(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010867293.9
(22)申请日 2020.08.26
(71)申请人 夏文杰
地址 437600 湖北省咸宁市通山县通羊镇
马槽桥社区马肚小区189号
(72)发明人 夏文杰
(74)专利代理机构 连云港联创专利代理事务所
(特殊普通合伙) 32330
代理人 刘刚
(51)Int.Cl.
C07H 15/04(2006.01)
C07H 1/06(2006.01)
(54)发明名称一种鼠李糖脂的提取纯化方法(57)摘要本发明公开了一种鼠李糖脂的提取纯化方法，属于生物提取技术领域。它包括以下步骤：(1)絮凝沉淀固液分离：调节鼠李糖脂发酵液的pH值，随后进行絮凝沉淀处理，最后过滤以进行固液分离，获取分离液；(2)脱：在步骤(1)固液分离后的分离液中加入 活性炭，获取脱液，最后进行脱处理，获取溶液A；(3)澄清：采用第一滤膜将步骤(2)脱后的溶液A进行澄清处理，获取溶液B；(4)浓缩脱盐：采用第二滤膜将步骤(3)微滤澄清后的溶液B进行浓缩脱盐处理，获取溶液C；(5)蒸发浓缩：将步骤(4)浓缩脱盐后的溶液C进行蒸发浓缩。与现有技术相比，可在较低成本下连续大规模高效地分离纯化鼠李糖脂，并获得
高品质鼠李糖脂产品。权利要求书2页 说明书8页CN 112279879 A 2021.01.29
C N 112279879
A
1.一种鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)絮凝沉淀固液分离：鼠李糖脂发酵生产结束后，调节鼠李糖脂发酵液的pH值，并添加絮凝剂进行搅拌混合均匀，随后进行絮凝沉淀处理，最后过滤以进行固液分离，获取分离液；
(2)脱：在步骤(1)固液分离后的分离液中加入活性炭，获取脱液，并控制脱液的温度和pH值，最后进行脱处理，获取溶液A；
(3)澄清：采用第一滤膜将步骤(2)脱后的溶液A进行澄清处理，获取溶液B；
(4)浓缩脱盐：采用第二滤膜将步骤(3)微滤澄清后的溶液B进行浓缩脱盐处理，获取溶液C；
(5)蒸发浓缩：将步骤(4)浓缩脱盐后的溶液C进行蒸发浓缩，即得成品。
2.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(1)中所述的鼠李糖脂发酵液的pH值的调节范围为6.0-7.5。
3.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(1)中所述的絮凝剂为硅藻土、钠基膨润土、部分水解聚丙烯酰胺、聚合硫酸铝、聚合硫酸铁中的两种或三种以上的混合物组成；
步骤(1)中所述的絮凝剂的浓度范围为100pm-1000ppm；
步骤(1)中所述的絮凝剂的絮凝沉淀处理的温度范围为35℃-45℃；
步骤(1)中所述的絮凝剂的絮凝沉淀处理的时间范围为1h-4h。
4.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(1)中所述的过滤的设备为板框压滤机，其中板框压滤机的孔径范围为200目-500目。
5.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(2)中所述的活性炭与所述的步骤(1)固液分离后的分离液的重量体积比范围为0.5％-1.2％；
步骤(2)中所述的活性炭为活性炭302、活性炭303、活性炭305、活性炭311、活性炭314中的一种。
6.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(2)中所述的脱液的温度范围为78℃-90℃；
步骤(2)中所述的脱液的pH值的调节范围为4.5-5.5；
步骤(2)中所述的脱处理的时间范围为1h-2h。
7.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(3)中所述的第一滤膜为陶瓷滤膜；
步骤(3)中所述的第一滤膜的孔径范围为0.05μm-0.2μm。
8.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(3)中所述的澄清处理的温度范围为25℃-55℃；
步骤(3)中所述的澄清处理的pH值的调节范围为4.5-5.5。
9.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，
步骤(4)中所述的第二滤膜为纳滤膜；
步骤(4)中所述的第二滤膜的截留分子量范围为300Da-600Da；
步骤(4)中所述的浓缩脱盐处理的温度范围为25℃-40℃。
10.根据权利要求1所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法，其特征在于，步骤(5)中蒸发浓缩的真空度范围为：-0.02MPa～-0.06MPa；
步骤(5)中蒸发浓缩的温度范围为80℃-100℃。
一种鼠李糖脂的提取纯化方法
技术领域
[0001]本发明属于生物提取技术领域，具体地说，涉及一种鼠李糖脂的提取纯化方法。
背景技术
[0002]生物表面活性剂是一种由微生物合成的、结构多样的表面活性物质，包括糖脂、脂肽、脂蛋白、磷脂以及中性类脂衍生物等。目前，市场上绝大部分表面活性剂都是由化学合成的，然而，使用化学表面活性剂会产生严重的环境污染问题，特别是在用量特别巨大的石油化工和日化领域，长期、大量的应用化学表面活性剂造成了严重的水资源和土壤污染。生物表面活性剂毒性低、可生物降解，生物相容性好。因此，近年来，环境友好的生物表面活性剂的研究、生产和使用日益受到人们的广泛关注。随着人们环保意识的逐年提高，生物表面活性剂的市场需求将迅速扩大。
