一种精子优选装置-Ⅱ型的制作方法

一种精子优选装置
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型
技术领域
1.本实用新型涉及辅助生殖技术用医疗器械领域，具体地说，涉及一种优选高质量精子的培养皿。

背景技术：

2.试管婴儿技术作为辅助生殖技术是目前不孕不育的主要方法之一，主要针对排卵困难的女性及少弱精的男性。少弱精的患者表现为精子数量少，精子活力低和精子功能受损，从而无法使卵子细胞自然受精。
3.目前流行的有3种试管婴儿技术：第一代体外受精胚胎移植技术；第二代卵细胞质内单精子注射(icsi)技术；第三代植入前遗传学诊断。然而，由于人为的降低了精子进入卵细胞的门槛以及其他操作过程中对精子的损伤。使得试管婴儿的成功率不足50％，其中由于精子出现失败的比例约40％。卵子对每一对生育困难的夫妇都是十分宝贵的，所以，在注射前对精子进行优选十分重要，该操作会直接影响胚胎的移植成功率和胚胎的发育率。
4.现在被医院及科研院所接受的精子预处理方式，精子简单洗涤，上游法，密度梯度离心法等，过程中都包括了离心、稀释再离心富集的操作。其中离心过程容易使精子尾部断裂，头部损伤，dna断裂溢出和形成碎片。而且没有充分使用精子的运动能力以及精子的形态学表征。

