第７卷 第６期２０１６年１１月器官移植
ＯｒｇａｎＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎＶｏｌ ７ Ｎｏ ６
Ｎｏｖ ２０１６
·综述·
ＤＯＩ：１０ ３９６９／ｊ ｉｓｓｎ １６７４ ７４４５ ２０１６ ０６ ０１４
基金项目：广东省自然科学基金（２０１４Ａ０２０２１２１５９）作者单位：５１０６３０ 广州，中山大学附属第三医院肝移植科
通讯作者：张剑，Ｅ
ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｊｉａｎ６２９＠ｓｉｎａ ｃｏｍ间充质干细胞免疫调节作用的研究进展 陈强星 综述 张剑 审校
【摘要】 间充质干细胞（ＭＳＣ）是一类具有自我更新、增殖和多向分化潜能的干细胞。研究表明，ＭＳＣ具有低免疫源性，并且可以通过与细胞间直接接触或分泌细胞因子等方式发挥免疫调节作
用。当前，ＭＳＣ在免疫相关性疾病中的研究是一个热点。为了更好了解ＭＳＣ免疫方面的特性，本文就ＭＳＣ的生物学特性和免疫调节作用作一综述。
【关键词】 间充质干细胞；免疫调节；固有免疫系统；适应性免疫系统
【中图分类号】Ｒ６１７，Ｒ３９２ ４ 【文献标志码】Ａ 【文章编号】１６７４ ７４４５（２０１６）０６ ００１４ ０６
间充质干细胞（ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＭＳＣ）是一类具有自我更新和多向分化潜能的干细胞，可以分化为中胚层起源的多种组织细胞，如成骨细胞、骨细胞、脂肪细胞等。一定条件下，ＭＳＣ也可跨胚层分化为神经细胞、胰岛细胞、肝细胞等。Ｍ
ＳＣ最初在骨髓中分离得到，随后研究者们还从脐带、脂肪、皮肤、牙龈等组织中分离得到。体内和体外实验均证实ＭＳＣ具有免疫调节功能，这一特性为临床应用提供了依据。然而，ＭＳＣ发挥免疫调节功能的机制仍有待进一步研究。本文就ＭＳＣ的生物学特性及免疫调节功能作一综述。
１ 间充质干细胞的生物学特性
１ １ 间充质干细胞的鉴别
ＭＳＣ是一种间充质来源、非造血的干细胞，具有自我更新的能力。因为ＭＳＣ表达一些干性基因，如转录因子ＮＡＮＯＧ和Ｓｏｘ２，ＭＳＣ具有了类似胚胎干细胞的自我更新的能力。国际细胞协会将ＭＳＣ定义为多能干细胞，是因为ＭＳＣ满足以下５个特点：（１）在标准培养的条件下具备塑料黏附特性；（２）成纤维细胞样形态；（３）体外培养具有分化为３种主要细胞的潜能，包括骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞；（ ４）缺乏血细胞标志ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１４、ＣＤ３４、ＣＤ１９、ＣＤ７９ａ、ＣＤ４５、人类白细胞抗原（ＨＬＡ） ＤＲ和
ＣＤ３１的表达［１］
；（５）表达ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ５４、ＣＤ７３、ＣＤ９０、ＣＤ１０５、ＣＤ１６６和Ｓｔｒｏ １［２］。此外，ＭＳＣ被证实能
够分泌大量的生长因子、细胞因子和趋化因子，这些分泌的可溶性蛋白在ＭＳＣ的迁移、增殖、免疫调节、促进血管
再生、细胞凋亡和造血干细胞（ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）的分化和移植上发挥了重要的作用。１ ２ 间充质干细胞表达的免疫调节分子
