用作激酶活性调节剂的6-[4-(1H-咪唑-2-基)-1-基]嘧啶-4-胺衍生物

用作激酶活性调节剂的6-[4-(1H-咪唑-2-基)-1-基]嘧啶-4-胺衍生物

相关申请

本申请要求2013年3月11日提交的美国专利申请号61/776,440的优先权，其内 容全部纳入此处作为参考。

技术领域

本发明涉及一系列可用于哺乳动物的过度增殖性疾病诸如癌症的新颖的杂环 胺。本发明还包括所述化合物在哺乳动物尤其是人的过度增殖性疾病的用途，以 及包含所述化合物的药物组合物。

发明背景

蛋白激酶组成一大族担负细胞内多种信号转导过程控制的结构相关酶(Hardie，G. 和Hanks，S.(1995)TheProteinKinaseFactsBook.I和II，AcademicPress，SanDiego， CA)。通过它们磷酸化的底物(例如蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)，可 将激酶分成多族。已确定了一般对应于这些激酶各族的序列模体(例如，Hanks， S.K.，Hunter，T.，FASEBJ.，9：576-596(1995)；Knighton，等人，Science，253： 407-414(1991)；Hiles等人，Cell，70：419-429(1992)；Kunz等人，Cell，73：585- 596(1993)；Garcia-Bustos，等人，EMBOJ.，13：2352-2361(1994))。

蛋白激酶可由其调节机制表征。这些机制包括例如自磷酸化作用、由其它激酶转 磷酸作用、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-脂质相互作用和蛋白质-多核苷酸相互作 用。单个蛋白激酶可由多于一种机制调节。

通过将磷酸基团加到靶蛋白，激酶可调节很多不同的细胞过程，包括但不限于增 殖、分化、细胞凋亡、运动性、转录、翻译及其他信号传导过程。这些磷酸化事件充 当能够调节或调整靶蛋白生物功能的分子通断开关。靶蛋白的磷酸化响应于多种胞外 信号(激素、神经递质、生长和分化因子等)、细胞周期事件、环境或营养应激等而发 生。适合的蛋白激酶在信号传导通路中起作用以活化或钝化(直接或间接)例如代谢 酶、调节蛋白、受体、细胞骨架蛋白、离子通道或泵或转录因子。由蛋白磷酸化控制 缺陷导致的不受控的信号传导涉及多种疾病，包括例如炎症、癌症、过敏/哮喘、免疫 系统疾病和病症、中枢神经系统疾病和病症及血管生成。

蛋白激酶70S6K，即70kDa核糖体蛋白激酶p70S6K(也称为S6K、p70/p85S6激 酶、p70/p85核糖体S6激酶和pp70S6K)是蛋白激酶的AGC亚家族的成员。p70S6K 是丝氨酸-苏氨酸激酶，其是磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT通路的组成部分。p70S6K 为PI3K的下游部分，且通过响应多种有丝分裂原、激素和生长因子在多个位点的磷 酸化而被激活。由于雷帕霉素起到抑制p70S6K活性的作用，p70S6K活性也受包含 mTOR的复合物(TORC1)的控制。p70S6K通过PI3K下游靶点AKT和PKCζ调节。 Akt直接磷酸化并钝化TSC2，由此激活mTOR。此外，对于被渥曼青霉素抑制而不被 雷帕霉素抑制的p70S6K的突变体等位基因的研究表明PI3K通路可以不依赖mTOR 活性的调节而对p70S6K产生作用。

酶p70S6K通过S6核糖体蛋白的磷酸化而调控蛋白合成。S6磷酸化与翻译装置 (translationalapparatus)的mRNA编码组件的翻译的增加相关，所述翻译装置包括核糖 体蛋白和翻译延伸因子(其表达增加对细胞生长和增殖是必不可少的)。这些mRNA在 其5'转录起始端(称为5'TOP)包含寡嘧啶片段，已证明这对于其在翻译水平的调节是 必不可少的。

除了参与翻译之外，p70S6K激活还涉及细胞周期控制、神经细胞分化、在肿瘤转 移中重要的细胞运动性和细胞响应的调节、免疫应答和组织修复。p70S6K抗体破坏了 大鼠成纤维细胞进入S期所驱动的促有丝分裂响应，这就表明了p70S6K功能在细胞 周期中从G1期至S期的进程中是必不可少的。此外，已经确定在细胞周期的G1期至 S期雷帕霉素对细胞周期增殖的抑制是其抑制生成过度磷酸化的激活形式的p70S6K的 结果。

p70S6K肿瘤细胞增殖和保护细胞免于细胞凋亡中的作用受到支持，这是基于其在 肿瘤组织中参与生长因子受体信号转导、过表达和激活。例如，RNA印迹分析和蛋白 质印迹分析表明，pS6K基因的扩增分别伴有mRNA和蛋白质表达的相应增加(Cancer Res.(1999)59：1408-11-pS6K在乳腺癌中定位于染体区17q23及其扩增的测定 (LocalizationofpS6KtoChromosomalRegion17q23和DeterminationofItsAmplification inBreastCancer))。

染体17q23在以下肿瘤和癌症中扩增：高达20％的原发性乳腺肿瘤、87％含有 BRCA2突变的乳腺肿瘤和50％含有BRCA1突变的肿瘤以及其它癌症类型，例如胰腺 癌、膀胱癌和成神经细胞瘤(参见M.Barlund，O.Monni，J.Kononen，R.Cornelison， J.Torhorst，G.Sauter，O.-P.Kallioniemi和KallioniemiA.，CancerRes.，2000，60： 5340-5346)。研究表明，17q23在乳腺癌中的扩增涉及PAT1、RAD51C、pS6K和 SIGMA1B基因(CancerRes.(2000)：60，第5371-5375页)。

p70S6K基因已被鉴定为这些部位扩增和过表达的靶点，并且观察到扩增和预后不 良之间在统计上显着相关。在用上游激酶mTOR的抑制剂CCI-779(雷帕霉素酯) 的肾癌患者中，观察到p70S6K激活的临床抑制。据报道，疾病进程和p70S6K活性抑 制之间有显着的线性相关性。在响应能量应激时肿瘤抑制因子LKB1激活AMPK， AMPK磷酸化TSC1/2复合物，并使得其钝化mTOR/p70S6K通路。LKB1中的突变引 起波伊茨-耶格综合征(Peutz-JegherssyndromePJS)，患有PJS的患者发展为的癌症可能 性是一般人的15倍。此外，1/3的肺腺癌潜伏有未激活的LKB1突变。p70S6K涉及 代谢疾病和障碍。据报道，缺乏p70S6K避免患年龄和饮食诱发的肥胖症并同时提高 胰岛素敏感性。基于这些发现，支持了p70S6K在肥胖症、糖尿病、代谢综合征、胰 岛素抵抗、高血糖、高氨基酸血症和高脂血症等代谢疾病和障碍中的作用。

在WO03/064397，WO04/092154，WO05/054237，WO05/056014， WO05/033086，WO05/117909，WO05/039506，WO06/120573，WO06/136821， WO06/071819，WO06/131835，WO08/140947，WO10/056563，WO10/093419， WO12/013282，WO12/016001以及WO12/069146中公开了被描述为适于抑制 p70S6K的化合物。

发明内容

本发明的一方面提供通式(I)所示的化合物及其可药用盐、溶剂化物、盐的溶剂化 物或者前药，

式中，R¹、R²、R³、R⁴、R^A和n各自如本文所定义。

本发明的目的是提供调节激酶活性的新化合物。该蛋白激酶调节包括但不限于 p70S6K抑制和AKT抑制，其用于过度增殖性疾病，尤其是与以上提及的蛋白激 酶的活动过度相关的那些，诸如哺乳动物中的癌症，所述化合物在活性以及溶解度、 代谢清除率和生物利用度特性方面具有优良的药理性质。

因此，本发明提供了新的杂环胺化合物及其可药用盐、溶剂化物或前药，这些化 合物都是激酶抑制剂且可用于以上提及的疾病。

本发明的一方面提供通式(I)化合物及其可药用盐、溶剂化物、盐的溶剂化物或前 药，

式中：

R¹是Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、N(LA)₂、NO₂、CN、 OCN、COOH、COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、 NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、NHSO₂(LA)、CHO、 CO(LA)， 或者是具有0、1、2、3或4个N和/或O原子和4、5、6、7、8、9或 10个骨架原子的单环或双环的脂族或芳香族同素环或杂环，其可以未取 代或彼此独立地被Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、 N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、 CON(LA)₂、NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、CHO和/或 CO(LA)单取代、二取代或三取代，或者

是具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子的无支链的或有支链的直链 或环状烷基，其中1个或2个CH₂-基团可以被O原子所替代和/或被- NH-、NH(LA)、-CO-、-NHCO-或–CH＝CH–基团所替代，和/或其中CH 基团可以被-N-所替代；

R^A是H；或者R^A和R¹与各自所连接的原子一起形成具有1-4个独立地选自 N、O或S的杂原子的3-7元杂环，或者形成具有1-4个独立地地选自 N、O或S的杂原子的5-6元单环杂芳环；R^A任选地是取代的；

每个R²独立地是Hal、OH或A；

A是具有1、2、3、4、5或6个碳原子的无支链的或有支链的烷基，其中 1-4个H原子彼此独立地被Hal所替代；

R³是H，或者是具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个碳原子的无支链的或 有支链的直链、单环或双环烷基，其中1个或2个CH₂基团可以被-O- 或-NH-基团所替代，和/或其中1个或2个CH基团可以被-N-基团所替 代，和/或其中1、2或3个H原子可以被Hal或者OH所替代；或者R³是具有1、2、3、4、5或6个碳原子的无支链的或有支链的烷基，所述 烷基被3-6元杂环取代，可以任选地被进一步取代；

R⁴是C_5–10芳基、3-8元饱和或部分不饱和的碳环、具有1-4个独立地选自 N、O或S的杂原子的3-7元杂环、具有1-4个独立地选自N、O或S的 杂原子的5-6元单环杂芳环；上述基团中每一个被Hal、LA、OH、 O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、 COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、NHCO(LA)、 NHCONH(LA)、NHCONH₂、NHSO₂(LA)、CHO或CO(LA)单取代、二 取代或三取代；

LA是具有1、2、3或4个碳原子的无支链的或有支链的饱和或部分不饱和 的直链烃链，其中1、2或3个H原子可以被Hal所替代；

Hal是F、Cl、Br或I；以及

n是1或2。

在某些实施例中，R¹是Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、N(LA)₂、 NO₂、CN、OCN、COOH、COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、 NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、NHSO₂(LA)、CHO或CO(LA)。在某些实 施例中，R¹是具有0、1、2、3或4个N和/或O原子和4、5、6、7、8、9或10个骨 架原子的单环或双环的脂族或芳香族同素环或杂环，其可以未取代或彼此独立地被 Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、 COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、NHCO(LA)、NHCONH(LA)、 NHCONH₂、CHO和/或CO(LA)单取代、二取代或三取代。在某些实施例中，R¹是具 有1、2、3、4、5、6、7或8个碳原子的无支链的或有支链的直链或环状烷基，其中 1个或2个CH₂-基团可以被O原子所替代和/或被-NH-、NH(LA)、-CO-、-NHCO-或- CH＝CH-基团所替代，和/或其中CH基团可以被-N-所替代。

在某些实施例中，R¹是CN、CONH₂、Hal、O(LA)，或者是具有1、2、3、4、 5、6、7或8个碳原子的无支链的或有支链的直链或环状烷基，其中1个或2个CH₂- 基团可以被O原子所替代和/或被-NH-、NH(LA)、-CO-、-NHCO-或-CH＝CH-基团所替 代，和/或其中CH基团可以被-N-所替代。

在某些实施例中，R¹是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁 基、直链或支链戊基、或者直链或支链己基。

在某些实施例中，R¹选自表1的基团。

表1：通式(I)中的R ¹ 的取代基：

在某些实施例中，每个R²独立地是Hal。在某些实施例中，每个R²独立地是 OH。在某些实施例中，每个R²独立地是具有1、2、3、4、5或6个碳原子的无支链 的或有支链的烷基，其中1-4个H原子彼此独立地能被Hal所替代。

在某些实施例中，每个R²独立地是Hal、OH、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正 丁基、仲丁基、叔丁基、直链或支链戊基、或者直链或支链己基。

在某些实施例中，每个R²独立地是F、OH或甲基。

在某些实施例中，R³是H。

在某些实施例中，R³是具有1、2、3、4、5、6、7、8或9个碳原子的无支链的或 有支链的直链或者单环或双环烷基，其中1个或2个CH₂基团可以被-O-或-NH-基团所 替代，和/或其中1个或2个CH基团可以被-N-基团所替代，和/或其中1、2或3个H 原子可以被Hal或者OH所替代。

在某些实施例中，R³是具有1、2、3、4、5或6个碳原子的无支链的或有支链的 烷基，所述烷基被3-6元杂环取代，可以任选地被进一步取代。在某些实施例中，取 代的杂环是氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、噁唑烷、异噁唑烷、噻 唑烷、异噻唑烷、、吗啉、哌嗪、六氢嘧啶、或六氢哒嗪。

在某些实施例中，R³选自表2的基团。

表2：通式(I)中的R ³ 的取代基：

在某些实施例中，R⁴是C_5–10芳基、3-8元饱和或部分不饱和的碳环、具有1-4个 独立地选自N、O或S的杂原子的3-7元杂环、具有1-4个独立地选自N、O或S的杂 原子的5-6元单环杂芳环；上述基团中每一个被Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或 NH(LA)、N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、 CON(LA)₂、NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、NHSO₂(LA)、CHO或CO(LA) 单取代、二取代或三取代。

