发明人:龙丽娟,杨键,肖运柱,田新朋,李洁,张偲
申请号:CN201610705142.7
申请日:20160822
公开号:CN106318928A
公开日:
20170111
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种二肽酶突变体及其编码基因和应用。本发明以一种具有水解有机磷化合物混杂活性的海洋细菌二肽酶OPAA4301(其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示)为蛋白质工程改造起点,运用定点饱和突变和组合突变技术改造其底物结合相关位点,获得有机磷化合物水解活性提高的二肽酶突变体;其为二肽酶突变体D45W、H226G、Y292F/L366F、D45W/H226G、 D45W/Y292F/L366F、D45W/H226G/Y292F/L366F、H343I、L225Y/H226L或
L225Y/H226L/H343I。水解对氧磷最优二肽酶突变体D45W/H226G的催化速率常数相较于野生型二肽酶OPAA4301提高了30.68倍;水解甲基对硫磷最优二肽酶突变体L225Y/H226L/H343I的催化速率常数相较于野生型二肽酶OPAA4301提高了8837.71倍。本发明的二肽酶突变体可高效水解对氧磷、甲基对硫磷等常见有机磷化合物污染物,在有机磷化合物污染修复领域具有良好应用前景。
申请人:中国科学院南海海洋研究所
地址:510301 广东省广州市新港西路164号
国籍:CN
代理机构:广州科粤专利商标代理有限公司
代理人:刘明星