适当的免疫应答或者诱导免疫抑制都需要细胞和细胞内部表达大量的分子。比如，黏附分子和主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）参与了免疫细胞的相互作用，对于Ｔ细胞而言，共刺激分子和Ｆａｓ受体／配体（ＦａｓＲ／ＦａｓＬ）的相互作用对于Ｔ细胞的活化和功能的发挥非常重要。ＭＳＣ低表达ＭＨＣ Ｉ类分子，表达共抑制分子Ｂ７ Ｈ１和Ｂ７ Ｈ４，不表达ＭＨＣⅡ类分子、ＦａｓＬ和共刺激分子Ｂ７ １、Ｂ７ ２、ＣＤ４０或者ＣＤ４０Ｌ。ＭＳＣ表达细胞间黏附分子（ＩＣＡＭ）１，一旦 内皮细胞表达ＩＣＡＭ受体，ＭＳＣ就能够迁移到损伤组织［３］
。
ＭＳＣ还表达Ｔｏｌｌ样受体（Ｔｏｌｌｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＬＲ） ２、ＴＬＲ ３、ＴＬＲ ４、ＴＬＲ ７和ＴＬＲ ９，ＴＬＲ一定程度上影响了ＭＳＣ免疫调节能力。最近的研究表明，ＭＳＣ被ＴＬＲ活化，影响了ＭＳＣ的增殖、分化、迁移、生存和免疫抑制能
力［
４］
。ＭＳＣ的免疫抑制机制仍未完全清楚。当前研究表明，细胞和细胞间直接接触和分泌可溶性免疫调节因子是ＭＳＣ发挥免疫调节作用的两种主要方式。ＭＳＣ分泌的可溶
性免疫调节因子和生物功能见表１［５ １６］
。
２ 间充质干细胞的免疫调节功能
体内和体外实验证实ＭＳＣ在适应性免疫系统和固有免疫系统中均具有免疫调节功能。研究证实，ＭＳＣ对专职抗原提呈细胞［Ｂ细胞、树突状细胞（ＤＣ）、巨噬细胞（Ｍφ
）］、自然杀伤（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒ，ＮＫ）细胞、Ｔ细胞、调
第６期 陈强星等 间充质干细胞免疫调节作用的研究进展
表１ ＭＳＣ分泌的可溶性免疫调节因子及其生物功能
Ｔａｂｌｅ１ ＳｏｌｕｂｌｅｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒｓａｎｄｉｔｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｓｅｃｒｅｔｅｄｂｙＭＳＣ
ＮＯ抑制Ｔ细胞增殖（体外）
ｓＨＬＡ Ｇ抑制ＰＢＭＣ反应［８］
ＩＬ ６抑制Ｔ细胞增殖（体外）［８］，抑制ＤＣ分化（体外）［８］
ＴＳＧ ６调节Ｍφ（体内、体外）［１１］，抑制炎症反应（体内）［１２］，抑制ＤＣ的成熟和功能（体外）［１３］ＩＬ １ＲＡ诱导Ｍφ向Ｍ
２
型Ｍφ分化，抑制ＣＤ４＋Ｔ细胞，抑制Ｂ细胞分化（体外）［１５］
ＴＧＦ β促进Ｔｒｅｇ的产生（体外、体内）［７］，抑制Ｔ细胞的增殖（体外）［８］，抑制ＮＫ细胞的活化和功能（体外）［９］
ＨＧＦ抑制Ｔ细胞增殖（体外）［８］
ＬＩＦ促进Ｔ细胞增殖（体外）［８］
ＩＬ １０抑制Ｔ细胞增殖（体外）［８］，抑制Ｔｈ１７细胞分化（体外）［１０］
ＰＧＥ
２抑制Ｔ细胞增殖（体外）［８］，诱导Ｔｒｅｇ生成（体外）［１４］，抑制ＮＫ细胞功能（体外）［６］，诱导Ｍφ向Ｍ
２
型Ｍφ分化（体内、体外）［８］，抑制ＤＣ成熟及其功能（体外）
ＨＯ １抑制Ｔ细胞增殖（体内、体外），诱导Ｔｒｅｇ生成（体外）［１６］
