一种多功能精油组合物及其制备方法和应用与流程



1.本发明涉及植物精油技术领域,具体涉及一种多功能精油组合物及其制备方法和应用。


背景技术:



2.正常睡眠对学习记忆的形成起着非常重要的作用,长期睡眠时间减少和睡眠质量下降被认为是睡眠剥夺,可引起情绪、学习记忆、免疫等一系列功能的改变,特别是导致认知功能明显受损,如学习记忆能力下降、反应迟钝、注意力分散、定向及空间障碍等。药物干预对长时间作业过程中睡眠剥夺所致警觉能力下降的防治已成为人们首选的研究目标,其中以精神兴奋剂的研究及应用最为广泛,如、。研究表明,这些药物在对抗长时连续作业中不良影响方面有显著效果。最先由法国用于嗜睡症,发作性睡眠症及自发性睡眠过度。睡眠剥夺条件下可减轻主观困倦程度和疲劳感,并使受试者的警觉性、注意力、认知和心理运动能力维持在较好的水平;但有研究表明可导致血压升高、心率加快、乏力、降低食欲,甚至损害记忆能力。
3.芳香疗法作为一种非药物干预手段结合了艺术与双重功能,综合性地考虑人体生理、理智和心灵深处的需求,是一种回归自然类似于整体的方法。芳香疗法主要采用由植物中提取的精油作为媒介,研制成各种剂型,通过吸入、沐浴、熏香、按摩、外用等途径,达到缓解精神压力、疾病、促进人体健康的一种自然疗法。芳香疗法中所用的芳香物质或精油已有研究报道具有促醒效果。早在《神农本草经》中记载的某些中药到后来的芳香开窍中药,其所含有的精油具有疗效好、毒副作用小等特点,被广泛用于提神醒脑、延长日常清醒时间。此外,现代研究表明精油的提神醒脑效果与大脑不同区域的神经递质信号有关,可能涉及多种神经递质如单胺类包括去甲肾上腺素(noradrenaline,na)、5-羟胺(5-hydroxytryptamine,5-ht);氨基酸类包括γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,gaba)、乙酰胆碱(acetylcholine,ach)、谷氨酸(glutamicacid,glu)等。
4.植物精油在植物学领域被称为精油,在化学和医药学领域被称为挥发油,在商业领域被称为芳香油,是一类存在于芳香植物的叶、根、皮、花和果中,可随水蒸气蒸馏,且具有一定气味(一般为香味或辛辣味)的挥发性油状液体,颜多为无,属植物体自身的次级代谢产物,享有“液体黄金”的美誉。
5.目前关于植物精油提取的方法相当多,例如水蒸气蒸馏法、有机溶剂萃取法、分子蒸馏法、超临界co2流体萃取法、亚临界水萃取法、微胶囊-双水相萃取法、超声微波辅助提取法等,其中水蒸气蒸馏法因设备简单、操作简便、提取成本低等优点而广泛应用,同时也是当下植物精油提取最为常用的方法。植物精油含有各组活性化合物,具有多种功能特性,例如抗氧化、抑菌、抗癌抑瘤、保鲜、驱蚊防虫等,一直以来被广泛应用于化妆品、洗涤用品、食品(主要是果蔬、肉类及水产品)、烟酒、农业以及其他工业用香精中。水蒸气蒸馏法具有设备简单、操作容易、绿环保等优点,但是,hd法也存在着些许缺点。此法中会因为植物原料组织长时间地置于高温中,导致其中所含有的热敏性成分热分解,易水解成分发生水解
及原料焦化等,从而造成对精油产品质量不利的影响,还存在能耗高、耗时长等缺点。有机溶剂萃取法的设备简单、投资小,精油提取率高,但提取过程中需用大量有机溶剂,严重污染环境,并且最终精油产品中残留的提取溶剂也比较难以除去。植物精油提取的传统方法除上述介绍的水蒸气蒸馏法和有机溶剂萃取法外,还存在着一些传统的提取方法,例如吸收法、压榨法、吸附法等,其中吸收法和吸附法适用于热敏性的贵重精油提取,工序复杂,耗时长;压榨法是最为传统的精油抽提方法,该法所得精油产品不纯,且得率低,成品保存时间短。


技术实现要素:



