miR-208a促进非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和 迁移的功能和机制研究
李新玲，吴振国，张立海，朱颀峰△
摘要：目的探讨miR-208a对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法（1）分别用miR-208a mimic、NC mimic、miR-208a inhibitor和NC inhibitor转染A549细胞。采用荧光定量PCR（qPCR）检测A549细胞中miR-208a过表达和干扰效率；采用CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验检测miR-208a对A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响。利用生物信息学网站PicTar、miRanda、Targetscan和miRDB预测与miR-208a结合的下游靶基因；构建蛋白酪氨酸磷酸酶受体G（PTPRG）的3'UTR野生型和突变型双荧光素报告酶基因载体，和miR-208a共转染到HEK-293T细胞后观察荧光素酶活性变化。（2）取对数生长期的A549细胞，设置阴性对照组（si-NC组）、PTPRG敲低组（si-PTPRG组）和PTPRG敲低组＋miR-208a干扰组（si-PTPRG＋miR-208a inhibitor组），采用CCK-8、Transwell 实验和划痕实验检测PTPRG对A549增殖、侵袭和迁移的影响，qPCR和Western blot检测3组细胞PTPRG的mRNA和蛋白表达变化。结果（1）miR-208a mimic组miR-208a基因表达水平、细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移率均高于NC mimic组（P＜0.05）；miR-208a inhibitor组的miR-208a 基因表达水平、细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移率均低于NC inhibitor组（P＜0.05）。生物信息学分析显示PTPRG是miR-208a的靶基因，双荧光素报告酶实验结果显示miR-208a过表达能够降低PTPRG3'UTR野生型的荧光素酶活性，而敲低miR-208a能够增加PTPRG3'UTR野生型的荧光素酶活性，miR-208a能够与PTPRG的3'UTR序列结合。（2）与si-NC组相比，si-PTPRG组细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移能力明显增高，PTPRG基因和蛋白表达水平下降（P＜0.05）；而与si-PTPRG组相比，si-PTPRG＋miR-208a inhibitor组细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移能力下降，PTPRG基因和蛋白表达水平升高（P＜0.05）。结论miR-208a 可能通过靶向调控PTPRG来促进A549细胞的增殖、侵袭和迁移。
关键词：癌，非小细胞肺；A549细胞；受体样蛋白质酪氨酸磷酸酶类；微RNAs；细胞增殖；细胞运动；miR-208a
中图分类号：R734.2，R349.5文献标志码：A DOI：10.11958/20202500
Study on the function and mechanism of miR-208a in promoting the proliferation,invasion and
migration of non-small cell lung cancer A549cells
LI Xin-ling,WU Zhen-guo,ZHANG Li-hai,ZHU Qi-feng△
Department of Respiratory and Critical Care Medicine,the First Hospital of Hebei Medical University,
Shijiazhuang050031,China
△Corresponding Author E-mail:*********************
Abstract:Objective To investigate the functional role and mechanism of miR-208a on proliferation,invasion and migration of non-small cell lung cancer(NSCLC)A549cells.Methods(1)A549cells were transfected with miR-208a mimic,NC mimic,miR-208a inhibitor and NC inhibitor,respectively,and the overexpression and interference efficiency of miR-208a were detected by quantitative polymerase chain reaction(qPCR).CCK-8,Transwell and wound healing assays were used to evaluate the effects of miR-208a on