注：Ｍφ为巨噬细胞；ＮＫ细胞为自然杀伤细胞；Ｔｒｅｇ为调节性Ｔ细胞；ＤＣ为树突状细胞；Ｔｈ１７细胞为辅助性Ｔ细胞１７；ＩＤＯ为吲哚胺２，３ 双加氧酶；ＴＧＦ β为转化生长因子 β；ＮＯ为一氧化氮；ＨＧＦ为肝细胞生长因子；ｓＨＬＡ Ｇ为人可溶性白细胞抗原Ｇ；ＰＢＭＣ为外周血单个核细胞；ＬＩＦ为白血病抑制因子；ＩＬ ６为白细胞介素 ６；ＩＬ １０为白细胞介素 １０；
ＴＳＧ ６为肿瘤坏死因子α刺激基因 ６；ＰＧＥ
２为前列腺素Ｅ
２
；ＩＬ １ＲＡ为白细胞介素１受体拮抗剂；ＨＯ １为血红素加氧酶 １；
体外指体外实验，体内指体内实验
节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ）等均有调节作用。
２ １ 间充质干细胞在固有免疫系统中的调节作用
２ １ １ 间充质干细胞和单核吞噬细胞系统 单核吞噬细胞系统包括循环于血液中的单核细胞和组织器官中的Ｍφ，他们具有很强的吞噬能力，是固有免疫系统中重要的组成部分，同时又是专职抗原提呈细胞中的一类重要细胞，在特异性免疫应答的诱导和调节中起着关键的作用。
骨髓干细胞来源的前单核细胞在血液中分化为成熟的单核细胞，成熟单核细胞迁移到特定组织后，可以进一步分化为Ｍφ和ＤＣ。依据ＣＤ１４和ＣＤ１６的表达情况，将单核细胞分为经典的单核细胞（ＣＤ１４＋＋ＣＤ１６－）、ＣＤ１４＋＋ＣＤ１６＋单核细胞和ＣＤ１４＋ＣＤ１６＋促炎症单核细胞等３种类型。当检测到病原体后，人或鼠来源的骨髓间充质干细胞（ＢＭ ＭＳＣ）能够促进单核细胞的迁移，并能通过分泌趋化因子配体（ＣＣＬ ２、ＣＣＬ ３和ＣＣＬ １２）促使单核细胞和Ｍφ向炎症组织聚集从而促进伤口修复。
单核细胞进入炎症环境后，分化为Ｍ
１
型Ｍφ并通过分泌干扰素（ＩＦＮ） γ和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ） α起着促进
炎症作用，或者分化为Ｍ
２
型Ｍφ并分泌白细胞介素
（ＩＬ） １０和转化生长因子（ＴＧＦ） β
１起着抗炎作用。Ｍ
１
型
Ｍφ为经典活化型，在辅助性Ｔ（Ｔｈｅｌｐｅｒ，Ｔｈ）１细胞型免疫应答中作为诱导细胞和效应细胞参与杀伤病原体和肿瘤细胞，起着促炎作用。Ｍ
２
型Ｍφ为可选择活化型，介导
纤维化组织修复及适应性免疫应答，起着抗炎作用。研究表明ＭＳＣ与单核细胞的迁移、分化相关。体外实验表明，将ＭＳＣ和单核细胞共培养，可以检测到ＣＤ２０６和ＣＤ１６３高表达，而共刺激分子ＣＤ８６低表达，同时ＩＬ １０、ＩＬ ６分泌呈高水平，ＩＬ １２和ＴＮＦ α呈低水平，暗示了ＭＳＣ能够
促进单核细胞向Ｍ
２
型Ｍφ分化［１７］。进一步研究，人们发现ＭＳＣ可以直接通过细胞接触的方式或者分泌前列腺素
（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ，ＰＧ）Ｅ
２
和吲哚胺２，３ 双加氧酶
（ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ２，３ ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ＩＤＯ）诱导单核细胞向Ｍ
２
型
Ｍφ分化［５］。而ＭＳＣ所诱导的Ｍ
２
