化(Wizard DNA提纯体系A7280，Promega)。非甲基化的 胞嘧啶，而非其甲基化的相似物通过处理被改变为尿嘧啶。所述甲基 化反应‑特异性聚合酶链反应(PCR)在两步法中实施。[PalmisanoWA， Divine KK，Saccomanno G，et al.Predicting lung cancer by detecting aberrant promoter甲基化反应in sputum.Cancer Res 2000；60：5954‑8.]
由从肿瘤再分离DNA开始，在独立实验中可验证结果。PCR产物 在4％琼胶凝胶上分离。选择和分析成胶质细胞瘤样品的研究人员对 所有临床信息是不知的。
可选地，可根据Donson等人在Journal Pedriatic Blood Cancer， 2006中描述的方法实施。
根据Donson等人，MGMT启动子甲基化反应/MGMT的甲基化反应状 态根据以下步骤可有利地测定：
DNA提取和甲基化反应特异性聚合酶链反应
使用DNeasy试剂盒(Qiagen，Valencia，CA)从在外科手术获取 的瞬冻肿瘤中分离基因组DNA(COMIRB 95‑500)和GBM细胞系。甲基 化反应特异性PCR测定MGMT基因的CpG岛中的DNA甲基化模式。该步 骤涉及的化学改变非甲基化的、而不是甲基化的胞嘧啶成尿嘧啶，随 后嵌套的2阶段PCR[17]。用在55ml中的氢氧化钠(终浓度0.3M) 使一微克DNA变性并经610ml亚硫酸氢盐处理(3.3M亚硫酸氢钠和 0.5mM氢醌)16hr于55℃和然后使用Wizard DNA提纯体系(Promega， Madison，WI)纯化。进行PCR来扩增MGMT基因的289‑bp片段，其 包含富CpG启动子区的部分。引物识别亚硫酸氢盐‑改性的模板但不辨 别甲基化和非甲基化的等位基因。在MGMT基因的阶段1使用的扩增引 物序列如下：
MGMT‑阶段1‑正前，50‑GGATATGTTGGGATAGTT‑30；和MGMT‑阶段 1‑反向，50‑CCAAAAACCCCAAACCC‑30。Master Mix(Fermentas， Hanover，MD)。阶段1的PCR扩增方案如下：95℃进行10min，然 后于95℃变性30sec，于52℃退火30sec，于72℃延伸30sec 进行40个循环，随后10min的最后延伸。在所有PCR反应中使用 A25‑ml。所述阶段1的PCR产物被稀释50倍，并使5ml的所述稀释 液经历阶段2的PCR，其中使用特异于甲基化的或非甲基化的模板的 引物。用于阶段2的PCR针对非甲基化反应的引物序列是MGMT‑阶段 2‑正向，50‑TTTGTGTTTTGATGTTTGTAGGTTTTTGT‑30和MGMT‑阶段2‑反 向，50‑AACTCCACACTCTTCCAAAAACAAAACA‑30和针对甲基化的反应是 MGMT‑阶段2‑正向50‑TTTCGACGTTCGTAGGTTTTCGC‑30和MGMT‑阶段 2‑反向50‑GCACTCTTCCGAAAACGAAACG‑30。所述用于阶段2的PCR扩 增方案如下：95℃进行10min，热后于95℃变性15sec，于62℃ 退火15sec，于72℃延伸15sec进行40个循环，随后10min于 72℃的最后延伸。用SssI甲基转移酶(New England Biolabs，Beverly， MA)体外处理来自正常人淋巴细胞的DNA被用作针对MGMT的甲基化等 位基因的阳性对照和来自正常淋巴细胞的未处理的DNA被用作针对 MGMT的甲基化等位基因的阴性对照。每个PCR反应(10ml)被直接 加载到4％的琼脂凝胶上，用溴乙啶染并在UV照明下可见化。可用 本领域中已知的方法进行统计学分析，如Kaplan‑Meier的方法，关 联性和统计学显著性分析，例如使用Prism统计学分析程序 (GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)。
对患者的瞬冻组织进行甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶启动子的甲 基化反应状态分析。MGMT甲基化反应状态在肿瘤外规律地测定。在部 分患者中，针对MGMT启动子的甲基化反应状态所测试的样品被证明是 部分甲基化的(图29A)。没有样品显示完全的甲基化反应。所观察 到的不完全的甲基化反应可归因于肿瘤异质性，浸润外周血淋巴细胞 和/或血管系统。出于对比的目的，通过研究6个GBM细胞系(包括细 胞系145)的MGMT启动子的甲基化反应状态，可测定是否肿瘤MGMT 启动子的部分甲基化反应对该观察负责，所述细胞系建立于用替莫唑 胺的患者且其瞬冻肿瘤也被用于上述分析。在所研究的六个细胞 系中的四个中观察到了启动子的部分甲基化反应(图29B)。结果显 示甚至在纯的GBM细胞系，可存在部分的MGMT启动子甲基化反应。
图29A显示在GBM活检样本中MGMT启动子的甲基化反应状态， 如通过嵌套的甲基化反应特异性PCR测定所确定的。来自正常外周血 淋巴细胞(PBL)的DNA被用作针对非甲基化的MGMT启动子的对照(U)， 来自PBL的酶促的甲基化的DNA用作针对甲基化的MGMT启动子的阳 性对照(M)，和水被用作PCR的阴性对照。100‑bp标志物阶梯被加载 用于评估分子大小，如在左刻度上所显示的(L)。
图29B显示GBM细胞系中MGMT启动子的甲基化反应状态，如通 过嵌套的甲基化反应特异性PCR测定所确定的。100‑bp标志物阶梯被 加载用于评估分子大小，如在左刻度上所显示的(L)。
以上所描述的MGMT分析技术已在大多数近期研究中被采用，显示 MGMT甲基化反应是应答烷化剂的成功预估器[1‑3]。该技术在其证明 了甲基化反应是引起GBM中MGMT酶促活性丧失的主要原因后废弃了酶 活性测量的较早的技术。
被作为显示MGMT甲基化反应的患者或可被作为显示MGMT甲基化 反应的患者测试的患者，优选使用以上所描述的方法，其类似法或任 何根据本领域技术人员的理解等同适宜的其它方法，被视为根据本发 明的“甲基化的患者”，更优选作为具有增加的DNA甲基化状态的患 者和/或作为显示至少一种MGMT基因的至少一种启动子的部分或完全 甲基化反应的患者。他们因此属于可特别有利地通过根据本发明的方 法或或药物进行的患者。
然而，此种技术例如以下所描述的方法，鉴于MGMT状态按照本发 明可优选使用。
化疗功效，消除肿瘤细胞而不引起致死宿主毒性的化疗法的能力， 选择性地取决于药物。抗癌药物的一类，烷化剂，通过结合DNA引起 细胞死亡，其结构性地歪曲DNA螺旋结构阻止DNA转录和翻译。在正 常细胞中，烷化剂的损害作用可通过细胞DNA修复酶特别是O6‑甲基鸟 嘌呤‑DNA甲基转移酶(MGMT)修复，其还已知为O6‑烷基鸟嘌呤‑DNA‑ 烷基转移酶(AGAT)。MGMT水平在肿瘤细胞生长在相同类型的肿瘤中 变化。编码MGMT的基因不常突变或被删除。由于后天性饰变，MGMT 在肿瘤细胞中更倾向于低水平；MGMT启动子区是甲基化的，因此抑制 MGMT基因的转录并阻止MGMT的表达。
同个多个证据渠道已经表明甲基化反应在基因表达、细胞分化、 肿瘤发生、X‑染体失活、基因组印迹和其它主要生物过程中起重要 作用。真核细胞中，胞嘧啶残基的甲基化反应直接在5′生成鸟苷，主 要存在于胞嘧啶‑鸟嘌呤(CG)贫乏区。相反CpG岛在正常细胞中维持 非甲基化的，除非在X‑染体失活期间和亲本特异性印迹，其中5′ 调节性区的甲基化反应可导致转录阻遏。肿瘤抑制基因的表达还可以 通过通常非甲基化的CpG的从头DNA甲基化而取消。
编码DNA修复酶的过甲基化反应可用作为标志物用于预见针对某 些癌的临床应答。
某些化疗剂(例如包括烷化剂)通过交联DNA来抑制细胞增殖， 导致细胞死亡。
因为DNA修复酶移除了交联结构，采用此种剂的努力可 能被阻挠且针对此种剂产生了抗性。鉴于大多数化疗药物的有害 副作用和某些药物对各种的非有效性，希望预测用化疗剂的 临床应答。
美国专利号6,773,897揭示了涉及细胞增殖性障碍的化疗的 方法。特别是，提供方法用于“预测针对化疗剂的某些类型的临床应 答”，包括特异性烷化剂。该方法将需要的患者的编码DNA修复 酶的核酸的甲基化反应状态与不需要的受试对象的进行测定和对 比。任何差异均被视为“预见性的”应答。该方法，然而，没有提供 建议如何改善任何具有不利“预见”的患者的临床结果。
替莫唑胺是Schering Corp.的可利用的烷化剂，商品名在美国为Temodar在欧洲为Temodal
用于口服施用的Temodar胶囊包含替莫唑胺、咪唑并噻唑衍生物。替莫唑胺的化学名称是3，4‑二氢‑3‑甲基‑4‑氧代咪唑并[5，1‑d]‑as‑四嗪‑8‑甲酰胺(参见U.S.Pat.No.5,260,291)。替莫唑胺或其代谢物，MTIC，的细胞毒性被认为由于DNA的烷化反应是基础的(primarily)。烷化反应(甲基化反应)主要出现在鸟嘌呤的O6和N7位上。
Temodar(替莫唑胺)胶囊是当前在美国被指导用于新诊断出多形性成胶质细胞瘤以及难治的星形细胞瘤的成年患者，即在包含亚和丙卡巴肼的药物方案下已经历疾病恶化的患者于首次复发。Temodal是当前在欧洲被批准用于在标准疗法后显示复发或恶化的恶性神经胶质瘤如多形性成胶质细胞瘤或星形细胞瘤的患者。
根据本发明，可选地，相对于以上所描述的方法，通过测定在获 自患者的样品中的MGMT蛋白的水平来测定MGMT基因甲基化反应的水 平。所述水平可分类为“很低”、“低”、“中等”或“高”，优选 如以下更详细的描述。