proliferation,invasion and migration of A549cells.Bioinformatics websites such as miRDB,PicTar,Targetscan and miRanda were used to predict the downstream target genes of miR-208a.PTPRG 3'UTR wild-type and mutant double luciferase reporter gene vectors were constructed and co-transfected with miR-208a into HEK-293T cells to observe the changes of luciferase activity.(2)A549cells in logarithmic phase were taken,and negative control group(si-NC group),PTPRG knockdown group(si-PTPRG group),PTPRG knockdown group+miR-208a interference group(si-PTP
RG+miR-208a inhibitor group)were set up.CCK-8,Transwell test and scratch test were used to detect the effects of PTPRG on proliferation,invasion and migration of A549cells.qPCR and Western blot assays were
作者单位：河北医科大学第一医院呼吸与危重症医学科（邮编050031）
作者简介：李新玲（1973），女，硕士，副主任医师，主要从事呼吸内科疾病方面研究。E-mail：*********************
△通信作者E-mail：*********************
肺癌是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌的85%［1］。目前，NSCLC的以外科手术结合放化疗、分子靶向为主；尽管这些方法对患者预后有所改善，但由于该病复发率高，5年生存率依然没有较大提高。侵袭和转移是肿瘤重要的生物学特征，也是造成肿瘤复发的关键因素，深入研究NSCLC侵袭和转移的机制是改善患者预后的关键。研究表明，
miR-208a在肿瘤中的异常表达，参与影响乳腺癌［2-3］、结肠癌［4］、胃癌［5-6］等多种肿瘤的发生和发展，但在NSCLC中的报道少见。蛋白酪氨酸磷酸酶受体G（PTPRG）是蛋白酪氨酸磷酸酶家族的一员，主要参与调节细胞的生长、分化、周期以及肿瘤转化等生物过程。研究发现PTPRG过表达
可抑制鼻咽癌细胞的生长和侵袭［7］，以及乳腺癌的进展［8］。本研究通过过表达和干扰NSCLC细胞miR-208a表达，探讨miR-208a对NSCLC细胞增殖、侵袭和迁移的影响，并验证miR-208a与PTPRG的靶向关系，为NSCLC的临床提供新的思路和理论基础。
1材料与方法
1.1实验材料人NSCLC细胞A549购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库；人肾胚细胞HEK-293T购自武汉普诺赛生命科技有限公司；RPMI1640、胎牛血清、青/链霉素双抗、胰蛋白酶购自美国Gibco公司；CCK-8试剂盒、结晶紫染液、细胞裂解液、BCA蛋白定量试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；Matrigel基质胶购自美国BD公司；鼠源GAPDH一抗、兔源PTPRG一抗、羊抗兔二抗、羊抗鼠二抗、ECL化学发光底物、SDS-PAGE蛋白上样缓冲液购自武汉爱博泰克生物科技有限公司；蛋白Marker、RNA提取试剂盒购自美国赛默飞公司；mRNA逆转录试剂盒和荧光定量试剂盒购自日本Takara公司、miRNA逆转录试剂盒（加尾法）购自上海冠泰生物科技有限公司；PVDF膜购自美国密理博公司；双
荧光素报告酶试剂盒购自美国Promega公司。多功能酶标仪（Thermo公司，美国），电泳仪（六一仪器厂，北京），CO2细胞培养箱（松下，日本），实时荧光定量PCR（qPCR）仪（ABI，美国），倒置显微镜（Olympus，日本），超净工作台（苏洁医疗器械有限公司，苏州），高速冷冻离心机（贝克曼，美国）。
1.2方法
1.2.1细胞培养A549细胞采用含10%胎牛血清和1%青/链霉素的RPMI1640培养基进行培养，细胞置于培养条件为 37℃、5%CO2的培养箱中。每隔1~2d进行换液，待细胞融合度达到80%~90%时，用胰蛋白酶消化，进行1∶3传代。1.2.2细胞转染及分组取处于指数生长期的A549细胞，接种于细胞培养板中。将细胞预培养12h，待细胞融合度达到60%~ 80%时将培养基更换成无血清无双抗的RPMI1640培养基，进行细胞转染。转染方法参照lipofectamine2000试剂盒说明书进行操作。转染组包含4组：miR-208a mimic组、NC mimic组、miR-208a inhibitor组和NC inhibitor组。NC mimic，miR-208a mimic，NC inhibitor和miR-208a inhibitor均由广州锐博生物科技有限公司合成。序列miR-208a mimic：5'-AUAAGACGAGCAAAAAGCUUGU-3'；miR-208a inhibitor：5'-UAUUCUGCUCGUUUUUCGAACA-3'；NC mimic：5'-UUCUC CGAACGUGUCACGUTT-3'；NC inhibitor：5'-CAGUACUU UUGUGUAGUACAA-3'。
