一种含活性益生菌的阴道制剂及其制备方法与流程

1.本发明涉及阴道制剂技术领域，具体涉及一种含活性益生菌的阴道制剂及其制备方法。

背景技术：

[0002]“益生菌疗法”定义为使用有益的微生物或益生菌来恢复发生微生物生态失调的部位的健康微生物。女性生殖道寄居着数量巨大的不同种属的微生物，是人体非常重要的微生物区，其与女性健康有着密切的关系。但女性阴道较为脆弱，常常因为微生物组成受到扰动造成阴道炎症，可以将有益细菌或益生菌直接局部施用于阴道生态位以维持健康阴道微生物并帮助恢复不平衡的阴道微生物。
[0003]
目前国内外研究人员都把维持益生菌制剂的存活和稳定作为质量评价的标准。为了解决益生菌在使用上存活率低，不稳定的问题，利用微胶囊包埋技术保护益生菌已成为目前国内外研究的热点。但是仍然存在稳定性欠佳，抗逆性较差，肠道、黏膜定植性差，贮存过程中活性降低甚至失效等问题。此外，有些技术流程不适合大规模生产，严重影响了所包被益生菌的活性及其产品的产业化和应用。因此需要研发一种对维持益生菌制剂的存活和稳定有很大作用的制剂制备方法。

