光动力复合仿生水凝胶及其制备与应用

1.本发明属于医药领域，具体涉及一种光动力复合水凝胶及其制备与应用。

背景技术：

2.在人体中，皮肤组织是最大、最暴露、也是最脆弱的组织。一旦皮肤组织发生损伤，修复过程非常复杂，包括四个经典阶段：止血、炎症、增殖和重塑。并且在皮肤愈合过程中，病原菌容易入侵并形成菌落，从而导致严重的伤口感染，这会延长炎症阶段的时间从而阻碍伤口愈合。以抗生素为基础的疗法一直是感染的一种常见手段，然而这容易使细菌产生耐药性。迄今为止，已经开发了各种类型的伤口敷料材料用于预防感染、促进伤口快速愈合，包括电纺丝纳米纤维、多孔泡沫、生物相容性膜和功能性水凝胶。理想的伤口敷料应具备以下特征：
①
能够为伤口提供湿润的愈合环境，具有良好的透气性和机械保护作用；
②
可吸收伤口渗出物，保护伤口免受污染和细菌感染，减少伤口表面坏死以及刺激生长因子的分泌；
③
良好的生物相容性、生物可降解性，易于无痛去除和更换。水凝胶是一种亲水性高分子材料，可通过物理或化学交联形成具有三维网络结构。具有含水量高、生物相容性好等优点。最近开发的水凝胶大多不具有仿生性且只能修复单一类型的伤口，限制了其在临床上的广泛应用。因此，研究在不同伤口的整个愈合过程中发挥作用的新型仿生水凝胶具有重要意义。
3.螺旋聚异腈多肽(pic)水凝胶是一种可逆的温敏水凝胶，能够模拟天然细胞外基质的纤维结构和机械性能。pic在低于成胶温度时为液体，当温度上升到成胶温度时，多条聚合物单链聚集在一起，形成凝胶网络。通过“点击化学”的方法可将细胞粘附肽gly-arg-gly-asp-ser(grgds)功能化修饰于pic侧链，从而为细胞提供粘附位点，促进细胞粘附、细胞迁移、增殖、血管化和细胞相容性等生物学响应(synthetic extracellular matrices as a toolbox to tune stem cell secretome,kaizheng liu，acs appl.mater.interfaces 2020,12,56723-56730)。grgds功能化修饰的pic水凝胶能够用于多种细胞系和类器官的3d培养。基于pic可调的机械性质，可调控细胞的分化、分泌等生物学功能。此外，pic水凝胶具有较好生物相容性，在活体实验中没有表现出毒性迹象。pic水凝胶的机械仿生性质能够为细胞生长提供良好环境，其温敏特性有利于在伤口创面的使用或移除，避免机械移除造成的二次伤害。因此，pic水凝胶在伤口敷料应用方面具有良好前景。
4.光动力和光热抗菌疗法因其不易产生耐药性和高效抗菌性而受到广泛关注。光动力抗菌疗法(pdt)通过产生活性氧(ros)化学氧化损伤细菌的磷脂和蛋白质。光热抗菌疗法(ptt)依靠产生局部热疗来杀死细菌。然而，活性氧和热疗的协同作用可以更快、更有效地杀灭细菌。共轭寡聚物纳米粒子(ettc nps)可以实现光动力和光热协同，能够作为抗菌剂进行细菌感染的。ettc nps在808nm激光照射下不仅实现了出的光热转换能力和单重态氧产生性能，还具有良好的光稳定性和生物相容性。
5.此外，低剂量pdt能够显著上调间充质干细胞分泌各种促血管生成因子(vegf-a、
il-8、pai-1、mmp-9等)，并提高间充质干细胞促进血管生成的能力。将低剂量pdt会上调促血管生长因子运用到复合水凝胶体系中，从而促进伤口的愈合。

技术实现要素：

6.本发明针对现有技术的缺陷，提供一种仿生光动力复合水凝胶，所述光动力复合水凝胶集光热光动力抗菌性能及活性因子促进伤口愈合功能于一体，用于伤口抗菌感染及刺激皮肤细胞增殖。
7.本发明所提供的光动力复合水凝胶，通过包括如下步骤的方法制备得到：
8.1)pic-rgd的制备
9.使dbco-peg4-nhs(二苯基环辛炔-四聚乙二醇-活性酯)与黏附多肽(grgds)反应，得到dbco-grgds，将带叠氮的pic与dbco-grgds进行点击化学反应，得到pic-rgd；
10.其中，所述带叠氮的pic结构式如下所示：
[0011][0012]