型Ｍφ与Ｔｒｅｇ的生成相关，其具体机制是ＭＳＣ促使单核细胞向Ｍ２型Ｍφ分化，并高表达ＩＬ １０和ＣＣＬ １８，而ＣＣＬ １８在Ｔｒｅｇ的生成中具有重要作用［１８］。体内实验，在败血症Ｃ５７ＢＬ／６小鼠模型中［８］，ＭＳＣ降低了败血症Ｃ５７ＢＬ／６小鼠的病死率，而给败血症Ｃ５７ＢＬ／６小鼠注射抗ＩＬ １０中和抗体或者ＩＬ １０受体或者清除Ｍφ，ＭＳＣ的这种保护作用也随之消除。同样，Ｌｕｚ Ｃｒａｗｆｏｒｄ等［１５］研究证实来源于敲除白细胞介素１受体拮抗剂（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １ｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔ，ＩＬ １ＲＡ）基因的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠中的ＭＳＣ相比于野生型ＭＳＣ，在诱导Ｍφ向
Ｍ
２
型分化的作用上，前者作用明显减弱。这说明ＭＳＣ分
泌的ＩＬ １ＲＡ在诱导Ｍφ分化为Ｍ
２
型上扮演着重要的角。
·
５
８
４
·
器官移植第７卷
２ １ ２ 间充质干细胞和中性粒细胞 体外实验表明，在ＭＳＣ和外周血中性粒细胞共培养体系中，细菌内毒素能够促使ＭＳＣ表达趋化因子。同时经脂多糖（ＬＰＳ）活化的ＭＳＣ能够分泌大量的炎性因子并通过分泌ＩＬ ８、巨噬细胞迁移抑制因子（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｍｉｇｒａｔｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ，ＭＩＦ）募集中性粒细胞［１９ ２０］。这一研究结果暗示了ＭＳ
Ｃ在炎症早期抗击病原体的辅助作用。而在体内实验，通过向败血症大鼠模型中注射ＭＳＣ，ＭＳＣ能够通过加强中性粒细胞抗菌能力辅助清除细菌的作用［２１］。此外，ＭＳＣ能够通过上调中性粒细胞抗凋亡因子ＭＣＬ１的表达，并下调促凋亡因子ｂａｘ的表达抑制中性粒细胞凋亡，延长中性粒细胞寿命。
２ １ ３ 间充质干细胞和树突状细胞 ＤＣ分布十分广泛，起源于骨髓中的多能ＨＳＣ。是目前所知的机体内功能最强的专职抗原提呈细胞。ＤＣ最重要的功能就是摄取、加工处理并提呈抗原，激发机体产生免疫应答。ＤＣ可激发初次免疫应答，可有效地刺激Ｔ细胞和Ｂ细胞的活化。正常情况下体内绝大多数ＤＣ是未成熟ＤＣ，它们表达低水平的ＭＨＣⅡ类分子、在摄取抗原或受到某些刺激［主要是炎症信号如ＬＰＳ、ＩＬ １β、ＴＮＦ α）］后，未成熟ＤＣ即开始分化成熟。成熟ＤＣ表达大量ＭＨＣⅡ类分子，并且共刺激分子和黏附分子表达水平也显著增加，而Ｆｃ受体和病原体受体表达下降，从而具备了激发免疫应答的能力。
ＭＳＣ能够影响ＤＣ的募集、成熟和功能。就成熟ＤＣ的来源而言，体外实验证实ＭＳＣ能够显著地减少单核细胞分化为ＤＣ，影响ＣＤ１ａ、ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８６和ＨＬＡ ＤＲ的上调。研究表明，这种作用可以通过分泌ＰＧＥ
２