技术实现要素：

[0004]
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种对维持益生菌制剂的存活和稳定有很大作用的阴道制剂的制备方法。
[0005]
本发明的目的通过以下技术方案实现：一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：它采用多层包裹技术，具体包括以下步骤：步骤（1）将益生菌粉混合均匀得到复合益生菌粉末；步骤（2）加热熔融甘油明胶，倒入中号栓剂模具中，中间填入另一个小号栓剂实心模具，冷却，拆模得到有空洞内腔的隔离层，将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口；步骤（3）将低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖粉末混合均匀，再加入乳酸搅拌成湿润团块，将湿润团块均匀涂抹于隔离层外壁；步骤（4）将泊洛沙姆水浴条件下熔融，加入抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy混合搅拌均匀得到熔融混合物，将熔融混合物倒入大号栓剂模具中，将步骤（3）处理后的隔离层放入大号栓剂模具中，用熔融混合物填满模具，冷却，脱模，即得一种含活性益生菌阴道制剂。
[0006]
所述益生菌粉为质量比为（1-5）：（1-5）：（1-5）：（1-5）：（1-5）的鼠李糖乳杆菌、格氏乳杆菌、植物乳杆菌、詹氏乳杆菌和长双歧杆菌。
[0007]
所述低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸的质量比为（5-10）：（5-10）：（5-10）： 1。
[0008]
每400-500重量份的泊洛沙姆，加入1重量份的抗金黄葡萄球菌igy和1重量份的
抗白念珠菌igy。
[0009]
步骤（2）中将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口前控制加工湿度在15%以下。
[0010]
一种含活性益生菌的阴道制剂，它采用栓剂，该栓剂包括从外向内依次包裹的外层、益生元中间层、隔离层、益生菌内层。
[0011]
所述外层采用泊洛沙姆、抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy制成，所述益生元中间层采用低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸，所述隔离层采用甘油明胶，所述益生菌内层采用复合益生菌粉末。
[0012]
本发明所用益生菌粉均采用市售的益生菌粉。
[0013]
本发明甘油明胶中，水：明胶：甘油质量比为8：21：71。
[0014]
使用本发明后，外层的基质泊洛沙姆在体温下由固态变为液态，外层熔融后释放基质泊洛沙姆中的抗白念珠菌igy、抗金黄葡萄球菌igy，能直接与阴道中已感染的致病菌结合，清除致病菌；随后益生元中间层包裹的益生元被释放，在湿润环境下充分分布于阴道褶皱处，被原生益生菌分解利用，可作为底物被阴道正常菌利用，能够选择性地刺激阴道内一种或几种有益的细菌生长的繁殖，抑制有害细菌生长的菌种，对宿主健康具有有益作用；最后隔离层的甘油明胶隔离层具有弹性，不易折断，在体温时不熔融，但可缓慢溶于分泌液中，甘油明胶层缓慢溶蚀过程中少量释放益生菌内层中被包裹复合益生菌粉末，具有缓释效应，缓慢释放活菌，减少菌骤增现象。复合益生菌可分解阴道黏膜上皮内的糖原产生乳酸，维持阴道ph为3.8～4.4，这种酸性环境可有效的抑制其他致病菌（如白念珠菌、金黄葡萄球菌）的生长繁殖，并且益生菌可产生有机酸、过氧化氢和细菌素等物质直接抑制致病菌的生长，或者通过益生菌细胞壁的磷壁酸和阴道黏膜上皮结合，粘附并占据阴道黏膜表面，形成生物菌膜，并且可分泌免疫球蛋白a，抑制致病菌粘附，起到占位性保护作用。
[0015]
本发明的有益效果：本发明基于健康妇女阴道内正常微生物菌落与宿主、环境之间相互制约、相互协调的原理，通过外源性使用益生元和益生菌成份，促进阴道微生态恢复，本发明的制备方法采用多层包裹技术，将益生元与益生菌分区贮存，防止产品贮存过程中后发酵现象导致益生元被消耗的问题，又使得益生菌能够在常温下贮存而不失活性。本发明用于女性阴道感染，减少抗生素等药物的使用，促进女性阴道微生态平衡恢复，增加阴道自净功能，可用于细菌性、滴虫性阴道炎。
[0016]
附图说明：图1为本发明含活性益生菌的阴道制剂的结构示意图。
[0017]1‑‑‑
外层、2
‑‑‑
益生元中间层、3
‑‑‑
隔离层、4
‑‑‑
益生菌内层。
具体实施方式
[0018]
结合以下实施例对本发明作进一步描述。
[0019]
实施例1一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，它采用多层包裹技术，具体包括以下步骤：
步骤（1）将益生菌粉混合均匀得到复合益生菌粉末；步骤（2）加热熔融甘油明胶，倒入中号栓剂模具中，中间填入另一个小号栓剂实心模具，冷却，拆模得到有空洞内腔的隔离层，将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口；步骤（3）将低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖粉末混合均匀，再加入乳酸搅拌成湿润团块，将湿润团块均匀涂抹于隔离层外壁；步骤（4）将泊洛沙姆水浴条件下熔融，加入抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy混合搅拌均匀得到熔融混合物，将熔融混合物倒入大号栓剂模具中，将步骤（3）处理后的隔离层放入大号栓剂模具中，用熔融混合物填满模具，冷却，脱模，即得一种含活性益生菌阴道制剂。
[0020]
步骤（2）中将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口前控制加工湿度在15%以下。
[0021]
上述含活性益生菌的阴道制剂，它采用栓剂，该栓剂包括从外向内依次包裹的外层1、益生元中间层2、隔离层3、益生菌内层4，所述外层采用泊洛沙姆、抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy制成，所述益生元中间层采用低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸，所述隔离层采用甘油明胶，所述益生菌内层采用复合益生菌粉末。本实施例各种物质的用量如下：。
[0022]