2)ettc nps@cm的制备
[0013]
先用纳米沉淀法制备ettc nps，然后在ettc nps表面包覆细胞膜，得到ettc nps@cm；
[0014]
其中，ettc的结构式如下所示：
[0015][0016]
3)pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶的制备
[0017]
将pic-rgd聚合物溶解在pbs中，与ettc nps@cm结合组装，得到pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶；
[0018]
4)cf的制备
[0019]
将成纤维细胞封装在pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶中，3d培养，培养过程中进行近红外光照射，得到含有多种活性因子的培养基(cf)；
[0020]
5)pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶的制备
[0021]
将pic-rgd聚合物溶解在所述含有多种活性因子的培养基(cf)中，加入ettc nps@cm，组装，得到pic-rgd/ettc nps@cm/cf。
[0022]
上述方法步骤1)中，dbco-peg4-nhs与抗黏附多肽(grgds)、带叠氮的pic的配比依次可为：1-2mg：0.5-1.5mg：10-20mg，具体可为1.3mg：1.0mg：15mg；
[0023]
所述反应的温度可为室温，时间可为18-28h；
[0024]
所述点击化学反应的温度可为室温，时间可为18-28h。
[0025]
步骤2)中，纳米沉淀法制备ettc nps的操作为：将ettc溶液与dspe-peg
2000
溶液混合，超声，将超声的混合物迅速滴入正在超声的超纯水中，超声，搅拌过夜，透析，超滤浓缩得到ettc nps；
[0026]
所述细胞膜为l929成纤维细胞的细胞膜，也可为目标组织的细胞膜；
[0027]
在ettc nps表面包覆细胞膜的操作为：将细胞膜溶液与ettc nps混匀，超声，得到ettc nps@cm；
[0028]
其中，细胞膜与ettc nps的配比可为：3-5μg蛋白量：200-500μg，具体可为4.3μg蛋白量：300μg；
[0029]
所述超声的时间可为20-40min；所述超声在4℃的水浴中进行。
[0030]
上述方法步骤3)中，pic-rgd聚合物与ettc nps@cm的配比可为：5-6mg：10-12μg。
[0031]
上述方法步骤4)的操作为：将pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶溶液与细胞悬液混匀，培养15-30min(具体可为20min)分钟后凝胶化，将无血清培养基添加到复合水凝胶上，3d培养4-5天(具体可为5天)，得到含有多种活性因子的培养基(cf)，
[0032]
在培养的第2，3，4天进行近红外光照射，所述近红外光照射的功率为0.1-5w，具体可为0.25-0.3w；每次照射1-20min，具体可为3-4min，更具体可为3min30s。
[0033]
上述方法步骤5)中，pic-rgd聚合物与含有多种活性因子的培养基(cf)、ettc nps@cm的配比可为：5-6mg：6ml：10-12μg。
[0034]
由上述方法制备得到的光动力复合水凝胶(pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶)也属于本发明的保护范围。
[0035]
上述pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶在制备用于伤口抗菌感染及刺激皮肤细胞增殖的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
[0036]
所述产品具体可为伤口敷料、抗菌凝胶。
[0037]