1.2.3CCK-8实验取处于指数生长期的A549细胞，以5×103个/孔接种于96孔板中。细胞预培养12h后进行细胞转染实验。转染完成后，分别于0、24、48和72h检测增殖情况。将10μL CCK-8溶液加入到96孔板中，在37℃下孵育1~4 h，用多功能酶标仪检测450nm波长处光密度（OD）值，每组设置3个复孔。
1.2.4划痕实验在6孔板背面用记号笔平行划下3条标记线，用于划痕实验记录位置。取转染后的4组细胞，以1×106/孔接种于6孔板中。用10μL头在细胞培养板中划下3条垂直于标记线的划痕。用PBS润洗，洗掉漂浮的细胞。选取3个划痕位置，分别于0h和24h进行拍照，记算细胞划痕迁移率。迁移率=（0h划痕宽度-24h的划痕宽度）/0h划痕宽度×100%。
performed to detect the expression levels of PTPRG mRNA and protein.Results There were increased levels of miR-208a mRNA expression,cell proliferation,migration and invasion in miR-208a mimic group compared with those of NC mimic group(P＜0.05).By contrast,miR-208a inhibition exerted the opposite effects.Bioinformatics analysis showed that PTPRG was the target gene of miR-208a,and the overexpression of miR-208a could reduce the luciferase activity of PTPRG3'UTR wild-type,and miR-208a inhibitor could increase the luciferase activity of PTPRG3'UTR wild-type,indicating that miR-208a could bind to the3'UTR sequence of PTPRG.Further studies showed that compared with si-NC group,the proliferation,invasion and migration of cells were significantly increased in si-PTPRG group,and the expression levels of PTPRG gene and protein were decreased(P＜0.05).Compared with si-PTPRG group,the proliferation,invasion and migration ability were decreased in si-PTPRG+miR-208a inhibitor group,and the expression levels of PTPRG gene and protein were increased.Conclusion miR-208a promotes the proliferation,invasion and migration of A549cells by targeting PTPRG.
Key words:carcinoma,non-small-cell lung;A549cells;receptor-like protein tyrosine phosphatases;microRNAs;cell proliferation;cell movement；miR-208a
1.2.5Transwell实验在Transwell板上室中提前加入Matrigel基质胶，在细胞培养箱中孵育2h左右备用。4组细胞转染24h后，胰蛋白酶消化，用400μL无血清细胞培养液重悬细胞。吸取100μL的细胞悬液，接种至Transwell上室，下室加入600μL含20%胎牛血清的RPMI1640培养液。24 h后，吸取上室中的培养液，用脱脂棉花轻轻擦掉上室中未侵袭到底部的细胞。随后将小室置于4%多聚甲醛溶液中，于4℃固定20min，然后用0.1%结晶紫溶液室温染15min。随机读取5个视野进行拍照，计算细胞侵袭数量。
1.2.6生物信息学分析miR-208的靶基因应用PicTar （pictar.mdc-berlin.de）、miRanda（www.microrna. org/microrna/home.do）、Targetscan（/ mamm_31/）和miRDB（/）4个数据库分析与miR-208a结合的下游靶基因，并通过维恩图（
bioinfogpb.csic.es/tools/venny/）求交集。随后，通过GEPIA 数据库（gepia.cancer-pku/）检索PTPRG在肺腺癌（LUAD）和肺鳞癌（LUSC）中的表达量。