实施例2一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，它采用多层包裹技术，具体包括以下步骤：步骤（1）将益生菌粉混合均匀得到复合益生菌粉末；步骤（2）加热熔融甘油明胶，倒入中号栓剂模具中，中间填入另一个小号栓剂实心模具，冷却，拆模得到有空洞内腔的隔离层，将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口；步骤（3）将低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖粉末混合均匀，再加入乳酸搅拌成湿润团块，将湿润团块均匀涂抹于隔离层外壁；步骤（4）将泊洛沙姆水浴条件下熔融，加入抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy混合搅拌均匀得到熔融混合物，将熔融混合物倒入大号栓剂模具中，将步骤（3）处理后的隔离层放入大号栓剂模具中，用熔融混合物填满模具，冷却，脱模，即得一种含活性益生
菌阴道制剂。
[0023]
步骤（2）中将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口前控制加工湿度在15%以下。
[0024]
上述含活性益生菌的阴道制剂，它采用栓剂，该栓剂包括从外向内依次包裹的外层1、益生元中间层2、隔离层3、益生菌内层4，所述外层采用泊洛沙姆、抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy制成，所述益生元中间层采用低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸，所述隔离层采用甘油明胶，所述益生菌内层采用复合益生菌粉末。本实施例各种物质的用量如下：。
[0025]
实施例3一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，它采用多层包裹技术，具体包括以下步骤：步骤（1）将益生菌粉混合均匀得到复合益生菌粉末；步骤（2）加热熔融甘油明胶，倒入中号栓剂模具中，中间填入另一个小号栓剂实心模具，冷却，拆模得到有空洞内腔的隔离层，将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口；步骤（3）将低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖粉末混合均匀，再加入乳酸搅拌成湿润团块，将湿润团块均匀涂抹于隔离层外壁；步骤（4）将泊洛沙姆水浴条件下熔融，加入抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy混合搅拌均匀得到熔融混合物，将熔融混合物倒入大号栓剂模具中，将步骤（3）处理后的隔离层放入大号栓剂模具中，用熔融混合物填满模具，冷却，脱模，即得一种含活性益生菌阴道制剂。
[0026]
步骤（2）中将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口前控制加工湿度在15%以下。
[0027]
上述含活性益生菌的阴道制剂，它采用栓剂，该栓剂包括从外向内依次包裹的外层1、益生元中间层2、隔离层3、益生菌内层4，所述外层采用泊洛沙姆、抗金黄葡萄球菌
igy、抗白念珠菌igy制成，所述益生元中间层采用低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸，所述隔离层采用甘油明胶，所述益生菌内层采用复合益生菌粉末。本实施例各种物质的用量如下：。将发明阴道制剂的实验数据具体如下：（1）稳定性考察：-20℃耐寒、35℃耐热实验24h恢复至室温后，无明显变化，各层完整无破裂现象。
[0028]
（2）特定ph范围内（3.5～4.5）益生菌活性测试：取稳定性考察结束后的产品，将产品置于5ml ph 3.5～4.5的磷酸盐缓冲液中，37℃水浴加热，使栓剂熔融，搅拌混合溶液，取或者溶液作微生物限度检测（活菌菌落总数检测），活菌菌落总数测试值如下：。
[0029] （3）临床疗效观察：1.1资料将确诊为细菌性、霉菌性阴道炎患者110例随机进行分组，对照组、组各55例。
[0030]
纳入标准：（1）符合《妇产科学》中关于细菌性、霉菌性阴道炎诊断标准并经实验室检查确诊者；（2）既往无阴道炎病史者；（3）入组前2周未使用过抗生素等可能影响研究结果的药物者；（4）一般资料与各项检查资料齐全者。
[0031]
排除标准：（1）存在其他类型阴道炎者；（2）合并妇科器质性病变者；（3）对相关药物存在过敏反应者；（4）未配合完成研究者。
[0032]
对照组（n=55）：年龄为21-55岁，中位年龄（39.92
±
2.72）岁。病程为11-74d，病程均值为（41.35
±
4.47）d。
[0033]
组（n=55）：年龄为22-56岁，中位年龄（40.10
±
2.80）岁。病程为12-75d，病程均值为（41.42
±
4.60）d。
[0034]
组间一般资料具有可比性（p》0.05）。
[0035]
方法对照组：乳酸菌阴道胶囊。患者在每日睡前清洗外阴阴道，然后将乳杆菌活菌胶囊（定君生，生产厂家：内蒙古双奇药业股份有限公司，批准文号：国药准字s20030005，）置于阴道后穹隆处，一次一粒，一日一次，连用7天为一疗程。
[0036]
组：使用本发明制备的栓剂。将栓剂缓慢塞入阴道中。每日1次。
[0037]
评价指标及判定标准（1）在两组患者就诊当天（前）、停药1个月后评估其阴道微生态环境的变化情况，评分标准：
①
阴道ph值：0分、1分、2分依次对应＜3.8、3.8-4.4、＞4.4；
②
阴道清洁度：0-3分依次对应
ⅰ‑ⅳ
度；
③
乳酸杆菌数量评分：0-3分分别对应＞30、6-30、1-5、＜1菌体数；
④
阴道菌密集度：0-3分对应
ⅰ‑ⅳ
级；
⑤
阴道乙酰氨基葡萄糖苷酶（nag）：阴性——0分，弱阳性——1分，阳性——2分。
[0038]
（2）对两组患者的临床症状改善情况进行观察记录。
[0039]
（3）评估后两组的临床疗效，标准：
①
治愈：疾病相关症状体征消失，实验室检查结果正常，随访3个月无复发；
②
显效：临床症状体征显著好转，阴道分泌物检查结果基本正常；
③
有效：临床症状体征稍有缓解，阴道分泌物检查结果存在一定异常；
④
无效：以上标准均未达到。（55例-无效例数）/55例
×
100%=总有效率。
[0040]
（4）统计期间两组患者发生的不良反应情况。
[0041]
结果2.1阴道微生态环境评分两组患者停药1个月后的阴道ph值评分与阴道nag评分均低于前（p＜0.05），但组间比较停药1个月后的分值差异不大（p＞0.05）；停药1个月后，两组的其他三项指标分值均较前下降（p＜0.05），且组间同时间点的各项分值比较有较大区别（p＜0.05）。
[0042]
见表1所示：。
[0043]
临床症状改善情况组的临床症状改善情况优于对照组（p＜0.05）。
[0044]
见表2所示：
。
[0045]
临床疗效对照组和组之间比较临床总有效率区别较大（p＜0.05）。
[0046]
如表3所示：2.4不良反应发生情况两组患者均未出现明显不良反应。
[0047]
最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