本发明用细胞膜将具有光热光动力功能的ettc纳米粒子包裹起来，与pic水凝胶相结合，用于小鼠皮肤成纤维细胞l929的三维培养。细胞膜的包裹作用增加了纳米粒子的仿生特性，促使纳米粒子与细胞和pic的相互作用。在低剂量光动力时，促使细胞产生更多的活性因子，这些活性因子可以促进伤口处血管内皮细胞和成纤维细胞的生长，将它掺入后使水凝胶具有促进伤口愈合的功能。此外，ettc nps在近红外光照射下产生的ros和热量对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌以及真菌显示出高抗菌效率。小鼠实验表明，本发明设计的复合水凝胶能够有效减轻伤口处细菌感染，从而加快伤口愈合速度，并且对器官没有明显的毒性，具有良好的生物相容性。所以最后的体系是含有包膜纳米颗粒和细胞活性因子的
水凝胶在近红外光照射下既有光热光动力抗菌功能，还有活性因子促进伤口愈合功能。
[0038]
本发明的pic水凝胶的结构和力学性能与胶原蛋白和纤维蛋白非常相似，具有在高应变下的特征性硬化反应，以及可逆的热响应行为易于应用和移除，并不会引起异物反应或过度炎症。
[0039]
本发明采用光热疗法(ptt)和光动力疗法(pdt)联合的抗菌方法，避免了抗生素疗法使细菌产生耐药性的现象。抗菌剂ettc nps被细胞膜覆盖，更加增强了纳米粒子的生物相容性、细胞结合率以及与pic网络结构的相互作用。
[0040]
本发明运用低剂量pdt上调l929细胞分泌促进伤口愈合的因子(fbln5、mt1等)，收集这些活性因子，作用在混合水凝胶中作为伤口敷料，有效的促进伤口处细胞的生长与转化，从而加快伤口愈合的进程。
附图说明
[0041]
图1为通过动态光散射(dls)和透射电子显微镜(tem)测量本发明实施例1中制备的ettc nps和ettc nps@cm的尺寸和形态。
[0042]
图2为含有不同浓度ettc nps@cm的pic复合水凝胶的储能模量随温度的变化曲线。
[0043]
图3为本发明实施例3中制备的复合水凝胶在nir下温度随照射时间的变化。
[0044]
图4为本发明实施例3中制备的含15ug/ml ettc nps@cm的pic水凝胶在nir下ros的产生。
[0045]
图5和图6为本发明实施例5中划痕实验及其定量分析结果。
[0046]
图7和图8本发明实施例6中螺旋聚异腈多肽光动力复合水凝胶分别对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄葡萄球菌、白念球菌的抗菌活性分析的平板实验及其定量分析。
[0047]
图9为本发明实施例7中l929细胞在复合水凝胶的存活率。
[0048]
图10和图11为本发明实施例8中在不同天数小鼠全层皮肤缺损模型伤口愈合图像以及定量分析。
具体实施方式
[0049]
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
[0050]
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0051]
下述实施例中使用的ettc参照文献near-infrared small molecule coupled with rigidness and flexibility for high-performance multimodal imaging-guidedphotodynamic andphotothermal synergistic therapy,xiao zhen li,fang fang,nanoscale horiz.2021,6,177-185.
[0052]
带叠氮的pic的参考文献synthetic extracellular matrices as a toolbox to tune stem cell secretome,kaizheng liu，acs appl.mater.interfaces 2020,12,
56723-56730.
