一：实验目的
1、通过不同浓度的硫酸溶液刺激蟾蜍趾引起的屈肌反射，掌握反射时的测定 方法，了解刺激强度与反射时的关系。
2、通过脊蟾蜍分析屈肌反射反射弧的组成部分，探讨反射弧的完整性与反射
活动的关系。
二：实验原理
1、反射是指在中枢神经系统的参与下，机体对内外环境刺激的规律性应答。反射活动的基础是反射弧，典型的反射弧包括感受器、传入神经、神经中枢、传出神经和效应器五部分。一旦其中任何一个环节的解剖结构和生理完整性受到破坏，反射活动就无法实现。从皮肤接受刺激至机体出现反应的时间为反射时，它是反射通过反射弧所用的时间。在一定范围内，刺激越强，反射时越短；刺激越弱，反射时越长。 本实验中，涉及到的蟾蜍反射弧为：
趾皮肤中的感受器→大腿部的传入神经（混合在坐骨神经中）→神经中枢（脊髓）→大腿部的传出神经→大腿部的肌肉
kawd-445
由于脊髓的机能比较简单，所以常选用只毁脑的动物（脊蛙或脊蟾蜍）为实验材料，以利于观察和分析。
2、在实验动物的皮肤受到伤害性刺激时，受刺激一侧的肢体出现屈曲，关节的屈肌收缩，伸肌迟缓，称为屈肌反射，具有保护性意义。
三：实验材料
1、实验动物蟾蜍
2、实验器材常用手术器械、铁架台、蛙嘴夹、蛙板、小烧杯、点滴板、棉花、
滤纸片、塑料纸、秒表
3、实验试剂浓度分别为1%、0.5%、0.2%的硫酸溶液、2%普鲁卡因
四：实验步骤
消声室制作1、脊蟾蜍的制备用左手持蟾蜍，右手持毁髓针从枕骨大孔插入向前捣毁蟾蜍
的脑，并在枕骨大孔出左右划几下，切断脑与脊髓的连接，只保留脊髓制成脊蟾蜍。用蛙嘴夹夹住其下颌皮肤，确定其前肢无抓挠反应。
2、反射时的测定①将蛙嘴夹悬挂于铁架台上，用0.2%硫酸溶液刺激左肢（或
者右肢）的中趾趾端（浸没约1mm），同时启动秒表计时，当屈肌反射一出现立即停止计时，记下反射时。并立即用清水清洗蟾蜍的后肢，将硫酸洗净。
间隔约3~5min后继续进行下一次刺激，重复三次，求均值。如果三个值中某个值偏离其它两个较多，应多加一次或者两次刺激，以得到可信数值。②然后再依次用0.5%、1.0%浓度的硫酸溶液刺激其中趾，同样得到反射时的均值。
③在三个浓度中选取某浓度的硫酸溶液，用另一后肢（右肢）的中趾进行反
射时的测定。与之前得到的数值做对比，并进行分析。
3、反射弧的组成分析
①用手术剪将蟾蜍左后脚上的皮肤进行环切，然后用手术镊剥净其脚部的皮肤，用1%硫酸刺激去皮的中趾，进行观察其屈肌反射，观察到其并没有反应；改换其右后肢有皮肤的趾，将其浸入硫酸溶液中，观察到其有屈肌反射。
②沿蟾蜍右后肢背侧纵行剪开皮肤，在肱二头肌和半膜肌之间的沟内到坐骨神经干，在其下部将一宽约5mm的塑料纸条穿过，并再将一细棉条从坐骨神经干下、塑料纸条上穿过。用硫酸刺激右后肢的中趾，观察发现其有抓挠反射；在靠近坐骨神经干的细棉条上滴几滴普鲁卡因（不要直接滴在坐骨神
经干上），并立即计时，每隔一定时间用硫酸溶液刺激其右后肢中趾，当屈肌反射不再出现时记录时间，并立即将浸有1%硫酸溶液的滤纸片贴于蟾蜍右侧背部，观察其抓或擦反射，每隔一定时间用滤纸片刺激，直到抓或擦反射不再出现，记录时间。
③将蟾蜍的脊髓毁坏，用滤纸片贴于其左两侧的背部和腹部，观察其反应。
