一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂及其制备方法和应用

1.本发明涉及一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂及其制备方法和应用，属于医学技术领域。

背景技术：

2.乳腺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，具有多个亚型，三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,tnbc)便是其中之一，具体是指雌激素受体、孕激素受体和人表皮生长因子受体2的表达均为阴性的乳腺癌，约占所有乳腺癌病理类型的15％～20％，具有预后差、易转移、易复发以及高度侵袭性的临床特点。在乳腺癌过程中，常规面临许多挑战，如乳腺癌特异性不足、药物无法进入转移部位、肿瘤微环境水平耐药等。肿瘤微环境(tme)能够促进肿瘤细胞代谢重编程，减少化疗药物灌注并诱导癌细胞产生耐药性，在抵抗疾病中起着核心作用。肿瘤细胞代谢旺盛，常处于快速增殖状态，耗氧量高于正常细胞，故肿瘤微环境常处于缺氧状态，该状态与肿瘤的多药耐药关系十分密切，可通过促进药物排泄、凋亡抵抗、自噬、血管生成、干性特征形成等多种途径导致多药耐药的产生。
3.缺氧是tme的典型特征，可驱动许多肿瘤的侵袭性和转移特性，大多数实体瘤的局部或永久性低氧状态是由于血液供应不足和血管畸形导致的氧气(o2)供应不足。tme中的缺氧可改变正常微环境的功能，促进肿瘤进展，并限制效果，与正常细胞相比，恶性癌细胞产生过量的h2o2，导致肿瘤微环境中的h2o2水平显著增加，因此在实体肿瘤中存在酸性和富含h2o2的微环境。纠正肿瘤的缺氧微环境在肿瘤防治中意义深远。

技术实现要素：

4.针对上述现有技术存在的问题，本发明提供一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂及其制备方法和应用，操作方便，方法稳定可靠，制得的纳米诊疗剂生物相容性好、靶向性强、毒副作用小。
5.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂，以介孔聚多巴胺mpda为载体，包载声敏剂ce6，得到负载声敏剂ce6的mpda-ce6，然后在其表面均匀包裹对肿瘤微环境敏感的mno2纳米片，最后在mno2纳米片表面通过酰胺作用修饰西妥昔单抗c225，构成具有良好生物相容性和肿瘤靶向性的多功能介孔聚多巴胺纳米诊疗剂mpda-ce6@mno
2-c225。
6.利用肿瘤微环境特征，本发明制得的纳米粒不但能够主动靶向肿瘤，并且能触发药物释放和改善肿瘤缺氧tme以增强抗肿瘤作用。本发明制得的纳米粒以西妥昔单抗通过酰胺反应与纳米粒表层的mno2纳米片偶联。利用声动力具有独特的深层穿透性和无辐射损伤等优势。通过超声激活声敏剂ce6产生ros导致肿瘤细胞凋亡，有助于推动肿瘤诊疗一体化的发展。mno2纳米片可以诱导h2o2酶分解为水和氧气，因此可以作为减少肿瘤缺氧的关键介质。此外，mno2可以响应其他特定于肿瘤的环境特质而分解，例如谷胱甘肽(gsh)或局部酸度，并且产生的mn
2+
是用于肿瘤组织t1磁共振(mr)成像的极好的造影剂。
7.声动力是利用声敏剂在声动力的作用下，将分子氧转化成有毒性的单线态氧，从而实现对肿瘤细胞的杀伤效果。而在肿瘤组织中，肿瘤细胞失控性增殖，其脉管系统提供的血氧含量和营养物质不能满足其生长所需，导致肿瘤组织内氧气的消耗量远远大于供应量，氧含量持续下降，进而形成肿瘤组织缺氧微环境。因此对氧气需求较高的声动力仅能杀灭肿瘤组织内常氧区域的肿瘤细胞而无法有效杀灭乏氧肿瘤细胞，肿瘤中的氧气短缺导致声动力疗法的抗肿瘤效力显著降低，尤其是在需要连续的情况下，甚至会诱导肿瘤细胞产生耐药，促使肿瘤复发，阻碍肿瘤的有效。所以，提高肿瘤组织的含氧量，改善肿瘤乏氧环境至关重要。