、ＩＬ ６、肿瘤坏死因子α刺激基因（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒαｓｔｉｍｕｌａｔｅｄｇｅｎｅ，ＴＳＧ） ６、巨噬细胞集落刺激因子（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，Ｍ ＣＳＦ）和Ｊａｇｇｅｄ ２实现［１３］。然而，这是一个可逆的过程，如果在共培养体系中清除ＭＳＣ，单核细胞又可以重新分化为ＤＣ。不仅如此，当来源于单核细胞和ＭＳＣ的共培养体系中，未成熟ＤＣ被ＬＰＳ活化分化成最终形式的细胞后，这些细胞低表达成熟标识分子ＣＤ８３和共刺激分子ＣＤ８０、ＣＤ８６。这一研究结果说明ＭＳＣ能够使得ＤＣ维持在未成熟状态。然而，Ｓｐａｇｇｉａｒｉ等［２２］研究显示，在ＬＰＳ诱导未成熟ＤＣ分化为成熟ＤＣ的体系中，ＭＳＣ不会影响成熟ＤＣ上ＣＤ８０、ＣＤ８６和ＣＤ８３的表达。这一研究结果说明ＭＳＣ对于单核细胞分化而来的未成熟ＤＣ具有强大的抑制作用，但对ＬＰＳ诱导的未成熟ＤＣ向成熟ＤＣ分化的体系中却没有抑制作用。此外，当成熟ＤＣ和ＭＳＣ共培养后，成熟ＤＣ上的ＨＩＡ ＤＲ、ＣＤ１ａ、ＣＤ８０和ＣＤ８６表达量降低，这说明ＭＳＣ能够通过减少成熟ＤＣ上刺激分子的表达，促使成熟ＤＣ趋向一种未成熟状态。
此外，ＭＳＣ还能够影响与ＤＣ成熟有关的几种关键细胞因子的分泌。有研究观察到ＭＳＣ能够抑制ＬＰＳ活化的ＤＣ分泌ＴＮＦ α，从而影响了ＤＣ的成熟、迁移和活化Ｔ细胞的能力［８］。ＭＳＣ还抑制了ＤＣ分泌ＩＬ １２，ＩＬ １２的缺失诱导了Ｔ细胞的无能和耐受。总之，在ＭＳＣ的暴露下，未成熟ＤＣ无法正常分化为成熟的ＤＣ，从而不能有效地活化初始Ｔ细胞和刺激Ｔ细胞增殖，这间接反映了ＭＳＣ介导免疫抑制功能方面的机制。
２ １ ４ 间充质干细胞和自然杀伤细胞 ＮＫ细胞是能够直接杀伤被病毒感染的自身细胞或者肿瘤细胞的一类淋巴细胞。ＮＫ细胞来源于ＨＳＣ，分布广泛，尤其在肝脏和肺脏中比例较高（约３０％）。ＮＫ细胞表面可以表达抑制性受体和活化性受体。通过抑制性受体传递的抑制信号可以避免ＮＫ细胞对“自己”的攻击。
在不被ＮＫ细胞杀伤的情况下，ＢＭ ＭＳＣ能干扰ＮＫ细胞的增殖、细胞因子的产生，某些情况下也可以影响ＮＫ细胞的毒性。ＭＳＣ和ＮＫ细胞的相互作用是复杂的，且很大程度上取决于所处的微环境和ＮＫ细胞活化的状态。ＢＭ ＭＳＣ能够抑制ＩＬ ２、ＩＬ １５导致ＮＫ细胞的增殖和ＩＦＮ γ的生成［２２］，但无法抑制已经活化ＮＫ细胞的细胞毒性［６］。相反，在ＮＫ细胞活化前接触ＭＳＣ，ＭＳＣ能干扰ＮＫ细胞介导的细胞毒性、细胞因子生成、细胞膜上活化受体的表达和颗粒酶Ｂ的释放。这种作用源于细胞间的直接接触和ＭＳＣ分泌的ＩＤＯ、ＰＧＥ２、ＴＧＦ β
１
、ＨＬＡ Ｇ５等［９］。
２ １ ５ 间充质干细胞和补体系统 补体可通过３条既独立又交叉的途径被激活，即经典途径、旁路途径和凝集素途径。补体活化过程及其活化的产物可介导细胞溶解、调理吞噬、炎症反应、清除免疫复合物等一系列重要的生物学效应，其与移植后排斥反应也有着密切的联系。研究发现，ＢＭ ＭＳＣ
表达补体受体（如Ｃ３ａＲ和Ｃ５ａＲ），说明了补体裂解片段对ＭＳＣ的趋化可能，或者有促使ＭＳＣ向炎症区域迁移的功能。此外，Ｃ３ａ和Ｃ５ａ和ＭＳＣ上膜表面受体Ｃ３ａＲ和Ｃ５ａＲ的结合加强了ＭＳＣ对氧化应激损伤的抵抗能力并且延长了ＭＳＣ内增殖和抗凋亡信号的活化时间。不仅如此，ＭＳＣ膜表面受体和Ｃ３的结合与抑制外周血单个核细胞（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌ，ＰＢＭＣ）的增殖高度相关［２３］。另外，研究还发现ＭＳＣ膜表面表达补体抑制物ＣＤ４６、ＣＤ５５和ＣＤ５９，这些补体抑制物一定程度上抑制了补体系统的活化，同时保护了ＭＳＣ不被补体溶解的作用。同时，ＭＳＣ还分泌补体抑制物Ｈ因子，Ｈ因子通过限制Ｃ３和Ｃ５转化酶的活性抑制补体激活［２４］。然而，ＭＳＣ的这种保护机制在已经活化的补体环境中并没有作用，且ＭＳＣ容易受膜攻击复合物ＭＡＣ的攻击［２５］。