测定是否MGMT基因是甲基化的可通过本领域技术人员任何抑制 的方法进行。用于检测基因或核酸的甲基化反应的技术包括但不限于 Ahrendt et aL，J.Natl.Cancer Inst.，91：332‑339(1999)； Belsinky et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，95：11891‑11896 (1998)，Clark et al.，NucleicAcids Res.，22：2990‑2997(1994)； Herman etaL，Proc Natl Acad Sd U.S.A.，93：9821‑9826(1996)； Xiong and Laird，Nucleic Acids Res.，25：2532‑2534(1997)；Eads et aL，Nuc.Acids.Res.，28：e32(2002)；Cottrell et al.，Nucleic Acids Res.，32：1‑8(2004)描述的那些。本文中所引用的所有参考通 过引用并入本文。
甲基化反应特异性PCR(MSP；Herman et al.，Proc.Natl.Acad Sci.USA，93(18)：9821‑9826(1996)；Esteller et al.，Cancer Res.， 59：793‑797(1999))还参见美国专利号5,786,146，Jul.28，1998 出版；美国专利号6,017,704，Jan.25，2000出版；美国专利号 6,200,756，Mar.13，2001出版；和美国专利号6,265,171，Jul.24， 2001出版；美国专利号6,773,897 August 10，2004出版；它们每 一个的全部内容通过引用并入本文，可快速评价CpG岛内CpG位点的 基本上任何基团的甲基化反应状态，不依赖于甲基化反应敏感性限制 酶的使用。该测定通过亚硫酸氢钠进行DNA的最初改变，转化所有非 甲基化的而不是甲基化的胞嘧啶生成尿嘧啶，并随后用对相比非甲基 化的DNA特异于甲基化的DNA的引物扩增。MSP需要小量的DNA，敏感 于所给定的CpG岛基因座的0.1％的甲基化的等位基因，并可以在从包 埋于石蜡的样品提取的DNA上进行。MSP消除了先前基于PCR的方法 所固有的假阳性结果，其依赖于差异性限制酶切割来区别甲基化的和 非甲基化的DNA。该方法非常简单并可以在小量组织或几个细胞上使 用。
有用于本发明的该实施方式以测量患者样品中MGMT蛋白水平的 蛋白质印迹测定的图示例被示于Li等人的美国专利号5,817,514，其 全部内容通过引用并入本文。Li等人描述了单克隆抗体能够特异性结 合天然人MGMT蛋白或具有烷基化的活性位点的人MGMT蛋白。有用于 本发明的该实施方式以测量患者样品中MGMT蛋白水平的免疫组织化 学技术的图示例被示于美国专利号5,407,804，其全部内容通过引用 并入本文。公开了能够特异性结合在单一细胞制剂(免疫组织化学染 测定)和在细胞提取物(免疫测定)中的MGMT蛋白的单克隆抗体。
荧光读取结合细胞图像的数字化的使用被描述并允许量化测量在 患者和对照样品中的MGMT水平，包括但不限于肿瘤活检样品。
用于测量MGMT蛋白的酶促活性的有用的技术包括但不限于描述 于：Myrnes等人，Carcinogenesis，5：1061‑1064(1984)；Futscher et al.，癌Comm.，1：65‑73(1989)；Kreklaw et al.，J.Pharmacol. Exper.Ther.，297(2)：524‑530(2001)；和Nagel等人，Anal. Biochem.，321(1)：38‑43(2003)的方法，其全部内容以其全部通过 引用并入本文。
根据该发明的一种模式，患者细胞表达的MGMT蛋白的水平通过使 用特异于MGMT的抗体测量MGMT蛋白例如通过蛋白质印迹来测定，参 见例如Li等人的美国专利号5,817,514(supra)描述蛋白质印迹测 定以测定MGMT水平。该水平对比已知表达MGMT的正常淋巴细胞所表 达的水平。
患者MGMT蛋白水平优选如下分类为：非常低＝0‑30％的正常淋 巴细胞表达的MGMT；低＝31‑70％的正常淋巴细胞表达的MGMT；中等 ＝71‑90％和高＝91‑300％或更高的正常淋巴细胞表达的MGMT。
作为具有中等或较小MGMT蛋白水平的患者或可被作为具有中等 或较小MGMT蛋白水平的患者测试的患者，优选使用以上所描述的方 法，其类似方法，或任何根据本领域技术人员的理解等同适宜的其它 方法，被视为根据本发明的“甲基化的患者”。他们因此属于可特别 有利地通过根据本发明的方法或或药物进行的患者。
据此，相对于正常淋巴细胞表达的MGMT，具有或可显示具有中等 (＝71‑90％)，优选(低＝31‑70％)和更优选非常低(＝0‑30％)的 患者优选被视为根据本发明的“甲基化的患者”，更优选作为具有增 加的DNA甲基化状态的患者和/或作为显示至少一种MGMT基因的至少 一种启动子的部分或完全甲基化反应的患者。他们因此属于可特别有 利地通过根据本发明的方法或或药物进行的患者。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物在具有增加的DNA甲基化状态的患者的中使用。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物在显示至少一种MGMT基因的至少一种启动子的部分或完 全甲基化反应的患者的中使用。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物在具有中等，优选低和更优选非常低水平的MGMT蛋白的患 者的中使用，优选对比于正常淋巴细胞表达的MGMT。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物具有增加的DNA甲基化状态的患者的中使用，和其中 所述方法包括施用一种或多种烷化剂，优选选自氮芥、乙烯亚胺化合 物、烷基磺酸盐和其它具有烷化作用的化合物，优选选自亚类， 优选ACNU、BCNU和CCNU，白消安，美法仑，卡铂，顺铂，奥沙利铂， 环磷酰胺，达卡巴嗪，卡莫司汀，异环磷酰胺和洛莫司汀，替莫唑胺 和六甲蜜胺或喜树碱。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物在显示至少一种MGMT基因的至少一种启动子的部分或完 全甲基化反应的患者的中使用。和其中所述方法包括施用一种或 多种烷化剂，优选选自氮芥、乙烯亚胺化合物、烷基磺酸盐和其它具 有烷化作用的化合物，优选选自亚类，优选ACNU、BCNU和CCNU， 白消安，美法仑，卡铂，顺铂，奥沙利铂，环磷酰胺，达卡巴嗪，卡 莫司汀，异环磷酰胺和洛莫司汀，替莫唑胺和六甲蜜胺，或喜树碱。
因此，本发明特别优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其 中所述药物在具有中等，优选低和更优选非常低水平的MGMT蛋白的患 者的中使用，优选对比于正常淋巴细胞表达的MGMT，和其中所述 方法包括施用一种或多种烷化剂，优选选自氮芥、乙烯亚胺化合物、 烷基磺酸盐和其它具有烷化作用的化合物，优选选自亚类，优 选ACNU、BCNU和CCNU，白消安，美法仑，卡铂，顺铂，奥沙利铂， 环磷酰胺，达卡巴嗪，卡莫司汀，异环磷酰胺和洛莫司汀，替莫唑胺 和六甲蜜胺或喜树碱。
在前述关于MGMT的方法或用途中，所述方法或用途优选包括施用 一种或多种特异性整联蛋白配体，优选选自环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)，它们的制药可接受的衍生物、溶剂 合物和盐，和特别是环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)。
测定患者中增加的DNA甲基化状态和/或显示至少一种MGMT基因 的至少一种启动子的部分或完全甲基化反应是本领域中已知的。据此， 通过本领域技术人员可容易地确定可有利地通过本文中所描述的方法 或用途的患者。
本发明优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其中所述药物 在复发癌的中，例如第二线或随后方案中使用。
本发明更优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其中所述药 物在复发癌的中，例如第二线或随后方案中使用，其中所述 癌是如本文中所描述的。
本发明甚至更优选的主题是本文中所描述的方法或用途，其中根 据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接受的盐， 优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)在新诊断出癌的中，优选在 第一线药物方案中使用。
本发明的另一个主题是受试对象的方法，优选人受试对象， 或鉴于根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接 受的盐的本文中所描述的用途，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)， 其中所述受试对象或人受试对象具有增加的DNA甲基化状态。
本发明的另一个主题是受试对象的方法，优选人受试对象， 或鉴于根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接 受的盐的本文中所描述的用途，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)， 其中所述受试对象或人受试对象至少一种MGMT基因的至少一种启动 子的部分或完全甲基化反应。