6.本发明的目的在于提出一种多功能精油组合物及其制备方法和应用,具有提神醒脑、开窍解郁、舒缓脏腑、呼吸舒畅、让人放松、心情愉悦、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒、活血化瘀,疏通经络,对跌打扭伤有效等功效。
7.本发明的技术方案是这样实现的:本发明提供一种多功能精油组合物的制备方法,将薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香经过微波干燥后混合粉碎,得到植物材料粉,植物材料粉经过混合溶剂超声波辅助提取,过滤,滤液浓缩,得到提取油,固体采用复合酶酶解、复合菌剂发酵,得到的发酵产物经过离子液体-乙腈的混合溶液提取,加入纳米磁流体萃取,得到萃取泥浆,将萃取泥浆加入有机溶剂中反向萃取,得到萃取液,将得到的萃取液与提取油混合,经陶瓷膜纯化后,浓缩,加入经过聚多巴胺改性的多孔道二氧化硅微球吸附,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
8.作为本发明的进一步改进,包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香微波干燥后,混合,粉碎,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,超声波辅助提取,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂;s3.酶解:将步骤s2得到的固体加入水中,加入复合酶酶解,灭酶,得到酶解产物;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,发酵培养,灭菌,过滤,得到发酵产物;s5.离子液体提取:将步骤s4制得的发酵产物加入离子液体-乙腈的混合溶液中,缓慢通入co2,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;s6.活性物质的反向萃取:将步骤s5制得的萃取泥浆加入有机溶剂中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将步骤s2得到的提取油和步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将正硅酸烷基酯溶于有机溶剂中,得到油相;将致孔剂和表面活性剂溶于水中,得到水相;将油相加入水相中,spg快速膜乳化,调节ph值,
加热反应固化,离心,洗涤,干燥,得到多孔道二氧化硅微球;s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于水中,加入多巴胺盐酸盐和催化剂,加热反应,离心,洗涤,干燥,得到改性多孔道二氧化硅微球;s10.多功能精油组合物的制备:将步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
9.作为本发明的进一步改进,步骤s1中所述薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香的质量比为1-3:1-2:3-5:2-3:1-2:3-5:5-7;所述微波干燥的功率为1000-1500w,时间为1-2h;步骤s2中所述混合溶剂中水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为3-5:5-7:1-3:3-5;所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:3-5g/ml;所述超声波辅助提取的功率为500-700w,时间为30-50min。
10.作为本发明的进一步改进,步骤s3中所述固体和复合酶的质量比为10:1-2;所述复合酶选自纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶、淀粉酶、木质素酶中的至少两种;所述酶解采用的温度为40-60℃,时间为2-4h;优选地,所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为3-5:1。
11.作为本发明的进一步改进,步骤s4中所述活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌的接种量分别为3-5%、2-4%、0.5-1.5%;所述发酵培养的条件为37-40℃,时间为24-48h;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,37-39℃,50-70r/min,培养12-18h,得到含菌量为10
8-109cfu/ml的菌种种子液;步骤s5中所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为5-7:1-2的混合溶液;所述离子液体选自1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丁基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-戊基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十二烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十四烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十六烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-乙基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丁基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-1-甲基双三氟甲磺酰亚胺盐、三丁基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵、三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵、三丁基十四烷基双三氟甲磺酰亚胺膦、三己基十四烷基双三氟甲磺酰亚胺膦中的至少一种;所述缓慢通入co2中co2的通入速率为0.5-1ml/min,通入时间为30-50min;所述纳米磁流体为1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体;所述发酵产物、纳米磁流体、离子液体-乙腈的混合溶液的质量比为10:2-3:15-20。
12.作为本发明的进一步改进,步骤s6中所述萃取泥浆和有机溶剂的质量比为2:3-5;所述有机溶剂选自二氯甲烷、、四氯化碳、乙酸乙酯、石油醚、乙腈、乙酸甲酯、正己烷中的至少一种;步骤s7中所述小孔径陶瓷膜的孔径为2000-3000d,所述超滤膜的孔径为30-100nm,所述纯化挥发油液的相对密度为1.4-1.7;所述提取油和萃取液的质量比为3-5:2-7。
13.作为本发明的进一步改进,步骤s8中所述正硅酸烷基酯为正硅酸甲酯或正硅酸乙
酯;所述有机溶剂选自二氯甲烷、、四氯化碳、乙酸乙酯、石油醚、乙腈、乙酸甲酯、正己烷中的至少一种;所述致孔剂选自聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、氧乙烯-氧丙烯三嵌段共聚物peo20-ppo70-peo20、peo106-ppo70-peo10中的至少一种;所述表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、十四烷基苯磺酸钠、十四烷基磺酸钠、十六烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、十八烷基苯磺酸钠、十八烷基磺酸钠中的至少一种;所述正硅酸烷基酯、致孔剂和表面活性剂的质量比为10:2-3:0.5-1;所述spg快速膜的孔径为5000-7000nm;所述调节ph值至8-9,所述加热反应固化的温度为50-70℃,时间为3-5h;步骤s9中所述多孔道二氧化硅微球、多巴胺盐酸盐和催化剂的质量比为20:25-32:2-3;所述催化剂为含有3-5wt%的co
2+
的ph值为5-6的tris-hcl溶液,所述加热反应的温度为45-55℃,时间为2-4h;步骤s10中所述改性多孔道二氧化硅微球和纯化挥发油液的质量比为10-15:5-7。
14.作为本发明的进一步改进,具体包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将1-3重量份薄荷、1-2重量份尤加利、3-5重量份薰衣草、2-3重量份丁香、1-2重量份香蜂草、3-5重量份迷迭香、5-7重量份广藿香,于1000-1500w微波干燥1-2h后,混合,粉碎,过60-100目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:3-5g/ml,500-700w超声波辅助提取30-50min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为3-5:5-7:1-3:3-5;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1-2重量份复合酶酶解,100-105℃灭酶15-20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为3-5:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为3-5%、2-4%、0.5-1.5%,37-40℃发酵培养24-48h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,37-39℃,50-70r/min,培养12-18h,得到含菌量为10
8-109cfu/ml的菌种种子液;s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入15-20重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.5-1ml/min,通入时间为30-50min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2-3重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为5-7:1-2的混合溶液;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入3-5重量份有机溶剂中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将3-5重量份步骤s2得到的提取油和2-7重量份步骤s6得到的萃取液混
合均匀,采用孔径为2000-3000d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为30-100nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.4-1.7;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸甲酯或正硅酸乙酯溶于50重量份有机溶剂中,得到油相;将2-3重量份致孔剂和0.5-1重量份表面活性剂溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为5000-7000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8-9,加热至50-70℃,反应固化3-5h,离心,洗涤,干燥,得到多孔道二氧化硅微球;优选地,所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为5-7:3。
15.经过大孔致孔剂和介孔致孔剂的作用下,可以让二氧化硅微球形成复杂、致密的孔道,从而有助于后期对于植物精油的充分吸附以及缓慢释放。
16.s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入25-32重量份多巴胺盐酸盐和2-3重量份催化剂,加热至45-55℃反应2-4h,离心,洗涤,干燥,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有3-5wt%的co