在某些实施例中，R⁴是C_5–10芳基或具有1-4个独立地选自N、O或S的杂原子的 5-6元单环杂芳环；上述基团中每一个被Hal、LA、OH、O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、 N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、COO(LA)、CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、 NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、NHSO₂(LA)、CHO或CO(LA)单取代、二 取代或三取代。

在某些实施例中，R⁴是苯基或吡啶基；上述基团中每一个被Hal、LA、OH、 O(LA)、NH₂和/或NH(LA)、N(LA)₂、NO₂、CN、OCN、COOH、COO(LA)、 CONH₂、CONH(LA)、CON(LA)₂、NHCO(LA)、NHCONH(LA)、NHCONH₂、 NHSO₂(LA)、CHO或CO(LA)单取代、二取代或三取代。

在某些实施例中，R⁴选自表3的基团。

表3：通式(I)中的R ⁴ 的取代基：

在某些实施例中，R^A是H。

在某些实施例中，R^A和R¹与各自所连接的原子一起形成具有1-4个独立地选自 N、O或S的杂原子的3-7元杂环。在某些实施例中，R^A和R¹与各自所连接的原子一 起形成具有1-4个独立地地选自N、O或S的杂原子的5-6元单环杂芳环。

在某些实施例中，R^A和R¹与各自所连接的原子一起形成5元杂芳环；R^A任选地 是取代的。

在某些实施例中，R^A和R¹一起形成

一般地，出现超过一次的全部残基可以是相同或不同，即它们是相互独立的。

在某些实施例中，本发明提供通式(II)所示的化合物及其可药用盐，

式中，R¹、R²、R³和R⁴具有上面标明的的意义以及在上面和此处实施例、类别及 子类中单独或组合地描述的意义。

在某些实施例中，通式(II)所示的化合物是外消旋体。在某些实施例中，通式(II) 所示的化合物是手性化合物。在某些实施例中，R²是F。在某些实施例中，R²是甲 基。

在某些实施例中，本发明提供通式(III)所示的化合物及其可药用盐，

式中，R¹、R²、R³和R⁴具有上面标明的的意义以及在上面和此处实施例、类别及 子类中单独或组合地描述的意义。

在某些实施例中，通式(III)所示的化合物是外消旋体。在某些实施例中，通式(III) 所示的化合物是手性化合物。在某些实施例中，R²是F。在某些实施例中，R²是甲 基。

在某些实施例中，本发明提供通式(IV)所示的化合物及其可药用盐，

式中，R¹、R²、R³和R⁴具有上面标明的的意义以及在上面和此处实施例、类别及 子类中单独或组合地描述的意义。

在某些实施例中，R²是OH。

在某些实施例中，本发明提供通式(V)所示的化合物及其可药用盐，

式中，R²、R³、R⁴和n具有上面标明的的意义以及在上面和此处实施例、类别及 子类中单独或组合地描述的意义。

在某些实施例中，R²是F。

本发明的另一个实施例提供通式(I)所示的化合物，选自以下组内：

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“1”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“2”)；

4-氨基-6-[(3R,4S)-4-[1-[2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基]-4-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]咪唑- 2-基]-3-氟-1-基]嘧啶-5-羧酰胺(手性)(“3”)；

4-氨基-6-[(3S,4R)-4-[1-[2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基]-4-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]咪唑- 2-基]-3-氟-1-基]嘧啶-5-羧酰胺(手性)(“4”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-甲基--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“5”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-甲基--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“6”)；

4-氨基-6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“7”)；

4-氨基-6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“8”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)咪唑-2-基]-3-氟-1- 基]}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“9”)；

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-5-氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“10”)；

6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-5-氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“11”)；

5-氯-6-{3,4-顺--4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“12”)；

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-5-乙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“13”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“14”)；

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“15”)；

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“16”)；

6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“17”)；

4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“18”)；

4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(外消旋体)(“19”)；

4-氨基-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性)(“20”)；

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性)(“21”)；

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(手性)(“22”)；

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(手性)(“23”)；

6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“24”)；

5-氯-6-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“25”)；

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-基}-5-异丙基-嘧啶- 4-基胺(外消旋体)(“26”)；

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性)(“27”)；

4-氨基-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性)(“28”)；

5-氯-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-4-基胺(手性)(“29”)；

5-氯-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-4-基胺(手性)(“30”)；

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性)(“31”)；

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性)(“32”)；

6-{顺-4-[1-(2-氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}- 5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“33”)；

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性)(“34”)；

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性)(“35”)；

6-{(顺-4-[1-(2-氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-5-氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“36”)；

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-异丙基氨基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1- 基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“37”)；

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-甲基氨基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-基}- 5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“38”)；

6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙氧基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“39”)；

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(手性)(“40”)；

6-{顺-4-[1-氮杂环丁烷-3-基甲基-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“41”)；

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“42”)；

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“43”)；

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-羟 基--1-基}-嘧啶-5-甲腈(“44”)；

1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯 基)-1H-咪唑-2-基]--4-醇(“45”)；

1-(6-氨基-5-乙基-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)- 1H-咪唑-2-基]--4-醇(“46”)；

1-(6-氨基-5-氯-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H- 咪唑-2-基]--4-醇(“47”)；

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3- 二氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(“48”)；

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3- 二氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(“49”)；以及

6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(“50”)；

以及上述化合物的可药用盐、溶剂化物或前药。

本发明化合物可为前药化合物形式。“前药化合物”是指于生物体中在生理学条 件下可以通过例如氧化反应、还原反应、水解反应等转化为本发明的生物学活性化合 物的衍生物，每种反应均可以在有酶或没有酶的参与的情况下下进行。前药的实例为 下述情况的化合物：其中本发明化合物中的氨基基团被酰化、烷基化或磷酸化，例 如，二十酰基氨基、丙氨酰氨基、新戊酰氧基甲基氨基；或其中羟基基团被酰化、烷 基化、磷酸化或转化为硼酸酯，例如乙酰基氧基、棕榈酰氧基、新戊酰氧基、琥珀酰 氧基、富马酰氧基、丙氨酰氧基；或其中羧基基团被酯化或酰胺化；或其中硫羟基基 团与载体分子(例如肽)形成二硫桥，所述载体分子选择性地将药物递送至靶点和/或 至细胞溶胶。这些化合物可根据已知的方法由本发明化合物制得。前药的其它实例为 如下的化合物，其中本发明化合物中的羧酸酯例如被转化为烷基-、芳基-、胆碱、氨 基、酰氧基甲酯、亚麻酰基(linolenoyl)-酯。

本发明化合物的代谢物也在本发明范围内。

当本发明化合物或其前药的互变异构(例如，酮-烯醇互变异构)现象存在时，既要 求保护它们分别的单个形式(例如，酮或烯醇形式)，也要求保护其任意比例的混合 物。这同样适用于它们的立体异构体，例如，对映异构体、顺/反异构体、构象异构体 等。如有需要，异构体可根据本领域已知的方法(例如液相谱法)分离。这同样适用 于它们的对映异构体，例如，采用手性固定相分离。此外，对映异构体可通过转化为 非对映异构体进行分离，即与对映异构纯的辅助化合物偶连，随后分离所得的非对映 异构体并裂解辅助残基。或者，本发明化合物的任何对映异构体可用光学纯原料由立 体选择性合成获得。

本发明化合物可以是可药用盐或溶剂化物形式。术语“可药用盐”是指由可药用 的无毒碱或酸(包括无机碱或酸和有机碱或酸)制得的盐。在本发明化合物含有一个或 多个酸性或碱性基团的情况下，本发明同样包括它们相应的药学上或毒物学上可接受 的盐，尤其是它们药学上可利用的盐。因此，含有酸性基团的本发明化合物可以盐形 式存在，并且根据本发明，可以作为例如碱金属盐、碱土金属盐或铵盐使用。更多此 类盐的精确实例包括：钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或含有氨或有机胺(例如，乙基胺、乙 醇胺、三乙醇胺或氨基酸)的盐。含有一个或多个碱性基团(即，可被质子化的基团) 的本发明化合物可以盐形式存在，并且根据本发明，可以与无机或有机酸形成的加成 盐形式存在。适当的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、对甲 苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、新 戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、氨基磺 酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸和其它本领知的酸。如 果本发明化合物在分子中同时包含酸性和碱性基团，那么除了所述盐形式外，本发明 同样包含内盐或内铵盐(两性离子)。所述各盐可通过本领域技术人员已知的常规方法 制得，例如使它们在溶剂或分散剂中与有机或无机酸或碱接触，或者使阴离子或阳离 子与其它的盐交换。本发明同样包含如下所有本发明化合物的盐，其因低生理学兼容 性不适宜在药物中直接使用，但可作为例如化学反应中间体或在可药用盐的制备中使 用。

除非另有说明，术语“被取代的”优选是指被上述取代基取代，其中可能有多种 不同程度的取代。

这些化合物的所有的生理学可接受的盐、衍生物、溶剂化物、盐的溶剂化物和立 体异构体，包括其所有比例的混合物，也符合本发明。

通式(I)化合物可以具有一个或多个手性中心。因此所述化合物可能以多种对映异 构形式出现并可能为外消旋形式或旋光体。因此本发明还涉及这些化合物的旋光体(立 体异构体)、对映异构体、外消旋物、非对映异构体和水合物及溶剂化物。

因为本发明化合物的外消旋物或立体异构体的药学活性可能存在差异，可能需要 使用对映体。在这些情况下，可采用本领域技术人员已知的或甚至在合成上直接采用 的化学或物理方法将终产物甚至中间体拆分成为对映异构化合物。

在分子结构中存在外消旋胺的情况下，混合物可与光学活性拆分试剂形成非对映 体。合适的拆分试剂实例为具有光学活性的酸类，如R型或S型的酒石酸、二乙酰酒 石酸、二苯甲酰酒石酸、扁桃酸、苹果酸和乳酸，合适的N-保护氨基酸类(例如N-苯 甲酰脯氨酸或N苯磺酰脯氨酸)，或各种光学活性的樟脑磺酸。借助于光学活性拆分剂 (例如固定在硅胶上的二硝基苯甲酰苯基甘氨酸、三醋酸纤维素或碳水化合物的其他衍 生物或手性衍生化甲基丙烯酸聚合物)的对映体的谱拆分法也具有优势。为此目的所 使用的合适洗脱剂为含水或含醇的溶剂混合物，例如乙烷/异丙醇/腈，例如比例为 82∶15∶3。一种拆分包含酯基(例如乙酰基酯)的外消旋物的巧妙的方法是使用 酶、特别是酯酶类。

另外，本发明涉及包含作为活性成分的本发明化合物或其前药化合物或其可药用 盐或其溶剂化物以及包含可药用载体的药物组合物。

“药物组合物”是指一种或多种活性成分和组成载体的一种或多种惰性组分以及 由下列直接或间接获得的任意产物：任意两种或多种组分组合、复合、聚集，或者一 种或多种组分解离，或者一种或多种组分的其它类型的反应或相互作用。因此，本发 明药物组合物包括通过本发明化合物和可药用载体混合而制得的任意组合物。

本发明药物组合物可另外含有一种或多种作为活性成分的其它化合物，例如一种 或多种另外的本发明化合物、前药化合物或其它p70S6K抑制剂。药物组合物包括经 口、直肠、局部、肠胃外(包括皮下、肌肉内和静脉内)、眼球(眼)、肺(鼻或颊吸入) 或鼻给药的适宜组合物，在任何已知的情况中最适宜的途径取决于的病症的性质 和严重性以及活性组分的性质。它们可方便地以单位剂量形式存在并采用药物领域已 知的任意方法制备。

在一个实施方案中，所述化合物和药物组合物用于以下疾病：癌症，例如脑 癌、肺癌、结肠癌、表皮样癌、鳞状细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、头 癌、颈癌、肾癌、肾的癌、肝癌、卵巢癌、前列腺癌、结直肠癌、子宫癌、直肠癌、 食管癌、睾丸癌、妇科癌、甲状腺癌、黑素瘤、恶性血液病，诸如急性髓性白血病、 多发性骨髓瘤、慢性髓性白血病、骨髓细胞白血病、神经胶质瘤、卡波西肉瘤，或其 它任何类型的实体或液体肿瘤。优选地，的癌症选自乳腺癌、结直肠癌、肺癌、 前列腺癌或胰腺癌或成胶质细胞瘤。

本发明还涉及本发明化合物在制备药物中的用途，所述药物用于哺乳动物中 与p70S6K活动过度有关的过度增殖性疾病以及由p70S6K级联所调节的疾病，或用于 异常增殖介导的病症，例如癌症和炎症。

本发明还涉及用于哺乳动物中与血管发生或血管生成有关的疾病的化合物或 药物组合物，其包含有效量的本发明化合物或其可药用盐、前药或水合物以及可 药用的载体。

在一个实施方案中，所述化合物或药物组合物可以用于下列疾病：肿瘤血管 生成、慢性炎症(例如类风湿性关节炎、炎性肠疾病)、动脉粥样硬化、皮肤病(例如银 屑病、湿疹和硬皮病)、糖尿病、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病和年龄相关性黄 斑变性。

