组长：谭莹莹
组员：彭芳芳
马嘉
林梦
504762481@qq
Tel:159********
QQ：504762481
指导老师：张艳梅
完成日期：20011-9-21
实验申请实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂
实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.
实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、 电子天平。倒挂器
辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。
实验目的：
1.掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。
2.学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。
3. 巩固抽滤等基本操作。
4.了解薄层层析谱法的原理及操作。
实验原理：
卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。
参考文献： 刘宝全，所给实验资料.
tpml-1
组长：谭莹莹
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指导老师：张艳梅
完成日期：20011-9-21
实验操作实验操作步骤
实验一 卵磷脂的制备与提取
1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。
2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。
3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。
4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。
5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。
7.蒸发结束后，将烧瓶冷却至室温，称量整个烧瓶的重量。
8.收集产品，进行检测。
实验二 TLC检测
展开剂的选择：
各小组分别用不同的展开剂做检测，本小组用的是1:1的和乙酸乙酯，通过检测结果比较最终选用的展开剂为30:10:4:2的、甲醇、乙酸、水，操作如下：
1. 用毛细管在层析板距下端7mm处点两个样，自制卵磷脂样品和标准品，样点的间距问1cm。
2. 将展开剂置于层析缸中平衡30min，使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡，然后放入层析板，溶液自下而上在层析板上展开，当展开到距层析板上端7mm处即可取出，置室温下干燥。
3.将层析板放在碘瓶中显。
4.观察并测出Rf值。
操作流程图：
乙醚、石油醚
蒸发
显 展开 点样 TLC检测
tpml-2
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实验结果与分析实验一 卵磷脂的提去数据结果
本实验小组的实验结果
样品 | 蛋壳 | 蛋白 | 蛋黄 | 卵磷脂 |
质量(g) | 25.11 | 146.75 | 62.84 | 7.645 |
产率 | 12.17% |
| | | | |
产率 = = 12.17%
各小组在乙醇-石油醚和氯仿不同溶剂下的产率
小组 | 1 微安表 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
溶剂 | 乙醇-石油醚 | 氯仿 | 乙醇-石油醚 | 氯仿 | 乙醇-石油醚 | 氯仿 | 乙醇-石油醚 |
内作产率 | 21.36% | 10.7% | 9.84% | 20.35% | 12.17% | 22.13% | 8.83% |
| | | | | | | |
实验一 卵磷脂的提取数据分析
1. 组号为单号的实验小组均使用乙醇-石油醚作为提取卵磷脂的有机溶剂，为什么第3,5,7小组的产率在10%左右，而第1小组高达21.36%？组号为双号的实验小组均使用氯仿做为提取卵磷脂的有机溶剂，为什么第4,6小组的产率高达20%左右，而第二组仅有10.7%？
鸡蛋黄中的成分有脂肪，卵磷脂，蛋黄粉，胆固醇，维生素等。在第一步中用丙酮除油和水的过程中，有机溶剂的PH，浓度可能使得蛋黄残渣中仍含有脂肪，蛋白。在第二步中用
乙醇-石油醚和氯仿分别萃取卵磷脂时可能带有其他脂肪，使得产率偏高。通过实验数据，使用氯仿时的产率大于使用乙醇-石油醚，可能是因为乙醇-石油醚比氯仿更能使蛋白变性，氯仿能溶解残渣中其他脂肪及维生素，使得产率偏高。
实验一 卵磷脂提取的操作分析
1. 用丙酮分多次搅拌蛋黄，更好地清除油和水。
2. 用乙醇-石油醚分两次浸泡搅拌蛋黄残渣，能更好地萃取卵磷脂。
3. 用真空泵抽滤布氏漏斗时，不能用水浸湿滤纸，应为卵磷脂遇水会起泡，滤纸不能太大。抽完后应该先拔掉橡胶管在关真空泵的开关，避免倒吸。
tpml-3
林梦
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指导老师：张艳梅
完成日期：20011-9-21
实验二 TLC检测结果1. 展开剂为混合展开剂A（氯仿 ：乙酸乙酯为1:1 ）时显结果
经过测量，a = 3.5cm, b=3.1.
所以，Rf = =0.886.
各种展开剂下的标准卵磷脂显结果
经过各小组最后显结果,确定最佳混合展开剂B（氯仿：甲醇：乙酸：水为30:10:4:2）
tpml-4
2. 组长：谭莹莹
组员：彭芳芳
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指导老师：张艳梅
完成日期：20011-9-21
展开剂B的显结果 经过测量 a=3.6cm , b=2.2cm.
所以，Rf = ==0.611
各小组在展开剂B下的显结果
反垃圾邮件系统
tpml-5
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图像型火焰探测器
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实验讨论
提取卵磷脂的关键步骤
1.抽滤时滤纸的剪法
选择大小合适的布氏漏斗，放在滤纸上，用铅笔绕着漏斗的外径画圈，在滤纸上对应漏斗
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