8.介孔聚多巴胺纳米粒可以通过模版法制备，介孔结构由于具有较大的比表面积可以增加材料的载药量。聚多巴胺具有很强的粘附性，可以涂覆在多种材料的表面，而且其具有ph敏感性，它可以在酸性环境中解聚，从而释放药物，因此聚多巴胺外壳具有“门控效应”。
9.二氧化锰纳米片具有毒性低、生物相容性好、表面积大、吸附性强等特点，并被癌细胞内过表达的谷胱甘肽gsh降解，可作为良好的多功能分子探针构建平台。利用二氧化锰的ph响应效应增强磁共振成像，同时二氧化锰可以催化双氧水分解，有助于增加肿瘤乏氧区的氧含量，提高声动力疗效。
10.一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂的制备方法，
11.a.将盐酸多巴胺溶解于混合后的f127、1，3，5-三甲苯tmb溶液中，在超声处理下，溶液由透明转变为乳白液体，缓慢滴加氨水，溶液变为棕且逐渐转为黑；
12.b.混合物在磁力搅拌器中搅拌一段时间后离心收集，然后分别用无水乙醇与超纯水依次洗涤，洗涤后将样品冷冻干燥得到mpda；
13.c.将ce6经过活化后与mpda通过酰胺作用，得到负载ce6的mpda纳米粒mpda-ce6；
14.d.将mpda-ce6与kmno4通过原位氧化还原反应，得到mno2纳米片包裹的纳米粒mpda-ce6@mno2；
15.e.37℃水浴条件下，将c225通过酰胺反应修饰在mpda-ce6@mno2表面，得到偶联单抗的纳米诊疗剂mpda-ce6@mno
2-c225。
16.进一步的，所述步骤c中ce6在负载之前，先进行羧基的活化，将ce6溶于二甲亚砜dmso溶液中，之后在溶液中再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐edc和n-羟基硫代琥珀酰亚胺nhs。
17.进一步的，所述的ce6的包封率为71％～87％；载药量为30％～40％。
18.进一步的，所述mpda-ce6@mno
2-c225粒径为250～290nm。
19.靶向乳腺癌的纳米诊疗剂在制备乳腺癌的药物中的应用。
20.与现有技术相比，本发明具有以下优点：
21.以介孔聚多巴胺为载体，无毒性、生物相容性良好，且孔道结构增大了ce6的负载量，提高了声动力的效果。
22.mno2纳米片能够催化过氧化氢分解为氧气，且能够降低肿瘤微环境中过表达的gsh的水平，提高声动力疗效；分解成的mn
2+
同时能用于磁共振成像兼化学动力学，从而实现磁共振成像引导下的声动力与化学动力的协同。
23.c225是一种嵌合型单克隆抗体，其与表皮生长因子受体(egfr)具有非常强的亲和
力和很强的特异性，因此靶向egfr过表达的肿瘤细胞，这将会对egfr过表达癌症的诊断和带来很大的帮助；近年来，基于tnbc分子表达谱的研究成果，发现了多个可能用于tnbc的潜在分子靶点，从许多临床研究中可以明显看出，tnbc患者通常对抗egfr抗体相关的化疗的反应较于单纯的化疗组效果要更好，因此，egfr受体适用于tnbc的靶向。
24.操作方便，方法稳定可靠，制得的纳米诊疗剂具有生物相容性好、靶向性强、毒副作用小等优点，在肿瘤方面可发挥单抗靶向、ce6的声动力、利用mno2能为声动力提供氧气和mn
2+
的类芬顿反应下产生的
·
oh持续杀伤肿瘤；另一方面mno2能清除gsh对ros起到保护作用，进一步放大氧化性损伤；在磁共振成像引导下将声动力与化学动力学联合，对比单一疗法能够对细胞起到持续性杀伤作用。
附图说明
25.图1a为本发明mpda纳米粒的透射电镜图；
26.图1b为本发明mpda-ce6@mno
2-c225纳米粒的透射电镜图；
27.图2a为本发明不同纳米粒的紫外吸收光谱图；
28.图2b为本发明不同纳米粒的荧光发射光谱图；
29.图3a为本发明mpda-ce6@mno2连接靶向后的考马斯亮蓝染结果；
30.图3b为本发明不同纳米粒的傅立叶红外图谱(ft-ir)；
31.图4a为本发明mpda-ce6@mno