2+
的ph值为5-6的tris-hcl溶液;s10.多功能精油组合物的制备:将10-15重量份步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入5-7重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
17.本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的多功能精油组合物。
18.本发明进一步保护一种上述的多功能精油组合物在制备提神醒脑、开窍解郁、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒的相关产品中的应用。
19.本发明具有如下有益效果:本发明首先将各组分采用微波干燥,相比传统的干燥方法,比如烘干的方法会使植物材料长时间暴露在高温空气中,引起萜烯类降解成单萜,同时醇类酯化形成酯类,从而改变了后期部分精油的组成。真空干燥由于长时间的真空处理会明显的改变精油的活性成分的类别和数量。红外干燥会引起氧化和化学结构重排,从而产生新的挥发性化合物,与植物本身含有的物质结构差异较大。本发明中采用微波干燥的方法可以提高植物材料内部温度较高,引起植物细胞损伤,细胞壁破裂,有利于挥发性复合物的释放。
20.本发明利用水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂在超声波的作用下提取,水-乙醇-乙腈-石油醚混合溶剂的四相体系包含有极性溶剂水、乙醇、乙腈等,同时也包含了非极性溶剂石油醚,同时,经过微波干燥后,植物材料粉的细胞出现破裂损伤,进一步在超声波辅助提取下,进一步破裂,从而有助于活性物质的溶出和被溶剂“相似相溶”,从而被溶解到溶剂中,从而提高了活性物质在溶剂中的溶解度,提高了提取率。
21.进一步过滤得到的固体采用复合酶酶解,复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,从而将植物细胞的细胞壁,果胶等酶解,从而进一步将细胞内大量的活性物质溶出,提高提取率;采用发酵技术,进一步将植物细胞破坏,促进活性物质的溶出,进一步提高提取率,同时,发酵过程也有助于产生一些活性芳香小分子,这些芳香小分子也有助于改善预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒等的效果。
22.将酶解产物进一步通过离子液体-乙腈的混合溶液提取,酶解产物中含有大量的
多糖、蛋白、肽、寡糖等杂质,经过离子液体-乙腈的混合溶液萃取,离子液体是由带正电的离子和带负电的离子构成,它在-100至200℃之间均呈液体状态,离子液体一般不会成为蒸汽而产生造成大气污染的有害气体,且离子液体还可以反复多次使用。憎水型离子液体与水互不相溶,可利用“相似相溶”的原理,将溶解在水中的物质萃取出来,用离子液体-乙腈混合溶剂作为萃取剂来萃取分离,不仅可以解决离子液体高粘度、高成本问题,还可以促进活性物质的萃取,从而起到很好的分离杂质,萃取活性物质的效果;同时,在萃取过程中,通过缓慢通入co2,逐渐提高混合溶剂的极性,在较长的时间内,能够促进不同极性的活性物质的萃取和溶解,大大的提高了的活性物质的萃取效果,同时,得到的含有co2的混合溶剂,经过加热处理即可返回为原状态,利于重复使用。水相中为多糖、蛋白、肽、寡糖等杂质,而混合溶剂中主要为活性物质,本发明进一步选用1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,萃取,将活性物质反向萃取,活性物质与1-羟乙基-3-甲基咪唑基的阴阳离子均具有相互作用、同时,含苯化合物和离子液体阳离子之间还存在π-π作用,从而实现萃取,进一步加入有机溶剂中,将1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体吸附的活性物质反向萃取下来,得到了萃取液;萃取液与提取油混合,陶瓷膜纯化,进一步除去多糖、蛋白等大分子杂质,得到了纯度很高的精华油混合物;薄荷精油中富含左旋薄荷醇、左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸癸酯、乙酸薄荷酯、苯甲酸甲酯、α-及β-蒎烯、β-侧柏烯、3-戊醇、2-已醇、3-辛醇、右旋月桂烯、柠檬烯、桉叶素、α-松油醇;尤加利精油中富含桉油醇、芳樟烯、樟脑、茴香萜、柚油萜;薰衣草精油中富含乙酸芳樟酯、芳樟醇、薰衣草醇、乙酸薰衣草酯、对-1-孟烯-4-醇、松油醇、石竹烯、别罗勒烯;丁香精油中含有丰富的丁香酚、乙酰基丁香酚、β-石竹烯、α-葎草烯、水杨酸甲酯、石竹烯氧化物、胡椒酚;香蜂草精油中含有丰富的单萜醛,其中柠檬醛的含量很高,橙花醛和香叶醛都是柠檬醛;迷迭香精油中含有丰富的a-蒎烯、冰片、b-蒎烯、樟脑、乙酸龙脑酯、莰烯、1,8-桉叶素和柠檬烯;广藿香精油中含有丰富的广藿香烯、广藿香醇、广藿香酮、藿香油主要含甲基黑椒酚等。多种活性组合物混合,制得的混合油吸附与聚多巴胺改性的多孔道二氧化硅微球内,二氧化硅微球内含有大量的曲折的孔道和洞穴,从而提高了其负载精油的载量,同时,其对精油的吸附,也有助于其缓慢释放精油活性挥发成分,另外,经过聚多巴胺改性的微球,表面和内部含有丰富的聚多巴胺物质,聚多巴胺丰富的羟基、羧基、氨基、苯基,有助于与精油中的活性物质,如醇、酮、酸、酯等形成氢键,从而稳定的吸附活性物质,同时,苯基也易于与活性物质中的芳香基团如水杨酸甲酯等形成π-π共轭,从而稳定的固定在二氧化硅微球内部,提高微球对精油活性物质的载量。
23.本发明制得的多功能植物精油组合物具有提神醒脑、开窍解郁、舒缓脏腑、呼吸舒畅、让人放松、心情愉悦、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒、活血化瘀,疏通经络,对跌打扭伤有效等功效。
附图说明
24.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提下,还可
以根据这些附图获得其他的附图。
25.图1为实施例1制得的多功能精油微球的截面sem图。
具体实施方式
26.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
27.纤维素酶,5000u/g,果胶酶,2500u/g,购于夏盛(北京)生物科技开发有限公司;酿酒酵母菌购于泸州市龙马潭区瑞华生物制曲有限公司,菌种数量≥200亿个/g;枯草芽孢杆菌,菌种数量≥200亿个/g,购于武汉艾诺森生物科技有限公司;植物乳杆菌,100cfu/g,购于潍坊瑞辰生物科技有限公司;1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐,购于成都点纯科技有限公司,三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵,购于西安齐岳生物科技有限公司。
28.实施例1本实施例提供一种多功能精油组合物的制备方法,具体包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将1重量份薄荷、1重量份尤加利、3重量份薰衣草、2重量份丁香、1重量份香蜂草、3重量份迷迭香、5重量份广藿香,于1000w微波干燥1h后,混合,粉碎,过60目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:3g/ml,500w超声波辅助提取30min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为3:5:1:3;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1重量份复合酶酶解,100℃灭酶15min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为3:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为3%、2%、0.5%,37℃发酵培养24h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,37℃,50r/min,培养12h,得到含菌量为108cfu/ml的菌种种子液;s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入15重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.5ml/min,通入时间为30min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至50℃,处理30min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
29.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为5:1的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵
按照质量比为3:2的混合物;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入3重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将3重量份步骤s2得到的提取油和2重量份步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2000d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为30nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.4;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸甲酯溶于50重量份乙酸乙酯中,得到油相;将2重量份致孔剂和0.5重量份吐温-20溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为5000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8,加热至50℃,反应固化3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为5:3。
30.s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入25重量份多巴胺盐酸盐和2重量份催化剂,加热至45℃反应2h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有3wt%的co
2+
的ph值为5的tris-hcl溶液;s10.多功能精油组合物的制备:将10重量份步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入5重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物,图1为制得的多功能精油微球的截面sem图,由图可知,该微球形成了大量的大小不均匀的孔道,便于精油的吸附和缓释。
31.实施例2本实施例提供一种多功能精油组合物的制备方法,具体包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将3重量份薄荷、2重量份尤加利、5重量份薰衣草、3重量份丁香、2重量份香蜂草、5重量份迷迭香、7重量份广藿香,于1500w微波干燥2h后,混合,粉碎,过100目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:5g/ml,700w超声波辅助提取50min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为5:7:3:5;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入2重量份复合酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为5:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为5%、4%、1.5%,40℃发酵培养48h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,39℃,70r/min,培养18h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;