本发明的另一个主题是受试对象的方法，优选人受试对象， 或鉴于根据式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)的肽和/或其制药可接 受的盐的本文中所描述的用途，优选环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMeVal)， 其中所述或用途涉及新诊断出的癌，优选在第一线化疗法方案中。
优选，述及“式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽”或述及“环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)”还包括其制药可接受的衍生物、溶 剂合物和/或盐。
优选，述及“肽”或“所述肽”优选表示“式环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽”和优选还包括其制药可接受的 衍生物、溶剂合物和/或盐。
因此，述及“肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐” 或“所述肽和/或其制药可接受的衍生物、溶剂合物和/或盐”优选涉 及“式环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)的肽和/或其制药可接受的衍 生物、溶剂合物和/或盐”。
在此使用的术语“无中断的”，特别是鉴于方案或期间 使用的，优选被理解为表示所述方案或期间是以连续次序实施或 应用的。例如“2至8周和特别是6周，优选无中断”优选意意图表 示“2至8周和特别是6周，优选以连续的次序”。
在此使用的，关于数字、量、剂量、小时、倍、时间、期间等的 术语“约”优选被理解为表示“约”基于所述数字、量、剂量、小时、 倍、时间、期间等的。
如果没有另外说明，施用于受试对象、人受试对象或患者的量以 “mg”给出，如in 500mg，1000mg，2000mg，4000mg，6000mg， 8000mg，10000mg，12000mg和14000mg，优选意图表示待施用的 各种量“flat”，即不针对各受试对象、人受试对象或患者的体重和/ 或体表面积的固定剂量。
如果没有另外说明，施用于人受试对象、患者或人患者的量以“mg” 给出，如in 500mg，1000mg，2000mg，4000mg，6000mg，8000mg， 10000mg，12000mg和14000mg，优选意图表示待施用的各种量 “flat”，即即不针对各人受试对象、患者或人患者的体重和/或体表 面积的固定剂量。
如果没有另外明确说明，在此使用的术语“一种或多种”，例如 关于化合物、剂、癌综合剂、癌化疗剂等的数目，优选表示 “一或大于一”并因此优选包括“两种或更多种”(或“二或多于二”)、 “三种或更多种的”(或“三或多于三”)和/或“四以上的”(或“更 多的或多于四”)。据此，在此使用的术语“一种或多种”优选包括 一、二、三、四、五、六和/或更高数目的数字。鉴于化合物、剂、 癌综合剂、癌化疗剂，特别优选包括数字一、二、三、四和/或五， 甚至更优选数字一、二、三和/或四和特别是数字一、二和/或三。
优选，本发明特别优选的主题涉及方面、主题、用途、方法和/ 或实施方式，其中本文中所描述的方面、主题、用途、方法和/或实施 方式的两种或更多种的一种或多种特征组合于一项主题。
通过实施例的方式更详细地阐述本发明。本发明可在所要求的范 围内实施，不受限于在此给出的实施例。
此外，为了帮助技术人员更好地理解本发明通过举例的方式给出 以下实施例。实施例无意限制权利要求书所赋予的保护范围。在实施 例中定义的化合物、组合物、方法和/或用途的示范的特征、性质和优 点可赋予其它没有特别描述和/或定义于实施例的化合物、组合物、方 法和/或用途，但落入权利要求书所定义的范围。
优选，实施例和/或权利要求中定义的所述化合物、组合物、方法 和/或用途的示范的特征、性质和优点可赋予其它没有特别描述和/或 定义于实施例和/或权利要求的化合物、组合物、方法和/或用途，但 落入权说明书和/利要求书所定义的范围。
实施例
以下给出的实施例为了帮助技术人员更好地理解本发明通过举例 的方式给出以下实施例。实施例无意限制权利要求书所赋予的保护范 围。在实施例中定义的化合物、组合物、方法和/或用途的示范的特征、 性质和优点可赋予其它没有特别描述和/或定义于实施例的化合物、组 合物、方法和/或用途，但落入权利要求书所定义的范围。
实施例1：西仑吉肽抑制实验的乳腺癌骨转移灶的恶化使用VCT、 MRI和DCE‑MRI作为非浸润性成像的纵向体内研究
该研究的目的是使用非浸润性成像技术调查在实验诱发的乳腺癌 骨转移灶中通过西仑吉肽抑制αvβ3/αvβ5整联蛋白效果。出于该 目的，用西仑吉肽患有建立的乳腺癌骨转移灶的裸大鼠，西仑吉 肽是αvβ3和αvβ5整联蛋白(75mg/kg，五天每周；n＝12大鼠) 的小分子抑制剂，并对比赋形剂处理的对照大鼠(n＝12)。在纵向研 究中，使用常规磁共振成像(MRI)和平板测定体积计算机体层摄影术 (VCT)来分别测定软组织肿瘤和骨质溶解的体积，并进行动态增强 (DCE‑)MRI成像以确定反映血量和血管通透性的肿瘤血管系统的功 能性参数。在用西仑吉肽处理的大鼠中，VCT和MRI显示骨溶性病损 和各骨转移软组织肿瘤恶化比在赋形剂处理的对照中更慢。DCE‑MRI 指出血量的降低和血管通透性的增加，并且免疫组织学揭示在西仑吉 肽处理的大鼠中相比赋形剂对照，不成熟的血管数目的增加。结论是 用西仑吉肽实验的乳腺癌骨转移灶导致显著的抗吸收和抗肿瘤效 果，建议实现的αvβ3/αvβ5抑制是骨转移灶的有希望的 方法。
1.介绍
许多的人恶性肿瘤包括乳、前列腺，和肺癌频繁发生骨转移灶。 在骨髓内肿瘤细胞繁殖刺激破骨细胞是骨转移灶的发病机制的特征， 当构思骨转移灶的策略时必须考虑肿瘤和骨的微环境。1双膦酸 盐是破骨细胞功能的潜在抑制剂，其已经在过去数十年中使用来 患有骨转移灶的患者。然而，他们不能引起骨转移灶的减退。这一起 与关于双膦酸盐疗法的不良反应如颌骨坏死和肾毒性，强调了急需开 发可备选应用的新颖的疗法并作为联合对象对靶向的骨转移灶更有 效。
整联蛋白是具有24个跨膜蛋白的家族，其整合细胞外和细胞内活 性。除了它们在促进性物理粘附的作用外，整联蛋白信号传递可引起 细胞扩散、迁移、存活、增殖，和分化。2αvβ3整联蛋白与数个细 胞外基质(ECM)蛋白包括玻连蛋白、纤连蛋白、骨桥蛋白、骨唾液蛋 白(BSP)和纤维蛋白原相互作用。3，4其在激活的肿瘤内皮细胞上强 表达而在非疾病组织的休止的内皮细胞上的表达通常是低的。5‑7在骨 转移灶的发病机制中，破骨细胞表达αvβ3整联蛋白，并且在实验的 前列腺癌骨转移灶中选择性αvβ3抑制剂已经显示抑制破骨细胞‑介 导的骨吸收。8此外，在实验模型中αvβ3整联蛋白在肿瘤细胞上过 表达刺激癌转移到骨。9，10密切相关的整联蛋白αvβ5也是涉及到乳 腺癌细胞迁移和侵袭的玻连蛋白受体，尽管被破骨细胞和宽范围的癌 细胞过表达，但在骨癌转移的发病机制中较少地被研究。11，12一起与 αvβ5，αvβ3整联蛋白识别细胞外配体的精氨酸‑甘氨酸‑天冬氨酸 (RGD)肽序列。13西仑吉肽(EMD 121974)是包含对αvβ3和αv β5具有高亲和性的RGDf(N‑Me)V序列的环状五肽，其抑制αvβ3/α vβ5‑依赖性细胞过程。14‑17因为西仑吉肽抑制源自人、牛和大鼠的α vβ3和αvβ5整联蛋白，可适合于实验和临床研究。15，16在近期用 于多形性成胶质细胞瘤的II期实验中，西仑吉肽显示出有希望的 结果，包括抗肿瘤活性的适应征和良好的安全特征。13，19在模型体系 中西仑吉肽具有抗血管形成活性，与其附着、迁移、萌芽、分化的抑 制相关，并且在那些依赖于αvβ3/αvβ5粘附和存活的内皮血管生 成细胞中诱导凋亡。15，18，20然而，用于而靶向αv整联蛋白仍是 有争议的，且在缺失αvβ3和αvβ5的小鼠中对一些肿瘤生长是加速 的，而另一些，肿瘤生长和血管发生是被西仑吉肽加速的。21，22在该 研究中，我们使用非浸润性成像技术来检查在使用西仑吉肽的疗法下 转移病损发展的动力学。计算机体层摄影术(CT)和磁共振成像(MRI) 是当前用于测定骨质溶解程度和骨转移灶的各软组织组分。对于骨转 移灶中血管发生的体内成像，动态增强MRI成像(DCE‑MRI)允许评估 在这些骨骼病损中与血量和血管通透性相关的功能性参数。23我们近 期介绍了实验的乳腺癌骨癌转移的体内模型，其中血管发生、软‑组织 病损大小和骨质溶解程度可通过体积CT(VCT)、形态学MRI和DCE‑MRI 同时地和纵向地监测。23，24在此我们使用该模型非侵入性地评估在乳 腺癌骨转移灶在西仑吉肽抑制αvβ3和αvβ5整联蛋白的效果。
2.材料和方法
2.1细胞系和培养条件
不依赖人雌激素的乳腺癌细胞系MDA‑MB‑231购自于American Type Culture Collection。细胞被常规地在RPMI‑1640(Invitrogen， Karlsruhe，Germany)中培养，用10％FCS(Sigma，Taufkirchen， Germany)供养。所有培养介质存在于受控的条件下(加湿的大气，5％ CO2，37℃)和每周传代2‑3次以使它们呈指数生长。
2.2流式细胞计数