2-c225纳米粒的粒径分布图；
32.图4b为本发明不同纳米粒的zeta电位测定结果图；
33.图5为本发明不同纳米粒的溶液氧测定结果图；
34.图6为本发明不同纳米粒在体外1o2产生能力测定结果图；
35.图7为本发明通过mb降解法检测纳米粒的类芬顿反应结果图；
36.图8为本发明不同纳米粒在4t1细胞内的o2测定结果图；
37.图9为calcein-am/pi染研究不同纳米粒对4t1细胞的杀伤效果图；
38.图10为cck-8法研究对mpda-ce6@mno
2-c225对4t1细胞的杀伤效果图。
具体实施方式
39.下面结合附图对本发明作进一步说明。
40.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
41.本发明提供一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂，将0.5g盐酸多巴胺、0.5g f127、0.8ml tmb分散在25ml水和25ml乙醇的混合溶液中，超声5～10min形成乳液超声条件下，将2ml氨水缓慢滴加到乳液中，于室温条件下500rpm/min磁力搅拌4h后，将样品溶液在4℃、13000rpm下离心30min，移除上清；然后分别用无水乙醇与超纯水依次洗涤三次以去除模版和反应残留，最后一次洗涤后将样品冷冻干燥后即可获得介孔聚多巴胺纳米粒。
42.负载ce6前，先要进行羧基的活化，称取1mg ce6溶于1ml的dmso溶液中，之后加入12mg edc和24mg nhs，搅拌4h；随后与mpda溶液(浓度为1，2和5mg/ml)反应，室温下避光搅
拌24h后，再通过高速离心机(13000rpm，10min)收集粗产物。并用水：dmso＝1:1的溶液洗涤数次，去除过量的ce6、nhs和edc。将全部上清收集定容，通过紫外分光光度计测定ce6的负载量，最终离心分散到一定体积的超纯水中得到mpda-ce6纳米粒。
43.称取2mg预制备的mpda-ce6纳米粒超声分散于10ml的超纯水中。取1mg kmno4溶解于1ml的超纯水中，在超声条件下缓慢将kmno4溶液滴加入mpda-ce6纳米溶液中，40℃水浴条件下，500rpm/min磁力搅拌24h；收集反应后的液体，15000rpm，离心15min后，去除上清液，使用去离子水将沉淀溶解后，经超声处理后分散于水中，继续离心，重复以上步骤三次后，将沉淀冷冻干燥即可得到mpda-ce6@mno2纳米粒。
44.称取1mg mpda-ce6@mno2，用1ml 0.01mtris-hcl重悬后，加入20ul c225抗体混匀，在37℃室温条件下180rpm震荡反应1h，离心后，弃去上清液，得沉淀即为偶联单抗的纳米诊疗剂mpda-ce6@mno
2-c225。
45.采用透射电子显微镜(tem)观察mpda与mpda-ce6@mno
2-c225的结构形态学特点。具体检测过程为，在避光条件下，将mpda溶解于超纯水中，取适量稀释后的纳米诊疗剂滴至电镜制样专用的铜网上，30min后使用吸水纸吸干多余液体，晾干后进行拍照观察。由检测结果可知，如图1a所示，所得到的mpda介孔结构清晰、孔径较均一，如图1b所示，纳米粒子表面具有均匀的片层结构。
46.使用紫外吸收光谱仪对不同的纳米粒溶液的紫外吸收光谱进行测定，从图2a中可以看出，mpda-ce6和mpda-ce6@mno
2-c225纳米颗粒在404nm处和660nm处有明显的特征峰，与ce6的特征峰一致。然后对mpda-ce6@mno2纳米颗粒进行荧光光谱分析，如图2b所示，mpda-ce6@mno2与ce6荧光光谱相似，但是游离ce6荧光强度明显高于纳米化的ce6荧光强度，其主要原因是纳米颗粒的ce6分子由于荧光共振能量转移发生荧光萃灭现象所致。上述的实验结果充分说明了ce6已成功共价连接到纳米颗粒上。