s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入20重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为1ml/min,通入时间为50min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入3重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至60℃,处理50min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
32.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为7:2的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为5:2的混合物;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入5重量份中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将5重量份步骤s2得到的提取油和7重量份步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用孔径为3000d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为100nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.7;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份乙酸甲酯中,得到油相;将3重量份致孔剂和1重量份吐温-60溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为7000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至9,加热至70℃,反应固化5h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为7:3。
33.s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入32重量份多巴胺盐酸盐和3重量份催化剂,加热至55℃反应4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有5wt%的co
2+
的ph值为6的tris-hcl溶液;s10.多功能精油组合物的制备:将15重量份步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入7重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附2h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
34.实施例3本实施例提供一种多功能精油组合物的制备方法,具体包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:4g/ml,600w超声波辅助提取40min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为4:6:2:4;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1.5重量份复合
酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为4:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为4%、3%、1%,38℃发酵培养36h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,38℃,60r/min,培养15h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至55℃,处理40min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
35.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将4重量份步骤s2得到的提取油和5重量份步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
36.s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入29重量份多巴胺盐酸盐和2.5重量份催化剂,加热至50℃反应3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有4wt%的co
2+
的ph值为5.5的tris-hcl溶液;s10.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
37.实施例4与实施例3相比,离子液体为单一的1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐,其他条件均不改变。
38.实施例5与实施例3相比,离子液体为单一的三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵,其他条件均
不改变。
39.实施例6与实施例3相比,致孔剂为单一的大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯,其他条件均不改变。
40.实施例7与实施例3相比,致孔剂为单一的介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10,其他条件均不改变。
41.实施例8与实施例3相比,混合溶剂为乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,乙醇、乙腈、石油醚的体积比为10:2:4,其他条件均不改变。
42.实施例9与实施例3相比,混合溶剂为水、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙腈、石油醚的体积比为10:2:4,其他条件均不改变。
43.实施例10与实施例3相比,混合溶剂为水、乙醇的混合溶剂,水、乙醇的体积比为4:6,其他条件均不改变。
44.实施例11与实施例3相比,复合酶为单一的纤维素酶,其他条件均不改变。
45.实施例12与实施例3相比,复合酶为单一的果胶酶,其他条件均不改变。
46.对比例1与实施例3相比,步骤s1中微波干燥改为真空干燥,其他条件均不改变。
47.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于70℃真空干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉。
48.对比例2与实施例3相比,未进行步骤s2混合溶剂提取步骤,其他条件均不改变。
49.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.酶解:将10重量份步骤s1制得的植物材料粉加入100重量份水中,加入1.5重量份复合酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为4:1;s3.发酵:向步骤s2得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为4%、3%、1%,38℃发酵培养36h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,38℃,60r/min,培养15h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;
s4.离子液体提取:将10重量份步骤s3制得的发酵产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至55℃,处理40min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
50.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物;s5.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s4制得的萃取泥浆加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s6.纯化:将9重量份步骤s5得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s7.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
51.s8.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s7制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入29重量份多巴胺盐酸盐和2.5重量份催化剂,加热至50℃反应3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有4wt%的co
2+
的ph值为5.5的tris-hcl溶液;s9.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s8制得的改性多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s6制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
52.对比例3与实施例3相比,未进行步骤s3酶解步骤,其他条件均不改变。
53.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:4g/ml,600w超声波辅助提取40min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为4:6:2:4;
s3.发酵:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为4%、3%、1%,38℃发酵培养36h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,38℃,60r/min,培养15h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;s4.离子液体提取:将10重量份步骤s3制得的发酵产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至55℃,处理40min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
54.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物;s5.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s4制得的萃取泥浆加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s6.纯化:将4重量份步骤s2得到的提取油和5重量份步骤s5得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s7.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
55.s8.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s7制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入29重量份多巴胺盐酸盐和2.5重量份催化剂,加热至50℃反应3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有4wt%的co