[0053]
实施例1、ettc nps@cm的制备
[0054]
使用纳米沉淀法制作ettcnps
[0055]
1.0ml ettc溶液(1.0mg/ml，溶于thf)与2ml dspe-peg
2000
溶液(5.0mg/ml，溶于thf)，两者混和，超声30min。将超声的混合物迅速滴入27ml正在超声的超纯水，超声20min，过夜搅拌700-800rpm，然后透析，最后超滤浓缩。另外是l929细胞膜的提取，将细胞裂解液加入洗干净的细胞，置于冰上30min后超声破碎40min。4℃条件下3200g离心5min，取上清。4℃条件下15000g离心30min，取沉淀。得到的细胞膜沉淀分散在pbs中，用bca试剂盒测定细胞膜浓度。
[0056]
将l929的细胞膜均匀地包被在ettc nps表面
[0057]
首先取含有4.3μg蛋白量的细胞膜溶液与300μg的ettc nps混合均匀，在4℃的水浴中超声20分钟，最后得到的纳米粒子称为ettc nps@cm，其浓度为0.5μg/μl。
[0058]
图1显示了纳米颗粒的尺寸分布，检测到的颗粒尺寸分别约为98nm(ettc nps)和111nm(ettc nps@cm)，表明纳米粒子的成功制备和细胞膜的包覆。
[0059]
实施例2、pic-rgd的制备
[0060]
即grgds连接到pic水凝胶上
[0061]
将1mg grgds(抗黏附多肽)多肽溶于167μl硼酸缓冲液(ph＝8.4)中。将1.3mg dbco-peg4-nhs溶于217μl dmso中，充分溶解后加入到硼酸缓冲液中的多肽溶液中，并在室温下在搅拌板上搅拌24小时。另取15mg带叠氮的pic溶解在6ml乙腈中，然后加入合成的82μl的dbco-grgds，在室温下搅拌24小时。然后在在二异丙醚中沉淀，通过离心收集并风干24小时。
[0062]
实施例3、pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶流变测试以及光热光动力能力
[0063]
将ettc nps稀释至不同浓度，与pic水凝胶混合，将复合水凝胶用流变仪进行了流变测试，然后暴露于激光照射(808nm，0.8w cm-2
)5分钟。每30秒用温度计测定温度。将含有不同浓度ettc nps@cm的pic水凝胶加入到活化的dcfh-da溶液中。溶液在室温下避光储存3分钟，用0.4wnir照射0、1、3、5、7分钟。然后用488nm的激发波长测量dcf的荧光光谱(500-650nm)。
[0064]
图2通过流变学实验清楚地表明，凝胶有较低的成胶温度，约为18℃,且混合纳米粒子后水凝胶的成胶温度以及应力刚化效果并没有显著的改变，依然具有柔软特性，适宜细胞的3d培养。
[0065]
图3为制备的复合水凝胶在nir下温度随照射时间的变化。
[0066]
图4为本发明实施例3中制备的含15ug/ml ettc nps@cm的pic水凝胶在nir下ros的产生。
[0067]
由图3和图4可以看出复合水凝胶中的ettc纳米粒子仍然具有良好的光热和光动力性能。
[0068]
实施例4、
[0069]
混合因子(cf)的收集
[0070]
首先进行复合水凝胶的制备用来封装细胞的水凝胶
[0071]
首先将6mg干燥的pic-rgd聚合物通过紫外线灭菌20分钟，然后在3ml的4℃pbs中
充分溶解，24h后使聚合物溶液浓度为2mg/ml，再加入24μl浓度500μg/ml的ettc nps@cm，使纳米粒子的浓度为4μg/ml，充分混匀，放置于-20℃备用。通过胰蛋白酶消化收集l929细胞，离心收集，并重悬于少量无血清培养基中以增大细胞密度，使细胞浓度为2
×
106个/ml。将pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶溶液与细胞悬液各取1ml混合后，充分混匀，置于冰上待用。将混合液转移至96孔板，每孔100μl混合液，并在标准细胞培养条件(37℃，5％co2)下20分钟后凝胶化。形成胶凝后，轻轻将100μl无血清培养基(在37℃预热)添加到复合水凝胶上。最后放置在37℃，5％co2条件下培养。另外设置对照组将水凝胶溶液换成pbs,其余步骤相同，即在相同条件下细胞的2d培养，将3d培养的样品设置成两组，不光照组和光照组，光照组在培养的第2，3，4天对光照组进行0.3w近红外光照射,每孔3min30s。第5天收集所有组条件培养基于离心管，光照组含有活性因子的条件培养基称为nir(+)cf,对照组含有活性因子的条件培养基称为nir(-)cf,并将条件培养基用0.22μm的无菌滤膜过滤后放于-20℃冰箱保存备用。