２ ２ 间充质干细胞在适应性免疫系统中的调节作用
２ ２ １ 间充质干细胞和Ｔ细胞 ＭＳＣ的一个特点是具有的低免疫源性。在人类，ＭＳＣ低表达ＭＨＣⅠ类分子，不表达ＭＨＣⅡ类分子和共刺激分子。尽管ＭＨＣⅠ类分子在ＭＳＣ上低表达，但却能够结合ＮＫ细胞上的抑制性受体，抑制ＮＫ细胞的激活，从而避免自身被ＮＫ细胞杀伤。此外，由于ＭＳＣ不表达ＭＨＣⅡ类分子，这使得ＭＳＣ无法被ＣＤ４＋Ｔ细胞识别。有趣的是ＭＳＣ在ＩＦＮ γ的作用下，ＭＨＣ
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第６期 陈强星等 间充质干细胞免疫调节作用的研究进展
Ⅰ类分子和ＭＨＣⅡ类分子的表达上调，尽管在这种情况下ＭＳＣ依然不能刺激免疫应答。此外，ＭＳＣ在炎症环境中，其细胞表面的共刺激分子ＣＤ４０表达上调［２６］，抑制分子ＣＤ２７４［亦称为程序化细胞死亡 配体１（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ１ｌｉｇａｎｄ１，ＰＤ Ｌ１）］表达亦上调，两种分子传递的信号正好相互平衡，其结果是Ｔ细胞仍然无法完全活化［２７］。
ＤｉＮｉｃｏｌａ等［２８］发现在混合淋巴细胞培养体系和多种活化剂（ＩＬ ２或植物凝集素）中，ＭＳＣ能够抑制Ｔ细胞的增殖。此外，他们还发现，ＣＤ４＋Ｔ细胞和ＣＤ８＋Ｔ细胞都能被ＭＳＣ抑制，而这种抑制作用是呈剂量依赖性的，即ＭＳＣ的量越大，抑制效果越明显。目前研究发现ＭＳＣ抑制Ｔ细胞的主要机制包括：（１）可溶性因子的释放；（２）细胞间的直接接触；（３）诱导Ｔｒｅｇ的生成。
可溶性细胞因子在抑制Ｔ细胞方面的研究报道不少。研究发现，在避免ＭＳＣ和Ｔ细胞接触的实验中，Ｔ细胞增殖也能被一定程度地抑制，说明ＭＳＣ能够通过分泌相关因子发挥其免疫调节作用［８］。然而，ＭＳＣ分泌的具有抑制Ｔ细胞增殖作用的可溶性因子取决于ＭＳＣ和活化Ｔ细胞是否存在交流，来自于ＭＳＣ单独培养的上清液并不能对Ｔ细胞产生足够的抑制作用，相反来自于ＭＳＣ和活化Ｔ细胞共培养体系的上清液却能够抑制Ｔ细胞的增殖。进一步探索发现超过３０种ＭＳＣ分泌的可溶性因子在调节Ｔ细胞活化和增殖上具有免疫调节能力［２８］，包括肝细胞生长因子（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＨＧＦ）、ＴＧＦ β、ＩＤＯ、ＰＧＥ
２
、一氧化氮（ＮＯ）、ＩＬ ６、ＩＬ １０、脑信号蛋白（ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ，ＳＥＭＡ） ３Ａ、半乳糖凝集素（ｇａｌｅｃｔｉｎ，Ｇａｌ） １和Ｇａｌ ９等。有趣的是，不同物种来源的ＭＳＣ对Ｔ细胞发挥免疫调节作用分泌的相关因子不同，如人类ＭＳＣ会产生ＩＤＯ抑制Ｔ细胞的增殖，而鼠类ＭＳＣ则会产生ＮＯ抑制Ｔ细胞增殖［２９］。最近的研究发现，在ＭＳＣ和Ｔ细胞进行交流的过程中，ＭＳＣｓ会产生腺苷酸，腺苷酸和Ｔ细胞膜表面上的腺苷酸Ａ２Ａ受体结合传递信号促使Ｔ细胞增殖减少［３０］。这种现象还在鼠ＭＳＣ抑制Ｔ细胞增殖中观察到。
就细胞间的直接接触而言，ＤｉＮｉｃｏｌａ等［２８］首先证实了细胞间的直接接触是ＭＳＣ发挥
