·小专论·
马小龙 王 宪 冯 娟△
（北京大学基础医学院生理学与病理生理学系；分子心血管学教育部重点实验室，北京１００１９１）
摘要 一氧化氮（ＮＯ）是心血管系统、免疫系统和中枢神经系统中重要的信号分子。适应性免疫系
统由Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞组成，其主导的细胞免疫应答和体液免疫应答是机体清除病原、维 持免疫稳态的核心。ＮＯ在适应性免疫细胞的发育、分化、激活等多种过程中发挥重要作用，同时
对适应性免疫反应参与的肿瘤、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等多种病理过程具有重要的调
控作用。因此，认识ＮＯ信号在适应性免疫中的作用；ＮＯ对适应性免疫系统相关疾病的研究和干
预靶点的寻至关重要。本文将从ＮＯ的来源和多种作用机制出发，集中介绍ＮＯ在适应性免疫
聚氨酯浆料系统及自身免疫病等多种相关疾病中的研究进展。
关键词 一氧化氮；适应性免疫系统；巯基亚硝基化
中图分类号 Ｒ３６３；Ｒ３９２
监控杆基础
１９９８年诺贝尔生理学或医学奖被授予发现细胞可产生一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）并作为“内皮来源舒张因子”在血管舒张作用中的系列工作。随后ＮＯ作为心血管系统、免疫系统和中枢神经系统中重要信号分子的角被逐渐阐明。ＮＯ除了在固有免疫系统清除病原、介导炎症等过程中发挥重要作用外，在由Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞组成的免疫系统中也存在重要调控作用。本文将对ＮＯ在适应性免疫系统及其肿瘤、自身免疫病、病毒感染等相关疾病中的作用进行综述。
一、ＮＯ的来源
哺乳动物细胞在生理和病理状态下均能广泛产生内源性ＮＯ。在哺乳动物细胞中，ＮＯ的经典来源是由三种一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳｓ）所介导，分别是神经元型一氧化氮合酶（ｎｅｕ ｒｏｎａｌＮＯＳ，ｎＮＯＳ，又称ＮＯＳ１）、诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｉｂｌｅＮＯＳ，ｉＮＯＳ，又称ＮＯＳ２）和内皮型一氧化氮合酶（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＮＯＳ，ｅＮＯＳ，又称ＮＯＳ３）。其中ｎＮＯＳ和ｅＮＯＳ的表达具有钙离子依赖性和
广泛的细胞和组织分布，其产生的ＮＯ在皮摩尔（ｐＭ）或纳摩尔每升（ｎＭ）水平。ｉＮＯＳ同样具有广泛的分布，但不依赖于钙离子信号，在细胞静息状态下不表达或很少表达，其在局部可产生微摩尔每升（μＭ）水平的ＮＯ。促炎信号或氧化应激等均能够促进ｉＮＯＳ的表达。病理条件下，巨噬细胞等髓系细胞来源的ＮＯ能以旁分泌的形式调控其他细胞的功能。因此ｉＮＯＳ广泛参与调控机体对抗原刺激、营养应激等的响应。
除了细胞内部ＮＯＳｓ，皮肤组织含有光敏感性的ＮＯ衍生物亚硝酸盐和亚硝基硫醇，经紫外线作用可被转化为ＮＯ（Ｏｐｌａｎｄｅｒ等．２０１３）；食物和肠道菌来源的硝酸盐或亚硝酸盐经机体代谢产生ＮＯ；此外，肠道菌ＮＯＳｓ来源的ＮＯ也可参与机体功能调控［１］。以上非经典来源也是机体ＮＯ储备池的重要调节机制，广泛参与生理和病理性过程的调控。
二、ＮＯ的作用机制