[0072]
实施例5、螺旋聚异腈多肽光动力复合水凝胶体外伤口愈合性能检测
[0073]
用l929进行细胞迁移试验
[0074]
以300,000个细胞/ml的密度转移到24孔板中。一旦观察到汇合的单层(孵育24-48小时后)，用头在每个孔中划出一条等距的划痕，吸出生长培养基，用pbs洗涤。然后，将光照与不光照的cf分别添加到孔中。分别在0h,24h,48h,72h用光学显微镜拍摄损伤区域，通过使用image j软件进行分析，确定细胞未覆盖的区域。划痕愈合率＝(0小时的划痕面积-24h、48h或72h的划痕面积)/0h的划痕面积。
[0075]
图5和图6表明水凝胶中3d培养的l929经过低剂量光动力刺激后的条件培养基比没有光动力刺激的具有更好的促进细胞迁移效果，这是由于低剂量光动力刺激l929分泌更多的细胞因子如tbcb、bcl2l2等，它们加速了l929细胞的迁移。由于l929对皮肤愈合很重要，因此从上述结果推断，螺旋聚异腈多肽光动力复合水凝胶体可能促进伤口愈合。
[0076]
实施例6、螺旋聚异腈多肽光动力复合水凝胶的抗菌活性研究
[0077]
使用大肠杆菌和铜绿假单胞菌(革兰氏阴性)，金黄葡萄球菌(革兰氏阳性)和白念球菌(真菌)通过平板计数法评价水凝胶的抗菌活性。以大肠杆菌e.coli为例实验过程，通过pbs缓冲液将培养的e.coli清洗三遍，然后制成od600＝1.0的细菌悬浮液，稀释十倍后，使用纳米粒子浓度分别为0，5，7.5，10，15μg/ml的pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶溶液50μl与e.coli悬浮液50μl混合。在黑暗中孵育10分钟，然后在0.4w cm-2
的nir下孵育7分钟，用pbs缓冲液将nir光照射后的e.coli悬浮液稀释104倍，取出10μl菌液均匀地涂布在固体lb培养基上。然后培养18小时并计算菌落数。存活分数是用近红外光照处理的e.coli菌落数与不使用近红外光处理的大肠杆菌菌落数之比。
[0078]
图7和图8可以看出：不光照时，复合水凝胶对细菌没有杀伤能力，光照条件下，复合水凝胶有很好的抗菌效果，在纳米粒子为15μg/ml时，细菌存活率低于5％。
[0079]
实施例7、制备的复合水凝胶中不同浓度纳米粒子的细胞毒性用l929细胞存活率测定，评价复合水凝胶的生物相容性
[0080]
首先将l929细胞以2
×
105个/ml的密度与含有不同纳米粒子浓度的复合水凝胶等体积混合(4℃)，然后置于96孔板培养，每孔100μl，每组三个平行，待成胶后再加入100μl培养基。培养24h和48h后，每孔加入20μl的cck-8，2h后用酶标仪记录450nm处的吸光值。细胞
相对存活率(％)＝实验组测得的吸光值/对照组测得的吸光值
×
100％。
[0081]
图9表明，本发明提供的复合水凝胶敷料中纳米粒子浓度在0-16μg/ml对l929细胞没有明显的细胞毒性，具有良好的生物相容性。
[0082]
实施例8、通过全层皮肤缺损模型进行体内伤口愈合实验测试凝胶促进伤口愈合的能力
[0083]
将小鼠背部产生直径为5mm的全层皮肤圆形伤口并感染大肠杆菌，成功感染后，将所有小鼠随机分为6组，包括对照组，pic/nps组，pic/nps@cm(pic-rgd/ettc nps@cm),pic/nps@cm+nir(pic-rgd/ettc nps@cm+nir),pic/nps@cm/cf(pic-rgd/ettc nps@cm/cf)和pic/nps@cm/cf+nir(pic-rgd/ettc nps@cm/cf+nir)，纳米粒子浓度均为15μg/ml。在第0天，第3天，第5天，第7天，第14天，采集所有伤口区域图片。
[0084]
根据图10和图11所示，在第3天，各组均出现一定程度的伤口面积减小，而pic/nps@cm/cf+nir((pic-rgd/ettc nps@cm/cf+nir))水凝胶表现出最大的伤口收缩面积，表明其对伤口愈合的促进作用相对较高。在第13天，尽管所有组都表现出较小的伤口残留面积，但pic-rgd/nps@cm/cf+nir(pic-rgd/ettc nps@cm/cf+nir)水凝胶组在伤口收缩面积仍然比空白对照组大。因此，pic/nps@cm/cf+nir(pic-rgd/ettc nps@cm/cf+nir)水凝胶显示出比对照组更好的伤口愈合效果。
[0085]
