H-E染
概述
苏木精（Hematoxylin）-伊红（Eosin）染也称普通染，简称为H-E染。是生 物组织学、病理学及细胞学工作必不可少的最常用的染方法，故又称常规染 H-E染应该是红蓝相映，层次浓淡均为分明稳恒定优质
各种固定、包埋方法所制作的组织切片和冰冻切片等，均可用采用常规染 H-E染原理
组织细胞的不同成分对苏木精染料的亲合力不同，经苏木精染的组织切片，再利
用酸乙醇的分化作用，可使细胞核等酸性成分着清晰，而其它成分脱
再经伊红染细胞质等碱性成分，则各种组织与病变的一般形态结构均可显示出来
一张优质的染切片，可以清晰地观察到各种不同的组织结构以此作为病理诊断的
确切依据
再根据此染切片所见，分别进行不同的特殊染
到目前为止人类所积累的病理组织学知识，绝大部分是从观察苏木精-伊红染标本
所得来的
第一节染液及溶液的配制
一、明矾苏木精染液的配制
苏木精染液的配法很多，普通、常规染多用明矾苏木精，常用的有哈瑞（Harris）、
埃利希（Ehrlich）、德拉菲而德（Delafield）及迈耶（Mayer）等
明矾苏木精染液用钾明矾或铵明矾中的铝离子作为苏木精的媒染剂
利用等氧化剂进行人工氧化或通过自然氧化成熟的方法，使苏木精具有较强
的染效果
还需用冰醋酸作为促染剂，以增强染能力
（一）哈瑞斯（Harris）苏木精染液
1．配方
（1）甲液
苏木精1g
无水乙醇10ml
（2）乙液
钾明矾（硫酸铝钾）20g
蒸馏水200ml
（3）其他
0.5～1g
冰醋酸0.5～1ml
2．配制法
分别配制甲、乙液，将乙液（加温并搅拌），待全部溶解后，再加入甲液，混合后煮
沸1～2分钟，然后改用小火加温，慢慢加入，同时不停地摇荡或搅拌使其充
分氧化，当液体变为深紫蓝时，即迅速将容器放入入冷水中使之迅速冷却，室温
静置数小时至一夜。第二天过滤，每100毫升滤液内加0.5～1毫升冰醋酸，以增强其染力
染时间为3～15分钟
此液为人工氧化剂，配制方便，配后第二天即可应用，且染时间较短，为临床病
理常用之方法，保存时间不能太长，经2～6个月后染作用渐弱，故现用现配为好，一次不宜配制过多，应按需要量随用随配
钾明矾为媒剂，为氧化剂，冰醋酸为促染剂
二、伊红染液的配制
为砖红粉末状或酱红结晶，是最常用的胞浆染料
伊红有水溶性和醇溶性，黄光（Y）与蓝光（B）之分
病理组织学常规染一般多用水溶性伊红Y
伊红染液的一般浓度为0.25％～1％。常规染常用O.25％～0.5％；快速染时或
偶尔遇到对伊红着染困难的组织，可使用0.5％～1％
浓度较低的易使胞质染均匀，调清晰、美观
（－）水溶性伊红染液
（二)醇溶性伊红染液
1．0.5％醇溶性伊红染液
2．0.25％醇溶性伊红染液
（1）配方
醇溶性伊红（B）0.5g
蒸馏水5ml
95％乙醇200ml
（2）配制法
先将伊红溶于蒸馏水中，待其溶解后摘冰醋酸于其中，有沉淀生成，至成浆糊状，
再加蒸馏水数毫升，继续滴冰醋酸，直至沉淀不再增加。过滤，弃滤液留沉淀物，
待其干燥后，溶于200毫升95％乙醇中即可
3．改良伊红配制法
（1）配方
伊红（水溶性Y）1g
蒸馏水200ml
冰醋酸30ml
（2）配制法
将伊红溶于蒸馏水100ml中，然后边摇边滴冰醋酸，待伊红呈浆糊状，即加100ml
蒸馏水，摇匀后过滤，将滤液弃之，将伊红同滤纸一并收入烤箱内烘干，烘干之改
良伊红照常规用乙醇配制之
此法是将伊红经过酸化处理配之染液，染效果较好，细胞浆呈粉红，肌纤维呈
鲜红，红血球呈橙红
三、分化液的配制
（一）1％盐酸乙醇