2+
的ph值为5.5的tris-hcl溶液;s9.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s8制得的改性多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s6制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
56.对比例4与实施例3相比,步骤s1中未添加薄荷,其他条件均不改变。
57.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份尤加利、5重量份薰衣草、3重量份丁香、2重量份香蜂草、5重量份迷迭香、7重量份广藿香,于1500w微波干燥2h后,混合,粉碎,过100目筛,得到植物材料粉。
58.对比例5与实施例3相比,步骤s1中未添加尤加利,其他条件均不改变。
59.具体如下:s1.植物材料的预处理:将3重量份薄荷、5重量份薰衣草、3重量份丁香、2重量份香蜂草、5重量份迷迭香、7重量份广藿香,于1500w微波干燥2h后,混合,粉碎,过100目筛,得到植物材料粉。
60.对比例6与实施例3相比,步骤s1中未添加薰衣草,其他条件均不改变。
61.具体如下:s1.植物材料的预处理:将3重量份薄荷、2重量份尤加利、3重量份丁香、2重量份香蜂草、5重量份迷迭香、7重量份广藿香,于1500w微波干燥2h后,混合,粉碎,过100目筛,得到植物材料粉。
62.对比例7与实施例3相比,未进行步骤s4发酵步骤,其他条件均不改变。
63.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:4g/ml,600w超声波辅助提取40min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为4:6:2:4;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1.5重量份复合酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为4:1;s4.离子液体提取:将10重量份步骤s3制得的酶解产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至55℃,处理40min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
64.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物;s5.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s4制得的萃取泥浆加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s6.纯化:将4重量份步骤s2得到的提取油和5重量份步骤s5得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm
的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s7.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
65.s8.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s7制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入29重量份多巴胺盐酸盐和2.5重量份催化剂,加热至50℃反应3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有4wt%的co
2+
的ph值为5.5的tris-hcl溶液;s9.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s8制得的改性多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s6制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
66.对比例8与实施例3相比,步骤s5中未通入co2,其他条件均不改变。
67.具体如下:s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,搅拌萃取,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物。
68.对比例9与实施例3相比,步骤s5中离子液体-乙腈的混合溶液由乙腈替代,其他条件均不改变。
69.具体如下:s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入17重量份乙腈中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆。
70.对比例10与实施例3相比,未进行步骤s5离子液体提取步骤,其他条件均不改变。
71.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉
和混合溶剂的固液比为1:4g/ml,600w超声波辅助提取40min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为4:6:2:4;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1.5重量份复合酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为4:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为4%、3%、1%,38℃发酵培养36h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,38℃,60r/min,培养15h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;s5.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s4制得的发酵产物加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s6.纯化:将4重量份步骤s2得到的提取油和5重量份步骤s5得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s7.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
72.s8.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s7制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入29重量份多巴胺盐酸盐和2.5重量份催化剂,加热至50℃反应3h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有4wt%的co
2+
的ph值为5.5的tris-hcl溶液;s9.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s8制得的改性多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s6制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
73.对比例11与实施例3相比,步骤s8中未添加致孔剂,其他条件均不改变。
74.具体如下:s8.二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到二氧化硅微球。
75.对比例12与实施例3相比,未进行步骤s9,其他条件均不改变。
76.具体如下:s1.植物材料的预处理:将2重量份薄荷、1.5重量份尤加利、4重量份薰衣草、2.5重量份丁香、1.5重量份香蜂草、4重量份迷迭香、6重量份广藿香,于1250w微波干燥1.5h后,混合,粉碎,过80目筛,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:4g/ml,600w超声波辅助提取40min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为4:6:2:4;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1.5重量份复合酶酶解,105℃灭酶20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为4:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为4%、3%、1%,38℃发酵培养36h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,38℃,60r/min,培养15h,得到含菌量为109cfu/ml的菌种种子液;s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入17重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.7ml/min,通入时间为40min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2.5重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;高萃取离子液体-乙腈混合溶液经过加热至55℃,处理40min后,逸散出co2,返回得到离子液体-乙腈的混合溶液,该离子液体-乙腈的混合溶液可以重复使用。
77.所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为6:1.5的混合溶液;所述离子液体为1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐和三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵按照质量比为4:2的混合物;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入4重量份二氯甲烷中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将4重量份步骤s2得到的提取油和5重量份步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2500d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为60nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.55;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸乙酯溶于50重量份二氯甲烷中,得到油相;将2.5重量份致孔剂和0.7重量份吐温-80溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为6000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8.5,加热至60℃,反应固化4h,5000r/min离心15min,去离子水洗涤,70℃干燥2h,得到多孔道二氧化硅微球;所述致孔剂为大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯和介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10的混合物,质量比为6:3。
78.s9.多功能精油组合物的制备:将12重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球加入6重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附1.5h,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。