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本技术欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本技术中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。

技术特征：

1.一种制备光动力复合水凝胶的方法，包括如下步骤：1)pic-rgd的制备使dbco-peg4-nhs与黏附多肽反应，得到dbco-grgds，将带叠氮的pic与dbco-grgds进行点击化学反应，得到pic-rgd；2)ettc nps@cm的制备先用纳米沉淀法制备ettc nps，然后在ettc nps表面包覆细胞膜，得到ettc nps@cm；3)pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶的制备将pic-rgd聚合物溶解在pbs中，与ettc nps@cm结合组装，得到pic-rgd/ettc nps@cm复合水凝胶；4)cf的制备将成纤维细胞封装在pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶中，3d培养，培养过程中进行近红外光照射，得到含有多种活性因子的培养基(cf)；5)pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶的制备将pic-rgd聚合物溶解在所述含有多种活性因子的培养基(cf)中，加入ettc nps@cm，组装，得到pic-rgd/ettc nps@cm/cf。2.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1)中，dbco-peg4-nhs与rgd、带叠氮的pic的配比依次为：1-2mg：0.5-1.5mg：10-20mg；所述反应的温度为室温，时间为18-28h；所述点击化学反应的温度为室温，时间为18-28h。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)中，纳米沉淀法制备ettc nps的操作为：将ettc溶液与dspe-peg
2000
溶液混合，超声，将超声的混合物迅速滴入正在超声的超纯水中，超声，搅拌过夜，透析，超滤浓缩得到ettc nps；所述细胞膜为l929成纤维细胞的细胞膜；或目标组织的细胞膜。在ettc nps表面包覆细胞膜的操作为：将细胞膜溶液与ettc nps混匀，超声，得到ettc nps@cm；其中，细胞膜与ettc nps的配比为：3-5μg蛋白量：200-500μg；所述超声的时间为20-40min；所述超声在4℃的水浴中进行。4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于：步骤3)中，pic-rgd聚合物与ettc nps@cm的配比为：5-6mg：10-12μg。5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤4)的操作为：将pic-rgd/ettc nps@cm水凝胶溶液与细胞悬液混匀，培养10-30min分钟后凝胶化，将无血清培养基添加到复合水凝胶上，3d培养4-5天，得到含有多种活性因子的培养基，在培养的第2，3，4天进行近红外光照射，所述近红外光照射的功率为0.1-5w；每次照射1-20min。6.由权利要求1-5中任一项所述方法制备得到的光动力复合水凝胶，即，pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶。7.权利要求6所述的pic-rgd/ettc nps@cm/cf水凝胶在制备用于伤口抗菌感染及刺激皮肤细胞增殖的产品中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述产品为伤口敷料、抗菌凝胶。

技术总结

本发明公开了一种光动力复合仿生水凝胶及其制备与应用。本发明用细胞膜将ETTC纳米粒子包裹起来，与PIC水凝胶相结合，用于小鼠皮肤成纤维细胞L929的三维培养，在低剂量光动力时，促使细胞产生更多的活性因子，这些活性因子可以促进伤口处血管内皮细胞和成纤维细胞的生长，进而促进伤口愈合。此外，ETTC纳米粒子在近红外光照射下产生的ROS和热量对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌以及真菌显示出高抗菌效率。小鼠实验表明，本发明设计的复合水凝胶能够有效促进细胞生长，并减轻伤口处细菌感染，从而加快伤口愈合速度，并且对器官没有明显的毒性，具有良好的生物相容性。具有良好的生物相容性。