医用手套ＮＯ具有高度活跃的属性，能够与多种自由基和活跃金属离子发生反应。目前认为ＮＯ的信号途径主要有三条：（１）直接与亚铁离子血红素蛋白结合，激活可溶性鸟苷酸环化酶（ｓｏｌｕｂｌｅｇｕａｎｙｌａｔｅｃｙ ｃｌａｓｅ，ｓＧＣ） 环磷酸鸟苷（ｃｙｃｌｉｃｇｕａｎｏｓｉｎｅｍｏｎｏｐｈｏｓ ｐｈａｔｅ，ｃＧＭＰ）信号通路；（２）与其他自由基如超氧化物等反应；与脂质过氧化物进行链终止反应；以及与硫醇自由基反应形成亚硝基化硫醇（Ｒ ＳＮＯ）；（３）与氧气（Ｏ
２
）或活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）发生氧化反应［２］。ＮＯ的经典作用机制在其他综述已有较详尽介绍。下文我们将就ＮＯ的非经 国家自然科学基金（８１６７０４１３；９１７３９３０３；９１９３９１０５；８１７７０４４５）资助课题
△通讯作者 ｊｕａｎｆｅｎｇ＠ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
典作用机制———巯基亚硝基化进行重点介绍。１９９２年，Ｓｔａｍｌｅｒ等（１９９２）首次报道在血浆中ＮＯ能够以蛋白质为载体，对蛋白质的巯基半胱氨酸进行亚硝基化修饰，并以这一硫醇的形式存在于循环系统中。经ＮＯ修饰的蛋白质具有和ＮＯ类似的血管舒张和血小板抑制作用。该研究首次揭示了ＮＯ的巯基亚硝基化作用机制，开启了ＮＯ研究的新领域。之后的系列工作表明，除了蛋白质，ＮＯ也能对某些化合物中特定半胱氨酸残基中的自由基（ ＳＨ）进行修饰，即以共价键的形式结合，形成亚硝基硫醇（Ｓ ｎｉ ｔｒｏｓｏｔｈｉｏｌｓ，ＳＮＯｓ）。由于ＮＯ极不稳定，在血浆或细胞内更多的是以亚硝基硫醇的形式存在。其中以巯基亚硝基谷胱甘肽（Ｓ ｎｉｔｒｏｓｏｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，ＧＳＮＯ）、巯基亚硝基半胱氨酸（Ｓ ｎｉｔｒｏｓｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＣＳＮＯ）、巯基亚硝基化的白蛋白、磷酸甘油醛脱氢酶（ｇｌｙｃｅｒａｌｄｅ ｈｙｄｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＧＡＰＤＨ）居多。在特定条件下，这些亚硝基硫醇释放 ＮＯ或直接以转亚硝基化（ｔｒａｎｓｎｉｔｒｏｓｙｌａｔｉｏｎ）作用对靶蛋白进行修饰。在巯基亚硝基化的调控中，外源性ＮＯ或ＮＯＳ来源的ＮＯ促进其发生，同时巯基亚硝基谷胱甘肽还原酶（Ｓ ｎｉｔｒｏｓｏｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＧＳＮＯＲ）和硫氧还蛋白（ｔｈｉｏｒｅｄｏｘｉｎ，Ｔｒｘ）等还原酶介导去亚硝基化作用，减少巯基亚硝基化。亚硝基化还原酶受众多生物过程调控，因此也是细胞巯基亚硝基化水平的重要调节因子。巯基亚硝基化能够调控蛋白质的生物活性、细胞内定位、稳定性和蛋白质间相互作用。而随着巯基亚硝基化蛋白质组学的建立，ＮＯ的大量蛋白质修饰位点被鉴定，其中以代谢酶居多（Ｚｈａｎｇ等．２０１０）。庞大的靶蛋白质库极大地开拓了人们对于ＮＯ生理和病生理作用的认知。
三、ＮＯ在Ｔ细胞中的作用
Ｔ细胞介导免疫耐受、免疫稳态和免疫记忆，是机体对抗病毒感染、肿瘤等的重要免疫细胞。同时Ｔ细胞也是许多炎症和自身免疫病的驱动因素。ＮＯ信号在Ｔ细胞的发育、分化、激活等多个环节发挥重要调控作用，影响Ｔ细胞在多种疾病中的作用。而作用于Ｔ细胞的ＮＯ由两条途径提供：（１）Ｔ细胞内ｅＮＯＳ、ｉＮＯＳ的表达产生内源性ＮＯ；（２）来自于微环境中树突细胞、巨噬细胞的外源性ＮＯ。