使用流式细胞计数表征MDA‑MB‑231人乳腺癌细胞的整联蛋白表 达特征。肝细胞上的表面整联蛋白染如所描述的(具有微小改动的) 实施。25简而言之，细胞被收获、清洗、悬浮于PBS‑BSA(包含二价 阳离子)，并随后用小鼠抗αvβ3(LM60926)、小鼠抗αvβ5(P1F627； Millipore，Schwalbach，Germany)或小鼠抗αv(17E625)温育，之 后通过用荧光化的山羊‑抗小鼠IgG和碘化丙啶(5μg/ml)染。 用10μg/ml浓度的初级抗体(primary antibody)温育并至于冰 上45分钟。在FACScan仪器(Becton‑Dickinson，Heidelberg， Germany)上进行流式细胞计数，选通活细胞，和每次染收集10000 次记录。使用第二层反应剂的染强度作为背景来标准化整联蛋白染 的平均荧光强度。
2.3动物模型和疗法应用
获自Harlan‑Winkelmann GmbH(Borchen，Germany)的六周龄裸大鼠(RNU株)并宿于中心动物设备的小栅栏体系(a mini barrier system of the central animal facility)的特别的无病原体的环境中。动物存在于受控的条件下(21±2℃室温，60％湿度，12h昼夜节律)并任意地提供高压食品和水。使用0.05％胰蛋白酶‑EDTA(GibcoInvitrogen，Karlsruhe，Germany)收获分汇合的MDAMB‑231细胞，在Neubauer’s chamber上计数并在RPMI‑1640再悬浮至终浓度为105细胞于200μl中。使用氧化亚氮(1l/min)、氧(0.5l/min)和异氟烷(1.5vol.％)的混合物麻醉大鼠。如前所述地将右后腿的动脉分支剖出(dissected)并将105个细胞注射入腹壁浅动脉。28建立骨转移灶并只观察右后腿的股骨、胫骨和腓骨。癌细胞移植30天后，将大鼠(n＝24)随机地分为两组，一组经腹膜内接受于等压的盐水(75mg/kg；n＝12大鼠)中的αvβ3/αvβ5整联蛋白的环RGD‑肽抑制剂(西仑吉肽，EMD 12197414，17，29；Merck，Darmstadt，Germany)每周五次而另一组，假的组，用作为对照(n＝12大鼠)。所有动物的观察时段是55天且没有大鼠在研究中死于时间表之前。
2.4体内成像
癌细胞的接种后，每只大鼠在30，35，45和55天使用(i)平板 装备的体积计算机体层摄影(Volume CT，Siemens，Germany)和(ii) 装备有自制首发线圈的1.5T临床磁共振扫描仪(Symphony，Siemens， Erlangen，Germany)(内径83mm且可用长度为120mm的圆柱体积共 振器)成像。在使用VCT和MRI体内成像之前，如上所述用氧化亚氮、 氧和异氟烷麻醉大鼠。
2.4.1测定体积计算机体层摄影术
用以下参数获取VCT成像：管电压80kV，管电流50mA，扫描时间 51秒，旋转速率10秒，每秒120帧，基质512x512，且层面厚度 0.2mm。使用改进的FDK(Feldkamp Davis Kress)锥形线束重建算 法(kernel H80a；Afra，Erlangen，Germany)进行图像重建。
2.4.2磁共振成像
使用涡轮‑旋转‑回声序列(定向轴，TR 3240ms，TE 81ms，基 质152x256，FOV 90x53.4mm2，层面厚度1.5mm，averages 3， 扫描时间3min 40s)进行T2加权成像。对于动态增强MRI成像， 使用穿过肿瘤的最大直径的饱和恢复涡轮闪烁序列(saturation recovery turbo flash through sequence)(定向轴，TR 373ms，TE 1.86ms，基质192x144，FOV 130x97.5mm，层面厚度5mm，测 量512，averages 1，扫描时间6min 55s)。20s基线后，0.1mmol/kg Gd‑DTPA(Magnevist；Bayer Schering Pharma，Berlin，Germany) 经静脉内灌注10s。
2.5后处理
使用医疗成像关联工具盒(MITK，Heidelberg，Germany)分析非 增强的VCT图像和MRI获取的T2‑加权图像来分别测定骨溶性病损和 软组织组分的体积。如所描述的根据Brix的二室模型使用Dynalab workstation(Mevis Research，Bremen，Germany)分析DCE‑MRI获 取的数据测定参数幅值A和交换速率常数kep。23，30简而言之，注射 的造影剂在这两个室中分布(血管内腔和血管外的，细胞间隙)。在 这些室中造影剂的经时积累被幅值A表征(与血量相关)，而在血管 内腔和细胞间隙之间的造影剂的交换由交换速率常数kep表征(与血管 通透性相关的)。用于在我们的研究中测定骨转移灶的幅值A和kep 的各值，使用Dynalab workstation(Mevis Research，Bremen， Germany)将关注区域被分别置于彩图上的软组织组分周围针对A和 kep。
2.6组织学
在观察期末，每只动物的下肢被截肢并去除肌肉组织。具有围绕着的软组织肿瘤的骨被贮存于70％乙醇中并包埋于基于甲基丙烯酸甲酯的化合物(Technovit9100NEU，Heraeus Kulzer，Hanau，Germany)根据制造商的说明。切下5μm‑厚切片(Microm HM340emicrotome；Thermo Scientific，Waltham，MA)，封固到SuperFrost Plus显微镜载玻片上并过夜干燥于60℃。另外的新鲜移除的软组织肿瘤被包埋于最佳切割温度化合物(optimum cutting temperature compound)(OCT，TissueTec，Sakura，Japan)并贮存于‑80℃。7μm厚冰冻切片(在莱卡CM 3050S上获得)被解冻封固，固定于甲醇和丙酮中并在PBS中洗涤。用于免疫染，所述Technovit‑包埋的切片与在含有12％牛血清白蛋白的PBS中的初级抗体于4℃过夜孵育。使用以下初级抗体：家兔抗I V型胶原蛋白多克隆抗体(1∶50；Progen Biotechnik GmbH，Heidelberg，Germany)和小鼠抗平滑肌肌纤蛋白(SMA)多克隆抗体(1∶400；Sigma Aldrich，Saint Louis，MO)。在PBS洗涤后，切片用二级抗体于室温下温育1h，如下：Texas Red染连接的驴抗家兔IgG(1∶100；Jackson Immunoresearch，Suffolk，UK)和CyTM2‑连接的山羊抗小鼠IgG(1∶50，Jackson Immunoresearch，Suffolk，UK)。冰冻切片与以下抗体在4℃下温育过夜：小鼠抗人整联蛋白αvβ3 Alexa Fluor488连接的单克隆[LM609]抗体(1∶100；Millipore GmbH，Schwa lbach，Germany)和小鼠单克隆[P1F6]抗体针对整联蛋白αvβ5(藻红蛋白)(1∶100；Abcam，Cambridge，UK)。在用DAPI(4’，6‑二脒基‑2‑苯基吲哚，Serva，Heidelberg，Germany)的核染步骤后，切片被封固在Fluoromount G(Southern Biotech，USA)中。使用装配有数码相机(F‑view XS；软成像体系，M ünster，Germany)的莱卡显微镜(DMRE Bensheim，Germany)检查切片。测定每组4只代表性动物的SMA和IV型胶原蛋白(以百分比)的平均阳性分区以及平均血管直径(以μm)，使用分析软件分析每只大鼠的10个随机选择的视野(cellF；Olympus软成像溶液，M ünster，Germany)。免疫染肿瘤血管上的CD 31(内皮细胞)和IV型胶原蛋白(基膜)可见高度阳性地与骨转移灶的软组织组分相关(数据未显示)。
对于光学显微镜分析，用Mayer’s苏木素(Carl Roth，Karlsruhe， Germany)和曙红(Merck，Darmstadt，Germany)染切片，使用Eukitt 封固剂(O.Kindler，Freiburg，Germany)封固并使用装配有数码 相机(DFC 320；Leica，Wetzlar，Germany)的显微镜(DM LB；Leica， Wetzlar，Germany)分析。
2.7统计学分析
对于每只动物，骨质溶解和软组织组分的体积，幅值A和交换速 率常数kep相对于肿瘤细胞接种后的时间绘图(由于技术原因对照组的 一只动物不能被用于评价幅值A和kep)。在第30天针对每只动物进 行数据相对于相应的初始值的标准化并将变化以百分比表示。为了非 浸润性成像和组织学分析的数据的统计学对比，使用两面Wilcoxon‑ 测试对比对照与组之间的各项值；p‑值＜0.05被认为是显著的。
3.结论
在体外，MDA‑MB‑231人乳腺癌细胞表达αvβ5但仅是低水平的α vβ3整联蛋白。如通过pan α‑v反应剂17E6所检测到的， MDA‑MB‑231细胞的整体落体外表达αv整联蛋白(图1A)。使用在 文献中标准定义的抗体通过流式细胞计数它们显示低的αvβ3整联 蛋白细胞表面表达(36％的细胞是选通的(gated)；中值强度3倍于 背景)，强染于αvβ5整联蛋白(100％细胞选通的；中值强度10 倍于背景)(图1B、C)。MDA‑MB‑231还表达α2、α3、α5、α6， 和β1、β4，而非α4或β6链(未显示数据)。原位免疫组织化学显 示软组织肿瘤被强染和对于αvβ5相当均匀的染，但对于αvβ3 仅具有弱斑的染(图1D、E)。