五：实验结果及分析
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①由表中数据可以看到，随着硫酸浓度的增高，反射时逐渐减少。因为随着硫酸浓度的增高，刺激强度也随之增大，使得兴奋在反射弧神经元之间的传递（突触传递）速度加快，反射时减少。
②从数据中还可以发现，在同一浓度的硫酸溶液刺激下，三次反应时呈现依次增加的规律，分析其原因：一是每次刺激前，蟾蜍中趾上的水滴并未完全吸干，使得硫酸的浓度逐渐减小，造成反射时的延长；二是每次刺激后由于未及时并充分洗去蟾蜍中趾上的硫酸，其皮肤上的感受器已经对该刺激有了一定的适应性，所以敏感度下降。
2、反射弧的分析：
①蟾蜍的左后肢中趾去皮后不再对硫酸的刺激产生屈肌反射，而未去皮的右后肢中趾依然对硫酸刺激产生屈肌反射，说明蟾蜍趾部硫酸刺激的感受器位于皮肤内。
②蟾蜍右后肢坐骨神经干加上麻醉药后，2分49秒后用硫酸溶液刺激其同侧中趾屈肌反射消失，说明传入神经彻底被麻醉；用浸有1%硫酸溶液的滤纸片贴于蟾蜍右侧背部，其后肢仍具有屈肌反射，5分20秒后贴滤纸片已不会引起反射，说明传出神经彻底被麻醉。
③将蟾蜍毁髓后，用浸有硫酸的滤纸片刺激皮肤不产生任何反射，说明脊髓是蟾蜍屈肌反射的神经中枢。
④由以上分析可知，蟾蜍后肢的屈肌反射弧的组成为：皮肤（感受器）→坐骨神经（传入神经）→脊髓（神经中枢）→坐骨神经（传出神经）→腿部肌肉（效应器）。反射弧的完整性是反射活动的基础，破坏反射弧的任何一部分均导致反射活动无法实现。
⑤实验结果还表明，一侧反射弧的完整性与否不影响对侧屈肌反射的功能。
六：注意事项
1、每次用硫酸刺激时，趾进入硫酸中的面积应相同，以保持相同数目的感受器
受到刺激，保持实验条件的严谨；
三联件2、每次刺激后，应迅速用清水冲洗蟾蜍的趾部，洗净残余的硫酸，以保持感受
器对硫酸刺激的敏感性；
3、每两次刺激之间间隔3~5min，以使反射弧恢复其灵敏性。
4、在每次刺激开始时，注意用吸水纸将蟾蜍趾部的水轻轻蘸掉，以防趾部残余
的水分稀释硫酸溶液，给反射时的测定造成影响。
5、剥掉趾部皮肤时，一定注意趾尖不要残留皮肤，否则刺激仍能引起反射。
七：思考题
1、怎样测定反射时才更加准确？
多视点
①实验刺激时要保证蟾蜍的脑部被破坏完全，确定其前肢无抓挠反应，以免脑
部的高级神经结构对脊髓反射造成影响。
②保证每次刺激浸入硫酸中的趾尖长度一致，保证每次受到刺激的感受器数目3d打印玻纤
大致相同，且约1mm左右，不要过长，以免感受器太多，屈肌反射太快，计时的误差会比较大。
防静电推车③实验要重复多次，取多个相近数据的均值。
④每次刺激前尽量使蟾蜍趾部无水分残留，或者每次刺激前都更换一次相应浓
度硫酸溶液，以保证浓度一致。
⑤每次刺激后迅速用清水洗去皮肤上残留的硫酸，防止其对刺激产生适应。
⑥实验过程中要用任氏液保持蟾蜍皮肤的湿润，保证其正常的呼吸。
⑦小组成员之间配合要默契，保证刺激与计时的同步性以及反射发生与计时终
止的同步性。
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