本发明还涉及用于抑制哺乳动物中异常细胞生长的化合物或药物组合物，其包含 一定量的本发明化合物或其可药用盐或溶剂化物或前药以及一定量的另外的抗癌 药物，其中所述化合物、盐、溶剂化物或前药的量与化学剂的量一起对抑制异常 细胞生长是有效的。许多抗癌药物目前在本领域内中是已知的。在一个实施方案 中，所述抗癌药物是选自以下的化学剂：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢 药、嵌入抗生素(intercalatingantibiotics)、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓 扑异构酶抑制剂、生物学应答调节剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。在另一 个实施方案中，所述抗癌药物是选自以下的抗体：贝伐单抗、CD40-特异性抗 体、chTNT-1/B、地舒单抗、扎木单抗、IGF1R-特异性抗体、林妥珠单抗、依决洛单 抗、WXG250、利妥昔单抗、替西木单抗、曲妥单抗和西妥昔单抗。在另一个实施方 案中，所述抗癌药物是另一种蛋白激酶的抑制剂，所述蛋白激酶诸如Akt、Axl、 AuroraA、AuroraB、dyrk2、epha2、fgfr3、igf1r、IKK2、JNK3、Vegfr1、Vegfr2、 Vegfr3(也称为Flt-4)、KDR、MEK、MET、Plk1、RSK1、Src、TrkA、Zap70、cKit、 bRaf、EGFR、Jak2、PI3K、NPM-Alk、c-Abl、BTK、FAK、PDGFR、TAK1、 LimK、Flt-3、PDK1和Erk。

本发明还涉及抑制哺乳动物中异常细胞生长或过度增殖性疾病的方法，该方 法包括向哺乳动物施用一定量的本发明化合物或其可药用盐或溶剂化物或前药，与放 射联合使用，其中所述化合物、盐、溶剂化物或前药的量联合放射对抑制哺 乳动物中的异常细胞生长或过度增殖性疾病是有效的。施用放射的技术在本 领域中是已知的，并且这些技术可用于本文中所述的联合中。在该联合中， 本发明化合物的施用可如本文所述确定。一般认为，本发明化合物可以使得异常细胞 对放射更为敏感，从而可以杀死和/或抑制此类细胞生长。

因此，本发明还涉及使哺乳动物中的异常细胞对放射敏感化的方法，该方法 包括向哺乳动物施用一定量的本发明化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药，所述量 可以有效地使得异常细胞对放射敏感化。本方法中化合物、盐或溶剂化物的量可 根据本文所述的确定所述化合物的有效量的方法进行测定。本发明还涉及抑制哺乳动 物中异常细胞生长的方法，其包括一定量的本发明化合物或其可药用盐、溶剂化物、 前药或同位素标记的衍生物以及一定量的一种或多种选自抗血管生成剂、信号传导抑 制剂和抗增殖物。

在实际应用中，根据常规药物配制技术，本发明化合物作为活性成分可以与药用 载体结合为紧密混合物。所述载体可根据施用(例如，经口或胃肠外(包括静脉内的)) 所需的制剂形式而采用多种形式。在制备口服剂型组合物时，可使用任何常规药用介 质，例如，水、乙二醇、油类、醇类、矫味剂、防腐剂、着剂等。在口服液体制剂 的情况中，可使用任何常规药用介质，例如，混悬剂、酏剂和溶液剂；或载体例如淀 粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。在口服固体制 剂情况下，组合物可作为例如粉剂、硬和软胶囊以及片剂形式存在，相对液体剂型来 说，优选固体口服剂型。

因为片剂和胶囊容易给药，所以片剂和胶囊代表最有益的口服单位剂型，在此情 况下，明显可以采用固体药物载体。如有需要，片剂可通过标准含水或不含水技术包 衣。所述组合物和制剂应包含至少0.1％的活性化合物。当然，活性化合物在这些组合 物中的百分比可变化，可以有益地在约2％到约60％的单位重量范围内。在所述 有用的组合物中的活性化合物的量为能够获得有效剂量的量。活性化合物同样可经鼻 内给药，例如，液体滴剂或喷雾剂。

片剂、丸剂、胶囊等可同样包含：粘合剂，例如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或 明胶；赋形剂，例如磷酸二钙；崩解剂，例如玉米淀粉、土豆淀粉、海藻酸；润滑 剂，例如硬脂酸镁；和甜味剂，例如蔗糖、乳糖或糖精。单位剂型为胶囊时，可包含 除上述类型材料之外的液体载体，例如脂肪油。

各种不同的其它物质可以作为包衣材料存在，或用于改变单位剂量的物理形式。 例如，片剂可用虫胶、糖衣或两者一起包衣。除了活性组分外，糖浆剂或酏剂还可包 含：作为甜味剂的蔗糖、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、着 剂和矫味剂(例如樱桃或橙子口味)。

本发明化合物也可以经肠胃外给药。这些活性化合物的溶液或悬浮液可通过在水 中与表面活性剂(例如羟基-丙基纤维素)适当地混合来制备。分散液可由甘油、液态聚 乙二醇以及其在油中的混合物制备。在储存和使用的常规条件下，这些制剂可以包含 防腐剂以防止微生物的生长。

适宜于注射使用的药物形式包括用于即时制备无菌注射溶液或分散体的无菌注射 水溶液或分散体和无菌粉末。在所有情况中，该形式必须为无菌的并必须具有足够的 流动性使它们易于注射。在制备和储存的情况下，所述形式必须稳定并且必须能够对 抗微生物(例如细菌和真菌)的污染。载体可包括溶剂或分散介质，例如水、乙醇、多 元醇(例如，甘油、丙二醇和液态聚乙二醇)、其适宜的混合物和植物油。任何适宜的 给药途径可以提供哺乳动物(尤其是人类)有效剂量的本发明化合物。例如，可经口、 直肠、局部、肠胃外、眼、肺、鼻等给药。剂型包括片剂、口含片剂、分散剂、混悬 剂、溶液剂、胶囊剂、霜剂、软膏剂、气雾剂等。优选本发明化合物经口给药。

施用的活性组分的有效量可取决于该施用的具体化合物、施用模式、待的病 症以及待病症的严重性。所述剂量可很容易被本领域技术人员确定。

或预防作为本发明化合物的适应症的癌症、炎症或其它增殖性疾病时，在给 予日剂量为约0.01mg到约100mg/kg动物体重时即可以获得大致满意的结果，优选给 予单一日剂量。对于大型哺乳动物而言，总的日剂量为约0.2mg到约2000mg，优选为 约0.5mg到约1000mg。在70kg的成年人情况中，总的日剂量大致为约0.5mg到 1000mg。所述剂量方案可以调整从而能提供最佳响应。

本发明还涉及药盒(套盒)，该药盒包含下列独立包装：

a)有效量的本发明化合物或可药用盐、溶剂化物或前药；以及

b)有效量的另外的药物活性成分。

所述药盒包含适当的容器，例如盒子、独立瓶子、袋子或安瓿。药盒可包括例如 独立安瓿，每一个含有有效量的本发明化合物和/或其药学上可用的衍生物、溶剂化物 和立体异构体(包括其所有比例的混合物)以及溶解形式或冻干形式的有效量的另外的 药物活性成分。

在另一个实施例中，本发明描述了一种药物组合物或药物，其包含作为活性成分 的根据通式(I)所示的化合物或其可药用盐、溶剂化物或前药，以及药学上可接受的载 体。

在另一个实施例中，本发明描述了根据通式(I)所示的化合物、包含通式(I)所示的 化合物的药物组合物或药物在癌症的用途。

在另一个实施例中，本发明描述了根据通式(I)所示的化合物、包含通式(I)所示的 化合物的药物组合物或药物在制备癌症的药物中的用途。

在另一个实施例中，本发明描述了一种癌症的方法，所述方法包括向受试者 给予根据通式(I)所示的化合物、包含通式(I)所示的化合物的药物组合物或药物。在某 些实施例中，所述癌症选自以下组内：脑癌、肺癌、结肠癌、表皮样癌、鳞状细胞 癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌、头癌、颈癌、肾癌、肾的癌、肝癌、卵巢癌、 前列腺癌、结直肠癌、子宫癌、直肠癌、食管癌、睾丸癌、妇科癌、甲状腺癌、黑素 瘤、恶性血液病，诸如急性髓性白血病、多发性骨髓瘤、慢性髓性白血病、骨髓细胞 白血病、神经胶质瘤、卡波西肉瘤。

在另一个实施例中，本发明描述了一种药盒(套盒)，该药盒包含下列独立包装：

a)有效量的根据通式(I)所示的化合物或可药用盐、溶剂化物或前药；以及

b)有效量的另外的药物活性成分。

具体实施方式

实验部分

在本申请中可能出现的某些缩写如下：

缩写

名称

ACN 乙腈

AcOH 乙酸

AIBN 偶氮二异

ATP 三磷酸腺苷

b 宽峰

Bop-Cl 双(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯

Conc. 浓缩

d 双峰

DCM 二氯甲烷

DCE 二氯乙烷

DMAP 二甲氨基吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

DIEA/DIPEA N,N-二异丙基乙胺

DTT 二硫苏糖醇

EDTA 乙二胺四乙酸

equiv./eq. 当量

Et 乙基

h/hr 小时

HEPES 4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸

HPLC 高压液相谱法

LC/MS 液相谱法-质谱法

LiOH 氢氧化锂

m 多重峰

M 分子离子

m/z 质荷比

Me 甲基

MeOH 甲醇

min 分钟

MS 质谱法

N 当量(浓度单位)

NaOH 氢氧化钠

NBS N-溴代琥珀酰亚胺

NMO 4-甲基吗啉N-氧化物

NMP N-甲基-2-吡咯烷酮

NMR 核磁共振

PG 保护基团

psi 磅/平方英寸

PyBOP (苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基六氟磷酸盐

q 四重峰

Rf 保留因子

RT/rt 室温

Rt. 保留时间

s 单峰

T3P 丙基磷酸环酐

TBAF 四丁基氟化铵

Tert 叔

TEA 三乙胺

TFA 三氟乙酸

THAB 四己基溴化铵

THF 四氢呋喃

UV 紫外

VIS 可见

本发明化合物可以根据下文流程和实施例中的方法采用适当的物质制备，在下面 的具体的实施例中进一步举例说明。

此外，通过使用本文所述方法，结合本领域的常规技术，可容易地制备本文所要 求的其它化合物。然而，不能将实施例中说明的化合物理解为是作为本发明的唯一类 型。实施例还说明了本发明化合物的制备的详细描述。本领域技术人员容易理解，下 列制备方法的条件和过程的已知变通方法能用于制备这些化合物。

本发明化合物通常以其可药用盐形式分离，诸如如上所述的那些。相应于分离的 盐的作为游离胺的碱可以用适宜的碱中和制得，所述碱诸如碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧 化钠和氢氧化钾水溶液，将释放的作为游离胺的碱用有机溶剂萃取，然后蒸发。通过 所述方式分离的作为游离胺的可通过将其溶解于有机溶剂中，然后加入适当的酸，最 终蒸发、沉淀或结晶而进一步转化为其它可药用的盐。

通过以下流程和实施例中所述的具体实施方案阐述但不限制本发明。除非在流程 中另外说明，否则任何变量具有如上所述的同样意义。

除非另外说明，所有的原料来自商业供应商，且未经进一步纯化地使用。除非另 外说明，所有的温度以℃表示，且所有的反应在室温进行。化合物通过二氧化硅谱 或制备型HPLC纯化。

本发明还涉及根据下文所述流程和操作实施例制备通式(I)的化合物的方法。

描述中间体和终产物化合物的合成流程

中间体根据流程1和流程2描述的合成路径制备。

流程1

取代的--1,4-二羧酸1-叔丁酯1a与1-取代的-2-溴乙酮1b在碱存在下反应，生 成酯1c，酯1c再与醋酸铵反应，生成咪唑衍生物1d。咪唑衍生物1d与2-(2-溴-乙氧 基)-四氢吡喃在氢化钠的DMF溶液存在下进行烷基化反应，然后在甲醇中与对甲苯磺 酸进行脱保护，生成醇1e。将醇1e转化为甲磺酸酯中间体，再转化为Boc保护的 胺，所述胺脱保护后得到衍生物1f。

流程2

2-溴-1-(4-氟-3-甲基苯基)-乙酮2a与4-羟基--1,4-二羧酸1-叔丁酯在碱存在下 反应，生成酯2b，酯2b再与醋酸铵反应，生成咪唑衍生物2c。用TBDMSCl保护羟 基，得到化合物2d，化合物2d与2-(2-溴-乙氧基)-四氢吡喃在氢化钠的DMF溶液存在 下进行烷基化反应，然后在甲醇中与对甲苯磺酸进行脱保护，生成醇2f。将醇2f转化 为甲磺酸酯中间体，再转化为Boc保护的胺，所述胺脱保护后得到衍生物2g。

通式(I)所示的终化合物根据流程3描述的合成路径制备。

流程3

4-氨基-6-氯-5-取代的-嘧啶3a与衍生物在碱性条件下反应，生成所希望的嘧 啶衍生物3b。采用过氧化氢和氢氧化钠在DMSO中将5-腈嘧啶3b(如果R1＝腈)进一 步转化为5-羧酰胺嘧啶3c。

分析方法

使用以下三个方法进行分析性LC/MS：

方法A：使用DiscoveryC¹⁸，5μm，3x30mm柱，流速400μL/分钟，进样环5 μL，流动相(A)含0.1％甲酸的水，流动相(B)含0.1％甲酸的甲醇；保留时间以分钟 计。方法详述：(I)使用QuaternaryPumpG1311A(Agilent)，备有UV/VIS二极管阵列 检测器G1315B(Agilent)和FinniganLCQDuoMS检测器(ESI+模式)，UV-检测在254 和280nm，梯度：15-95％(B)3.2分钟线性梯度，(II)在95％(B)保持1.4分钟，(III) 从95-15％(B)0.1分钟线性梯度，(IV)在15％(B)保持2.3分钟。