如用VCT和MRI体内评价的，在实验的骨转移灶中，用西仑吉肽 减小了骨溶性病损(OL)和软组织组分(STC)的体积。在于第 30天开始之前，患肿瘤的动物被随机分配到两个组。骨溶性病损 (OL)和骨转移灶的软组织组分(STC)的平均相对体积在未处理的大 鼠中持续增加直至观察时间末(肿瘤细胞注射后55天)，相比于癌细 胞注射后30天的初始值(图2A)。OL体积的平均相对值在对照组中 提高了1.9、4.5和9.7被和在组中提高了1.5、2.4和3.5倍(分 别在35、45和55天)，相比于第30天的初始值(图2A、图3A)。 对于OL在第45天(p＜0.05)和55天(p＜0.01)发现组之间的明显差 异(图2A)。对照中在35、45和55天，STC的平均体积分别提高了 2.3、10.4和22.5倍(图2A)。在组的骨转移灶中，平均相对 STC值的增加，然而仅增加了2.2、4.9和6.3倍STC的体积相比于最 初值(图2A、图3B)。对于STC，在第45天(p＜0.05)和55天(p＜0.01； 图2A)发现对照组和组之间的显著差异。在组中，如VCT所 成像的，在使用西仑吉肽的疗法下三只大鼠(25％)显示新骨形成(图 3C)。该骨形成限制于骨溶性病损处且没有观察到超出骨质溶解的过 量的骨质增加。此种重新开始的骨形成进一步被组织学证实了，没有 出现在对照动物中。
用西仑吉肽处理实验的乳腺癌骨转移灶揭示了在源自DCE‑MRI的 参数中相对血量和血管通透性这两者的变化。对于DCE‑MRI参数幅值 A的平均相对值，发现在用αvβ3/αvβ5抑制剂的动物中显著的 降低，于第45天(102％的初始值；p＜0.05)和55(93％的初始值； p＜0.05)相比于对照(45天，125％和55天，105％的初始值)而不是 在接种后35天(106％在对照中vs.97％在的大鼠中；p＞0.05)(图 2B，图4A)。DCE‑MRI参数交换速率常数kep也揭示了在接种后55天 的显著差异，在被的动物中提高的值(72％的初始值；p＜0.05) 相比于对照(40％的初始值)，而不是在第35天(对照，86％和被治 疗的动物，69％；p＞0.05)或45(对照，63％和被的动物，88％； p＞0.05)(图2B，图4B)。
当与未处理的对照对比时，组织学分析揭示了在使用西仑吉肽治 疗后新骨形成，减小的血管直径和在动物血管中减少的平滑肌肌纤蛋 白和IV型胶原蛋白的co‑localization。在对照中，大鼠骨转移灶在 骨吸收的区域内包括肿瘤细胞(表现为软组织肿瘤)相应于VCT和MR 成像(图5A)。在使用西仑吉肽后，新形成的骨被苏木素/曙红 染的取自动物的近端胫骨的切片证实(图5B)展示于图3C。
在对照动物中的免疫荧光分析揭示了具有小直径的不规则血管， 由在血管的基底层中的IV型胶原蛋白染所显示，其没有与平滑肌肌 纤蛋白(SMA)co‑localization，与显示IV型胶原蛋白/SMA的较大血 管co‑localization(图5C)。在用西仑吉肽4周后基本上仅有 小和网状血管可见，而无清晰的SMA和IV型胶原蛋白的 co‑localization(图5D)。免疫荧光分析的量化导致显著减小的SMA 的平均阳性分区(p＜0.05)和显著提高的IV型胶原蛋白的分区 (p＜0.01)在被的动物中(相比对照)(图6A)。SMA和IV型胶 原蛋白的比(被的大鼠：0.60/3.32；对照大鼠：0.83/2.37)在 西仑吉肽4周后显著减小(p＜0.01)，和在西仑吉肽处理的骨转移 灶中的平均血管直径(6.6μm)显著小于对照大鼠中的(8.8μm， p＜0.01；图6B)。
4.讨论
该研究的目的是评估αvβ3/αvβ5整联蛋白抑制剂西仑吉肽对 用人MDA‑MB‑231乳腺癌细胞移植的裸大鼠中的乳腺癌骨转移灶的效 果。我们使用非浸润性成像技术VCT、形态学MRI和DCE‑MRI来追踪 纵向恶化。我们的最初发现是在允许肿瘤植入骨一个月后开始用西仑 吉肽在裸大鼠中减少了乳腺癌转移灶的骨质溶解和软组织肿瘤组 分的体积。西仑吉肽增加瘤内血管通透性，减少成熟的瘤内血管的出 现数目，并出乎预料地引起骨形成的恢复(下的动物的四分之一)。 我们在裸大鼠中使用西仑吉肽的期间使用VCT发现骨质溶解的显著较 少。一些研究已报道在抑制整联蛋白αvβ3后乳腺癌骨转移灶中骨吸 收的减少。9，31，32然而，这些团队使用了MDA‑MB‑231细胞设计并克隆 来过表达αvβ3或强表达该整联蛋白的乳腺癌细胞系如MDA‑MB‑435。 当MDA‑MB‑231细胞，我们使用仅表达低水平αvβ3，在此观察到的抗 吸收效果可能不是根本的，由于该整联蛋白在肿瘤细胞上的抑制，但 在破骨细胞上和在瘤内血管系统上也表达低水平的αvβ3，和αvβ5 整联蛋白在所有三种部分上。12，33在之前的研究中，表达高水平的α vβ3整联蛋白的破骨细胞结合数个含有RGD的ECM蛋白包括玻连蛋 白、骨桥蛋白，和BSP。34通过这些相互作用，αvβ3参与破骨细胞 活性的调节且和该整联蛋白的抑制被发现将降低破骨细胞‑介导的骨 吸收。35此外，因为需要血管发生来启动和维持破骨性骨吸收，通过 西仑吉肽的抑制可能贡献于所观察到的骨质溶解的减少，我们在西仑 吉肽后的观察。36因为西仑吉肽与人和大鼠αv整联蛋白交叉反 应，在我们的研究中所观察到的效果归因于在MDA‑MB‑231以及在宿主 细胞上特别是血管和骨部分上αvβ3和αvβ5整联蛋白的抑制。哪个 部分被靶向而产生效果，我们在此的报道是基于研究的。
有趣的是，用西仑吉肽的三只动物(25％)在此显示骨基质的 增加，即在骨溶性病损的新骨形成，其在对照动物中是没有的。迄今 没有已知的疗法，对于患有骨转移灶的患者，可见到这种效果。在用 双膦酸盐后，围绕骨溶性病损的硬边是标示局部骨矿化的应 答的一般标志，但在该疗法后没有见到新骨形成。37这两种整联蛋白 αvβ3和αvβ5被成骨细胞表达并与和成骨细胞、粘附和活性迁移相 关。38我们之前在该乳腺癌骨转移灶模型中显示BSP的抑制还导致减 少的骨吸收和新骨形成。28，39因为BSP结合αvβ3整联蛋白，因子、 BSP或αvβ3的抑制可能通过相同的路径导致成骨性骨形成。40然而， 诱导骨再生的准确机制还需要被阐明。
不仅是抗吸收效果，还有相比对照动物，各软组织组分具有较小 体积，标示着西仑吉肽的抗肿瘤效果。西仑吉肽抑制一些实验肿瘤的 生长包括黑素瘤和成胶质细胞瘤。41，42由于MDA‑MB‑231细胞的αv β5的高表达和αvβ3的低表达，我们在此报道的抗肿瘤效果可能是 在乳腺癌细胞的表面上直接抑制αvβ5与在肿瘤管的内皮表面上抑 制αvβ3和αvβ5的抗血管形成效果相组合的结果。15该假说，然而， 仅基于在我们的研究中所观察到的MDAMB‑231细胞的整联蛋白表达， 且必须在进一步的研究实验性验证。Chen等人之前观察到MDA‑MB‑231 细胞呈近似水平表达了αvβ3和αvβ5整联蛋白建议西仑吉肽的治 疗效果肯能取决于所使用的各细胞克隆的表达模式。43
体外和体内的西仑吉肽抗血管生成效果已早先描述了。15，18，41，44 在我们的研究中，通过DCE‑MRI的评估西仑吉肽实验的乳腺癌骨 转移灶导致幅值A的减小和交换速率常数kep的增加。这些结果说明在 这些骨骼病损中血量的减少和血管通透性的增加，与“抗血管生成” 效果相容。在实验的成胶质细胞瘤和黑素瘤中，在使用西仑吉肽治 疗后肿瘤血管生成和肿瘤生长减少。21，29一般性猜测西仑吉肽和相关 的抑制剂的抗血管形成活性归因于实验可观察到的萌芽和分化的抑 制，和血管生成内皮细胞凋亡的诱导，粘附和存活依赖αvβ3和αv β5。15，45在我们的免疫组织学分析中，我们观察到西仑吉肽后 血管再塑包括显著减小的平均血管直径和SMA/IV型胶原蛋白比，说明 较小的血管缺乏外膜细胞和平滑肌细胞，更频繁地发生在这些动物中 相比在未处理的对照中。在西仑吉肽下血管再塑的这些结果而非 肿瘤血管的完全的退化是与DCE‑MRI参数A和kep的中等变化相一致 的。一起考虑，我们的结论是西仑吉肽触发了血量的减少(通过幅值 A的评估)归因于较小和部分无功能的血管，并观察到提高了血管通 透性(通过交换速率常数kep评估)归因于在西仑吉肽后不成熟血 管的数目增加。如在我们的研究中所见到的提高的血管通透性，先前 被Alghisi和同事报道，其报道了在西仑吉肽下VE‑钙粘蛋白脱 离细胞‑细胞接触位点导致细胞接触的丧失和内皮单层通透性的增加。46在骨转移灶中，该效果可能改善局部药物递送到这些病损，当西仑 吉肽与标准如双膦酸盐或化疗法相结合。对比在骨转移灶中主要 显示抗破骨的双膦酸盐和主要显示细胞毒性效果的化疗法，在我们的 研究中西仑吉肽显示抗吸收、抗肿瘤和抗血管形成功效。由于相比当 前所使用的，该药物有利的安全性特征和可选的作用机制，西仑 吉肽表现出有希望的针对乳腺癌癌转移到骨的新颖疗法并可能在进一 步的实验和临床研究中呈单剂或与双膦酸盐和化疗法组合是有效 的。西仑吉肽还可能是适宜的组合对象用于在骨骼病损中的离子 放射，由于其在先前报道的在各种肿瘤包括乳腺癌中放射敏感效果。47‑49在一些啮齿类动物肿瘤模型中，缺乏αvβ3和αvβ5整联蛋白， 或低浓度的西仑吉肽的抑制刺激肿瘤生长。50，51这看来不是在我们在 此报道的乳‑肿瘤‑到‑骨模型的情况。是否这些实验内容的这个或那个 较好地反映了人病理学对αv整联蛋白抑制剂的应答，然而，必须留 待临床实验的验证。19结论是，用西仑吉肽较好建立的实验的乳 腺癌骨转移灶导致在这些骨病损中骨吸收和软组织肿瘤生长的抑制和 骨的部分再生。尽管进一步的实验和临床研究是需要的，西仑吉肽是 用于患有骨转移灶的乳腺癌患者的可能的选择。