技术实现要素：

5.本实用新型的目的是提供一种精子优选装置，可以避免精液样本在处理中易损伤精子的操作，通过精子本身的形态，运动能力来优选精子。同时可以利用趋化性来优化筛选流程，增强精子富集的功能。所获得的优质精子可直接进行体外受精或卵细胞质内单精子注射。
6.另外，市场上其他精子优选装置由于在优选过程中长时间处于水平放置，是精子由于重力及碰撞在底部沉积，优选效率较低。
7.本实用新型的目的是这样实现的：一种精子优选装置
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型，整体为呈水平放置的圆柱形，包括多节盒体，分别是底部盒体、中间盒体、顶部盒体；筛选网置放于各节盒体之间将盒体与盒体内腔分隔开，底部盒体和顶部盒体有适配于旋转仪的旋转卡口。
8.本实用新型的目的还可以这样实现：中间盒体根据样本情况设置有2个，分别是第一中间盒体和第二中间盒体。
9.所述筛选网为不同密度分布、不同孔径的薄膜，膜厚在0.05mm-0.15mm之间。
10.所述各个盒体功能区分为，底部盒体内腔为放样区，第一中间盒体内腔为初筛区，第二中间盒体内腔为优选区，顶部盒体内腔为收集区；相应的底部盒体与第一中间盒体之间放置的筛选网为初筛网，第一中间盒体与第二中间盒体之间放置的筛选网为优选网，第二中间盒体与顶部盒体之间放置的筛选网为富集网；
11.所述初筛网在放样区和初筛区之间，所述初筛网在放样区和初筛区之间，初筛网
材料为微孔孔径为15um-25um的高密度分布的聚碳酸酯膜。
12.所述优选网在初筛区与优选区之间，优选网材料为微孔孔径为5um-8um的高密度分布的聚碳酸酯膜。
13.所述富集网在优选区和收集区之间，富集网材料为微孔孔径为15um-25um的中密度分布的聚碳酸酯膜。
14.所述筛选网，其网面微米孔取向垂直于网面或与网面成一定角度。
15.与现有技术相比，本实用新型具有以下优点：
16.(1)本实用新型可选择不同微孔孔径的薄膜来适用于不同状态的样本。精子质量较差，数量较少的样本可以选择较大孔径的筛选网。
17.(2)本实用新型可选择不同数量的筛选网来适用于不同状态的样本。精子质量较差，数量较少的样本可以仅使用初筛网，进行精子优选。
18.(3)本实用新型利用精子的形态和运动能力进行优选，避免了离心等操作对精子造成的机械损伤。
19.(4)本实用新型将优选区与富集区分开，方便使用精子制动剂来收集精子。
20.(5)本实用新型依次排列的放样区、初筛区、优选区、收集区，方便形成趋化剂的浓度梯度。利用精子的趋化性，加快精子优选和富集。
21.(6)本实用新型使用多节圆柱体结构，方便配合旋转仪，在优选过程中进行慢速旋转。防止精子样本在水平底部沉积，影响筛选效率。
附图说明
22.图1为本实用新型实施例总体结构示意图，(a)主视图，(b)立体图(左侧视)，(c)立体图(右侧视)。
23.附图标记：
24.底部盒体1，其中底部盒体旋转卡口1-1、底部盒体母口内平面1-3；
25.第一中间盒体2，其中第一中间盒体公口外平面2-1、第一中间盒体公口2-2、第一中间盒体母口2-3；
26.第二中间盒体3，其中第二中间盒体公口3-2；
27.顶部盒体4，其中顶部盒体旋转卡口4-1、顶部盒体公口外平面4-2；
28.初筛网5，优选网6，富集网7。
具体实施方式
29.下面结合实施例，更具体地说明本实用新型的内容。应当理解，本实用新型的实施并不局限于下面的实施例，对本实用新型所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本实用新型保护范围。
30.实施例
31.参照图1(a)(b)(c)，本实施例所述的一种精子优选的装置
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型，整体为呈水平放置的圆柱形，包括多节盒体，分别是底部盒体、中间盒体、顶部盒体；筛选网置放于各节盒体之间将盒体与盒体内腔分隔开，底部盒体和顶部盒体有适配于旋转仪的旋转卡口。
32.具体包括底部盒体、第一中间盒体、第二中间盒体、顶部盒体，3个筛选网：初筛网、
优选网、富集网。初筛网在底部盒体和第一中间盒体之间，使用时通常由无毒性粘合剂粘在第一中间盒体的公口处；优选网在第一、第二中间盒体之间，使用时通常由无毒性粘合剂粘在第二中间盒体的公口处；富集网在第二中间盒体与顶部盒体之间，使用时通常由无毒性粘合剂粘在顶部盒体的公口处。各个盒体内部的体积并不固定，依样本情况而定。通常底部盒体内部空间较大，中间盒体、顶部盒体体积较小。
33.所述初筛网在放样区和初筛区之间，初筛网材料为微孔孔径为15um-25um的高密度分布的聚碳酸酯膜。依靠优质精子与较差精子的运动能力差异来进行初步筛选。相较于精子头部大约3.5um的直径，由于孔径较大，绝大部分具有前向运动能力的精子可以通过初筛网的筛选，进入初筛区；而运动能力较差，转圈运动的精子会被初筛网阻挡留在放样区。减少较差精子对后边优选网的堵塞。
34.所述优选网在初筛区与优选区之间，优选网材料为微孔孔径为5um-8um的高密度分布的聚碳酸酯膜。利用精子的运动能力，趋化性来进行精子优选。由于优选网上微孔较小，只有头部大小正常、前向运动能力强的优质精子可以通过。实现精子的优选过程。使用多节中间盒体时，通常筛选网膜的微孔孔径由大到小向顶部盒体排列。
35.所述富集网在优选区和收集区之间，富集网材料为微孔孔径为15um-25um的中密度分布的聚碳酸酯膜。利用不同区域的精子浓度差，精子的趋化性来富集优质精子。富集网的微孔孔径较大，方便精子通过，并且提供一定阻挡使富集区的精子不易重新回到优选区。同时由于膜的存在，使添加的趋化剂不会扩散的太快,易维持趋化剂的浓度梯度。
36.所述筛选网，其网面微米孔取向可垂直于网面或与网面成一定角度。
37.在精子优选实验中，首先对收集到的精液样本进行预处理。先进行液化处理半个小时，然后进行稀释，使处理后的样本体积小于底部盒体内部体积。再进行过滤，滤掉精液样本中的杂质，防止堵塞初筛网，降低精子优选效率。最后，再一次稀释精子样本，使精子样本体积略小于底部盒体内部体积。放在33℃的环境中进行预热。
38.在准备精子样本的同时，对实施例进行组装。首先将两节中间盒体及顶部盒体的公口部分与相应的筛选网使用无毒性粘合剂进行粘连，确保结合部紧密无气泡。然后，将粘好的筛选网浸泡精子培养液，进行浸润，防止在稍后添加样本时筛选网处产生气泡，阻塞筛选网，影响优选效率。顶部盒体预先整体浸泡在培养液中，使精子培养液缓慢的通过筛选网进入顶部合体内部。
39.在33℃的环境中使用本优选装置：
40.1.将底部盒体竖直放置在安装架上，母口向上，旋转卡口向下。将准备好的精子样本加入到底部盒体内部，液平面不要超过底部盒体母口的内平面。
41.2.将第一中间盒体从浸润液中取出，安装到底部盒体上。第一中间盒体的公口安装到底部盒体的母口。安装时，要两节盒体的轴线对齐，按压安装；避免筛选网破裂、褶皱，不要旋转安装。
42.3.向第一中间盒体添加精子培养液，液平面不要超过该盒体母口的内平面。
43.4.安装第二中间盒体，与第一中间盒体安装类似，要两节盒体的轴线对齐，按压安装，避免筛选网的破裂、褶皱。
44.5.向第二中间盒体添加精子培养液，液平面不要超过该盒体母口的内平面。
45.6.取出浸泡在精子培养液中的顶部盒体，确保盒体内部已经填充好精子培养液。
46.7.(可选)在富集网上滴加孕酮等精子趋化剂。以便安装好后，形成趋化剂的密度梯度。
47.8.将填充好精子培养液的顶部盒体，安装在第二中间盒体的母口上。同样，需要两节盒体的轴线对齐，按压安装，避免筛选网的破裂、褶皱。
48.9.将整体装置水平放置，轴线与地面平行，放置于旋转仪上。旋转速度小于3圈每分钟。
49.10.使用本实施例的进行优选的过程，持续40分钟到90分钟。
50.11.停止旋转后，将装置整体竖直放置于安装架上，底部盒体在下，顶部盒体在上。卸下最上层的顶部盒体，再倒置放置，盒体公口朝上，旋转卡口朝下。
51.12.用利器划开筛选网，使用移液收集富集区中含有优质精子的精子培养液。由此收集的优质精子可直接用于体外受精或卵细胞质内单精子注射。
52.13.验证实验使用三组dfi患者样本，初筛膜、优选膜和富集膜微孔孔径分别为20um、 8um和20um。优选40分钟后分别取出初筛区、优选区及富集区的精子样本与原液做对比。
53.14.实验方法，使用精子分析仪进行浓度、活力检测；使用dfi试剂进行碎片化精子检测。
54.15.表1精子浓度、活力及镜子碎片化检查结果平均值对比。
[0055] 原始样本初筛区优选区富集区浓度(106/ml)35.5410.54.13.5活力30.23％56.29％72.34％70.12％前向精子22.96％46.67％63.28％66.92％dfi指数63.70％13.60％7.32％5.66％
[0056]
16.实验数据表明，所述实用新型精子优选装置
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型具有十分有效的精子优选作用。
[0057]
最后所应说明的是，以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本实用新型进行了详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本实用新型的具体实施方式而已，并不用于限定本实用新型的保护范围，凡在本实用新型的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。