方法B：使用WatersSymmetryC¹⁸，3.5μm，4.6x75mm柱，流速1mL/分钟，进 样环10μL，流动相(A)为含0.05％TFA的水，流动相(B)为含0.05％TFA的ACN； 保留时间以分钟计。方法详述：(I)使用BinaryPumpG1312A(Agilent)，备有UV/Vis 二极管阵列检测器G1315B(Agilent)和AgilentG1956B(SL)MS检测器(ESI+模式)，UV- 检测在254和280nm，梯度：20-85％(B)10分钟线性梯度，(II)在85％(B)保持1分 钟，(III)从85-20％(B)0.2分钟线性梯度，(IV)在20％(B)保持3.8分钟。

方法C：梯度：4.2分钟/流速：2ml/分钟99：01-0：100水+0.1％(体积)TFA； 乙腈+0.1％(体积)TFA；0.0至0.2分钟：99：01；0.2至3.8分钟：99：01→0： 100；3.8至4.2分钟：0：100；柱：ChromolithPerformanceRP18e；长度100mm， 直径3mm；波长：220nm。

分析型手性HPLC

使用来自DaicelChemicalIndustries，Ltd.的ChiralPakAD-H柱(250X4.6mm)在 Agilent1100系列系统进行分析型手性HPLC。该方法使用5.0μL进样体积，流速 1mL/分钟，使用100％甲醇在25℃运行15分钟，且UV-检测在254和280nm。

制备型HPLC

使用WatersAtlantisdC₁₈OBD^TM10μM(30X250mm)柱或WatersSunfirePrepC₁₈OBD10μM(30X250mm)柱进行制备型HPLC。所述柱在装备有进样环(10mL)和ISCO UA-6UV/Vis检测器的WatersPrepLC4000System以60mL/分钟的流速使用。流动相 从含有(A)水和(B)HPLC-级乙腈的两个溶剂瓶中吸入。通常的制备使用线性梯度(例 如，0-60％溶剂B经历60分钟)。

实施例

以下操作实施例旨在阐明本发明的具体实施方案，并不意欲以任何方式限制说明 书或权利要求的范围。

实施例1中间体的制备

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- (外消旋体)

步骤1：3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯

室温下将2-溴-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮(2.23g；8.07mmol；1.0eq.)一次性 加入至3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯(2.0g；8.07mmol；1.0eq.)和三乙胺(1.36ml； 9.68mmol；1.20eq.)在乙腈(20ml)中的溶液。得到的混合物室温搅拌1.5小时。反应混 合物用60ml乙酸乙酯稀释，饱和碳酸氢钠溶液洗一次，盐水洗两次。有机层经 MgSO₄干燥，然后浓缩，得到标题化合物，为浅褐固体(3.75g，103％收率)。

步骤2：3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯

3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯(3.60 g；7.98mmol；1.0eq.)和醋酸铵(6.15g；79.75mmol；10.0eq.)在1,4-二噁烷(20ml)中 的溶液在110℃搅拌3小时。冷却至室温后，反应混合物用100ml乙酸乙酯稀释，饱 和碳酸氢钠溶液洗一次，盐水洗两次。有机层经MgSO₄干燥，然后浓缩。残留物在烘 箱内干燥过夜，得到标题化合物，为浅褐固体(3.5g，102％收率)，该产物无需纯化 直接用在下一步骤中。

步骤3：反-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧 酸叔丁酯和顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1- 羧酸叔丁酯

室温下将氢化钠(60％在矿物油中的分散液，417.21mg；10.43mmol；3.0eq.)加入 至3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(1.50g；3.48 mmol；1.0eq.)在DMF(8.0ml)中的溶液中。搅拌30分钟后，滴加入2-(2-溴-乙氧基)- 四氢吡喃(1.58ml；10.43mmol；3.00eq.)。得到的混合物室温搅拌过夜。反应混合物 用70ml乙酸乙酯稀释，水洗一次，盐水洗两次。分离出来的有机层经MgSO₄干燥， 浓缩，得到粗3-氟-4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)- 1H-咪唑-2-基)-1-羧酸叔丁酯。

将上述3-氟-4-(4-(4-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-(2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙基)- 1H-咪唑-2-基)-1-羧酸叔丁酯和甲苯-4-磺酸水合物(0.99g，5.22mmole，1.5eq.)在 甲醇(10ml)中的溶液室温搅拌1.5小时。移除溶剂后，残留物溶解在乙酸乙酯(100ml) 和饱和氯化铵溶液(50ml)中，有机层用盐水洗涤两次，MgSO₄干燥，浓缩。粗产物经 制备型HPLC(Waters，碱性条件)纯化，得到第一馏分顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基- 苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(440mg，31％收率)和第二馏 分反-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁 酯(490mg，34％收率)。

步骤4：顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟-

室温下将甲磺酰氯(0.07ml；0.95mmol；1.5eq.)加入至顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(300.0mg；0.63mmol；1.0 eq.)和二异丙基乙胺(0.23ml；1.26mmol；2.0eq.)在THF(3ml)中的溶液中，搅拌3小 时。向反应混合物加入氮杂环丁烷(360mg；6.31mmol；10.0eq.)，室温搅拌过夜。反 应混合物浓缩，无需纯化用于下一步骤中。

上述粗化合物溶解在三氟乙酸和二氯甲烷的1：1(v/v)混合物(2ml)中，室温搅拌 2小时。反应混合物浓缩，经制备型HPLC(Waters，碱性条件)纯化，获得标题化合 物，为乳白固体(196mg，75％收率)。

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基- (外消旋体)

步骤1：3-甲基--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯

向2-溴-1-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-乙酮(1000.00mg；3.51mmol；1.00eq.)3-甲基-哌 啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯(981.62mg；4.03mmol；1.15eq.)在10ml丙酮中的溶液加入碳酸 铯(1714.6mg；5.26mmol；1.50eq.)。得到的混合物室温搅拌30分钟。LC-MS显示反应 完成，并生成所希望的产物。将反应溶液倒入50ml乙酸乙酯中，用5％NaHCO₃水溶液 再用盐水洗涤。有机相干燥，浓缩，获得标题化合物，其可直接用于下一步骤反应 中。LC-MS(M+H＝448，obsd＝448)。

步骤2：4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基--1-羧酸 叔丁酯

3-甲基--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯 (1800.00mg；4.02mmol；1.00eq.)、醋酸铵(3101.09mg；40.23mmol；10.00eq.)和1- 丁醇(3ml)的混合物置于微波管中，放入125℃微波中加热20分钟。反应物经HPLC纯 化，获得标题化合物(300mg)。LC-MS(M+H＝472，obsd＝472)。

步骤3：4-{4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑-2-基}-3- 甲基--1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基--1-羧酸叔丁酯(1000.00 mg；2.34mmol；1.00eq.)在DMF(8ml)中的溶液加入NaH(280.72mg；7.02mmol； 3.00eq.)。室温搅拌30分钟后，加入2-(2-溴-乙氧基)-四氢-吡喃(1467.45mg；7.02 mmol；3.00eq.)。反应混合物在85℃搅拌1小时。LC-MS显示反应完成。反应混合物 冷却，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，干燥，浓缩，获得标题化合 物，其可直接用于下一步骤反应中，无需纯化。LC-MS(M+H＝556，obsd＝556)。

步骤4：4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基--1-羧酸 叔丁酯

向4-{4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑-2-基}-3- 甲基--1-羧酸叔丁酯(1290.00mg；2.32mmol；1.00eq.)在甲醇(20ml)中的溶液加入 甲苯-4-磺酸(39.98mg；0.23mmol；0.10eq.)。反应混合物室温搅拌过夜。因为LC-MS 显示仍然存在大量的起始材料，再加入2eq.甲苯-4-磺酸(800mg)，在LC-MS监测下室 温搅拌30分钟。移除溶剂后，加入50ml乙酸乙酯，用10％碳酸钠水溶液然后用盐水洗 涤。有机相干燥，浓缩，得到粗产物，该粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物 (200mg，收率18.3％)。LC-MS(M+H＝472，obsd＝472)。

步骤5：4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基- -1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯 (200.00mg；0.44mmol；1.00eq.)在THF(2ml)中的溶液加入乙基二异丙胺(0.16ml； 0.87mmol；2.00eq.)，然后加入甲磺酰氯(0.05ml；0.66mmol；1.50eq.)。反应混合物 室温搅拌过夜。LC-MS显示甲磺酸酯的产生已经完成。加入氮杂环丁烷(249.61mg； 4.37mmol；10.00eq.)，室温搅拌8小时。反应混合物经HPLC纯化，获得标题化合物 (90mg，收率38％)。LC-MS(M+H＝511，obsd＝511)。

步骤6：4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基- 三盐酸盐

向4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基- -1-羧酸叔丁酯(70.00mg；0.14mmol；1.00eq.)在甲醇(0.5ml)中的溶液加入4.0M HCl在二噁烷中的溶液0.5ml，反应物室温搅拌3小时。反应混合物浓缩，获得标题化合 物，为白固体(71.3mg)。LC-MS(M+H＝411，obsd＝411)。

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-(外消 旋体)

步骤1：3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯

室温下一次性地将2-溴-1-(4-氟-3-甲基-苯基)-乙酮(9344.79mg；40.44mmol；1.00 eq.)加入至3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯(10.00g；40.44mmol；1.00eq.)和三乙胺(6.82 ml；48.53mmol；1.20eq.)在乙腈(100.00ml；1914.60mmol；47.34eq.)中的溶液中。 得到的混合物室温搅拌2.5小时。用LC-MS监测到反应完成。反应混合物用300ml乙酸 乙酯稀释，饱和NaHCO₃水溶液洗一次，再用盐水洗两次。有机层经MgSO₄干燥，浓 缩。得到浅褐固体，为反式和顺式混合物，直接用在下一步反应中(14.80g；37.24 mmol))。LC-MS(M+H＝398，obsd.＝398)。

步骤2：顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯，外消旋体

3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯(14.80g； 37.24mmol；1.00eq.)和醋酸铵(28706.37mg；372.41mmol；10.00eq.)在二噁烷(100.00 ml；1173.60mmol；31.51eq.)中的溶液在100℃搅拌。用LC-MS监测到2小时后反应 完成。冷却至室温后，反应混合物用300ml乙酸乙酯稀释，饱和碳酸氢钠水溶液洗两 次，再用盐水洗两次。有机相经MgSO₄干燥，浓缩。残留物(含反式和顺式化合物以及 副产物)在烘箱干燥过夜，得到浅褐固体，加入DCM(20ml)，搅拌10分钟，加入乙酸 乙酯(40ml)，搅拌多1小时。过滤收集沉淀物，用小量乙酸乙酯洗涤，得到浅黄固 体，为顺式外消旋产物。LC-MS(M+H＝378，obsd.＝378)。

步骤3：顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔 丁酯，外消旋体

向外消旋体顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯 (5310.00mg；14.07mmol；1.00eq.)在DMF(30ml)中的溶液加入NaH(1406.77mg； 35.17mmol；2.50eq.)。室温搅拌30分钟后，滴加入2-(2-溴-乙氧基)-四氢-吡喃(4.26 ml；28.14mmol；2.00eq.)。反应混合物室温搅拌过夜。把反应混合物倒入水(200ml) 中，用乙酸乙酯(200mlx2)萃取。有机层合并，用盐水洗涤，干燥，浓缩，得到外消 旋体顺-3-氟-4-{4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑-2-基}- -1-羧酸叔丁酯。LC-MS(M+H＝506，obsd.＝506)。

向上述化合物在甲醇(100ml)中的溶液加入甲苯-4-磺酸水合物(4014.24mg；21.10 mmol；1.50eq.)。得到的混合物室温搅拌2小时。LC-MS显示反应完成。移除溶剂后， 残留物用乙酸乙酯(200ml)稀释，5％Na₂CO₃水溶液洗涤，再用盐水洗涤。有机相干 燥，浓缩，再用醚10ml处理，得到乳白固体，为标题化合物(4.4g)。LC-MS(M+H＝ 422，obsd.＝422)。

步骤4：顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-羧酸叔丁酯，外消旋体

0℃下向顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧 酸叔丁酯(4400.00mg；10.44mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(3.75ml；20.88mmol； 2.00eq.)在THF(50ml)中的溶液加入甲磺酰氯(1.21ml；15.66mmol；1.50eq.)。得到的 混合物室温搅拌3小时。LC-MS显示生成顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-甲磺酰氧 基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯，为干净产物。反应混合物用冰浴冷却，滴 加入氮杂环丁烷(5960.26mg；104.39mmol；10.00eq.)，然后室温搅拌过夜。反应混合 物乙酸乙酯(150ml)稀释，5％NaHCO₃水溶液洗涤，再用盐水洗涤。有机相干燥，浓 缩，获得标题化合物，其直接用在下一步反应中。LC-MS(M+H＝461，obsd.＝461)。

步骤5：顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶，外消旋体

0℃下向顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-羧酸叔丁酯(4700.00mg；10.20mmol；1.00eq.)在甲醇(15ml)中的溶液加入 4.0MHCl的二噁烷溶液(17.86ml；71.43mmol；7.00eq.)。反应混合物室温搅拌2小 时。移除溶剂后，残留物用醚处理，得到浅黄固体，为顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基- 乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-四盐酸盐。LC-MS(M+H＝361， obsd.＝361)。

顺-3-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-(顺-3-氟--4-基)-咪唑-1-基甲基]-氮杂环丁烷-1-羧酸叔 丁酯(外消旋体)

步骤1：顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸苄酯，外消旋体

向外消旋体顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯 (1230.00mg；3.26mmol；1.00eq.)在DCM(5ml)中的溶液加入三氟乙酸(3715.90mg； 32.59mmol；10.00eq.)。混合物室温搅拌1小时，LC-MS显示反应完成。反应混合物浓 缩，得到顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-，为TFA盐。