47.sds-page是鉴定蛋白质类物质的常用手段，本实验用来分析单克隆抗体c225是否成功偶联到纳米粒表面，如图3a所示，经考马斯亮蓝染的电泳结果显示，1泳道为蛋白marker指示条带，2泳道上样样品为单克隆抗体c225，抗体由2条重链(分子量约为55kd)和2条轻链(分子量违约25kd)以键间二硫键形成连接而成。经还原性的跑胶之后，二硫键打开，使重链和轻链分开，所以在图中可以分别看到重链带、轻链带。3泳道为阴性对照mpda-ce6@mno
2 nps(nps为纳米粒)，未偶联蛋白抗体，因此在途中未见蛋白条带。4泳道为mpda-ce6@mno
2-c225，跟c225相比较在相同位置出现了重链、轻链两条带，说明该样品中含有单克隆抗体，即证实了mpda-ce6@mno2成功偶联了c225。
48.为了进一步确定偶联方法、偶联缓冲液等条件制备mpda-ce6@mno
2-c225稳定体系。并通过傅里叶红外光谱(ftir)、动态光散射仪(dls)等手段对mpda-ce6@mno
2-c225组成、结构等性质进行表征。利用sds-page进一步证实c225是否成功偶联到mpda-ce6@mno2表面。取适量干燥后的mpda@mno2和mpda@mno
2-c225纳米粒与溴化钾粉末共同研磨、压片。在3800-400cm-1
处检测红外吸收光谱，以此确定纳米粒和单抗后纳米粒子官能团的变化。如图3b从傅里叶红外图谱可以看出，在520cm-1
附近有一个峰，可以归属于mn-o键的弯曲振动峰，3600-3200cm-1
之间的吸收峰是o-h基团的伸缩振动，2800-3025cm-1
之间的吸收峰可以归属于-ch2基团的-ch键的振动峰，1295cm-1
处的吸收峰是c-n振动，1500-1700cm-1
处有明显的吸收峰，该峰正好是酰胺i带、ii带的吸收范围。因此，ftir实验证实成功制备了偶联单抗的纳
米粒子。
49.利用马尔文粒径仪测量mpda-ce6@mno
2-c225的粒径大小、分布及表面电位。具体检测过程为，将mpda-ce6@mno
2-c225使用超纯水溶解后装于皿中(确保皿中无气泡产生)，使用马尔文粒径仪测量其粒径、分散性和电位。由检测结果可知，所制备的纳米粒子粒径均匀，分散性强，如图4a所示，纳米粒的尺寸为285
±
2.5nm，数值比与之相对应的tem图像测量结果稍大，这主要是由于这些纳米颗粒溶解在超纯水中其表面会形成一定厚度的水合层，从而导致所测水合粒径值增大。而且dls显示这些纳米颗粒有着狭窄的粒径分布，表明纳米颗粒在超纯水中有着良好的分散性。由图4b所示mpda、mpda-ce6、mpda-ce6@mno2和mpda-ce6@mno
2-c225纳米颗粒的zeta电位结果，mpda纳米颗粒的zeta电位为-29.2
±
0.35，负载上ce6后其电位为-28.9
±
0.76，表面修饰mno2纳米片后的电位为-23.67
±
1.84，偶联上单抗之后的电位为-9.25
±
0.87，进一步说明了单抗成功偶联于纳米粒上。
50.为了证实材料能够催化过氧化氢生成氧气，将单纯ce6、mpda-ce6@mno2和mpda-ce6@mno
2-c225 nps与h2o2预处理后，使用便携式溶解氧测定仪对溶液进行溶解氧含量测定。在10min内测定不同溶液的溶解氧浓度，mpda-ce6@mno2和mpda-ce6@mno
2-c225组的溶解氧浓度明显高于h2o2、ce6+h2o2组，结果说明mno2纳米片通过催化h2o2反应生成氧气，结果如图5所示。
51.为了验证不同纳米粒的声动力性能，具体检测过程为：利用dpbf探针测定不同时间的超声处理(1.5w/cm2、1mhz)下ce6、mpda-ce6@mno
2-c225的单线态氧产生情况，如图6所示，在不同时间的超声处理下，410nm处dpbf的吸收峰保持稳定，说明在此过程中没有产生1o2，相比之下，ce6和mpda-ce6@mno
2-c225在随着超声处理时间的增加，410nm处的dpbf峰逐渐降低，表示其生成1o2的效率很高，并且随着时间的推移mpda-ce6@mno