79.测试例1缓释性能实验将本发明实施例1-3、实施例6、7和对比例11-12制得的多功能精油组合物进行释放性能研究。
80.分别在25℃、有氧条件下,将相同质量的牛至精油微胶囊贮藏30d,每5d测定一次牛至精油的释放率,每组测定重复3次。释放率按以下公式计算:释放率(%)=(v
1-v
t
)/v1×
100%式中:v1为初始微球质量/g;v
t
为第t天微球质量/g。
81.结果见表1。
82.表1由上表可知,本发明实施例1-3制得的多功能精油微球能将精油吸附在微球的孔道内,起到长效缓释的效果。
83.实施例6、7与实施例3相比,致孔剂为单一的大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯或介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10,其缓释效果下降,同一时间下释放率提高。对比例11与实施例3相比,步骤s8中未添加致孔剂,其缓释效果下降,同一时间下释放率明显提高。经过大孔致孔剂和介孔致孔剂的作用下,可以让二氧化硅微球形成复杂、致密的孔道,从而有助于后期对于植物精油的充分吸附以及缓慢释放。
84.对比例12与实施例3相比,未进行步骤s9,其缓释效果下降,同一时间下释放率明显提高,经过聚多巴胺改性的表面和内部含有丰富的聚多巴胺物质,聚多巴胺丰富的羟基、羧基、氨基、苯基,有助于与精油中的活性物质,如醇、酮、酸、酯等形成氢键,从而稳定的吸附活性物质,同时,苯基也易于与活性物质中的芳香基团如水杨酸甲酯等形成π-π共轭,从而稳定的固定在二氧化硅微球内部,提高微球对精油活性物质的载量和缓释效果。
85.测试例2抑菌实验通过抑菌圈测试,判断待测样品对大肠杆菌(atcc25922)、金黄葡萄球菌(atcc6538)和白念珠球菌(atcc10231)的抑制作用。
86.在无菌洁净台上,将经过高温灭菌的培养基倒入直径9cm的无菌培养皿中,使每个培养皿有15-20ml的培养基,冷却后,加入0.2ml大肠杆菌(atcc25922)、金黄葡萄球菌(atcc6538)和白念珠球菌(atcc10231)菌悬液(浓度为106cfu/ml),将培养基表面涂布均匀,将牛津杯垂直放上相应培养基表面,加压使其与培养基接触无空隙,每个平板放3支小管,分别向各小管中滴加0.1mg的实施例1-12和对比例1-12制得的多功能精油组合物,并做好标记,然后置于37℃培养箱培养72h后,观察结果。培养时,试验菌不断生长,添加的待测样以牛津杯为原点向四周扩散,形成菌落不能生长的圆形区域,为“抑菌圈”,实验结束
后,测试“抑菌圈”直径。
87.结果见表2。
88.表2由上表可知,本发明实施例1-3制得的多功能精油组合物具有良好的抑菌性能。
89.测试例3灭满实验参考ny/t1151.2-2006灭螨和驱螨剂测试标准进行实验。将实施例1-12和对比例1-12制得的多功能精油组合物分为24组,对于每组样品,分别取4个培养皿,其中3个加入待测样品10g。另一个培养皿,不放待测样品作为阴性对照。每个培养皿内壁上缘均匀涂抹白油凡士林混合物。每个培养皿中心放入200只试虫,30min时在培养皿中心放入螨虫饲料0.05g,之后将培养皿置于隔水式培养箱内。48h检查并记录死亡螨虫数。每组取3个培养皿的平均结果为最终结果。
90.灭螨率的计算方法如下:灭螨率(%)=(1-实验组试虫数/阴性对照组试虫数)
×
100%结果见表3。
91.表3
由上表可知,本发明实施例1-3制得的多功能精油组合物具有良好的灭螨效果。
92.测试例4驱蚊药效实验将10g本发明实施例1-12和对比例1-12制得的多功能精油组合物加入20ml20wt%的海藻酸钠溶液中,滴加2ml5wt%的氯化钙,形成凝胶。
93.参照gb/t13917.9-2009要求,选择攻击力合格的白纹伊蚊和4名及以上测试人员,在测试人员手背标出5cm
×
5cm的受试皮肤,且在手背上均匀涂抹上述制得的凝胶(按1.5mg/cm2),将手背上用手套遮住,仅暴露涂敷了凝胶的4cm
×
4cm皮肤,另一只手为空白对照。2h后,将涂有凝胶的手伸入蚊虫笼中2min,观察有无蚊虫停落吸血。然后每隔1h进行一次测试,测试期间只要有一只蚊虫停落吸血即判为受试物失效,记录有效保护时间(h)。每次进行测试前对照手应先做测试,当蚊虫的攻击力合格后方可继续进行试验,否则更换攻击力合格蚊虫继续进行试验。
94.有效保护时间的计算:每组测试人员有效保护时间的平均数。
95.结果见表4。
96.表4
由上表可知,本发明实施例1-3制得的多功能精油组合物具有良好的蚊虫驱避效果。
97.测试例5消炎实验将10g本发明实施例1-12和对比例1-12制得的多功能精油组合物加入20ml20wt%的海藻酸钠溶液中,滴加2ml5wt%的氯化钙,形成凝胶。
98.取spf级雄性小鼠162只,随机分为27组,分别为模型组、空白组、复方醋酸地塞米松乳膏组、实施例1-12、对比例1-12组,每组6只。取受试物每天右耳廓正反面外用给药2次,每次1.2g/kg,复方醋酸地塞米松乳膏组给药0.2g/kg,空白组每次给与1.2g/kg基质凝胶,连续给药7d。末次给药后0.5h后,各小鼠以0.05ml二甲苯涂搽右耳两面,30min后将动物处死。沿小鼠耳廓剪下两耳,用直径8mm的打孔器分别凿出相同部位相同大小的耳片,称重,以两耳片重量差值为肿胀度,计算肿胀抑制率。
99.肿胀抑制率(%)=(模型组平均肿胀率-给药组平均肿胀率)/模型组平均肿胀率
×
100%。
100.结果见表5。
101.表5
由上表可知,本发明实施例1-3制得的多功能精油组合物具有良好的消炎效果。
102.实施例4、5与实施例3相比,离子液体为单一的1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐或三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。对比例9与实施例3相比,步骤s5中离子液体-乙腈的混合溶液由乙腈替代,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果明显下降。对比例10与实施例3相比,未进行步骤s5离子液体提取步骤,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果明显下降。将酶解产物进一步通过离子液体-乙腈的混合溶液提取,酶解产物中含有大量的多糖、蛋白、肽、寡糖等杂质,经过离子液体-乙腈的混合溶液萃取,离子液体是由带正电的离子和带负电的离子构成,它在-100至200℃之间均呈液体状态,离子液体一般不会成为蒸汽而产生造成大气污染的有害气体,且离子液体还可以反复多次使用。憎水型离子液体与水互不相溶,可利用“相似相溶”的原理,将溶解在水中的物质萃取出来,用离子液体-乙腈混合溶剂作为萃取剂来萃取分离,不仅可以解决离子液体高粘度、高成本问题,还可以促进活性物质的萃取,从而起到很好的分离杂质,萃取活性物质的效果。
103.对比例8与实施例3相比,步骤s5中未通入co2,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。本发明在萃取过程中,通过缓慢通入co2,逐渐提高混合溶剂的极性,在较长的时间内,能够促
进不同极性的活性物质的萃取和溶解,大大的提高了的活性物质的萃取效果,同时,得到的含有co2的混合溶剂,经过加热处理即可返回为原状态,利于重复使用。
104.实施例6、7与实施例3相比,致孔剂为单一的大孔致孔剂聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯或介孔致孔剂peo106-ppo70-peo10,对比例11与实施例3相比,步骤s8中未添加致孔剂,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。本发明多种活性组合物混合,制得的混合油吸附与聚多巴胺改性的多孔道二氧化硅微球内,二氧化硅微球内含有大量的曲折的孔道和洞穴,从而提高了其负载精油的载量,同时,其对精油的吸附,也有助于其缓慢释放精油活性挥发成分,从而发挥效力。
105.实施例8、9、10与实施例3相比,混合溶剂依次为乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,乙醇、乙腈、石油醚的体积比为10:2:4;水、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙腈、石油醚的体积比为10:2:4;水、乙醇的混合溶剂,水、乙醇的体积比为4:6,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。对比例2与实施例3相比,未进行步骤s2混合溶剂提取步骤,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果明显下降。本发明利用水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂在超声波的作用下提取,水-乙醇-乙腈-石油醚混合溶剂的四相体系包含有极性溶剂水、乙醇、乙腈等,同时也包含了非极性溶剂石油醚,同时,经过微波干燥后,植物材料粉的细胞出现破裂损伤,进一步在超声波辅助提取下,进一步破裂,从而有助于活性物质的溶出和被溶剂“相似相溶”,从而被溶解到溶剂中,从而提高了活性物质在溶剂中的溶解度,提高了提取率。
106.实施例11、12与实施例3相比,复合酶为单一的纤维素酶或果胶酶,消炎、驱蚊效果下降。对比例3与实施例3相比,未进行步骤s3酶解步骤,消炎、驱蚊效果明显下降。本发明将过滤得到的固体采用复合酶酶解,复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,从而将植物细胞的细胞壁,果胶等酶解,从而进一步将细胞内大量的活性物质溶出,提高提取率,从而提高了得到的精油组合物的效果。
107.对比例1与实施例3相比,步骤s1中微波干燥改为真空干燥,消炎、灭螨、驱蚊效果下降。本发明首先将各组分采用微波干燥,相比传统的干燥方法,比如烘干的方法会使植物材料长时间暴露在高温空气中,引起萜烯类降解成单萜,同时醇类酯化形成酯类,从而改变了后期部分精油的组成。真空干燥由于长时间的真空处理会明显的改变精油的活性成分的类别和数量。红外干燥会引起氧化和化学结构重排,从而产生新的挥发性化合物,与植物本身含有的物质结构差异较大。本发明中采用微波干燥的方法可以提高植物材料内部温度较高,引起植物细胞损伤,细胞壁破裂,有利于挥发性复合物的释放。
108.对比例4、5、6与实施例3相比,步骤s1中未添加薄荷、尤加利、薰衣草,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。本发明薄荷精油中富含左旋薄荷醇、左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸癸酯、乙酸薄荷酯、苯甲酸甲酯、α-及β-蒎烯、β-侧柏烯、3-戊醇、2-已醇、3-辛醇、右旋月桂烯、柠檬烯、桉叶素、α-松油醇;尤加利精油中富含桉油醇、芳樟烯、樟脑、茴香萜、柚油萜;薰衣草精油中富含乙酸芳樟酯、芳樟醇、薰衣草醇、乙酸薰衣草酯、对-1-孟烯-4-醇、松油醇、石竹烯、别罗勒烯。各种原料协同增效,起到了很好的提神醒脑、开窍解郁、舒缓脏腑、呼吸舒畅、让人放松、心情愉悦、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒、活血化瘀,疏通经络,对跌打扭伤有效等功效。
109.对比例7与实施例3相比,未进行步骤s4发酵步骤,消炎、驱蚊效果明显下降。本发明采用发酵技术,进一步将植物细胞破坏,促进活性物质的溶出,进一步提高提取率,同时,
发酵过程也有助于产生一些活性芳香小分子,这些芳香小分子也有助于改善预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒等的效果。
110.对比例12与实施例3相比,未进行步骤s9,抑菌、消炎、灭螨、驱蚊效果下降。本发明经过聚多巴胺改性的微球,表面和内部含有丰富的聚多巴胺物质,聚多巴胺丰富的羟基、羧基、氨基、苯基,有助于与精油中的活性物质,如醇、酮、酸、酯等形成氢键,从而稳定的吸附活性物质,同时,苯基也易于与活性物质中的芳香基团如水杨酸甲酯等形成π-π共轭,从而稳定的固定在二氧化硅微球内部,提高微球对精油活性物质的载量。
111.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征:


1.一种多功能精油组合物的制备方法,其特征在于,将薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香经过微波干燥后混合粉碎,得到植物材料粉,植物材料粉经过混合溶剂超声波辅助提取,过滤,滤液浓缩,得到提取油,固体采用复合酶酶解、复合菌剂发酵,得到的发酵产物经过离子液体-乙腈的混合溶液提取,加入纳米磁流体萃取,得到萃取泥浆,将萃取泥浆加入有机溶剂中反向萃取,得到萃取液,将得到的萃取液与提取油混合,经陶瓷膜纯化后,浓缩,加入经过聚多巴胺改性的多孔道二氧化硅微球吸附,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香微波干燥后,混合,粉碎,得到植物材料粉;s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,超声波辅助提取,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂;s3.酶解:将步骤s2得到的固体加入水中,加入复合酶酶解,灭酶,得到酶解产物;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,发酵培养,灭菌,过滤,得到发酵产物;s5.离子液体提取:将步骤s4制得的发酵产物加入离子液体-乙腈的混合溶液中,缓慢通入co2,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;s6.活性物质的反向萃取:将步骤s5制得的萃取泥浆加入有机溶剂中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将步骤s2得到的提取油和步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将正硅酸烷基酯溶于有机溶剂中,得到油相;将致孔剂和表面活性剂溶于水中,得到水相;将油相加入水相中,spg快速膜乳化,调节ph值,加热反应固化,离心,洗涤,干燥,得到多孔道二氧化硅微球;s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于水中,加入多巴胺盐酸盐和催化剂,加热反应,离心,洗涤,干燥,得到改性多孔道二氧化硅微球;s10.多功能精油组合物的制备:将步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤s1中所述薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香的质量比为1-3:1-2:3-5:2-3:1-2:3-5:5-7;所述微波干燥的功率为1000-1500w,时间为1-2h;步骤s2中所述混合溶剂中水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为3-5:5-7:1-3:3-5;所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:3-5g/ml;所述超声波辅助提取的功率为500-700w,时间为30-50min。4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤s3中所述固体和复合酶的质量比为10:1-2;所述复合酶选自纤维素酶、果胶酶、半纤维素酶、淀粉酶、木质素酶中的至少两种;所述酶解采用的温度为40-60℃,时间为2-4h。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤s4中所述活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌的接种量分别为3-5%、2-4%、0.5-1.5%;所述发酵培养的条件为37-40℃,时间为24-48h;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,37-39℃,50-70r/min,培养12-18h,得到含菌量为10
8-109cfu/ml的菌种种子液;步骤s5中所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为5-7:1-2的混合溶液;所述离子液体选自1,3-二甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丁基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-戊基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-己基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-辛基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-癸基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十二烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十四烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-十六烷基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐、1-乙基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丁基-1-甲基吡咯烷双三氟甲磺酰亚胺盐、1-丙基-1-甲基双三氟甲磺酰亚胺盐、三丁基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵、三辛基甲基双三氟甲磺酰亚胺铵、三丁基十四烷基双三氟甲磺酰亚胺膦、三己基十四烷基双三氟甲磺酰亚胺膦中的至少一种;所述缓慢通入co2中co2的通入速率为0.5-1ml/min,通入时间为30-50min;所述纳米磁流体为1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体;所述发酵产物、纳米磁流体、离子液体-乙腈的混合溶液的质量比为10:2-3:15-20。6.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤s6中所述萃取泥浆和有机溶剂的质量比为2:3-5;所述有机溶剂选自二氯甲烷、、四氯化碳、乙酸乙酯、石油醚、乙腈、乙酸甲酯、正己烷中的至少一种;步骤s7中所述小孔径陶瓷膜的孔径为2000-3000d,所述超滤膜的孔径为30-100nm,所述纯化挥发油液的相对密度为1.4-1.7;所述提取油和萃取液的质量比为3-5:2-7。7.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤s8中所述正硅酸烷基酯为正硅酸甲酯或正硅酸乙酯;所述有机溶剂选自二氯甲烷、、四氯化碳、乙酸乙酯、石油醚、乙腈、乙酸甲酯、正己烷中的至少一种;所述致孔剂选自聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇辛基苯基醚、十六烷基三甲基溴化铵、氧乙烯-氧丙烯三嵌段共聚物peo20-ppo70-peo20、peo106-ppo70-peo10中的至少一种;所述表面活性剂为吐温-20、吐温-40、吐温-60、吐温-80、十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、十四烷基苯磺酸钠、十四烷基磺酸钠、十六烷基苯磺酸钠、十六烷基磺酸钠、十八烷基苯磺酸钠、十八烷基磺酸钠中的至少一种;所述正硅酸烷基酯、致孔剂和表面活性剂的质量比为10:2-3:0.5-1;所述spg快速膜的孔径为5000-7000nm;所述调节ph值至8-9,所述加热反应固化的温度为50-70℃,时间为3-5h;步骤s9中所述多孔道二氧化硅微球、多巴胺盐酸盐和催化剂的质量比为20:25-32:2-3;所述催化剂为含有3-5wt%的co
2+
的ph值为5-6的tris-hcl溶液,所述加热反应的温度为45-55℃,时间为2-4h;步骤s10中所述改性多孔道二氧化硅微球和纯化挥发油液的质量比为10-15:5-7。8.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:s1.植物材料的预处理:将1-3重量份薄荷、1-2重量份尤加利、3-5重量份薰衣草、2-3重量份丁香、1-2重量份香蜂草、3-5重量份迷迭香、5-7重量份广藿香,于1000-1500w微波干燥1-2h后,混合,粉碎,过60-100目筛,得到植物材料粉;
s2.混合溶剂提取:将步骤s1制得的植物材料粉加入混合溶剂中,所述植物材料粉和混合溶剂的固液比为1:3-5g/ml,500-700w超声波辅助提取30-50min,过滤,固体留用,滤液减压除去溶剂,得到提取油;所述混合溶剂为水、乙醇、乙腈、石油醚的混合溶剂,水、乙醇、乙腈、石油醚的体积比为3-5:5-7:1-3:3-5;s3.酶解:将10重量份步骤s2得到的固体加入100重量份水中,加入1-2重量份复合酶酶解,100-105℃灭酶15-20min,得到酶解产物;所述复合酶为纤维素酶、果胶酶的混合物,质量比为3-5:1;s4.发酵:向步骤s3得到的酶解产物中加入活化后的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌,接种量分别为3-5%、2-4%、0.5-1.5%,37-40℃发酵培养24-48h,紫外线灭菌,过滤,得到发酵产物;所述活化的方法为将的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌分别接种于高氏培养基中,37-39℃,50-70r/min,培养12-18h,得到含菌量为10
8-109cfu/ml的菌种种子液;s5.离子液体提取:将10重量份步骤s4制得的发酵产物加入15-20重量份离子液体-乙腈的混合溶液中,通入co2,通入速率为0.5-1ml/min,通入时间为30-50min,振荡,停止通入co2,得到高萃取离子液体-乙腈混合溶液,静置分层,分液,除去水层,加入2-3重量份1-羟乙基-3-甲基咪唑基fe3o4纳米磁流体,振荡吸附,磁性分离,洗涤,干燥,过滤,得到萃取泥浆;所述离子液体-乙腈的混合溶液为离子液体和乙腈按照质量比为5-7:1-2的混合溶液;s6.活性物质的反向萃取:将2重量份步骤s5制得的萃取泥浆加入3-5重量份有机溶剂中,搅拌萃取,磁性分离,去除有机溶剂,得到萃取液;s7.纯化:将3-5重量份步骤s2得到的提取油和2-7重量份步骤s6得到的萃取液混合均匀,采用孔径为2000-3000d的小孔径陶瓷膜过滤,收集小分子滤出后的滤过液,采用孔径为30-100nm的超滤膜浓缩,得到纯化挥发油液,相对密度为1.4-1.7;s8.多孔道二氧化硅微球的制备:将10重量份正硅酸甲酯或正硅酸乙酯溶于50重量份有机溶剂中,得到油相;将2-3重量份致孔剂和0.5-1重量份表面活性剂溶于100重量份水中,得到水相;将油相加入水相中,用孔径为5000-7000nm的spg快速膜乳化,调节ph值至8-9,加热至50-70℃,反应固化3-5h,离心,洗涤,干燥,得到多孔道二氧化硅微球;s9.改性多孔道二氧化硅微球的制备:将20重量份步骤s8制得的多孔道二氧化硅微球均匀分散于100重量份水中,加入25-32重量份多巴胺盐酸盐和2-3重量份催化剂,加热至45-55℃反应2-4h,离心,洗涤,干燥,得到改性多孔道二氧化硅微球;所述催化剂为含有3-5wt%的co
2+
的ph值为5-6的tris-hcl溶液;s10.多功能精油组合物的制备:将10-15重量份步骤s9制得的改性多孔道二氧化硅微球加入5-7重量份步骤s7制得的纯化挥发油液中,搅拌吸附,过滤,得到多功能精油微球,即为多功能精油组合物。9.一种如权利要求1-8任一项所述的制备方法制得的多功能精油组合物。10.一种如权利要求9所述的多功能精油组合物在制备提神醒脑、开窍解郁、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒的相关产品中的应用。

