（一） 组织印片：
1．用锋利刀片剖开刚切取的新鲜肿瘤组织或淋巴结等，然后用清洁载玻片轻压于组织剖面处，将组织表面的细胞成分印在玻片上。用稍微加温的载玻片制备印片时，可印得较多细胞。
2．制作淋巴结印片前，应先用滤纸吸去淋巴结切面上的血液、组织液。
（二）压片：
1．选取微小薄片组织平铺于一张载玻片上，再用另一张载玻片叠加其上并予轻压。
2．脑组织质软，易于制作压片；稍硬的组织需切成细碎薄片制作压片。
（一）用于HE染和巴氏染的涂片必须湿固定，即涂片后立即进行固定。乳头溢液涂片
和液体标本离心沉淀物涂片，应待涂膜潮干（即周膜稍干而其中央区域未干）时进行固定。用于瑞氏染、May-Grünwald姬姆萨染和免疫细胞化学染的涂片，必须干固定，即待涂片稍干后再进行固定。
（二）固定液
1．乙醇－冰醋酸液：95%乙醇∶冰醋酸＝99∶1。常用。 2．乙醇－乙醚液：95%乙醇49.5ml, 乙醚49.5ml, 冰醋酸1ml。较常用。
3．甲醇：滴加在干燥涂片上，用于瑞氏染、May-Grünwald姬姆萨染 和免疫细胞化学染。
4．丙酮：适用于酶类染。
5．Carnoy液：由无水乙醇、氯仿、冰醋酸按6:3:1比例混成，适用于显示核酸、糖原、黏液染。涂片在Carnoy液固定3～5min后，应移入95%乙醇中继续固定。
6．对于液体标本的离心沉淀物、食管拉网获取的小块组织或吸出物中的细小组织块等，固
定于4%中性甲醛液中1h，然后制作常规石蜡包埋切片。
远程电源管理（三）固定方法
1．浸入法：
（1）将稍为干燥（不能完全干燥）的涂片直接浸泡于固定液内至少15 ～ 30min。
（2）因细胞容易脱落，宜以一个盛有固定液的容器只固定一例标本的涂片；一个容器固定多例涂片时，有可能造成的肿瘤细胞交叉污染。
（3）必要时可将标本涂在硅化载玻片上，以防脱落。
（4）固定液重复使用时，应先用滤纸过滤。
（5）95%乙醇固定液多次重复使用时，需测定其浓度比重，乙醇浓度低于90%时应予弃用。
2．滴加法：将固定液滴加于平放的干燥涂片上，应避免因固定液挥发造成沉淀。
（四）固定后未染涂片的保存或邮寄：涂片固定15min后取出，立即滴加数滴甘油于涂膜上。对该涂片进行染前，应先将其置于95%乙醇中溶去甘油。
五、涂片的染
最常用于细胞病理学涂片检查的是苏木素－伊红（HE）染和巴氏染。
（一） 苏木素－伊红（HE）染。
（二） 染程序
1．石蜡切片HE染（常规HE染）
（1）二甲苯Ⅰ 5～10min
（2）二甲苯Ⅱ 5～10min
（3）无水乙醇Ⅰ 1～3min
（4）无水乙醇Ⅱ 1～3min
（5）95%乙醇Ⅰ 1～3min
（6）95%乙醇Ⅱ 1～3min
（7）80%乙醇 1min
（8）蒸馏水 1min
（9）苏木素液染 5～10min
（10）流水洗去苏木素液 1min
（11）1%盐酸-乙醇 1～3s
（12）稍水洗 1～2s
（13）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s
（14）流水冲洗 1～2min
（15）蒸馏水洗 1～2min
（16）0.5%伊红液染 1～3min
（17）蒸馏水稍洗 1～2s
（18）80%乙醇 1～2s
（19）95%乙醇Ⅰ 2～3min
（20）95%乙醇Ⅱ 2～3min
（21）无水乙醇Ⅰ 3～5min
（22）无水乙醇Ⅱ 3～5min
（23）石炭酸-二甲苯 3～5min
（24）二甲苯Ⅰ 3～5min
（25）二甲苯Ⅱ 3～5min
（26）二甲苯Ⅲ 3～5min
（27）中性树胶封固
注：①（12）和（13）项可省去，但（14）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。 ②（23）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。
2．冰冻切片HE染
（1）冰冻切片固定 10～30s
（2）稍水洗 1～2s
（3）苏木素液染（60℃） 30～60s
（4）流水洗去苏木素液 5～10s
止推垫圈（5）1%盐酸-乙醇 1～3s
（6）稍水洗 1～2min
（7）返蓝（用温水或1%氨水等） 5～10s
（8）流水冲洗 15～30s
（9）0.5%伊红液染 1～2min
（10）蒸馏水稍洗 1～2min
（11）80%乙醇 1～2min
（12）95%乙醇 1～2min
磁悬浮支架图片
（13）无水乙醇Ⅰ 1～2min
（14）无水乙醇Ⅱ 1～2min
（15）石炭酸-二甲苯 2～3min
（16）二甲苯Ⅰ 2～3min
（17）二甲苯Ⅱ 2～3min
（18）中性树胶封固
注：①（7）和（8）项可省去，但（9）的冲水时间需延长至10～15min（细胞核显示更清晰）。 ②（15）项可用无水乙醇代替；北方地区可省略。
㈡染结果：细胞核呈蓝，细胞浆、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红。钙盐和细菌可呈蓝或紫蓝。
㈢染注意事项
1．切片染前，应彻底脱蜡。
2．用含有液体固定的组织，其切片染前应先脱去汞盐：
（1）石蜡切片脱蜡至水洗
（2）Lugol液 20min
降膜吸收塔
（3）流水冲洗 5min
（4）95%乙醇 10min
（5）水洗 1min
（6）5%次亚硫酸钠水溶液 5min
（7）流水冲洗 5min
（8）显微镜观察除汞满意后，转入HE染
3．脱除福尔马林素（必要时）：
（1）石蜡切片脱蜡至水洗
（2）1%NaOH(1ml)与80%乙醇（99ml）混合液 10min
（3）流水冲洗 5min
（4）转入HE染
4．严格执行HE染流程，用显微镜控制细胞核的苏木素染质量。HE染片应着鲜艳，红、蓝分明，对比清晰。
5．载玻片自二甲苯中取出后，应立即用洁净、光亮的盖玻片和稠度适宜的中性树胶湿封载玻片。封盖处内无气泡，外无溢胶。封片时必须进行操作人员和局部环境的二甲苯污染防护。不应将组织切片烤干或风干后再行封片。 长线驱动器
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