其强大抑制作用的必要条件。他们设计了一种实验方法促使ＭＳＣ无法和Ｔ细胞接触，此时ＭＳＣ对Ｔ细胞的抑制作用较弱，但是在允许ＭＳＣ和Ｔ细胞接触的条件下，其对Ｔ细胞的抑制作用会变得较强。随着进一步研究，他们发现ＭＳＣ表达了整合素（α１、α２、α３、α５、α６、αＶ、β１、β３、β４）、ＩＣＡＭ １、ＩＣＡＭ ２、血管细胞黏附蛋白（ｖａｓｃｕｌａｒｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＶＣＡＭ） １、ＣＤ７２和ＣＤ５８（ＬＦＡ ３），以及细胞表面上的其他黏附分子，这些分子能够和Ｔ细胞表面上的相应受体高度结合［３１］。研究还发现，ＭＳＣ吸引Ｔ细胞是因为ＭＳＣ高表达白细胞趋化因子，如趋化因子配体（ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１），这些因子的中和抗体应用能够逆转ＭＳＣ的免疫抑制作用，这暗示了细胞间的接触在ＭＳＣ对Ｔ
细胞的免疫调节作用的重要性。此外，ＣＸＣＲ３以及其他的分子如ＶＣＡＭ １，ＩＣＡＭ １和程序化细胞死亡因子（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ，ＰＤ） １，已经被证实参与了ＭＳＣ抑制Ｔ细胞的过程。Ｒｅｎ等［３２］等研究发现，鼠类ＭＳＣ在炎症环境中高表达ＩＣＡＭ １和ＶＣＡＭ １，介导了ＭＳＣ和Ｔ细胞间的密切接触。当促使这些黏附分子无法表达或者封闭这些黏附分子后，会显著地影响ＭＳＣ介导的免疫抑制功能。然而，人类ＭＳＣ上的ＩＣＡＭ １和ＶＣＡＭ １对于抑制Ｔ细胞的增殖似乎并不是那么重要。对于人类ＭＳＣ，其抑制Ｔ细胞的直接接触方式中，一种比较重要的方式是通过ＭＳＣ表达抑制性分子ＰＤ Ｌ１和相应受体结合［３３］。
Ｔｒｅｇ是Ｔ细胞中具有免疫抑制功能的功能亚。根据Ｔｒｅｇ的表面标志，产生的细胞因子和作用机制不同，Ｔｒｅｇ可分为ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ、Ｔｒ１和Ｔｈ３等多种亚型。ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ可高表达ＩＬ ２受体的α链（ＣＤ２５）分子和转录因子Ｆｏｘｐ３。Ｔｒ１也是ＣＤ４＋Ｔ细胞，多在ＩＬ １０的诱导下产生。Ｔｈ３主要分泌ＴＧＦ β，对Ｔｈ１和Ｔｈ２都具有抑制作用。ＭＳＣ能够诱导生成经典的ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ。ＭＳＣ能够为Ｔｒｅｇ提供合适的微环境，这有利于ＭＳＣ招募、调节和维持Ｔｒｅｇ的表型及功能。此外，ＭＳＣ可以通过分泌ＨＬＡ Ｇ５和非经典的ＨＬＡ Ｇ扩增Ｔｒｅｇ。ＭＳＣ诱导产生Ｔｒｅｇ的机制与ＭＳＣ所分泌ＰＧＥ２、ＴＧＦ β
１
和细胞间的直接接触有关。在ＭＳＣ和Ｔ细胞共培养体系中，采用ＭＳＣ所分泌的白细胞移动抑制因子（ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｆａｃｔｏｒ，ＬＩＦ）中和抗体后，Ｔｒｅｇ表面的Ｆｏｘｐ３表达下降［３４］。最近的研究还发现，在ＣＤ４＋Ｔ细胞分化为Ｔｒｅｇ过程中，Ｎｏｔｃｈ １通路被活化，而ＭＳＣ表达Ｎｏｔｃｈ １配体Ｊａｇｇｅｄ １、Ｊａｇｇｅｄ ２和Ｄｅｌｔａ Ｌｉｋｅ（ＤＬＬ） １、ＤＬＬ ３、ＤＬＬ ４［３５］。另外一项研究发现，ＭＳＣ产生的血红素加氧酶（ＨＯ） １在ＩＬ １０诱导生成Ｔｒ１中具有重要作用［３６］。同样，Ｔｒ１分泌的ＩＬ １０对于ＭＳＣ分泌ＨＬＡ Ｇ５也是非常重要，后者可以促使Ｔｒｅｇ的扩增。一项ＭＳＣ和ＰＢ