2-c225的1o2生产量高于ce6。此外，mpda-ce6@mno
2-c225在h2o2存在时产生1o2的能力比没有h2o2时更高，说明mpda-ce6@mno
2-c225催化h2o2生成氧气后产生了更多的1o2，增强了sdt效果。
52.为了评估不同纳米粒的体外类芬顿反应效能，通过fenton反应触发的mb降解方法确认羟基氧自由基的产生，将配置好mb+h2o2溶液中分别加入mpda-ce6+gsh、mpda-ce6@mno
2-c225、mpda-ce6@mno
2-c225+gsh，以mb作为对照组，通过mpda-ce6@mno
2-c225发生的类芬顿反应产生的自由基将mb降解生成水和二氧化碳，颜由蓝转变为无，mb于665nm处吸光度值变化结果如图7所示。单纯的mb组、mb+mpda-ce6+gsh组及mb+mpda-ce6@mno
2-c225组在665nm处吸光度值并没有明显降低，而mb+mpda-ce6@mno
2-c225+gsh组吸光度值明显降低，结果说明该纳米粒在材料层面具有良好的类芬顿反应性能。
53.为了研究不同纳米粒的乏氧缓解能力，通过rdpp氧气试剂盒检测药物作用4t1细胞后细胞内氧气的产生情况。为了评价o2产生的效果，先将4t1细胞以1.0
×
106细胞/孔密度接种于铺有盖玻片的6孔板中，滴加液体石蜡进行液封。在培养箱中培养24h后弃掉培养液，用pbs洗涤3次。随后，按照不同分组将药物用无血清培养基配成20μg/ml的mpda-ce6、mpda-ce6@mno2和mpda-ce6@mno
2-c225纳米粒处理4t1细胞，在超声探头下处理5min后，继续孵育4h。然后弃去上清，用冷pbs洗涤3次。使用配置好的rdpp探针工作液孵育4t1细胞，30min后，弃去工作液，用不完全培养基溶液洗涤3次后，用4％多聚甲醛固定细胞，然后用激光共聚焦显微镜观察细胞，mpda-ce6纳米粒组经过超声处理之后其荧光强度要高于control组，说明了在超声处理后的mpda-ce6纳米消耗了细胞内氧气，加重了细胞的乏氧情况，mpda-ce6@
mno2和mpda-ce6@mno
2-c225纳米粒组在超声处理后其荧光强度相较于，mpda-ce6纳米粒组要弱，结果表明设计的纳米粒能缓解mpda-ce6在声动力作用下对细胞造成的加剧乏氧情况，结果如图8所示。
54.为了进一步证实mpda-ce6@mno
2-c225 nps对乳腺癌的作用，取对数生长期的乳腺癌细胞4t1经胰酶消化后离心洗涤，计数后制成细胞悬液接种于6孔板，每孔细胞数约为1
×
105个/孔，37℃条件下，孵育12h。待细胞完全贴壁后吸出旧的培养基并使用pbs洗涤三次备用。实验设置8个分组，a组为对照组，b组采用超声探头处理5min，功率为1.5w频率为1m hz，c组mpda-ce6 nps，d组mpda-ce6 nps与细胞共孵育后经超声处理5min，e组mpda-ce6@mno
2 nps，f组mpda-ce6@mno
2 nps与细胞共孵育后经超声处理5min，g组mpda-ce6@mno
2-c225 nps，h组mpda-ce6@mno
2-c225 nps与细胞共孵育后经超声处理5min。不同处理后，吸出旧的培养基并用pbs洗涤三遍，每孔加入1ml的calcein-am/pi染液置于细胞培养箱中孵育20min，20min后取出培养板，去除染液，pbs轻轻洗三次，移至倒置荧光显微镜下观察，a、c、e、g组没有出现细胞死亡的情况，b组在单纯的超声处理下，有少数细胞死亡，是为正常情况，d组有半数细胞死亡是因为mpda-ce6 nps在声动力作用下产生的1o2对细胞造成了不可逆的杀伤，f、h因为mno2纳米片在细胞内产生了氧，使得mpda-ce6 nps在超声下产生了更多的1o2，使得细胞全部死亡，结果如图9所示。
55.为了证实mpda-ce6@mno
2-c225引起的sdt/cdt效应对4t1细胞的杀伤效果。具体检测过程为，取对数生长期的乳腺癌细胞4t1，经胰酶消化后离心洗涤，计数后制成细胞悬液，以1