向上述TFA盐(2300.00mg；3.14mmol；1.00eq.)在DCM(25ml)中的溶液加入(2,5- 二氧代吡咯烷-1-基)羧酸苄酯(1172.2mg，4.7mmol；1.5eq.)和乙基二异丙胺(3.94 ml；21.95mmol；7.00eq.)。反应混合物室温搅拌过夜，用DCM稀释，5％NaHCO₃洗 涤，再用盐水洗涤。有机相干燥，浓缩，获得标题化合物，其直接用在下一步反应 中。LC-MS(M+H＝546，obsd.＝546)。

步骤2：顺-4-[1-(1-叔丁氧基羰基-氮杂环丁烷-3-基甲基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑- 2-基]-3-氟--1-羧酸苄酯，外消旋体

向外消旋体顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸苄酯 (1200.00mg；2.92mmol；1.00eq.)在DMF(12ml)中的溶液加入NaH(349.96mg；8.75 mmol；3.00eq.)。室温搅拌30分钟后，滴加入3-碘甲基-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.13 ml；5.25mmol；1.80eq.)。反应混合物室温搅拌2小时。用饱和NH₄Cl水溶液淬灭反 应，加入乙酸乙酯(60ml)，用水、5％NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。有机相干燥，浓 缩。残留物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝581，obsd.＝ 581)。

步骤3：顺-3-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-(顺-3-氟--4-基)-咪唑-1-基甲基]-氮杂环丁烷- 1-羧酸叔丁酯，外消旋体

向外消旋体顺-4-[1-(1-叔丁氧基羰基-氮杂环丁烷-3-基甲基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)- 1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-羧酸苄酯(120.00mg；0.21mmol；1.00eq.)在甲醇(5ml)中 的溶液加入三氟乙酸(47.13mg；0.41mmol；2.00eq.)。搅拌5分钟后，加入湿的 10％Pd/C(120mg)，再加入甲酸铵(130.31mg；2.07mmol；10.00eq.)。反应混合物在 25℃搅拌1小时。移除催化剂并浓缩后，残留物经制备型HPLC纯化，获得标题化合 物。LC-MS(M+H＝447，obsd.＝447)。

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-2-(顺-3-氟--4-基)-1H-咪唑-4-基]-2-三氟甲基-吡 啶(外消旋体)

步骤1：顺-1-叔丁基4-{2-氧代-2-[2-(三氟甲基)吡啶-4-基]乙基}-1,4-二羧酸酯

室温下向顺-3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯(3690.07mg；14.92mmol；1.00eq.)和2- 溴-1-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-乙酮(4000.00mg；14.92mmol；1.00eq.)在THF(50ml)中 的溶液滴加入乙基二异丙胺(5.21ml；29.85mmol；2.00eq.)。反应混合物室温搅拌多1 小时，LC-MS显示反应完成。用饱和NH₄Cl水溶液淬灭反应，乙酸乙酯(200ml)萃取。 分离出来的有机层用饱和NH₄Cl水溶液(100mlx4)洗涤，干燥，浓缩，获得标题化合 物，为黄油(5400mg，100％收率)。LC-MS(M+H＝435，obsd.＝435)。

步骤2：顺-3-氟-4-[4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯

向顺-3-氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-氧代-2-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-乙基]酯 (5000.00mg；11.51mmol；1.00eq.)在二噁烷(100ml)中的溶液加入醋酸铵(8872.72 mg；115.11mmol；10.00eq.)。反应混合物在110℃搅拌1.5小时，经LC-MS监测反应 完成。冷却至室温后，反应混合物用150ml乙酸乙酯稀释，盐水洗涤，再用饱和碳酸 氢钠和盐水洗涤。有机相经MgSO₄干燥，浓缩，获得标题化合物(3830mg，收率 80.7％)。LC-MS(M+H＝415，obsd.＝415)。

步骤3：顺-3-氟-4-[1-(2-羟基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧 酸叔丁酯

向顺-3-氟-4-[4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(3830.00 mg；9.24mmol；1.00eq.)在DMF(18ml)中的溶液加入NaH(831.74mg；20.80mmol； 2.25eq.)。0℃搅拌30分钟后，滴加入2-(2-溴-乙氧基)-四氢-吡喃(2.10ml；13.86 mmol；1.50eq.)。反应混合物室温搅拌过夜。用饱和NH₄Cl水溶液(50ml)淬灭反应，乙 酸乙酯(100mlx2)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，干燥，浓缩。残留物经Biotage 谱法(SNAP柱，洗脱液为含2％甲醇和0.2％TEA的DCM)，获得顺-3-氟-4-[1-[2-(四氢-吡 喃-2-基氧基)-乙基]-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(1.7 g)。

向上述产物在甲醇(20ml)中的溶液加入甲苯-4-磺酸水合物(879.03mg；4.62 mmol；0.50eq.)。反应混合物室温搅拌1小时。移除溶剂后，向残留物加入乙酸乙酯 (60ml)和10％Na₂CO₃水溶液(20ml)，搅拌20分钟。分离出来的有机层用盐水洗涤，干 燥，浓缩，获得标题化合物，为黄固体(1300mg，收率30.7％)。LC-MS(M+H＝ 459，obsd.＝459)。

步骤4：顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-羧酸叔丁酯

0℃向顺-3-氯-4-[1-(2-羟基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]--1- 羧酸叔丁酯(1300.00mg；2.84mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(0.76ml；4.25mmol； 1.50eq.)在THF(10ml)中的溶液加入甲磺酰氯(0.30ml；3.83mmol；1.35eq.)。反应混 合物在同一温度下搅拌30分钟，再在室温搅拌2小时，LC-MS显示甲磺酰化反应完成。 向上述混合物加入氮杂环丁烷(2.02ml；28.36mmol；10.00eq.)，室温搅拌72小时。移 除溶剂后，向残留物加入50ml乙酸乙酯，先后用盐水、10％柠檬酸酸溶液、10％ NaHCO₃溶液和盐水洗涤。有机相干燥，浓缩，经SNAP柱(含1％甲醇和0.2％TEA的 DCM的)纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝498，obsd.＝498)。

步骤5：4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-2-(顺-3-氟--4-基)-1H-咪唑-4-基]-2-三氟甲 基-吡啶

0℃下向-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-羧酸叔丁酯(650.00mg；1.31mmol；1.00eq.)在甲醇(3ml)中的溶液滴加入 4MHCl的二噁烷溶液(2.29ml；9.15mmol；7.00eq.)。反应混合物在室温搅拌2小时， LC-MS显示反应完成。移除溶剂后，残留物溶解在水(10ml)中，用DCM洗涤。向水相 加入碳酸钠(692.34mg；6.53mmol；5.00eq.)和DCM(20ml)，室温搅拌1小时。分离出 来的有机相用盐水洗涤，干燥，浓缩，获得标题化合物，为黄固体(430mg，收率 82.8％)。LC-MS(M+H＝398，obsd.＝398)。

4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟-

步骤1：3,3-二氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯

向3,3-二氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯(3000.00mg；11.31mmol；1.00eq.)和三乙胺 (1.91ml；13.57mmol；1.20eq.)在ACN(30ml)中的溶液加入2-溴-1-(4-氟-3-甲基-苯 基)-乙酮(2561.03mg；11.08mmol；0.98eq.)。混合物室温搅拌30分钟。把反应溶液倒 入乙酸乙酯(100ml)中，先后用5％NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。有机相经NaSO₄洗涤， 浓缩，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝416，obsd＝416)。

步骤2：3,3-二氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯

向3,3-二氟--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯 (5000.00mg；12.04mmol；1.00eq.)在二噁烷(50ml)中的溶液加入醋酸铵(9278.08mg； 120.36mmol；10.00eq.)。混合物在110℃搅拌2小时，另外加入2g醋酸铵，120℃搅 拌1小时。冷却至室温，把反应混合物倒入乙酸乙酯(100ml)和water(50ml)。分离出来 的有机层先后用5％NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，干燥，浓缩，获得标题化合物，为黄 固体(4796mg，收率92％)，其直接用在下一步反应中。LC-MS(M+H＝396，obsd＝ 396)。

步骤3：3,3-二氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔 丁酯

向3,3-二氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(4330.00 mg；10.95mmol；1.00eq.)在DMF(18ml)中的溶液加入NaH(1094.95mg；27.38 mmol；2.50eq.)。室温搅拌30分钟后，滴加入2-(2-溴-乙氧基)-四氢-吡喃(3.32ml； 21.90mmol；2.00eq.)。反应混合物室温搅拌过夜。LC-MS显示反应完成。反应混合物 用100ml乙酸乙酯稀释，饱和氯化铵水溶液和盐水洗涤，MgSO₄干燥，浓缩，得到残 留物，为3,3-二氟-4-{4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑-2- 基}--1-羧酸叔丁酯。

将在甲醇(30ml)中的上述产物和甲苯-4-磺酸水合物(3124.45mg；16.43mmol； 1.50eq.)的反应混合物室温搅拌2小时。移除溶剂后，残留物溶解在乙酸乙酯中，用 10％Na₂CO₃水溶液洗涤。有机相干燥，浓缩。残留物经制备型HPLC纯化，获得标题 化合物(1190mg，收率24％)。LC-MS(M+H＝440，obsd＝440)。

步骤4：4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟-哌 啶

向3,3-二氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔 丁酯(1200.00mg；2.73mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(0.98ml；5.46mmol；2.00eq.) 在THF中的溶液加入甲磺酰氯(0.32ml；4.10mmol；1.50eq.)。反应混合物室温搅拌3 小时，LC-MS监测甲磺酰化反应完成。加入氮杂环丁烷(1.95ml；27.31mmol；10.00 eq.)，室温搅拌过夜。移除溶剂后，向残留物加入DCM(5.0ml)，再加入三氟乙酸 (3113.46mg；27.31mmol；10.00eq.)。混合物室温搅拌2小时。浓缩后，残留物经制备 型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝379，obsd＝379)。

4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基-二甲基- 硅烷基氧基)-

步骤1：4-羟基--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯

室温下一次性将2-溴-1-(4-氟-3-甲基-苯基)-乙酮(2633.06mg；11.40mmol；1.00eq.) 加入至4-羟基--1,4-二羧酸1-叔丁酯(2796.0mg；11.40mmol；1.00eq.)和三乙胺 (1.92ml；13.67mmol；1.20eq.)在乙腈(30ml)中的溶液中。得到的混合物室温搅拌100 分钟。反应混合物用100ml乙酸乙酯稀释，饱和NaHCO₃水溶液洗一次，盐水洗两 次。有机层经MgSO₄干燥，然后浓缩，获得标题化合物，为浅褐固体，其直接用在 下一步反应中。LC-MS(M+H＝396，obsd＝396)。

步骤2：4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-羟基--1-羧酸叔丁酯

向4-羟基--1,4-二羧酸1-叔丁酯4-[2-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-氧代-乙基]酯(4900.00 mg；12.39mmol；1.00eq.)在二噁烷(30ml)中的溶液加入醋酸铵(9551.99mg；123.92 mmol；10.00eq.)。混合物在120℃搅拌2小时。冷却至室温后，反应物用乙酸乙酯 (100ml)稀释，盐水、5％NaHCO₃水溶液再用盐水洗涤。有机相干燥，浓缩，得到粗 产物，其用醚处理，搅拌1小时。收集沉淀物，获得标题化合物(4652mg，收率 43％)。LC-MS(M+H＝376，obsd＝376)。

步骤3：4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1- 羧酸叔丁酯

4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-羟基--1-羧酸叔丁酯(1600.00mg； 4.26mmol；1.00eq.)、1H-咪唑(870.37mg；12.79mmol；3.00eq.)和叔丁基-氯-二甲基- 硅烷(1927.00mg；12.79mmol；3.00eq.)在DMF(5ml)中的混合物60℃下搅拌10天， 用LC-MS监测反应。把反应混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤， 干燥，浓缩，得到残留物，其用己烷处理，获得标题化合物，为白固体(2087mg， 收率91％)。LC-MS(M+H＝490，obsd＝490)。

步骤4：4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-{4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧 基)-乙基]-1H-咪唑-2-基}--1-羧酸叔丁酯

0℃下边搅拌边向4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(1.50g；3.06mmol；1.00eq.)在DMF(8ml)中的溶液分批加 入NaH(0.28g；7.05mmol；2.30eq.)。反应混合物在同一温度下搅拌30分钟，然后加 入2-(2-溴-乙氧基)-四氢-吡喃(0.70ml；4.59mmol；1.50eq.)。反应混合物室温搅拌过 夜。把反应溶液倒入水中，用乙酸乙酯萃取。有机相用盐水洗涤，干燥，浓缩，获得 标题化合物(1.9g)，其直接用在下一步反应中。LC-MS(M+H＝618，obsd＝618)。

步骤5：4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H-咪 唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯

向4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-{4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧 基)-乙基]-1H-咪唑-2-基}--1-羧酸叔丁酯(1.9g，3.06mmol)在甲醇(10ml)中的溶液加 入甲苯-4-磺酸水合物(0.87g；4.59mmol；1.50eq.)。混合物室温搅拌1小时。移除溶剂 后，向残留物加入乙酸乙酯(100ml)，用5％NaHCO₃洗涤，再用盐水洗涤，干燥，浓 缩。粗产物用醚处理，收集沉淀物，获得标题化合物，为浅黄固体(1.64g)。LC-MS (M+H＝534，obsd＝534)。