技术特征：

1.一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：它采用多层包裹技术，具体包括以下步骤：步骤（1）将益生菌粉混合均匀得到复合益生菌粉末；步骤（2）加热熔融甘油明胶，倒入中号栓剂模具中，中间填入另一个小号栓剂实心模具，冷却，拆模得到有空洞内腔的隔离层，将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口；步骤（3）将低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖粉末混合均匀，再加入乳酸搅拌成湿润团块，将湿润团块均匀涂抹于隔离层外壁；步骤（4）将泊洛沙姆水浴条件下熔融，加入抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy混合搅拌均匀得到熔融混合物，将熔融混合物倒入大号栓剂模具中，将步骤（3）处理后的隔离层放入大号栓剂模具中，用熔融混合物填满模具，冷却，脱模，即得一种含活性益生菌阴道制剂。2.根据权利要求1所述的一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：所述益生菌粉为质量比为（1-5）：（1-5）：（1-5）：（1-5）：（1-5）的鼠李糖乳杆菌、格氏乳杆菌、植物乳杆菌、詹氏乳杆菌和长双歧杆菌。3.根据权利要求1所述的一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：所述低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸的质量比为（5-10）：（5-10）：（5-10）： 1。4.根据权利要求1所述的一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：每400-450重量份的泊洛沙姆，加入1重量份的抗金黄葡萄球菌igy和1重量份的抗白念珠菌igy。5.根据权利要求1所述的一种含活性益生菌的阴道制剂的制备工艺，其特征在于：步骤（2）中将复合益生菌粉末倒入内腔，用甘油明胶封口前控制加工湿度在15%以下。6.如权利要求1所述制备工艺制备的一种含活性益生菌的阴道制剂，其特征在于：它采用栓剂，该栓剂包括从外向内依次包裹的外层、益生元中间层、隔离层、益生菌内层。7.根据权利要求6所述的一种含活性益生菌阴道制剂，其特征在于：所述外层采用泊洛沙姆、抗金黄葡萄球菌igy、抗白念珠菌igy制成，所述益生元中间层采用低聚异麦芽糖、海藻糖、低聚半乳糖、乳酸，所述隔离层采用甘油明胶，所述益生菌内层采用复合益生菌粉末。

技术总结

本发明涉及阴道制剂技术领域，具体涉及一种含活性益生菌的阴道制剂及其制备方法，本发明通过外源性使用益生元和益生菌成份，促进阴道微生态恢复，本发明的制备方法采用多层包裹技术，将益生元与益生菌分区贮存，防止产品贮存过程中后发酵现象导致益生元被消耗的问题，又使得益生菌能够在常温下贮存而不失活性。本发明用于女性阴道感染，减少抗生素等药物的使用，促进女性阴道微生态平衡恢复，增加阴道自净功能，可用于细菌性、滴虫性阴道炎。滴虫性阴道炎。滴虫性阴道炎。