1.2.7双荧光素报告酶实验通过PCR扩增PTPRG的3'UTR序列，克隆至pGL3质粒构建野生型质粒。随
后用点突变试剂盒对miRNA与mRNA3'UTR的结合位点的质粒进行点突变，得到突变型质粒。取指数生长期HEK-293T细胞，接种于24孔板中，细胞预培养12h后进行细胞转染。将miR-208a mimic/miR-208a inhibitor与包含PTPRG的3'UTR 序列的野生型/突变型质粒共同转染到HEK-293T细胞中，并用NC mimic和NC inhibitor作为对照。转染48h后，参照试剂盒说明书检测各组细胞的荧光素酶活性，并用海肾荧光活性对实验结果进行标准化。
1.2.8qPCR取各组转染48h后的细胞，根据RNA提取试剂盒说明书进行操作，提取细胞总RNA。应用逆转录试剂盒逆转录成cDNA，置于-20℃保存。随后，利用qPCR检测mRNA和miRNA的表达水平，GAPDH和U6分别作为内参。反应体系为：SYBR premix12.5μL，PCR上下游引物各0.5μL，DNA模板2μL，dH2O9.5μL，总体积25μL。反应条件：95℃预变性5min；95℃变性5s，60℃反应30s，共40个循环。反应完成后，采用2-ΔΔCt法计算mRNA和miRNA的相对表达量。引物由上海生工生物工程股份有限公司合成，引物序列见表1。
1.2.9Western blot各组细胞转染48h后，弃去细胞培养上清，用冰PBS润洗细胞3次。加入细胞裂解液，冰上裂解30 min。随后12000×g离心15min，吸取上清，得到细胞总蛋白，用BCA蛋白定量试剂盒进行蛋白定量。定量后取30μg 蛋白上样，进行10%SDS-PAGE凝胶电泳，待蛋白Marker完全分离后转移至PVDF膜上。随后用5%脱脂奶粉封闭2h，用含1%吐温20的TBS洗膜，加入PTPRG一抗（1∶1000）4℃孵育过夜后二抗（1∶10000），37℃孵育2h。最后加入ECL 化学发光液进行显影，
以GAPDH作为内参，用Image J对蛋白条带进行灰度分析。
1.2.10PTPRG与miR-208a的靶向关系验证取处于指数生长期的A549细胞，设阴性对照组（si-NC组）、PTPRG敲低组（si-PTPRG组）和PTPRG敲低组＋miR-208a干扰组（si-PTPRG＋miR-208a inhibitor组）。各组培养12h后分别进行转染，转染后采用CCK-8、Transwell实验和划痕实验检测PTPRG对A549增殖、侵袭和迁移的影响，qPCR和Western blot检测3组细胞PTPRG的mRNA和蛋白表达变化。si-NC 和si-PTPRG均由广州锐博生物科技有限公司合成，si-PTPRG序列为5'-GTCCCTTTTGTCGCGGTAG-3'。
1.3统计学方法所有数据应用Graphpad8.0软件进行统计学分析，计量资料均符合正态分布，以均数±标准差（x±s）表示，2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间多重比较采用Tukey-t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1miR-208a的转染效率验证转染48h后，miR-208a mimic组miR-208a表达水平较NC mimic 组上调约10.28倍（t=16.950，P＜0.01），而miR-208a inhibitor组miR-208a表达较NC inhibitor组下调约74%（t=19.340，P＜0.01），见图1。
2.2过表达和沉默miR-208a对A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响CCK-8结果显示，与NC 基因名称
miR-208a
U6
GAPDH
PTPRG
PTPRG3'UTR
引物序列（5'→3'）
上游：ATAAGACGAGCAAAAAGCTTGT
下游：GCGAGCACAGAATTAATACGAC
上游：CTCGCTTCGGCAGCACA
下游：AACGCTTCACGAATTTGCGT
上游：ACGGATTTGGTCGTATTGGGCG
下游：GCTCCTGGAAGATGGTGATGGG
上游：CAGGGAAAACAGTCGCCATC
下游：AGAAAATCTGCATCTCAACAGGA
上游：GCACTTAATTTGTAAACTTCTGAA
下游：TAAAAGCAATATTCACTGTCATAAC
产物大小
（bp）
126
94
213
174
344
Tab.1Primer sequence for qPCR
表1qPCR 引物序列
A~D分别为与NC mimic组、miR-208a mimic组、NC inhibitor组、miR-208a inhibitor组
Fig.1The transfection efficiency of miR-208a in A549cells
detected by qPCR
图1qPCR检测miR-208a在A549细胞中的转染效率
A
5
10
15
B C D
m
i
R
-
2
8
a
的
相
对
表
达
量
mimic组相比，miR-208a mimic组在24、48、72h细胞增殖能力明显升高（P＜0.05）；而沉默miR-208a后，miR-208a inhibitor组在24、48、72h细胞增殖能力较NC inhibitor组明显下降，见表2。划痕实验和Transwell实验结果显示，与NC mimic组相比，miR-208a mimic组迁移率升高，细胞侵袭数增多（P＜0.01）；而沉默miR-208a后，miR-208a inhibitor组迁移率和细胞侵袭数较NC inhibitor组明显下降，见图2、3，表3。