[0003]鼠李糖脂是由假单胞菌生物合成的一种生物表面活性剂，可以显著降低体系的界/表面张力，且具有热稳定性、化学稳定性、低毒性和生物可降解性，是一种典型的绿产品，可被广泛应用于石油、日化、环境、食品、医药以及农业等诸多领域。然而，目前对于鼠李糖脂来说，普遍存在产量低、生产周期长、生产规模小和分离纯化成本高等问题，特别是日化、食品及医药等领域需要纯化高品质鼠李糖脂产品，但由于鼠李糖脂自身的理化特性使其分离纯化成本居高不下，导致其使用成本高，限制了其在工业规模上的广泛应用。因此，急需开发高效、低成本的鼠李糖脂工业分离纯化技术，以适应当前市场发展的需求。
发明内容
[0004]1、要解决的问题
[0005]针对上述现有技术中存在的问题，本发明提供一种鼠李糖脂的提取纯化方法，与现有技术相比，可在较低成本下连续大规模高效地分离纯化鼠李糖脂，并获得高品质鼠李糖脂产品。
[0006]2、技术方案
[0007]为解决上述问题，本发明提供的技术方案为：
[0008]一种鼠李糖脂的提取纯化的方法，包括以下步骤：
[0009](1)絮凝沉淀固液分离：采用文献(CNKI,Springerlink,Sciencedirect,RSC,ACS 等数据库)报道，利用假单胞菌按照常规工艺(例如用植物油为碳源等)进行鼠李糖脂发酵生产结束后，调节鼠李糖脂发酵液的pH值，并添加絮凝剂进行搅拌混合均匀，随后进行絮凝沉淀处理，最后过滤以进行固液分离，获取分离液；
[0010](2)脱：在步骤(1)固液分离后的分离液中加入活性炭，获取脱液，并控制脱液的温度和pH值，最后进行脱处理，获取溶液A；
[0011](3)澄清：采用第一滤膜将步骤(2)脱后的溶液A进行澄清处理，获取溶液B；[0012](4)浓缩脱盐：采用第二滤膜将步骤(3)微滤澄清后的溶液B进行浓缩脱盐处理，获取溶液C；
[0013](5)蒸发浓缩：将步骤(4)浓缩脱盐后的溶液C进行蒸发浓缩，即得成品。[0014]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0015]步骤(1)中所述的鼠李糖脂发酵液的pH值的调节范围为6.0-7.5。
[0016]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0017]步骤(1)中所述的絮凝剂为硅藻土、钠基膨润土、部分水解聚丙烯酰胺(其CAS号为 9003-05-8)、聚合硫酸铝、聚合硫酸铁中的两种或三种以上的混合物组成；
[0018]步骤(1)中所述的絮凝剂的浓度范围为100pm-1000ppm；
[0019]步骤(1)中所述的絮凝剂的絮凝沉淀处理的温度范围为35℃-45℃；
[0020]步骤(1)中所述的絮凝剂的絮凝沉淀处理的时间范围为1h-4h。
[0021]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0022]步骤(1)中所述的过滤的设备为板框压滤机，其中板框压滤机的孔径范围为200目-500 目。
[0023]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0024]步骤(2)中所述的活性炭与所述的步骤(1)固液分离后的分离液的重量体积比范围为 0.5％-1.2％；
[0025]步骤(2)中所述的活性炭为活性炭302、活性炭303、活性炭305、活性炭311、活性炭 314中的一种。
[0026]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0027]步骤(2)中所述的脱液的温度范围为78℃-90℃；
[0028]步骤(2)中所述的脱液的pH值的调节范围为4.5-5.5；
[0029]步骤(2)中所述的脱处理的时间范围为1h-2h。
[0030]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0031]步骤(3)中所述的第一滤膜为陶瓷滤膜；
[0032]步骤(3)中所述的第一滤膜的孔径范围为0.05μm-0.2μm。
[0033]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0034]步骤(3)中所述的澄清处理的温度范围为25℃-55℃；
[0035]步骤(3)中所述的澄清处理的pH值的调节范围为4.5-5.5。
[0036]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0037]步骤(4)中所述的第二滤膜为纳滤膜；
[0038]步骤(4)中所述的第二滤膜的截留分子量范围为300Da-600Da；
[0039]步骤(4)中所述的浓缩脱盐处理的温度范围为25℃-40℃。
[0040]上述所述的鼠李糖脂的提取纯化的方法中，
[0041]步骤(5)中蒸发浓缩的真空度范围为；-0.02MPa～-0.06MPa；
[0042]步骤(5)中蒸发浓缩的温度范围为80℃-100℃。
[0043]3、有益效果
[0044]相比于现有技术，本发明的有益效果为：
[0045]本发明可在较低成本下连续大规模高效地分离纯化鼠李糖脂，并获得高品质鼠李糖脂产品，同时
方法简单、成本低、原料来源广泛、无复杂设备、不引入其他杂质、不使用有毒有害溶剂。具体来说，通过絮凝沉淀固液分离、脱、澄清、浓缩脱盐及蒸发浓缩五个步骤
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