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以上给出的文献通过引用以它们的全部并入本申请中。
6.附图图例
图1A‑D.MDA‑MB‑231细胞的整联蛋白在体外的表达(A‑C)和在 骨转移灶中的表达(D)。MDA‑MB‑231细胞用识别αv链(17E6；A)、 αvβ3(LM609；B)或αvβ5(P1F6；C)整联蛋白复合物的抗体染， 且通过流式细胞计数(open曲线)评价表达，由于第二层反应剂，染 被最小化(closed曲线)。原始数据曲线为展示而经平滑处理。对 αvβ3(红)、αvβ5(绿)和DAPI(蓝)染的对照动物的软组织 免疫组织学切片(D)。展示了合并的图像(αvβ3，αvβ5，DAPI) 以及αvβ3和αvβ5的单信道。条长，100μm。
图2A、B.实验的骨转移灶的骨溶性病损和软组织肿瘤的体积分 析(A)以及参数的平均相对值的量化A(与血量相关的)和kep(与血 管通透性相关)的量化(B)：对比未处理的和西仑吉肽处理的大鼠。对 比未处理的和西仑吉肽(cilengitide)处理的大鼠。以百分比给出值， 以相对于在接种癌细胞并开始西仑吉肽疗法30天后测定的初始值的 平均值表示。Y轴，以百分比表示的平均相对值(100倍)；X轴，癌 细胞接种后的天数(d)(d35，d45，d55)；误差条，SEM；*，p＜0.05；**， p＜0.01。
图3A‑C.赋形剂处理的和西仑吉肽处理的实验的骨转移灶形态 学特性。通过VCT和MRI获得的图像的分析分别确定骨溶性病损(A，C) 和软组织肿瘤(B)的体积，于癌细胞注射后的第30、35、45和55 天。在第30天成像后开始用西仑吉肽。在赋形剂处理的(A，B： 上列)以及导致骨质溶解和骨形成的抑制的西仑吉肽处理的动物之间 对比遭受骨损和软肿瘤的差异(A，B：下列；C)。展现的VCT图像： 3D骨表面重构，和MRI：T2加权成像的轴向层面。箭头，后腿的胫骨 近端。
图4A‑B.DCE‑MRI获取的描述骨转移灶的功能参数幅值A(与血 量相关的)(A)和交换速率常数kep(与血管通透性相关)(B)：于癌 细胞接种后的第30、35、45和55天对比未处理的和西仑吉肽处理的 大鼠。在第30天成像后开始西仑吉肽。患有MDAMB‑231骨转移 灶的大鼠于第30天成像，然后随之对照(上列)或西仑吉肽(下列) 处理。使用DynaLab软件计算这些彩图，红表示所给的参数值高(h)， 蓝表示值低(l)。相同的尺度范围被用于为实验的和对照动物制造 这些图像。
图5A‑D.实验的未处理的和西仑吉肽处理的大鼠的乳腺癌骨转 移灶的组织学分析。苏木素/曙红染的切片对照大鼠中骨溶性病损 (A；t，肿瘤细胞；b，骨；箭头，破骨细胞)和在经处理的大鼠中的 新骨形成(B；b，骨；箭头，成骨细胞)。对照动物的软组织组分的 免疫组织学切片(C)和西仑吉肽处理的大鼠(D)。绿显示IV型胶原 蛋白染而红表示平滑肌肌纤蛋白的结构染；蓝，细胞核。箭 头指出具有部分共区域化的平滑肌肌纤蛋白和IV型胶原蛋白的大血 管，而双箭头表示没有清晰的绿和红染共区域化的小血管。下面展 示突出显示的结构的放大图像(A’，B’，C’，C”，D’，D”)。 A‑D，条长100μm；A’‑D”，条长50μm。
图6A，B.组织学分析的量化。平滑肌肌纤蛋白(SMA)和I V型 胶原蛋白(Col.IV)的染的平均分区(fractional mean area) 值以所测试的总面积的百分比表示(A)，而血管直径以平均值以μm 表示(B)。误差条，SEM；*，p＜0.05；**，p＜0.01。
实施例2：大鼠原位成胶质细胞瘤模型放射疗法，西仑吉肽(＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val))调度实验
NIH rnu裸大鼠被麻醉、受限并大脑内注射于1mm后眼眶(retro orbitally)，前囟点右侧3mm和深度2.5mm，使用5x10E5 U251人 成胶质细胞瘤细胞悬浮于10ul培养介质，使用#2701 Hamilton注射 器(装有26规格针头，基本上如以前所描述的(Engebraaten等人， 1999)。14天后，在使用单一的准直、背‑腹光束的6MV x‑rays之前 的各时间点(8h，4h，2h，1h)，以腹膜内推注提供PBS中的西仑吉 肽(4mg/kg)，使得95‑100％的中心轴剂量25Gy辐射肿瘤体积(Kim 等人，1999)。随后每7天，所述动物还接受相同的西仑吉肽腹膜内推 注。所述动物被供以随意的食物和饮水直到它们垂死，或用于组织分 析的取样(在t‑4和t‑8h组，所述动物在肿瘤注射后230天是健康 的)。Kaplan‑Meier存活曲线由原始数据(表2)计算和绘图(图7)。 在放射疗法单一组中的所有动物死于120天。
参考表：
Engebraaten，O.，Hjortland，G.O.，Hirschberg，H.，and Fodstad，O.(1999).Growth of precul tured human glioma specimens in nude rat brain.J.Neurosurg.90，125‑132.
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以上给出的文献通过引用以它们的全部并入本申请中。
结果在下表2和图7中给出：
表2
患病＝垂死的并从研究中移除
健康＝于所示日期取样组织，但于该时间点是存活的
存活＝在所示时间点是活的。
放射前的时间＝当给药4mg/kg的西仑吉肽。
Rt＝放射疗法25Gy
EMD＝西仑吉肽推注4mg/kg
美国日历校正，在结束栏中的日期；欧洲日历校正，在放射栏里 的日期
实施例3：伴随放射疗法的西仑吉肽(＝环 ‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val))和替莫唑胺的I/IIa期实验，之后 在新诊断为成胶质细胞瘤(GBM)的患者中进行替莫唑胺和西仑吉肽维 持疗法。
目的：评价在标准替莫唑胺(TMZ)和放射疗法(RT)之外，与环 RGD五肽西仑吉肽(＝环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val))，整联蛋白 avβ3和avβ5抑制剂，相组合的安全性、毒性和功效。
患者和方法：52患者(PS 0‑1：92％，2：8％；中值年龄57岁) 活检(n＝9/17％)或肿瘤切除术(n＝43/83％)后用标准TMZ/RT(Stupp 等人NEJM 2005)。此外西仑吉肽(500mgi.v.，2x/周)在TMZ/RT 一周前开始并贯穿化疗法期间或直至恶化。基础终点是在第6个月的 无恶化存活率(目标：65％)。患者随后每2个月进行MRI。组织病理 学诊断和MR I成像被独立地评论，评价MGMT启动子的甲基化反应状态 于45患者(86.5％)。
结论：46患者(92％)完成RT，≥90％的共用TMZ被42患者接 受和西仑吉肽被45患者接受。20患者(3持续的)完成6个维持TMZ 和西仑吉肽循环。观察的血液学的3和4级毒性是：淋巴细胞减少 (28/52，53.8％)，血小板减少(7/52pt.13.4％)和中性粒细胞减少(5/52， 9.6％)。相关的非血液3级毒性被报道n＝3/52(5.7％)患者：全 身性症状(无力，疲乏，厌食，n＝3)；提高的肝功能测试(n＝1)，深 静脉血栓和肺栓塞(n＝1)。一患者有经历了乙状穿孔的乙状憩室病历 史(2级)。总计，34/52(65.4％[95％CI，50.9‑78.0％])患者于第6 个月无恶化。在肿瘤中具有O6‑甲基鸟嘌呤‑DNA甲基转移酶(MGMT)基 因启动子甲基化反应的患者更可能达到6个月无恶化(PFS)终点。总 计，34/52(65.4％[95％CI，50.9‑78.0％])患者于第6个月无恶化。 对于总体结果的主要贡献是来源于亚组的患者(23/52受试对象，具有 甲基化的MGMT启动子，沉默DNA修复酶MGMT)，其显示强增加的PFS‑6 速率，对比组织学对照(91％vs.69％)。其它主要亚组(22/52，非 甲基化的MGMT启动子)显示较少的相关的差异相对于组织学对照 (40.9％vs.40％)，相比具有甲基化的MGMT启动子的亚组，其可能通 过较高剂量的西仑吉肽是显著改善的。总体而言，该研究到达其基础 终点(PFS‑6＝65.4％)
结论：该研究达到其基础终点。整联蛋白抑制剂RGD肽西仑吉肽 和TMZ/RT的联合是良好耐受的，PFS于第6个月是非常有利的。MGMT 基因启动子甲基化反应提供甚至较好的预后，结果概括于附图8中。
实施例4：增殖测定
1材料和方法
1.1测试体系(生物材料/动物)
癌细胞系生长于以下培养介质：
A549‑DMEM包含10％FCS(热失活的)加2mM谷氨酰胺，
HUVEC‑DMEM包含10％FCS(热失活的)加2mM谷氨酰胺和1mM 丙酮酸钠。
所有培养介质包含100单元/ml青霉素
和100ug/ml链霉素。于汇流进行细胞传代，通过在无阳离子的 PBS中洗涤一次，随后在PBS中的胰蛋白酶(0.5ug/ml)/EDTA(0.2 ug/ml)溶液中于37℃进行3分钟温育。将细胞回收到培养介质中， 离心并取出放入培养介质并计数。
1.2化学品和溶液
所有细胞培养试剂源自GIBCO/InVitrogen，除了胎小牛血清，其 购自BioWhittaker。具有和不具有阳离子的Dulbecco’s PBS源自 GIBCO/Invitrogen，阿拉玛蓝源自Serotech。紫杉醇、长春碱，和奥 沙利铂源自Sigma。顺铂购自Fluka。吉西他滨购自LGC Promochem， Heidelberg。AstraZeneca的Gefitnib和Novartis的伊马替尼 (imatinib)是商购可得的。