2.3生物信息学分析寻miR-208的靶基因通过PicTar、miRanda、Targetscan和miRDB共4个数据库分别查询miR-208a的靶基因，并通过维恩图求交集，最终得到38个交集基因，其中包括PTPRG。随后，通过检索GEPIA数据库发现PTPRG在肺腺癌和肺鳞癌中的表达量均高于癌旁组织，见图4。因此选择PTPRG作为后续的研究对象。
2.4双荧光素报告酶实验结果双荧光素报告酶实验结果显示，miR-208a mimic/miR-208a inhibitor 与PT
PRG3'UTR野生型质粒共转染后，细胞荧光素酶活性分别较各自对照质粒下降或升高（P＜0.01）。而miR-208a mimic/miR-208a inhibitor与PTPRG 3'UTR突变型质粒共转染HEK-293T细胞后，荧光素酶活性与各自对照质粒组相比差异无统计学意义（P＞0.05），见图5，表4。
组别
NC mimic组miR-208a mimic组t
NC inhibitor组miR-208a inhibitor组t
24h
0.573±0.021
0.745±0.013
12.060＊＊
0.572±0.025
0.491±0.005
5.503＊＊
48h
0.859±0.015
1.125±0.141
3.249＊
0.903±0.073
0.638±0.029
5.843＊＊
72h
1.042±0.023
1.339±0.120
4.210＊
1.039±0.047
0.857±0.004
6.683＊＊
Tab.2Changes of the proliferation in A549cells after overexpression and knockdown of miR-208a
表2过表达和敲低miR-208a后A549细胞增殖能力变化
（n=3，OD450，x±s）＊P＜0.05，＊＊P＜0.01
组别
NC mimic组miR-208a mimic组t
NC inhibitor组miR-208a inhibitor组t 细胞迁移率（%）
41.00±3.00
66.33±1.53
13.030＊＊
40.33±3.22
27.67±3.06
4.936＊＊
侵袭细胞数（个/视野）
262.7±4.9
339.3±4.8
19.300＊＊
224.7±3.3
174.7±7.5
10.530＊＊
Tab.3Changes of migration and invasion ability in A549cells after overexpression and
knockdown of miR-208a
pgl3
表3过表达和敲低miR-208a后A549细胞迁移和
侵袭能力变化（n=3，x±s）＊＊P＜0.01
L
o
g
（
T
P
M
+
1
）
1
2
3
4
5
6
腺癌鳞癌
A：PicTar、miRanda、Targetscan和miRDB中miR-208a的靶基因韦恩图；B：GEPIA数据中PTPRG在肺腺癌和肺鳞癌的表达水平；腺癌：T=48例，N=347例；鳞癌：T=486例，N=338例
Fig.4Bioinformatics analysis of miR-208a target genes
图4生物信息学分析miR-208a
的靶基因
Fig.5Double luciferase reporter assay verified the3'UTR of miR-
208a targeting PTPRG
图5双荧光素报告酶实验验证miR-208a靶向PTPRG的3'UTR
组别
NC mimic组
miR-208a mimic组
t
NC inhibitor组
miR-208a inhibitor组
t
野生型
0.955±0.064
0.500±0.057
9.196＊＊
0.960±0.057
1.450±0.127
6.097＊＊
突变型
0.990±0.042
0.905±0.078
1.650
1.025±0.037
0.930±0.014
3.396 Tab.4Double luciferase reporter assay verified the
binding of miR-208a with PTPRG
表4双荧光素报告酶实验验证miR-208a与PTPRG结合
（n=3，x±s）＊＊P＜0.01
B
A
N T N T
2.5过表达和敲低miR-208a 对PTPRG mRNA 和蛋白表达的影响qPCR 和Western blot 结果显示，与NC mimic 组相比，miR-208a mimic 组PTPRG 的mRNA 和蛋白表达均下调，mRNA 水平下调约44%，蛋白水平下调约55%；而沉默miR-208a 后，miR-208a inhibitor PTPRG 的mRNA 和蛋白分别上调
3.22倍和2.22倍，见图6，表5。
2.6miR-208a 通过PTPRG 促进A549的增殖、侵袭
和迁移CCK-8实验发现，与si-NC 组相比，si-PTPRG 组能促进A549的增殖（P ＜0.01），在加入miR-208a inhibitor 后，si-PTPRG 的促增殖作用减弱（P ＜0.05），见表6。划痕实验和Transwell 结果显示，与si-NC 组相比，si-PTPRG 组细胞迁移率升高，侵袭细胞数增多；在加入miR-208a inhibitor 后，细胞迁移率和侵袭细胞数较si-PTPRG 组出现下降，见图7、8，表7。