步骤6：4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基- 二甲基-硅烷基氧基)-

0℃向4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-羟基-乙基)-1H- 咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(1600.00mg；3.00mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(0.81 ml；4.50mmol；1.50eq.)在THF(50ml)中的溶液加入甲磺酰氯(0.31ml；4.05mmol； 1.35eq.)。得到的混合物在同一温度下搅拌30分钟，再在室温搅拌2小时。LC-MS显示 甲磺酰化反应完成。加入氮杂环丁烷(2.14ml；29.98mmol；10.00eq.)，在LC-MS监测 下反应混合物室温搅拌7天。移除溶剂后，残留物用50ml乙酸乙酯稀释，盐水洗涤， 干燥，浓缩，获得4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 4-(叔丁基-二甲基-硅在甲醇(30ml)中，用冰浴冷却，在10分钟内向该溶液加入4.0M HCl的二噁烷溶液(5.25ml；20.98mmol；7.00eq.)。得到的混合物室温搅拌90分钟。移 除溶剂后，残留物用10％Na₂CO₃溶液中和至pH＝9，用乙酸乙酯(50mlx3)萃取。有机 层合并，用盐水洗涤，干燥，浓缩，获得标题化合物，为黄油(1417mg)。LC-MS (M+H＝473，obsd＝473)。

实施例2化合物

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“1”)

向顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- (130.0mg；0.31mmol；1.0eq.)在乙腈(2ml)中的溶液加入二异丙基乙胺(0.08ml； 0.47mmol；1.5eq.)，再加入4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(48.5mg；0.31mmol；1.0eq.)。 得到的混合物在LC-MS监测下室温搅拌3小时。过滤收集沉淀物，用乙腈洗涤，得到 标题化合物(白固体，150mg，90％收率)。LC-MS(M+H＝533，obsd.＝533)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.13–8.00(m，10H)，7.79(s，4H)，7.48(dd，J＝ 10.7，8.8Hz，4H)，7.25(s，7H)，4.34(dd，J＝13.2，6.3Hz，4H)，3.92(tt，J＝ 14.6，7.3Hz，7H)，3.79(dd，J＝13.1，3.4Hz，3H)，3.71(d，J＝9.9Hz，2H)，3.35 (dd，J＝8.4，4.2Hz，3H)，3.13(d，J＝7.0Hz，10H)，2.98(d，J＝6.5Hz，1H)，2.74 –2.63(m，4H)，2.43(d，J＝7.1Hz，1H)，2.20(s，5H)，1.95(d，J＝7.0Hz，4H)， 1.85(d，J＝10.0Hz，5H)，1.00–0.89(m，15H)，0.72(d，J＝6.9Hz，10H)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“2”)

向4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(50.0mg；0.09mmol；1.0eq.)在DMSO(5ml)中 的溶液加入过氧化氢(0.09ml；0.94mmol；10.0eq.)，然后加入2.0M氢氧化钠溶液 (0.47ml；0.94mmol；10.0eq.)。反应混合物室温搅拌2小时。粗产物经制备型 HPLC(Waters，碱性条件)纯化，获得标题化合物，为白固体(41mg，79％收率)。 LC-MS(M+H＝551，obsd.＝551)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.04(d，J＝1.9 Hz，3H)，7.79(d，J＝1.7Hz，1H)，7.69(s，1H)，7.60(s，1H)，7.49(t，J＝9.7Hz， 1H)，6.89(s，2H)，5.03–4.78(m，1H)，4.38–4.19(m，1H)，3.98(s，2H)，3.86– 3.72(m，1H)，3.10(t，J＝10.8Hz，2H)，2.93–2.56(m，2H)，1.95(dd，J＝27.3， 13.6Hz，4H)。

4-氨基-6-[(3R,4S)-4-[1-[2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基]-4-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]咪唑-2-基]- 3-氟-1-基]嘧啶-5-羧酰胺(手性，未确定绝对构型)(“3”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4- 氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺，获得标题化合 物。LC-MS(M+H＝551，obsd.＝551)。

4-氨基-6-[(3S,4R)-4-[1-[2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基]-4-[4-氟-3-(三氟甲基)苯基]咪唑-2-基]- 3-氟-1-基]嘧啶-5-羧酰胺(手性，未确定绝对构型)(“4”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4- 氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺，获得标题化合 物。LC-MS(M+H＝551，obsd.＝551)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-甲基--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“5”)

参照化合物“1”的制备方法，以外消旋体顺-4-(1-(2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基)-4-(4- 氟-3-(三氟甲基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-3-甲基代替3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙 基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-制备标题化合物。LC-MS(M+H ＝529，obsd.＝529)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.16–7.98(m，6H)，7.79(s， 2H)，7.48(dd，J＝10.7，8.8Hz，2H)，7.25(s，4H)，4.34(dd，J＝13.2，6.3Hz， 2H)，3.92(dt，J＝13.3，7.1Hz，4H)，3.79(dd，J＝13.1，3.4Hz，2H)，3.71(d，J＝ 9.9Hz，1H)，3.12(t，J＝7.0Hz，8H)，2.72(dd，J＝11.9，5.9Hz，3H)，2.20(s， 3H)，1.96(p，J＝6.9Hz，4H)，1.89–1.73(m，3H)，1.01–0.87(m，9H)，0.72(d，J ＝6.9Hz，6H)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-甲基--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“6”)

参照化合物2的制备方法，以4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4- (4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-甲基--1-基}-嘧啶-5-甲腈制备标题化合 物。LC-MS(M+H＝547，obsd.＝547)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.12–8.01 (m，4H)，7.98(s，2H)，7.77(s，2H)，7.48(dd，J＝10.3，8.0Hz，6H)，6.73(s， 3H)，4.02–3.76(m，5H)，3.44(dd，J＝12.8，3.4Hz，2H)，3.26–3.19(m，1H)， 3.11(t，J＝7.0Hz，6H)，2.70(h，J＝6.2Hz，3H)，2.24–2.02(m，3H)，1.95(p，J＝ 6.9Hz，3H)，1.78(s，2H)，0.69(d，J＝6.9Hz，4H)。

4-氨基-6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“7”)

参照化合物“1”的制备方法，以反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟 甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-制备标题化合物。LC-MS(M+H＝533，obsd.＝ 533)。

4-氨基-6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酰胺(外消旋体)(“8”)

参照化合物“2”的制备方法，以4-氨基-6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)- 4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈制备标题化合 物。LC-MS(M+H＝551，obsd.＝551)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.04(d，J＝ 1.9Hz，3H)，7.79(d，J＝1.7Hz，1H)，7.69(s，1H)，7.60(s，1H)，7.49(t，J＝9.7 Hz，1H)，6.89(s，2H)，5.06–4.94(m，0.5H)，4.88(q，J＝7.3，5.0Hz，0.5H)，4.38 –4.27(m，1H)，3.98(s，2H)，3.88–3.71(m，2H)，3.10(t，J＝10.8Hz，2H)，2.96– 2.60(m，3H)，1.95(dd，J＝27.3，13.6Hz，4H)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)咪唑-2-基]-3-氟-1- 基]}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“9”)

参照化合物“1”的制备方法，以外消旋体顺-2-(4-(4-氟-3-甲基苯基)-2-(3-氟- 4-基)-1H-咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺制备标题化合物。LC-MS(M+H＝467，obsd.＝ 467)。

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-5-氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“10”)

5，6-二氯-嘧啶-4-基胺(28.00mg；0.17mmol；1.00eq.)、顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1- 基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-外消旋体(84.91mg；0.20 mmol；1.20eq.)和乙基二异丙胺(0.06ml；0.34mmol；2.00eq.)在ACN(1.5ml)中的反 应混合物70℃下搅拌2天。反应混合物浓缩，经HPLC纯化，获得标题化合物。 LC-MS(M+H＝542，obsd.＝542)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.13–7.96(m， 3H)，7.81(d，J＝1.5Hz，1H)，7.48(t，J＝9.7Hz，1H)，6.82(s，2H)，5.13–4.85 (m，1H)，4.38–4.17(m，2H)，3.94(t，J＝6.3Hz，2H)，3.53–3.47(m，1H)，3.43 (d，J＝13.7Hz，1H)，3.11(t，J＝6.9Hz，5H)，2.74(d，J＝6.6Hz，2H)，2.66–2.51 (m，1H)，1.95(p，J＝7.0Hz，2H)，1.80(d，J＝13.9Hz，1H)。

6-{3,4-反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-5-氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“11”)

参照化合物“10”的制备方法，以外消旋体反-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4- (4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-制备标题化合物。LC-MS(M+H＝ 542，obsd.＝542)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.05(q，J＝6.4Hz，3H)，7.78 (s，1H)，7.48(t，J＝9.7Hz，1H)，6.92(s，2H)，4.95(dtd，J＝48.0，9.8，4.6Hz， 1H)，4.33(dt，J＝11.7，5.2Hz，1H)，4.04(d，J＝13.4Hz，1H)，3.93(t，J＝6.4 Hz，2H)，3.21–2.96(m，6H)，2.70(d，J＝7.0Hz，2H)，2.02(t，J＝13.5Hz，1H)， 1.99–1.78(m，3H)。

5-氯-6-{3,4-顺--4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“12”)

参照化合物“10”的制备方法，以外消旋体顺-2-(4-(4-氟-3-甲基苯基)-2-(3-氟哌 啶-4-基)-1H-咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺制备标题化合物。LC-MS(M+H＝476，obsd.＝ 476)。

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-5-乙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“13”)

把6-氯-5-乙基-嘧啶-4-基胺(30.00mg；0.19mmol；1.00eq.)、顺-4-[1-(2-氮杂环丁 烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-外消旋体(78.89mg； 0.19mmol；1.00eq.)、2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(0.05ml；0.38mmol； 2.00eq.)和NMP(0.4ml)的反应混合物置于5ml微波管中，在135℃微波加热8小时。反 应混合物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝536，obsd.＝536)。 ¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.12–7.93(m，3H)，7.81(s，1H)，7.52–7.42(m， 1H)，6.27(s，2H)，5.16–4.90(m，1H)，4.04–3.87(m，5H)，3.65(d，J＝12.8Hz， 2H)，3.09(dt，J＝16.3，7.0Hz，4H)，2.80–2.57(m，4H)，2.01–1.88(m，1H)， 1.82(d，J＝13.4Hz，1H)，1.12(t，J＝7.3Hz，3H)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“14”)

参照化合物“1”的制备方法，以4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈和外消旋体顺-2-(4-(4- 氟-3-三氟甲基苯基)-2-(3-氟-4-基)-1H-咪唑-1-基)-N,N-二甲基乙胺制备标题化合 物。LC-MS(M+H＝521，obsd.＝521)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.13–7.96 (m，5H)，7.84(s，1H)，7.47(t，J＝9.7Hz，2H)，7.33(s，3H)，5.12–4.92(m， 2H)，4.87(dd，J＝14.4，9.3Hz，2H)，4.71(d，J＝13.6Hz，2H)，4.09(t，J＝6.5 Hz，3H)，3.68(d，J＝14.3Hz，1H)，3.59(d，J＝13.8Hz，2H)，3.51(d，J＝10.4 Hz，1H)，3.36(d，J＝12.8Hz，1H)，2.63(hept，J＝5.7Hz，3H)，2.47–2.34(m， 1H)，2.22(s，8H)，1.86(d，J＝12.4Hz，2H)。

4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“15”)

参照化合物“2”的制备方法，以4-氨基-6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4- 氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲制备标题化合物。LC- MS(M+H＝539，obsd.＝539)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.10–7.97(m， 3H)，7.82(s，1H)，6.89(s，2H)，4.96(d，J＝47.6Hz，1H)，4.18(d，J＝13.2Hz， 1H)，4.08(d，J＝6.5Hz，2H)，4.03–3.88(m，1H)，3.59–3.38(m，2H)，3.19(t，J ＝11.5Hz，1H)，2.60(hept，J＝6.4Hz，2H)，2.21(s，6H)，1.83–1.70(m，1H)， 6.97–6.83(m，2H)。

6-{3,4-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“16”)

参照化合物“13”的制备方法，以6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-胺代替6-氯-5-乙基-嘧啶- 4-胺制备标题化合物。LC-MS(M+H＝552，obsd.＝552)。¹HNMR(400MHz，DMSO- d6)δ8.11–7.96(m，2H)，7.81(d，J＝2.0Hz，2H)，7.48(dd，J＝10.7，8.5Hz， 1H)，6.19(s，2H)，5.01(d，J＝47.9Hz，1H)，4.61(t，J＝11.3Hz，1H)，4.46(d，J ＝13.2Hz，1H)，3.95(q，J＝7.7，6.4Hz，2H)，3.78(q，J＝7.0Hz，2H)，3.59–3.35 (m，1H)，3.11(t，J＝7.0Hz，4H)，2.79–2.68(m，2H)，1.95(p，J＝6.9Hz，2H)， 1.79(d，J＝12.9Hz，1H)，1.31(t，J＝7.0Hz，3H)。

6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“17”)

把外消旋体顺-3-(氟--4-基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-咪唑-1-基]-乙基}-二甲 基-胺(82.06mg；0.20mmol；1.00eq.)在NMP(0.3ml)中的溶液置于5ml微波管中，加 入6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(35.00mg；0.20mmol；1.00eq.)和2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧 啶并[1,2-a]吖庚因(0.06ml；0.41mmol；2.00eq.)。反应混合物在130℃微波加热12小 时。粗产物经HPLC纯化，得到标题化合物。LC-MS(M+H＝552，obsd.＝552)。¹H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.11–7.94(m，10H)，7.61(d，J＝1.1Hz，2H)，7.33 (q，J＝9.3Hz，2H)，6.22(d，J＝3.1Hz，1H)，5.05(s，2H)，4.93(s，2H)，4.21(q， J＝7.8，7.0Hz，3H)，3.94(d，J＝3.4Hz，1H)，3.65–3.51(m，3H)，3.44(q，J＝ 9.0，7.3Hz，2H)，3.38(d，J＝6.5Hz，1H)，3.24(d，J＝13.6Hz，1H)，2.85–2.60 (m，6H)，2.32–2.26(m，3H)，1.95–1.87(m，2H)，1.45–1.34(m，11H)，1.31(s， 1H)。