Merck KGaA的西仑吉肽。牛血清白蛋白源自VWR。细胞外基质组 分玻连蛋白和纤连蛋白是根据SOP 6456从人血清自用纯化的；纤维蛋 白原根据SOP 6460。大鼠尾I型胶原源自Serva。用于FACS分析的抗 体：17E6，20H9，LM609，P1F6，11D1，P4C10，MAb P1D6是商购可得 的，例如购自Chemicon。山羊抗小鼠IgG FITC缀合物源自Becton Dickson。
1.3方法
FACS分析
如上所述用胰蛋白酶收获细胞。所需要的细胞数目是取自包含 0.9mM CaCl2和0.5mM MgCl2+0.5％BSA(＝FACS缓冲剂)的PBS 和等分的1x10e6/管。于800xg离心4分钟后，将细胞在冰上用 抗整联蛋白抗体(10ug/ml，在FACS缓冲剂中，100ul/管)温育60 分钟。洗涤去除未结合的抗体，用山羊抗小鼠(FITC稀释的1∶25于 FACS缓冲剂中)温育细胞。细胞在冰上温育30分钟，洗涤去除未结 合的抗体，且制备最终的细胞悬浮液于FACS缓冲剂中，500ul/管。 细胞在FACScan上分析和平均强度荧光(MIF)针对阴性对照的MIF 标准化(无一级抗体)。
附着测定
如下进行细胞外基质蛋白的附着：
简而言之，2.5x10e4细胞/孔于包含0.5％BSA和25mM Hepes pH 7.4的RPMI中，附着于非组织培养物处理的96‑孔板上于37℃进 行60分钟，所述孔板是用连续稀释的玻连蛋白、纤连蛋白、纤维蛋白 原和I型胶原包衣的。洗涤去除未结合的细胞后，通过用己糖胺酶底 物温育确定相对细胞数。在Genios plate reader(SLT)中于405nm 读取谱反应。
增殖测定用100ul/孔的在PBS中2ug/ml的玻连蛋白溶液包衣 的非组织培养物处理的96孔板，于4℃温育过夜。将细胞以5x10e3 置于100ul的细胞培养介质(如上所述用于每个细胞系)。3小时后 于37℃系列稀释的化疗剂被单独加入或在恒定EC50浓度的αV整联蛋 白阻断剂的存在下加入，于2倍浓度在100ul/孔在细胞培养介质中。 孔板温育72小时，之后通过添加20ul/孔阿拉玛蓝(刃天青) (Nakayama et al.1997)测定相对细胞数。在于37℃温育4小时后 在Genios plate reader(SLT)中于535/590nm(激发/发射)读取 相对荧光强度。
1.4实验设计
一式三份进行。反应剂空白，包含培养介质加谱反应剂而无细 胞，在每个孔板上进行。空白值被测试值减去并常规为5‑10％的无抑 制的对照值。
在FACS分析中分析了15,000个事件。单一细胞从debris和聚集 物和肝细胞选通，基于用碘化丙啶染。标志物设定于用山羊抗小鼠 FITC单独染的阴性对照落(无一级抗体)。落入标志物右侧的细 胞(较高强度的荧光)被认为是阳性染的。
结果分别展示于附图9和附图10中。
X轴)上的浓度涉及各化合物(奥沙利铂、顺铂、长春碱、紫杉 醇、Iressa(吉非替尼)或吉西他滨)。
Y轴涉及相对细胞数。
西仑吉肽浓度是恒定的(6nM用于NSCLC(A549)和0.2nM用于内 皮细胞(HUVEC)，分别)。
结果展示于附图11和12中：α‑V整联蛋白抑制剂与长春瑞滨的 组合作用于人癌细胞的增殖的效果
测试整联蛋白αV阻断剂EMD 121974(西仑吉肽)在存活的人癌 细胞上的效果，分别组合长春瑞滨和紫杉醇，在细胞存活力的测定中， 取决于阿拉玛蓝染料的还原。每种试剂单独可抑制肿瘤存活力，一起 是用，所述化合物显示有利的且优选协同的抑制效果。
5.1测试体系(生物材料/动物)
5.2化学品和溶液
西仑吉肽，EMD 121974，环‑(Arg‑Gly‑Asp‑D‑Phe[N‑Me]‑Val) 被合成，纯化并表征[23]。西仑吉肽于4℃贮存于无菌无热源溶液中。
Dulbecco’s磷酸盐缓冲的盐水(136.9mM NaCl，2.8mM KCl， 8.1mM Na2HPO4 H2O，1.5mM KH2PO4)而无钙和镁，胰蛋白酶/EDTA 和培养介质199源自Life Technologies，和其它试剂如下：血清白 蛋白(牛级份V)(VWR)；阿拉玛蓝(Serotec)；化疗剂紫杉醇、多西 他赛、依托泊苷，和长春瑞滨是商购可得的。化疗化合物被溶解于DMSO 作为10mM的母溶液，贮存于4℃和在一个月内使用。
5.3方法
以前所建立的方法和详尽的描述(Goodman和Hahn a；b)被用于 测量整联蛋白抑制剂与化疗药物的联合在癌细胞和人内皮细胞增殖上 的效果。
5.4实验设计
一式两份或三份进行。反应剂空白，包含培养介质加阿拉玛蓝而 无细胞，在每个孔板上进行。空白值被测试值减去并常规为5‑10％的 无抑制的对照值。
生长测定中西仑吉肽以50μM至0.1nM的范围测试。
在定比组合测定中，物质被测定于各EC50浓度的8倍、4倍、2倍、 1倍、0.5倍和0.25倍。
5.5评价和统计方法
化疗剂和αv‑整联蛋白阻断剂被单独系列稀释或一起稀释(组合 疗法)。在一些测定中，化疗剂被单独系列稀释或与α‑v整联蛋白阻 断剂组合稀释。生长抑制曲线被绘制和转换组合曲线到较低浓度 (与单试剂曲线相关)来说明由组合疗法比对单一疗法的附加效果。
5.6结论
在血清生长刺激测定中使用人癌细胞或人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)单独测试αv‑整联蛋白竞争性抑制剂西仑吉肽(EMD 121974) 和测试其与长春瑞滨的组合。在这些测定中，细胞培养于血清中，或 于内皮生长刺激培养介质中(Goodman&Hahn)。
作为单一疗法，岁数化疗药物抑制了内皮和癌细胞的生长。
所述α‑v整联蛋白阻断剂抑制了内皮细胞生长。使用HUVEC的典 型结果示于图1，其中西仑吉肽d IC50为700nM。紫杉醇的IC50为10 nM，被减少到的0.05nM当于2μM西仑吉肽组合。对于长春瑞滨，IC50 为20nM，被减少到0.8nM当与2μM西仑吉肽组合。
源自非小细胞肺癌的癌细胞系(NSCLC：A549、肾癌(A498)和头 和颈的鳞状细胞癌(SCCHN：Detroit 562)的生长通过化疗药物(并 特别地通过长春瑞滨)也被抑制了，和在所有情况下该抑制在西仑吉 肽的存在下是有利的并优选协同增强的。
结论，长春瑞滨与整联蛋白抑制剂在它们的EC50浓度下的组合大 幅降低了这些细胞毒性物的EC50，优选至少5倍，更优选至少10倍， 或甚至更多倍。对于此种药物的窗口通常是极其窄的，所述EC50 的降低对允许更加延长的和较少进攻性的抗癌药物电池是很有价值增 添，还在追求更有效的疗法方案。这些测定的结果以类似的或基本类 似方式优选分别概括于附图9，10，11，12，13，14，15，16，17，18， 19，22，23，24，25，26和/或27中。对所述测定/结果的优选被突 出于如下给出的各实施例5，6，7，8，9，10，12，13，14，15，16 和/或17和相应的附图中。
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以上给出的文献通过引用以它们的全部并入本申请中。
5.8图和表
表1.长春瑞滨组合西仑吉肽作用于各种癌细胞系的效果总结
还参见涉及αv整联蛋白配体西仑吉肽和紫杉醇/长春瑞滨作用 于HUVEC细胞增殖的效果和αv整联蛋白配体西仑吉肽和紫杉醇/长春 瑞滨作用于NSCLC(A549)细胞增殖的效果的附图。
实施例5：αv整联蛋白配体西仑吉肽和紫杉醇/长春瑞滨作用于 A498细胞增殖的效果和αv整联蛋白配体西仑吉肽和长春瑞滨/依托 泊苷作用于SCCHN(Detroit562)细胞增殖的效果
附图13和14的图显示西仑吉肽与组合对象的各联合在 A498/Detroit562细胞增殖测定中的有利的和优选协同的效果。西仑 吉肽浓度为2μM(恒定)。
实施例6：αv整联蛋白配体西仑吉肽组合多西他赛/紫杉醇作用 于HUVEC细胞增殖的效果
定比测定多西他赛/紫杉醇和西仑吉肽联合作用于在完全的EGM MV培养介质中生长的HUVEC内皮细胞，根据Chou和Talalay[1]的分 析在附图13的图和等效线图解中显示出协同效果。各联合指数(CI)： 多西他赛‑西仑吉肽(CI＝0.7)和紫杉醇‑西仑吉肽(CI＝0.1) 说明所述联合的协同效果。(参见附图15)。
实施例7：αv整联蛋白配体西仑吉肽组合紫杉醇作用于NSCLC 细胞增殖的效果
附图16显示A549定比增殖测定。在系列稀释的化疗剂(与一起 (三角)或无西仑吉肽(方块))的存在下，细胞在玻连蛋白‑涂覆的 板上生长72小时。为了组合，所述药物以8倍于各自的EC50浓度 混合，且该混合物倍系列稀释。通过阿拉玛蓝还原测定相对细胞数和 显示紫杉醇和西仑吉肽组合作用于细胞生长的协同效果。各联合指数 (CI)紫杉醇‑西仑吉肽(CI＝0.33)说明该组合的协同效果。
实施例8：αv整联蛋白配体西仑吉肽组合博来霉素/奥沙利铂/ 紫杉醇作用于A549NSCLC细胞增殖的效果
A549 NSCLC测定博来霉素/奥沙利铂/紫杉醇和西仑吉肽，根据 Chou和Talalay[1]的分析在所有示于附图15的图中显示出协同效 果。各联合指数(CI)博来霉素‑西仑吉肽(CI＝0.07)，奥沙利铂 ‑西仑吉肽(CI＝0.66)和紫杉醇‑西仑吉肽(CI＝0.33)说明所述 组合的协同效果。(参见附图17)。
实施例9：αv整联蛋白配体西仑吉肽组合Paxlitaxel或长春碱 作用于各种NSCLC细胞系的效果