盐酸1ml+70％乙醇99ml
（二）0.5％～1％盐酸水溶液
盐酸0.5～1ml+蒸馏水99ml
四、促蓝剂（弱碱性水溶液）配制
（一）氢氧化铵水溶液
（二）氢氧化锂水溶液
将氢氧化锂逐滴加入蒸馏水中，经搅拌后，用pH试纸检验溶液的pH，调正pH至
8.0左右
四、石碳酸-二甲苯溶液配制
石碳酸10ml+二甲苯30ml
第二节染方法及注意事项
一、染前的处理
无论用哪一种固定、包理方法所制作的切片，都必须经过适当处理方能进行染
这里着重介绍常用的石蜡切片染前的处理
石蜡切片在染之前必须经过脱蜡至水，就是先用二甲苯等有机溶剂将组织切片上
的石蜡溶解后，再用自高至低浓度的乙醇将不能与水混合的二甲苯溶掉；在经过各级乙醇的过程中，组织切片中的水分得到逐渐增加，直至最后水洗
步骤：二甲苯去蜡（二次，各5～10min ）；无水乙醇（二次）、95%乙醇、80%乙醇、
70%乙醇（各1～2min）；自来水冲洗，蒸馏水洗
二、染
苏木精-伊红染过程是先用苏木精将组织切片适当地过染，经水洗后再用盐酸乙醇
分化、温水或弱减性水溶液显蓝，使胞核呈鲜明的蓝，胞质等背景无；再经水洗后用伊红将胞质等染成深浅不同的粉红至红
步骤：苏木精染液(10～15分钟)，自来水洗(片刻)，盐酸酒精分化(1～2浸次)，流水冲
洗(片刻), 温水或碳酸锂饱和水溶液显蓝(1分钟)；流水冲洗(数分钟)；伊红液染(数分钟)
三、脱水透明封固
绝大部分苏木精-伊红染的切片标本，为了便于观察和长期保存，均应以干性封固
剂封藏
凡是用干性封固剂封藏的各种切片标本在染后，均需经过脱水、透明过程
可使存留在切片上之水分及漂浮的染液全部除净，经透明剂的作用后，将脱水剂
清除出来，使切片产生出适宜的折光率，最后用盖玻片及封固剂封固
步骤：95%乙醇、无水乙醇(各二次, 1～2分钟)；二甲苯(二次,1分钟)；滴加中性树胶等
盖盖玻片封片
第三节染结果、易出现的问题及原因
一、H-E染的结果
素木精-伊红染结果为
细胞核被苏木精染成鲜明的蓝，软骨基质、钙盐颗粒被染成深蓝，粘液染成灰
蓝
细胞质被伊红染成深浅不同程度的粉红至桃红，胞质内嗜酸性颗粒呈反光强的
鲜红，胶原纤维为淡粉红，弹力纤维呈亮粉红，红细胞为朱红；核仁红，蛋白性液体粉红
着情况不仅与组织、细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变
很多细胞在其新生时期胞质对伊红着淡或者轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性
变则呈现嗜伊红浓染
胶原纤维在老化和透明变性时，伊红着由浅变深
质量好的苏木精-伊红染切片标本，细胞核与细胞质蓝红相映，鲜艳美丽
胞核鲜明，核膜及核染质颗粒均清晰可见
组织细胞的一般形态结构特点及很多物质成分，基本上均能显示出来
优良的苏木精-伊红染切片标本，可以长期保存（数十年之久）且不明显褪
二、苏木精-伊红染易出现的问题
最常见的是调不正、两种对比颜不协调
染不均或模糊不清
切片脱落或有绉叠
切片被污染
含有气泡
易褪，而不能长期保存等等
出现这些问题的原因是多方面的，其中有的并非染技术问题，而是由于染前的
取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包理、切片等处理不当所致
如取材时组织标本就已发生腐败、自溶或未能及时固定，必然造成染模糊不清
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