2.7miR-208a 靶向下调PTPRG 的mRNA 和蛋白表达qPCR 和Western blot 实验发现，与si-NC 组相比，si-PTPRG 组PTPRG mRNA 和蛋白的表达水平均下降（P ＜0.01），在加入miR-208a inhibitor 后，PTPRG 的mRNA 和蛋白表达水平较si-PTPRG 组升高（P ＜0.01）。见图9，表8。
组别NC mimic 组miR-208a mimic 组t
NC inhibitor 组
miR-208a inhibitor 组
t
PTPRG mRNA 0.980±0.0360.553±0.02117.750＊＊
1.023±0.0063.220±0.5566.844＊＊PTPRG 蛋白（%）39.00±3.6017.33±4.726.323＊＊
35.33±3.5178.00±8.548.004＊＊Tab.5The expression levels of PTPRG mRNA and
protein in A549cells after overexpression and knockdown of miR-208a
表5
过表达和敲低miR-208a 后A549细胞PTPRG
mRNA 和蛋白表达变化
（n =3，x ±s ）＊＊
P ＜0.01
PTPRG
GAPDH
A
B
C
A~D 分别为与NC mimic 组、miR-208a mimic 组、NC inhibitor 组、
miR-208a inhibitor 组Fig.6
The effect of miR-208a overexpression and knockdown on the expression of PTPRG detected by Western blot assay
图6
Western blot 检测过表达和敲低miR-208a 对PTPRG
蛋白表达的影响
D
组别si-NC 组
si-PTPRG 组si-PTPRG ＋
miR-208a inhibitor 组
F
24h
0.668±0.0140.745±0.029a 0.693±0.013b 11.510＊＊
48h
0.874±0.0281.323±0.003a 1.007±0.025ab 337.600＊＊
72h
1.142±0.024
1.592±0.062a
1.335±0.015ab 98.750＊＊
Tab.6Changes of proliferation ability of A549cells after PTPRG knockdown and miR-208a interference
表6
敲低PTPRG 和干扰miR-208a 后A549细胞
增殖能力变化（n =3，
OD 450，x ±s ）＊＊
P ＜0.01；a 与si-NC 组比较，b
与si-PTPRG 组比较，P ＜0.05
组别si-NC 组
si-PTPRG 组
si-PTPRG ＋miR-208a inhibitor 组
F
细胞迁移率（%）14.33±4.0445.33±4.16a 24.67±3.51ab 48.800＊＊
侵袭细胞数（个/视野）163.7±4.1296.3±7.5a
230.7±5.8ab 369.800＊＊
＊＊
P ＜0.01；a 与si-NC 组比较，b
与si-PTPRG 组比较，P ＜0.05
（n =3，x ±s ）Tab.7
Changes of migration and invasion ability in
A549cells after knockdown PTPRG and interfere with
miR-208a
表7敲低PTPRG 和干扰miR-208aA549细胞
迁移和侵袭能力变化
1
2
3
PTPRG
GAPDH
1：si-NC 组；2：si-PTPRG 组；3：si-PTPRG ＋miR-208a inhibitor 组Fig.9
Western blot results showed that the expression of PTPRG mRNA and protein were regulated by miR-208a
图9Western blot 验证PTPRG 的基因和蛋白表达量受miR-208a
调控
组别si-NC 组si-PTPRG 组
si-PTPRG ＋miR-208a inhibitor 组F
PTPRG mRNA 0.990±0.0360.480±0.072a 0.890±0.030ab
89.070＊＊
PTPRG 蛋白（%）62.67±4.0422.00±2.65a 38.00±4.36ab
89.200＊＊
Tab.8The expression levels of PTPRG mRNA and
protein in A549cells after knockdown PTPRG and interfere with miR-208a
表8
敲低PTPRG 和干扰miR-208a 后PTPRG mRNA 和
蛋白表达变化
（n =3，x ±s ）＊＊
P ＜0.01；a 与si-NC 组比较，b
与si-PTPRG 组比较，P ＜0.05
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议