技术特征：

1.一种精子优选的装置
‑ⅱ
型，其特征在于，整体为呈水平放置的圆柱形，包括多节盒体，分别是底部盒体、中间盒体、顶部盒体；筛选网置放于各节盒体之间将盒体与盒体内腔分隔开，底部盒体和顶部盒体有适配于旋转仪的旋转卡口。2.根据权利要求1所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，中间盒体根据样本情况设置有2个，分别是第一中间盒体和第二中间盒体。3.根据权利要求1所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述筛选网为不同密度分布、不同孔径的薄膜，膜厚在0.05mm-0.15mm之间。4.根据权利要求1、2或3所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述各个盒体功能区分为，底部盒体内腔为放样区，第一中间盒体内腔为初筛区，第二中间盒体内腔为优选区，顶部盒体内腔为收集区；相应的底部盒体与第一中间盒体之间放置的筛选网为初筛网，第一中间盒体与第二中间盒体之间放置的筛选网为优选网，第二中间盒体与顶部盒体之间放置的筛选网为富集网。5.根据权利要求4所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述初筛网在放样区和初筛区之间，初筛网材料为微孔孔径为15um-25um的高密度分布的聚碳酸酯膜。6.根据权利要求4所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述优选网在初筛区与优选区之间，优选网材料为微孔孔径为5um-8um的高密度分布的聚碳酸酯膜。7.根据权利要求4所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述富集网在优选区和收集区之间，富集网材料为微孔孔径为15um-25um的中密度分布的聚碳酸酯膜。8.根据权利要求1所述的精子优选的装置
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型，其特征在于，所述筛选网，其网面微米孔取向垂直于网面或与网面成一定角度。

技术总结

一种精子优选的装置

技术研发人员：

马雁南 唐军 李存玺 刘家恩

受保护的技术使用者：

北京仁基源医学研究院有限公司

技术研发日：

2022.06.18

技术公布日：

2023/1/30