Calu6 NSCLC测定紫杉醇和西仑吉肽和H460 NSCLC测定长春碱/ 紫杉醇和西仑吉肽所有示于附图18的图中显示出协同效果。
实施例10：αv整联蛋白配体西仑吉肽组合5‑FU或紫杉醇作用 于各种EGFR依赖的细胞系的效果
在EGFR依赖的癌中，5‑FU与西仑吉肽的组合和紫杉醇与西仑吉 肽的组合都显示出有利的和优选协同的效果，如附图19中的结果所 示，例如在ACHN、A498和Caki 1细胞增殖测定中。
实施例11：西仑吉肽&Erbitux在癌异种移植物中的组合功效， 任选地与放射疗法组合
该实施例显示整联蛋白配体西仑吉肽(潜在的αvβ3拮抗剂)， 与EGFR抗体西妥昔单抗(Erbitux)的组合，在局部肿瘤疗法中， 任选地与放射疗法(优选还称为RT，Rx或RTx)组合，优选外线束放 射疗法，是有益的和特别是协同有益的。T体内异种移植物实验的结 果显示放射在内皮细胞中上调αvβ3表达和连续地磷酸化Akt，其可 提供由整联蛋白存活信号传递介导的放射损伤的肿瘤逃逸机制。内皮 细胞增殖、迁移、血管形成、凋亡，和克隆原存活的研究还显示通过 同时施用整联蛋白拮抗剂内皮细胞的放射敏感性的增强。这可表明有 希望的体外数据(示于附图22)可成功地转移到人异种移植物模型， 例如表皮样(A431)，生长s.c.于BALB/c‑nu/nu小鼠的异种移植物模 型示于附图20和附图21。对于这些实验适宜的反应剂和方法是本领 域中已知的。
所述实验优选如下所述或以其类似的方式进行：
反应剂和细胞培养物。培养最初分离的HUVEC s和人皮肤微血管内 皮细胞(HDMEC；Promocell，Heidelberg，Germany)直至5代。于 37℃，5％CO2和95％湿度的减少血清(5％FCS)的改良Promocell培 养介质下保持细胞于培养基中，供以2ng/mL VEGF和4ng/mL碱性的 成纤维细胞生长因子(bFGF；refs.1，30，31)。人前列腺(PC3)， 神经胶质瘤(U87)，和vulva(A431)肿瘤细胞(Tumorbank DKFZ， Heidelberg，Germany)被培养于DMEM介质)(10％FCS)中。所有实 验用HUVEC(直至5代)进行并且和使用HDMEC(直至6代)证实实现的 选择。
Matrigel侵入、迁移和共培养实验。HUVEC和HDMEC的体外侵入 在Matrigel‑包衣(0.78mg/mL)transwell插入8Am孔径(Becton Dickinson，Heidelberg，Germany)。细胞被胰蛋白酶处理和每个实 验加入200AL细胞悬浮液(3_105细胞/mL)到transwells一式三 份。包含VEGF和bFGF(500AL)的化学引诱剂介质被加入较低的孔。 对于共培养的研究，将PC3细胞播种于24‑孔板和，照射PC3细胞后， 具有内皮细胞的Matrigel‑包衣的transwells被加到上隔室。18小时 孵育后，确认内皮细胞已经侵入膜的下侧并用Diff‑Qulk II溶液 (Dade Behring)染和封于载玻片上。用显微镜计数迁移细胞。
动物研究。根据实验动物保护和使用条例并被动物和德国政府的 地区和政府动物保护委员会(Regierungspraesidium，Karlsruhe) 批准地进行动物研究。对于肿瘤生长实验用s.c.生长人异种移植物， 无胸腺的8周龄的20g的BALB/c‑nu/nu小鼠获自Charles River Laboratories(Sulzfeld，Germany)。人PC3前列腺癌细胞、U87成 胶质细胞瘤细胞，和A431外阴癌细胞被注射s.c.入右后肢(1‑5_106 细胞于100AL PBS中)。当肿瘤体积达到200mm3(通过每周两三次 的用卡尺直接测量来测定，并通过体积公式V＝长度_宽度_宽度 _0.5)，动物被随机用于，从第0天开始如下施用各种药物。放 射疗法(5_2.5Gy)被提供5个连续天，使用Co‑60源(Siemens， Gammatron，Erlangen，Germany)，或如下给出。
西仑吉肽&Erbitux在癌异种移植物中的组合功效，任选地组合 放射疗法(Rx)优选地如下测定：
A431人表皮样癌s.c.在balb c nu nu小鼠上，用Erbitux(西 妥昔单抗)以25mg/kg(＝0.5mg/动物)的量，腹内注射施用于第 1天(4小时先于放射疗法(Rx)，如果任选地还应用放射疗法)、第 8天、第15天、第22天；西仑吉肽(环‑(Arg‑Gly‑Asp‑DPhe‑NMe‑Val)) 被腹内注射施用(用量为25mg/kg)20次，优选连续5天每周(20x 5/w)，优选1‑2h先于放射疗法(Rx)，如果任选地还应用放射疗法。
特别是关于方法学的进一步参考由以下文献给出，其通过参考以 其全部被包括于本申请的公开内容中：
Abdollahi et a l.，CANCER RESEARCH 63，8890‑8898，December 15，2003
Abdollahi et al.，Cancer Res 2005；65：(9).May 1，2005
Abdollahiet al.，Clin Cancer Res 2005；11(17)September 1， 2005
Hallahan et al，Int.J.Radiation Oncology Biol.Phys.，Vol. 65，No.5，pp.1536‑1543，2006
Abdollahi et al，Clin Cancer Res 2211 2008；14(7)April 1， 2008
实施例12：西仑吉肽&Erbitux在A431/HDMVEC/U87增殖测定的 组合功效，任选地与放射疗法(Rx)组合。这些结果显示于附图22。
进行细胞增殖测定，分别针对A431、HDMVEC和U87细胞系，针对 Erbitux(于2.2g/ml的浓度)或西仑吉肽(于100nM的浓度) 或者这两者，任选地组合放射疗法(Rx＝2Gy)，相对于未处理的对 照或单一进行放射疗法。附图20显示所有的联合的有利的和优选协同 的效果，和特别是Erbitux与西仑吉肽的组合和Erbitux、西仑吉肽 与放射疗法的组合。
实施例13：αv整联蛋白配体西仑吉肽和依托泊苷在HUVEC细胞 增殖上的效果。这些结果显示于附图23。
在含有2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质199中，培养HUVEC 细胞于玻连蛋白‑涂覆的孔上，存在或不存在αv整联蛋白配体西仑吉 肽。各化疗剂(药物)单独或以恒定浓度(IC50或IC70)与西仑吉肽组 合。通过阿拉玛蓝还原测定相对细胞数。
如附图23中的等效线图解所示，αv整联蛋白配体西仑吉肽和依 托泊苷协同抑制HUVEC内皮细胞增殖。用于视觉等效线图解的所述数 据取自附图23的图上端并根据Chou和Talalay[1]进行分析。Dm＝ 介质效应下的药物浓度。联合指数(CI)＜1(在此CI＝0.4)标示该 组合的协同。
实施例14：αv整联蛋白配体西仑吉肽和药物依托泊苷、多柔比 星、长春新碱或美法仑在HUVEC细胞增殖上的效果。这些结果显示于 附图24。
在含有2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质199中，培养HUVEC 细胞于玻连蛋白‑涂覆的孔上，存在或不存在αv整联蛋白配体西仑吉 肽。各化疗剂(药物)单独或以恒定浓度(IC50或IC70)与西仑吉肽组 合。通过阿拉玛蓝还原测定相对细胞数。
实施例15：αv整联蛋白配体西仑吉肽和药物5‑FU、顺铂或喜树 碱在HUVEC细胞增殖上的效果。这些结果显示于附图25。
在含有2％FSC和10ng/ml FGF‑2的培养介质199中，培养HUVEC 细胞于玻连蛋白‑涂覆的孔上，存在或不存在αv整联蛋白配体西仑吉 肽。各化疗剂(药物)单独或以恒定浓度(IC50或IC70)与西仑吉肽组 合。通过阿拉玛蓝还原测定相对细胞数。
实施例16：αv整联蛋白配体西仑吉肽和依托泊苷在HUVEC细胞 增殖上的效果。这些结果显示于附图26。
定比测定：多西他赛/紫杉醇和西仑吉肽联合作用于在完全的EGM MV介质中生长的HUVEC内皮细胞，在附图24的图和等效线图解中根 据Chou和Talalay[1]的分析显示协同效果(CI＝0.2)。
实施例17：αv整联蛋白配体西仑吉肽和顺铂或依托泊苷在SCLC 细胞增殖上的效果。这些结果显示于附图27。
定比增殖测定：在依托泊苷或顺铂单独或以固定比例组合西仑吉 肽的存在下，DMS 53 SCLC细胞被培育72小时。通过阿拉玛蓝还原测 定细胞数。
X轴显示所使用的化疗剂的浓度。西仑吉肽浓度：依托泊苷∶西仑 吉肽为0.4∶1，和顺铂∶西仑吉肽为1∶0.5。
实施例18：研究007：MDA‑MB‑468‑原生肿瘤生长
MDA‑MB468人乳肿瘤细胞被原位接种入雌性BALB/c nu/nu小鼠的 第三乳房的脂肪组织。当肿瘤达到约40mm3的大小，将所述小鼠随机 分组。
在每个组中的小鼠接受赋形剂对照(安慰剂)或EMD 121974(75、 150或300mg/kg)的每天皮下注射。每周三次测量所有小鼠的体重和 肿瘤体积。
结果：用EMD 121974的每天抑制MDA‑MB‑468肿瘤的肿瘤生 长(所有三个给药组(75、150或300mg/kg)的肿瘤体积在第60天 低于200mm3，赋形剂对照的肿瘤体积在第60天大于350mm3。结果详 细地显示于附图28。
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