（一）ＮＯ对Ｔ细胞发育和分化的作用 高浓度ＮＯ具有普遍的免疫抑制效应，包括对１型辅助性Ｔ
细胞（ｔｙｐｅ１Ｔｈｅｌｐｅｒｃｅｌｌｓ，Ｔｈ１）、２型辅助性Ｔ细胞（ｔｙｐｅ２Ｔｈｅｌｐｅｒｃｅｌｌｓ，Ｔｈ２）、１７型辅助性Ｔ细胞（ｔｙｐｅ１７Ｔｈｅｌｐｅｒｃｅｌｌｓ，Ｔｈ１７）等细胞的分化与效应功能。而低浓度ＮＯ在不同细胞、不同生物过程中都扮演着不同角。
Ｔｈ１细胞和Ｔｈ２细胞的平衡维持免疫稳态。１９９８年，Ｌｉｅｗ等课题组发现ｉＮＯＳ敲除鼠的Ｔｈ１细胞反应明显增强。当时认为其可能原因是脾脏细胞ｉＮＯＳ来源的ＮＯ抑制ＩＬ １２的产生，从而抑制Ｔｈ１细胞的分化（Ｍａｃｌｅａｎ等．１９９８）。此后系列工作表明，主要是由巨噬细胞ｉＮＯＳ来源的高水平ＮＯ介导以上的抑制作用。而低水平ＮＯ则以ｃＧＭＰ信号依赖性的方式上调Ｔｈ１细胞ＩＬ １２Ｒｂ２的表达，促进Ｔｈ１细胞分化和扩增，但对Ｔｈ２细胞无影响（Ｎｉｅｄ ｂａｌａ等．２００２）。由此可见，不同浓度的ＮＯ对Ｔｈ１细胞分化的影响可能不同。
Ｔｈ１７细胞在多数自身免疫病中扮演着重要角。Ｔ细胞ｉＮＯＳ来源的ＮＯ可通过对转录因子维甲酸相关孤儿受体γｔ（ｒｅｔｉｎｏｉｄ ｒｅｌａｔｅｄｏｒｐｈａｎｒｅｃｅｐ ｔｏｒγｔ，ＲＯＲγｔ）进行硝基化修饰，抑制ＲＯＲγｔ介导的ＩＬ １７启动子激活，从而在转录水平抑制ＩＬ １７表达和Ｔｈ１７细胞的分化［３］。另一项研究表明，由ＮＯ供体或髓系来源抑制细胞（ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｒｉｖｅｄｓｕｐｐｒｅｓ ｓｏｒｃｅｌｌｓ，ＭＤＳＣｓ）提供的低水平外源性ＮＯ（１０～２５μＭ）能够促进ＲＯＲγｔ＋ＩＬ ２３Ｒ＋ＩＬ １７＋Ｔｈ１７细胞的分化［４］。
Ｔｈ９细胞在机体抗寄生虫感染中发挥保护作用，也能介导过敏反应。ＮＯ能够对Ｅ３泛素蛋白连接酶ＭＤＭ２进行巯基亚硝基化修饰，抑制其活性，进而促进ｐ５３表达，上调ＳＴＡＴ５磷酸化、ＩＲＦ４活性，以及ＩＬ ２、ＩＬ ４Ｒａ和ＴＧＦ βＲ２表达，促进Ｔｈ９细胞的分化。ｉＮＯＳ敲除鼠表现为抗原卵清白蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）诱导的哮喘模型的呼吸道炎症局部Ｔｈ９细胞的数量减少［５］。
ｉＮＯＳ敲除鼠的γδＴ细胞数量明显减少。抑制ｉＮＯＳ后，γδＴ细胞的增殖和糖酵解水平明显降低。这表明ｉＮＯＳ来源的ＮＯ对γδＴ细胞的发育具有促进作用［６］。
由此可见，不同浓度的ＮＯ对不同发育阶段、不同细胞亚的增殖、分化、代谢状态和效应功能等的影响均存在明显差别。但该调控作用仍十分模糊，尚需更多研究来明确。
（二）ＮＯ对Ｔ细胞激活和生存的影响 核因子 κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａ Ｂ，ＮＦ κＢ）信号对Ｔ细胞发育、生存和炎性激活有重要调控作用。ＮＯ能够对ＮＦ κＢ信号通路的多个靶点进行巯基亚硝基化修饰。在ＪｕｒｋａｔＴ细胞的研究表明，ＮＯ对ＩＫＫβ的
Ｃｙｓ１７９位点进行巯基亚硝基化修饰，抑制ＮＦ κＢ介导的Ｔ细胞激活（Ｒｅｙｎａｅｒｔ等．２００４）。ｅＮＯＳ来源的ＮＯ可对小ＧＴＰ酶Ｎ Ｒａｓ的Ｃｙｓ１１８位点进行修饰，抑制Ｔ细胞激活及其诱导的细胞死亡（Ｉｂｉｚａ等．２００４）。
提拉下水