×
104细胞/孔的浓度接种于96孔板中37℃条件下孵育24h。待细胞完全贴壁后吸出旧的培养基并使用pbs洗涤三次备用。实验设置5个分组，分别加入100μl/孔含有不同浓度梯度的mpda-ce6@mno
2-c225 nps(浓度梯度为5、10、15、20、50μg/ml)的培养基，孵育24h后，吸出旧的培养基后pbs洗涤三遍，每组在超声探头下处理5min后，向每孔加入配置好的cck-8检测液测定细胞存活率，当纳米粒浓度在50μg/ml时，细胞存活率低至40％以下，结果说明了纳米粒在声动力作用下对肿瘤细胞有高度生长抑制作用，结果如图10所示。
56.对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其它的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
57.以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何细微修改、等同替换和改进，均应包含在本发明技术方案的保护范围之内。

技术特征：

1.一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂，其特征在于，以mpda为载体，包载ce6，得到负载ce6的mpda-ce6，然后在其表面均匀包裹mno2纳米片，由c225功能化mno2纳米片，构成介孔聚多巴胺纳米诊疗剂mpda-ce6@mno
2-c225。2.根据权利要求1所述的一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：a.将盐酸多巴胺溶解于混合后的f127、tmb溶液中，在超声处理下，溶液由透明转变为乳白液体，缓慢滴加氨水，溶液变为棕且逐渐转为黑；b.混合物搅拌后离心收集，然后分别用无水乙醇与超纯水依次洗涤，洗涤后将样品冷冻干燥得到mpda；c.将ce6经过活化后与mpda通过酰胺作用，得到负载ce6的mpda纳米粒mpda-ce6；d.将mpda-ce6与kmno4通过原位氧化还原反应，得到mno2纳米片包裹的纳米粒mpda-ce6@mno2；e.37℃水浴条件下，将c225通过酰胺反应修饰在mpda-ce6@mno2表面，得到偶联单抗的纳米诊疗剂mpda-ce6@mno
2-c225。3.根据权利要求1所述的一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述步骤c中ce6在负载之前，先进行羧基的活化，将ce6溶于dmso溶液中，之后在溶液中再加入edc和nhs。4.根据权利要求1所述的一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂的制备方法，其特征在于，所述mpda-ce6@mno
2-c225粒径为250～290nm。5.根据权利要求1所述的一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂，其特征在于，所述ce6的载药量为30％～40％。6.根据权利要求1所述的靶向乳腺癌的纳米诊疗剂或权利要求2-5任一项所述的制备方法制备得到的靶向乳腺癌的纳米诊疗剂在制备乳腺癌的药物中的应用。

技术总结

本发明一种靶向乳腺癌的纳米诊疗剂及其制备方法和应用，将盐酸多巴胺与F127、TMB，超声混合形成乳液后滴加氨水；混合物搅拌后离心收集，然后分别用无水乙醇与超纯水依次洗涤，洗涤后将样品冷冻干燥得到MPDA；将Ce6经过活化后与MPDA通过酰胺作用，得到负载Ce6的MPDA纳米粒MPDA-Ce6；将MPDA-Ce6与KMnO4通过原位氧化还原反应，得到MnO2纳米片包裹的纳米粒MPDA-Ce6@MnO2；C225通过酰胺反应修饰在MPDA-Ce6@MnO2表面，得到偶联单抗的纳米诊疗剂MPDA-Ce6@MnO