4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“18”)

向顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- (80.00mg；0.22mmol；1.00eq.)在乙腈中的溶液加入乙基二异丙胺(0.06ml；0.33 mmol；1.50eq.)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(34.30mg；0.22mmol；1.00eq.)。混合物室 温搅拌1小时。粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝477， obsd.＝477)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.09(s，2H)，7.63(d，J＝7.5Hz， 2H)，7.55(d，J＝11.4Hz，4H)，7.33(s，3H)，7.07(t，J＝9.2Hz，2H)，5.05(d，J＝ 47.4Hz，2H)，4.86(dd，J＝14.3，9.5Hz，2H)，4.71(d，J＝13.7Hz，2H)，4.11– 3.99(m，2H)，3.99–3.85(m，3H)，3.71–3.40(m，4H)，3.36(s，1H)，3.29(s， 2H)，3.18(d，J＝5.5Hz，2H)，3.10(t，J＝7.0Hz，7H)，2.71(q，J＝7.9，7.1Hz， 4H)，2.44(d，J＝13.1Hz，1H)，2.25(s，5H)，1.95(p，J＝7.0Hz，4H)，1.90–1.78 (m，2H)，1.19(t，J＝7.2Hz，2H)。

4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- -1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(外消旋体)(“19”)

室温下向4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(70.00mg；0.15mmol；1.00eq.)在DMSO(8ml) 中的溶液加入H₂O₂(0.14ml；1.46mmol；10.00eq.)和2.0MNaOH水溶液(0.73ml； 1.46mmol；10.00eq.)。反应混合物室温搅拌2小时。粗产物经HPLC(碱性)纯化，获 得标题化合物。LC-MS(M+H＝497，obsd.＝497)。¹HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ 8.06(d，J＝1.2Hz，2H)，7.61(d，J＝7.5Hz，2H)，7.54(q，J＝8.1，6.6Hz，1H)， 7.40(s，1H)，7.00(t，J＝9.0Hz，2H)，5.06(s，1H)，4.94(s，1H)，4.29–4.13(m， 3H)，4.03(t，J＝6.6Hz，3H)，3.59–3.37(m，4H)，3.26(t，J＝7.2Hz，8H)，2.91– 2.79(m，3H)，2.77–2.59(m，2H)，2.30(s，4H)，2.12(p，J＝7.3Hz，3H)，1.93– 1.84(m，2H)。

4-氨基-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性，未确定绝对构型)(“20”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟 甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝539，obsd.＝539)。

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性，未确定绝对构型)(“21”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟 甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝539，obsd.＝539)。

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“22”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝552，obsd.＝552)。

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“23”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-乙氧基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝552，obsd.＝552)。

6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“24”)

向顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- (100.81mg；0.28mmol；1.00eq.)在NMP(0.3ml)中的溶液加入2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧 啶并[1,2-a]吖庚因(0.08ml；0.56mmol；2.00eq.)和6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(48.00 mg；0.28mmol；1.00eq.)。反应混合物在130℃微波加热7小时。粗产物经制备型 HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝496，obsd.＝496)。

5-氯-6-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-- 1-基}-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“25”)

向{2-[2-((顺-3-氟--4-基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-咪唑-1-基]-乙基}-二甲基- 胺(外消旋体)(82.00mg；0.20mmol；1.00eq.)在乙腈(1ml)中的溶液加入乙基二异丙胺 (0.05ml；0.30mmol；1.50eq.)和5,6-二氯-嘧啶-4-基胺(32.60mg；0.20mmol；1.00 eq.)。混合物在100℃搅拌过夜。粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。 LC-MS(M+H＝530，obsd.＝530)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.11–7.97(m， 3H)，7.85–7.78(m，1H)，7.48(t，J＝9.6Hz，1H)，6.83(s，2H)，5.07–4.84(m， 1H)，4.37–4.19(m，2H)，4.10(q，J＝7.7，6.5Hz，2H)，3.51(d，J＝14.0Hz， 1H)，3.43(t，J＝10.4Hz，1H)，3.12(t，J＝12.0Hz，1H)，2.62(td，J＝13.5，7.0 Hz，3H)，2.31–2.17(m，5H)，2.19–2.11(m，1H)，1.80(d，J＝13.1Hz，1H)。

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基 胺(外消旋体)(“26”)

6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(110.00mg；0.64mmol；1.00eq.)、顺-3-氟-4-[4-(4-氟- 3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-(外消旋体)(212.33mg；0.64mmol；1.00eq.)和 2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(0.18ml；1.28mmol；2.00eq.)在NMP(0.4ml) 中的反应混合物在135℃微波加热10小时。粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题 化合物。LC-MS(M+H＝467，obsd.＝467)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.09 (dd，J＝7.4，5.1Hz，2H)，8.03(s，1H)，7.74(s，1H)，7.49(t，J＝10.0Hz，1H)， 6.19(s，2H)，5.09(d，J＝48.0Hz，1H)，3.53(dd，J＝14.4，9.4Hz，1H)，3.39(dd， J＝20.8，10.3Hz，2H)，3.24–3.02(m，1H)，2.91(t，J＝11.8Hz，1H)，2.41–2.28 (m，1H)，2.00–1.90(m，1H)，1.36–1.20(m，6H)。

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性，未确定绝对构型)(“27”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3- 甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝497，obsd.＝497)。

4-氨基-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]- 3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(手性，未确定绝对构型)(“28”)。

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3- 甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝497，obsd.＝497)。

5-氯-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“29”)

通过SFC手性分离外消旋体5-氯-6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC-MS(M+H ＝530，obsd.＝530)。

5-氯-6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3- 氟--1-基}-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“30”)。

通过SFC手性分离外消旋体5-氯-6-{顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC-MS(M+H ＝530，obsd.＝530)。

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“31”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝538，obsd.＝538)。

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“32”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{3,4-顺-4-[1-(2-二甲基氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲 基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝538，obsd.＝538)。

6-{顺-4-[1-(2-氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异 丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“33”)

步骤1：2-[顺-3-氟--4-基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-咪唑-1-基]-乙基胺

向3-氟-4-[4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]--1-羧酸叔丁酯(3000.00 mg；6.95mmol；1.00eq.)在DMF(10.00ml；129.70mmol；18.65eq.)中的溶液加入 NaH(639.72mg；15.99mmol；2.30eq.)。室温搅拌30分钟后，加入(2-溴乙基)-氨基甲 酸叔丁酯(2805.09mg；12.52mmol；1.80eq.)，室温搅拌10天。反应混合物用乙酸乙酯 (100ml)稀释，盐水洗涤。有机相干燥，浓缩，获得(4-[1-(2-叔丁氧基羰基氨基-乙基)- 4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-羧酸叔丁酯。

向上述产物在DCM(10ml)中的溶液加入三氟乙酸(1189.40mg；10.43mmol；1.50 eq.)。反应混合物室温搅拌1小时。移除溶剂后，残留物经制备型HPLC(碱性)纯化，获 得标题化合物。LC-MS(M+H＝375，obsd.＝375)。

步骤2：6-{顺-4-[1-(2-氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)

2-[2-顺-3-氟--4-基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-咪唑-1-基]-乙基胺(80.00mg； 0.21mmol；1.00eq.)、6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(34.84mg；0.20mmol；0.95eq.)和 2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(0.06ml；0.43mmol；2.00eq.)在NMP(0.2ml) 中的混合物在130℃微波加热1小时。粗产物经HPLC纯化，获得标题化合物.LC-MS (M+H＝510，obsd.＝510)。

6-{(3S,4R)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“34”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯 基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC-MS (M+H＝496，obsd.＝496)。

6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-哌 啶-1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(手性，未确定绝对构型)(“35”)

通过SFC手性分离外消旋体6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯 基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺，获得标题化合物。LC-MS (M+H＝496，obsd.＝496)。

6-{(顺-4-[1-(2-氨基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-5- 氯-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“36”)。

5,6-二氯-嘧啶-4-基胺(35.00mg；0.21mmol；1.00eq.)、外消旋体2-[2-(顺-3-氟-哌 啶-4-基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-咪唑-1-基]-乙基胺(87.89mg；0.23mmol；1.10eq.) 和乙基二异丙胺(0.08ml；0.43mmol；2.00eq.)在ACN(1.5ml)中的反应混合物在70℃ 搅拌48小时。移除溶剂，粗产物经HPLC纯化，获得标题化合物.LC-MS(M+H＝502， obsd.＝502)。

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-异丙基氨基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-基}-5- 异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“37”)

步骤1：2-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-(顺-3-氟--4-基)-咪唑-1-基]-乙醇

向外消旋体顺-3-氟-4-{4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-[2-(四氢-吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H- 咪唑-2-基}--1-羧酸叔丁酯(4226.79mg；8.36mmol；1.00eq.)在DCM(15ml)中的 溶液加入三氟乙酸(11438.82mg；100.32mmol；12.00eq.)。反应混合物室温搅拌1小 时。移除溶剂后，残留物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物(1100mg，收率 40.9％)。LC-MS(M+H＝322，obsd.＝322)。

步骤2：2-[2-[(顺-1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-3-氟--4-基]-4-(4-氟-3-甲基-苯基)- 咪唑-1-基]-乙醇

2-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-(顺-3-氟--4-基)-咪唑-1-基]-乙醇(337.04mg；1.05 mmol；1.00eq.)和6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(180.00mg；1.05mmol；1.00eq)在NMP (0.5ml)中的混合物在140℃微波加热10小时。残留物经制备型HPLC纯化，获得标题 化合物。LC-MS(M+H＝457，obsd.＝457)。

步骤3：6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-异丙基氨基-乙基)-1H-咪唑-2-基]-- 1-基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)

向2-[2-[顺-1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-3-氟--4-基]-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-咪 唑-1-基]-乙醇(210.00mg；0.46mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(0.17ml；0.92mmol； 2.00eq.)在THF(1ml)中的溶液加入甲磺酰氯(0.05ml；0.69mmol；1.50eq.)。反应混 合物室温搅拌3小时。LC-MS显示甲磺酰化反应完成。向反应混合物加入异丙胺(0.34 ml；4.60mmol；10.00eq.)，室温搅拌过夜，再在40℃搅拌多24小时。粗产物经制 备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝478，obsd.＝478)。¹HNMR(400 MHz，DMSO-d6)δ8.03(s，1H)，7.71–7.61(m，1H)，7.57(d，J＝14.3Hz，2H)， 7.08(t，J＝9.2Hz，1H)，6.16(s，2H)，5.01(d，J＝47.8Hz，1H)，4.00(t，J＝6.6 Hz，2H)，3.56–3.40(m，2H)，3.25–3.08(m，1H)，2.93–2.81(m，3H)，2.72(q，J ＝6.2Hz，1H)，1.90–1.64(m，3H)，1.29(dd，J＝19.8，7.2Hz，6H)，0.97(dd，J＝ 6.3，2.5Hz，6H)。

6-{顺-3-氟-4-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1-(2-甲基氨基-乙基)-1H-咪唑-2-基]--1-基}-5-异 丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“38”)

向2-[2-[顺-1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-3-氟--4-基]-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-咪 唑-1-基]-乙醇(102.00mg；0.22mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(0.08ml；0.45mmol； 2.00eq.)在THF(1ml)中的溶液加入甲磺酰氯(0.025ml；0.336mmol；1.50eq.)。反应混 合物室温搅拌3小时。LC-MS显示甲磺酰化反应完成。加入甲胺(2.0M，溶于THF中， 1.12ml；2.24mmol；10.00eq.)。反应混合物室温搅拌24小时，再在40℃搅拌多24小 时。移除溶剂后，粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝ 470，obsd.＝470)。

6-{顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-5-异丙氧基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“39”)

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟- (86.45mg；0.24mmol；1.00eq.)、6-氯-5-异丙氧基-嘧啶-4-基胺(45.00mg；0.24 mmol；1.00eq.)和2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(73mg；0.48mmol；2.00 eq.)在NMP(0.5ml)中的溶液在140℃微波加热10小时。粗产物经制备型HPLC纯 化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝512，obsd.＝512)。¹HNMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.82(s，2H)，7.62(d，J＝9.0Hz，3H)，7.54(d，J＝9.6Hz，5H)，7.07 (t，J＝8.9Hz，3H)，6.14(d，J＝11.5Hz，4H)，5.05(s，1H)，4.93(s，1H)，4.48(s， 2H)，4.32(td，J＝13.8，12.1，7.8Hz，3H)，3.91(t，J＝6.2Hz，3H)，3.09(q，J＝ 7.2Hz，7H)，3.03(t，J＝7.0Hz，2H)，2.67(dt，J＝28.6，7.7Hz，5H)，2.25(s， 8H)，1.93(dp，J＝12.7，6.7Hz，5H)，1.86–1.68(m，3H)，1.29–1.10(m，13H)。

4-氨基-6-{(3R,4S)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2- 基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(手性，未确定绝对构型)(“40”)

通过SFC手性分离外消旋体4-氨基-6-顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三 氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈，获得标题化合物。LC-MS (M+H＝533，obsd.＝533)。

6-{顺-4-[1-氮杂环丁烷-3-基甲基-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1-基}- 5-异丙基-嘧啶-4-基胺(外消旋体)(“41”)