技术总结


本发明提出了一种多功能精油组合物及其制备方法和应用,属于植物精油技术领域。将薄荷、尤加利、薰衣草、丁香、香蜂草、迷迭香、广藿香,微波干燥,混合粉碎,混合溶剂超声波辅助提取,过滤,浓缩,得到提取油,固体采用复合酶酶解、复合菌剂发酵,发酵产物经过离子液体-乙腈的混合溶液提取,纳米磁流体萃取,得到萃取泥浆,反向萃取,得到的萃取液与提取油混合,陶瓷膜纯化,加入经过聚多巴胺改性的多孔道二氧化硅微球吸附,得到多功能精油组合物,具有提神醒脑、开窍解郁、舒缓脏腑、呼吸舒畅、让人放松、心情愉悦、预防感冒、顺畅鼻塞、缓解头晕头痛、止晕车晕船、预防蚊虫叮咬及咬后消肿止痒、活血化瘀,疏通经络,对跌打扭伤有效等功效。对跌打扭伤有效等功效。对跌打扭伤有效等功效。


技术研发人员:

陈国生 何永玲 邓悦新

受保护的技术使用者:

广东顺德芳香世家天然产品制造有限公司

技术研发日:

2022.11.02

技术公布日:

2022/11/29

本文发布于:2024-09-23 10:20:16,感谢您对本站的认可!

本文链接:https://www.17tex.com/tex/3/35999.html

版权声明:本站内容均来自互联网,仅供演示用,请勿用于商业和其他非法用途。如果侵犯了您的权益请与我们联系,我们将在24小时内删除。

标签:重量   精油   所述   步骤
留言与评论(共有 0 条评论)
   
验证码:
Copyright ©2019-2024 Comsenz Inc.Powered by © 易纺专利技术学习网 豫ICP备2022007602号 豫公网安备41160202000603 站长QQ:729038198 关于我们 投诉建议