ＭＣ共培养体系的研究说明了，单核细胞对于诱导Ｔｒｅｇ的产生是必须的。前文所述，ＭＳＣ能够促使单
核细胞分化为Ｍ
２
型Ｍφ，而后者分泌的ＣＣＬ １８和ＩＬ １０有利于Ｔｒｅｇ的生成。Ｙａｎ等［３７］还发现，ＭＳＣ通过上调ＰＤ １的表达加强Ｔｒｅｇ的免疫抑制能力，同时诱导生成高免疫抑制潜能的Ｔｒｅｇ。
２ ２ ２ 间充质干细胞和Ｂ细胞 Ｂ细胞可合成与分泌抗体，介导体液免疫应答，活化Ｂ细胞还具有抗原提呈功能，并能分泌多种细胞因子，参与免疫调节。ＭＳＣ和Ｂ细胞的相关研究不多。ＭＳＣ可以抑制Ｂ细胞的增殖、抗体的分泌以及影响Ｂ细胞的趋向性。ＭＳＣ与Ｂ细胞的作用机制是通过细胞之间的直接接触来发挥作用。同时也可通过分泌可溶性细胞因子对Ｂ细胞起调节作用。研究发现单独培养的ＭＳＣ上清液与Ｂ细胞不能发生反应，只有在两者共培养的情况下，ＭＳＣ才能抑制Ｂ细胞的增殖，说明ＭＳＣ可以分泌
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器官移植第７卷
可溶性细胞因子作用于Ｂ细胞，这一点与Ｔ细胞类似，但是前提是需要激活ＭＳＣ。在增殖方面，ＭＳＣ不是通过诱导Ｂ细胞凋亡发挥其抑制Ｂ细胞增殖的作用，而是通过使Ｂ细胞滞留于Ｇ０／Ｇ１期来抑制Ｂ细胞的增殖。最近的研究表明，Ｍ
ＳＣ对Ｂ细胞增殖的抑制作用不是直接的，而是需要Ｃ
Ｄ３＋Ｔ细胞的存在［３８］
。在抑制Ｂ细胞抗体方面，ＭＳＣ能够促使Ｂ细胞分泌ＩｇＭ、ＩｇＧ和ＩｇＡ减少［３８］
，最近Ｒｏｓａｄｏ等［３８］研究表明，ＭＳＣ抑制Ｂ细胞的增殖和抗体的
产生是Ｔ细胞介导的。此外，由于Ｍ
ＳＣ能够产生趋化因子受体ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５和ＣＣＲ７，故而ＭＳＣ能够改变Ｂ细胞的趋化能力。
３ 总 结
ＭＳＣ在固有免疫系统和适应性免疫系统中均具有免疫调节的能力，其相关调节机制说明了细胞间直接接触和ＭＳＣ分泌作用两种方式对ＭＳＣ发挥免疫调节作用都至关重要。在发挥免疫调节能力之前，ＭＳＣ需要被ＩＦＮ γ等促炎因子活化。ＭＳＣ能够抑制ＤＣ的成熟，间接地防止了Ｔ细胞的活化，亦能直接对Ｔ细胞起作用，同时能抑制ＮＫ细胞的细胞毒性，还对Ｂ细胞、单核巨噬细胞系统、补体系统、Ｔ
ｒｅｇ等起作用。正是因为ＭＳＣ具有这些特点，ＭＳＣ成为了最有希望的一种细胞。但我们同时也要认识到，当前对于ＭＳＣ的大部分研究仍局限于动物实验和体外实验，大部分关于ＭＳＣ对于免疫细胞的研究结果是在共培养体系中研究得到的，而在体内这样的结果是否成立仍需进一步研究。可喜的是，目前不少中心已经将ＭＳＣ用于临床试验阶段，特别是在免疫性疾病方面，如移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）方面的应用取得了良好的效果。随着对ＭＳＣ的不断探索，其生物学特点和免疫调节能力将为人类的相关疾病提供新的思路和方法。
参考文献：
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