HE染和吉姆萨染液

试剂和方法如下。

一、HE染试剂：苏木素染液：苏木精1g；无水乙醇25mL；硫酸铝钾10g；蒸馏水350mL；碘酸钾0.1g；冰醋酸10mL。A 液：用25mL 无水乙醇溶解1g苏木精，摇动即可溶解。B 液：用350mL 蒸馏水溶解10g硫酸铝钾，摇动或振荡即可溶解。把A 液和B 液混合，加入碘酸钾摇动至颜加深。最后加入10mL冰醋酸，摇动颜变为深葡萄酒红。染液配制当日即可应用于染。酸化液：醋酸20-35mL加蒸馏水至700mL。伊红染液：储液：取1g伊红，溶于100mL 95%的乙醇，待溶解完全后加几滴冰醋酸至染液呈半透明状，避光保存备用。工作液：取一定量的伊红储液，加入等量70%乙醇，此液即为伊红染液的工作液。染步骤：（1）细胞爬片放用PBS漂洗3次，每次5min，无水乙醇固定5min，风干。（2）95%乙醇1min，75%乙醇1min，三蒸水1min。( 3 ) 浸洗5 % 的醋酸液( 酸化液) 数秒。( 4 ) 苏木精染液3 - 5 m i n，胞核呈橙红。( 5 ) 自来水冲洗至颜变蓝。( 6) 盐酸乙醇液分化数秒，颜再次返红。(7) 自来水再次冲洗，返蓝。( 8) 伊红染液5min，流水漂洗15min左右。二、吉姆萨染试剂：吉姆萨染液配制：取吉姆萨粉末1g溶于66ml甘油中研磨混匀，然后放置55-60℃水浴2h，冷却后加入66ml甲醇中混匀，过滤后棕瓶分装保存。PBS甲醇液：PBS与甲醇一比一混合。染步骤：（1）细胞爬片使用PBS漂洗3次，每次5min。（2）加PBS甲醇液静置2min，去掉PBS甲醇液。

（3）加甲醇固定10min，去掉甲醇，加入新无水甲醇漂洗去掉。（4）加吉姆萨染液2ml/25cm2，2min后加入8ml水稀释并晃动染液2min，去掉染液。（5）流水冲洗10~20s，湿润时观察。

本文发布于:2024-09-22 04:02:59，感谢您对本站的认可！

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