向外消旋体顺-3-[4-(4-氟-3-甲基-苯基)-2-(3-氟--4-基)-咪唑-1-基甲基]-氮杂环 丁烷-1-羧酸叔丁酯(62.44mg；0.14mmol；1.00eq.)在NMP(0.3ml)中的溶液加入 2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(0.04ml；0.28mmol；2.00eq.)和6-氯-5-异丙 基-嘧啶-4-基胺(24.00mg；0.14mmol；1.00eq.)。反应混合物在135℃微波加热19小 时。粗产物经制备型HPLC纯化，获得顺-3-[2-1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-3-氟-哌 啶-4-基]-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-咪唑-1-基甲基]-氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯。LC-MS (M+H＝582，obsd.＝582)。

向上述化合物在DCM(2ml)中的溶液加入三氟乙酸(1ml)。混合物室温搅拌2小 时。移除溶剂后，残留物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝ 482，obsd.＝482)。

¹HNMR(400MHz，甲醇-d4)δ8.06(d，J＝4.4Hz，1H)，7.63(d，J＝7.9Hz， 1H)，7.55(t，J＝6.6Hz，1H)，7.36(s，1H)，7.01(t，J＝9.0Hz，1H)，5.01(s， 1H)，4.41–4.23(m，2H)，3.76(dq，J＝30.7，11.4，9.6Hz，2H)，3.66–3.55(m， 2H)，3.48(ddt，J＝27.4，11.3，5.8Hz，3H)，3.27–3.15(m，2H)，3.09(t，J＝12.3 Hz，1H)，2.83(q，J＝13.5，12.7Hz，1H)，1.95–1.86(m，1H)，1.38(dd，J＝13.1， 7.2Hz，6H)。

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“42”)

4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(24.61mg；0.14mmol；1.02eq.)、顺-4-[1-(2-氮 杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟-(56.00mg； 0.14mmol；1.00eq.)和乙基二异丙胺(22.70mg；0.18mmol；1.30eq.)在ACN(1ml)中 的反应混合物在50℃搅拌36小时。冷却至室温后，过滤收集沉淀物，获得标题化合 物，为黄固体。LC-MS(M+H＝557，obsd.＝557)。

顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(2-三氟甲基-吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基]-3-氟--1- 基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(外消旋体)(“43”)

参照化合物“42”的制备方法，以顺-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-2-(3,4)顺-3- 氟--4-基)-1H-咪唑-4-基]-2-三氟甲基-吡啶制备标题化合物。LC-MS(M+H＝540， obsd.＝540)。

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-羟基-哌 啶-1-基}-嘧啶-5-甲腈(“44”)

向4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基- 二甲基-硅烷基氧基)-(100.00mg；0.21mmol；1.00eq.)在乙腈(2ml)中的溶液加入 乙基二异丙胺(0.06ml；0.32mmol；1.50eq.)，再加入4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(33mg， 0.21mmol，1.0eq)。反应混合物室温搅拌过夜。移除溶剂后，残留物直接用在下一步 反应中。

向上述产物加入2mlTBAF(1.0M的THF溶液)。得到的混合物室温搅拌过夜。粗 产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝515，obsd＝515)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.06(s，1H)，7.67–7.58(m，1H)，7.55(d，J＝9.5 Hz，2H)，7.28(s，2H)，7.08(dd，J＝11.7，6.5Hz，1H)，4.32(dt，J＝13.2，4.0 Hz，2H)，4.18(q，J＝6.8Hz，2H)，3.72–3.53(m，2H)，3.23–3.03(m，5H)，2.77 (t，J＝6.6Hz，2H)，2.28–2.23(m，3H)，2.23–2.11(m，2H)，1.97(dd，J＝10.9， 4.0Hz，4H)，1.62–1.47(m，1H)，1.32(h，J＝7.3Hz，1H)，0.95(t，J＝7.3Hz， 2H)。

1-(6-氨基-5-异丙基-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H- 咪唑-2-基]--4-醇(“45”)

向4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基- 二甲基-硅烷基氧基)-(100.00mg；0.21mmol；1.00eq.)在DMSO(1ml)中的溶液加 入6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(36.31mg；0.21mmol；1.00eq.)和碳酸铯(103.39mg； 0.32mmol；1.50eq.)。混合物在120℃搅拌48小时。粗产物经HPLC纯化，获得标题 化合物。LC-MS(M+H＝494，obsd＝494)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.99(s， 1H)，7.63(dd，J＝7.3，1.9Hz，1H)，7.55(d，J＝4.4Hz，2H)，7.08(dd，J＝9.7，8.5 Hz，1H)，6.05(s，2H)，5.60(s，1H)，4.18(t，J＝6.7Hz，2H)，3.16(q，J＝7.9，7.0 Hz，6H)，2.78–2.69(m，2H)，2.26(d，J＝1.8Hz，4H)，2.05–1.85(m，4H)，1.28 (d，J＝7.2Hz，6H)。

1-(6-氨基-5-乙基-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]--4-醇(“46”)

参照化合物“45”的制备方法，以4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯 基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-与6-氯-5-乙基-嘧啶-4-基胺反 应，制备标题化合物。LC-MS(M+H＝480，obsd＝480)。¹HNMR(400MHz，DMSO- d6)δ7.98(s，1H)，7.68–7.60(m，1H)，7.60–7.47(m，2H)，7.08(dd，J＝9.7，8.5 Hz，1H)，6.19(s，2H)，5.61(s，1H)，4.18(t，J＝6.7Hz，2H)，3.32–3.19(m， 4H)，3.15(t，J＝7.0Hz，4H)，2.76(t，J＝6.7Hz，2H)，2.46(q，J＝7.1Hz，2H)， 2.31–2.20(m，5H)，2.05–1.85(m，4H)，1.11(t，J＝7.3Hz，3H)。

1-(6-氨基-5-氯-嘧啶-4-基)-4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪 唑-2-基]--4-醇(“47”)

向4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-4-(叔丁基- 二甲基-硅烷基氧基)-(100.00mg；0.21mmol；1.00eq.)在乙腈(2ml)中的溶液加入 乙基二异丙胺(0.06ml；0.32mmol；1.50eq.)，再加入5,6-二氯-嘧啶-4-基胺(34.69 mgl；0.21mmol；1.00eq.)。反应混合物在100℃搅拌24小时。粗产物经HPLC纯 化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝486，obsd＝486)。¹HNMR(400MHz，DMSO- d6)δ7.98(s，1H)，7.62(dd，J＝7.7，2.2Hz，1H)，7.59–7.48(m，2H)，7.08(t，J＝ 9.1Hz，1H)，6.77(s，2H)，4.18(t，J＝6.6Hz，2H)，3.84(dt，J＝13.2，4.1Hz， 2H)，3.25–3.02(m，8H)，2.76(t，J＝6.6Hz，2H)，2.30–2.15(m，5H)，2.06–1.83 (m，4H)，1.57(td，J＝10.7，9.7，5.9Hz，4H)，1.32(h，J＝7.3Hz，4H)，0.95(t，J ＝7.3Hz，5H)。

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟- -1-基}-嘧啶-5-甲腈(“48”)

向4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟-哌 啶(140.00mg；0.37mmol；1.00eq.)在乙腈(3ml)中的溶液加入乙基二异丙胺(0.10 ml；0.55mmol；1.50eq.)和4-氨基-6-氯-嘧啶-5-甲腈(57.18mg；0.37mmol；1.00 eq.)。反应混合物室温搅拌过夜。粗产物经制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC- MS(M+H＝497，obsd＝497)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.12(d，J＝1.3Hz， 1H)，7.64(d，J＝9.2Hz，2H)，7.61–7.51(m，1H)，7.45(d，J＝23.3Hz，1H)，7.09 (t，J＝9.2Hz，1H)，4.90–4.71(m，1H)，4.58(d，J＝13.8Hz，1H)，4.02–3.81(m， 4H)，3.58(t，J＝12.1Hz，1H)，3.12(dq，J＝19.6，6.8Hz，4H)，2.69(dtd，J＝ 18.1，12.2，6.4Hz，2H)，2.37(d，J＝11.4Hz，1H)，2.25(s，3H)，2.06(d，J＝14.1 Hz，1H)，1.95(q，J＝7.0Hz，2H)。

4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟- -1-基}-嘧啶-5-羧酸酰胺(“49”)

室温下边搅拌边向反应混合物向4-氨基-6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟- 3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟--1-基}-嘧啶-5-甲腈(150.00mg；0.30mmol； 1.00eq.)在DMSO(40ml)中的反应混合物加入H₂O₂(0.29ml；3.02mmol；10.00eq.)和 2.0MNaOH水溶液(1.51ml；3.02mmol；10.00eq.)。反应混合物室温搅拌2小时。粗 产物经制备型HPLC(碱性)纯化，获得标题化合物(60mg)。LC-MS(M+H＝515，obsd ＝515)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.04(d，J＝1.3Hz，2H)，7.63(t，J＝6.9 Hz，9H)，7.55(t，J＝6.7Hz，3H)，7.08(t，J＝9.1Hz，2H)，6.87(s，4H)，4.22– 3.99(m，5H)，3.99–3.87(m，4H)，3.81(ddt，J＝21.1，10.5，5.7Hz，1H)，3.64 (dd，J＝25.7，13.4Hz，2H)，3.11(dq，J＝19.1，6.8Hz，9H)，2.80–2.58(m，4H)， 2.35(d，J＝11.4Hz，2H)，2.31(s，0H)，2.25(s，5H)，1.95(p，J＝7.0Hz，6H)。

6-{4-[1-(2-氮杂环丁烷-1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟--1- 基}-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(“50”)

6-氯-5-异丙基-嘧啶-4-基胺(55.00mg；0.32mmol；1.00eq.)、4-[1-(2-氮杂环丁烷- 1-基-乙基)-4-(4-氟-3-甲基-苯基)-1H-咪唑-2-基]-3,3-二氟-(121.27mg；0.32mmol； 1.00eq.)、2,3,4,6,7,8,9,10-八氢-嘧啶并[1,2-a]吖庚因(0.09ml；0.64mmol；2.00eq.)和 NMP(0.4ml)的反应混合物置于5ml微波管中，在135℃微波加热10小时。粗产物经 制备型HPLC纯化，获得标题化合物。LC-MS(M+H＝514，obsd＝514)。¹HNMR (400MHz，DMSO-d6)δ8.12–8.02(m，1H)，7.71–7.49(m，3H)，7.10(t，J＝9.3 Hz，1H)，6.30(s，2H)，3.92(d，J＝7.3Hz，2H)，3.71(d，J＝22.8Hz，1H)，3.51 (d，J＝10.8Hz，1H)，3.16–3.03(m，4H)，2.96(t，J＝11.5Hz，1H)，2.75–2.57 (m，3H)，2.27(s，3H)，2.04–1.84(m，3H)，1.29(dd，J＝23.7，7.2Hz，6H)。

生物活性

P70S6K酶试验

将P70S6K抑制剂化合物稀释，并铺于96孔板中。将包含以下组分的反应混合液 加入该化合物板中以开始酶反应；将P70S6K(3nM，T412E突变体，Millipore)与24 μMATP在试验缓冲液中混合，所述缓冲液包含100mMHepes(pH7.5)、5mMMgCl₂、 1mMDTT、0.015％Brij和1μM底物肽FITC-AHA-AKRRRLSSLRA-OH(源自S6核糖 体蛋白质序列，FITC＝异硫氰酸荧光素，AHA＝6-氨基己酸)。将该反应物在25℃孵 育90分钟，之后加入10mMEDTA以停止该反应。在CaliperLifeSciencesLabChip 3000分析底物和产物(磷酸化的)肽的比例，压力为-1.4psi，下游电压和下游电压分别 为-3000和-700。在获得谱图上，解析出产物峰在底物峰之前。

AKT酶试验

采用TTPMosquito液体处理仪器，在384孔板的每个孔内放置125nl在100％ DMSO中适当浓度的抑制剂(用于绘制剂量反应曲线)。向该反应加入各组分至终浓度 为12.5μl：

0.1ng/μlHis-AKT(全长)，(Invitrogen，Part#P2999，Lot#641228C)

160uMATP(Fluka，02055)

1mMDTT(Sigma，D0632)

1mMMgCl2(Sigma，M1028)

1μM底物肽(序列FITC-AHA-GRPRTSSFAEG-NH2)，由TuftsPeptideSynthesis service合成

100mMHEPESpH7.5(Calbiochem，391338)

0.015％Brij-35(Sigma，B4184)

反应在25℃培育90分钟，然后加入70μl终止缓冲液(100mMHEPESpH7.5， 0.015％Brij-35，10mMEDTA(Sigma，E7889))终止反应。

用CaliperLC3000读取孔板，读取格式为芯片外迁移率试验格式(Off-Chip mobilityshiftassayformat)，采用具有12个吸入针的芯片，参数如下：筛选压力–2.3 psi，上游电压–500，下游电压–3000。这些条件使得未磷酸化底物和磷酸化产物以不 同峰分辨出来，因此可以直接测量底物转化为产物的百分比。将转化百分比与抑制剂 浓度绘制成曲线，得到S形剂量应答曲线，基于该S形曲线可以计算IC₅₀值。

表4列出了实施例部分的化合物在P70S6K和AKT酶抑制试验中获得的值。

表中的数据的含义如下：

+++：<1nM；

++：1–10nM；

+：>10nM。

表4：通式(I)所示的化合物对p70S6K和AKT酶的抑制

此处引用的所有专利、专利申请、专利公开文本、非专利公开文本以及任何其他 文献全部纳入本文作为参考。