此外，亚硝基化还原酶ＧＳＮＯＲ敲除小鼠使得细胞内ＮＯ的降解减少，蛋白质巯基亚硝基化水平升高，在胸腺中表现为Ｔ细胞凋亡增加，数量减少（Ｙａｎｇ等．２０１０）。这表明ＮＯ除了生成途径以外，其代谢去路也能够通过调控某些凋亡相关蛋白的巯基亚硝基化水平而调控Ｔ细胞发育。
细胞“代谢重编程”是细胞面对外界刺激和生存压力做出的重大调整。１９９４年，Ｓｃｈａｐｉｒａ和Ｃｏｏｐ ｅｒ的两个课题组先后发现ＮＯ在生理浓度下即可与Ｏ
螺旋伞齿轮２
竞争性结合神经细胞线粒体复合体ＩＶ组分细胞素ｃ，对线粒体呼吸起抑制作用（Ｃｌｅｅｔｅｒ等．１９９４）。随后在Ｔ细胞系Ｊｕｒｋａｔ细胞中的研究表明，外源性和内源性ＮＯ均可以抑制Ｔ细胞线粒体呼吸，使线粒体呈现高极化状态。且Ｊｕｒｋａｔ细胞ＮＯ水平升高早期会表现出抑制凋亡的效应；晚期线粒体发生去极化，ＲＯＳ产生增多，外膜完整性受损，细胞生存力降低。因此ＮＯ水平升高被认为是Ｔ细胞对抗促凋亡信号的早期保护机制，维持Ｔ细胞生存。
四、ＮＯ在Ｂ细胞中的作用
Ｂ淋巴细胞是适应性免疫系统的重要组成，其分泌抗体是体液免疫的核心作用方式。同时，Ｂ细胞还有抗原呈递和细胞因子分泌等重要功能。同Ｔ细胞类似，Ｂ细胞从幼稚细胞发育为成熟的具有生物功
能的细胞需要经历漫长的过程，在其发育、激活、抗体分泌等众多过程中存在众多影响因素，ＮＯ信号也是其中之一。
（一）ＮＯ在Ｂ细胞中的来源 １９９４年，Ｍａｎｎｉｃｋ等在Ａｋａｔａ和Ｂ ９５８等人类疱疹病毒第四型（ｅｐ ｓｔｅｉｎ ｂａｒｒｖｉｒｕｓ，ＥＢＶ）转化的人Ｂ淋巴细胞系中发现ｉＮＯＳ有持续低水平的表达。其产生的ＮＯ可通过下调ＥＢＶ反式激活因子Ｚｔａ的表达，维持ＥＢＶ的潜伏状态。同时，ＮＯ也会以ｃＧＭＰ非依赖的方式，调控细胞的氧化还原状态而抑制Ｂ淋巴细胞的凋亡。１９９８年，Ｚｈａｏ等人在多种慢性Ｂ细胞淋巴瘤中证实了ｉＮＯＳ的表达，同样是起抗凋亡作用。后被证明，慢性淋巴瘤细胞的ｉＮＯＳ表达可受细胞因子ＩＬ ４和ＩＦＮ γ调控，对Ｂ细胞生存起到促进作用（Ｌｅｖｅｓｑｕｅ等．２００３）。在原代细胞中，ＮＯ供体ＳＩＮ １（３ ｍｏｒ ｐｈｏｌｉｎｏｓｙｄｎｏｎｉｍｉｎｅ）刺激分离自小鼠脾脏的Ｂ细胞，能够使Ｂ细胞ｃＧＭＰ水平升高，抗凋亡基因Ｂｃｌ ２表达增加，Ｂ细胞凋亡减少。同样，外源性地添加可穿膜的ｃＧＭＰ能够模拟ＮＯ供体的效应，也可观察到其抗Ｂ细胞凋亡的效应（Ｇｅｎａｒｏ等．１９９５）。１９９６年，ＮｏｒｂｅｒｔＲｅｉｌｉｎｇ等人在信使ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）水平发现Ｂ细胞可表达ｅＮＯＳ。当Ｂ细胞激活后，其ｅＮＯＳ表达降低，但其功能仍未被揭示。由此可见，Ｂ细胞可能主要以表达ｉＮＯＳ为主，且研究多集中在ＮＯ的抗凋亡作用。
（二）ＮＯ在Ｂ细胞分化、存活以及抗体分泌中的作用 ｉＮＯＳ在促浆细胞生存信号的调控中起着
重要作用。ｉＮＯＳ缺失的情况下浆细胞的生存时间更短，但对Ｂ细胞的激活和终末分化没有明显影响。通过ｉＮＯＳ敲除或抑制剂的方法证明ｉＮＯＳ以ＮＯ ｃＧＭＰ ＰＫＧ的通路参与调控ＩＬ ６和ＡＰＲＩＬ这两个重要的促浆细胞化因子的信号通路，维持骨髓细胞中浆细胞的生存［７］。
外源性ＮＯ也是Ｂ细胞功能的重要调控因子。２００７年，Ｔｅｚｕｋａ等［８］研究表明，粘膜相关淋巴组织（ｍｕｃｏｓａ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｉｄｔｉｓｓｕｅｓ，ＭＡＬＴ）树突细胞通过Ｔｏｌｌ样受体感知来自粘膜腔细菌或细菌成分的刺激，上调ｉＮＯＳ的表达，进而可调控在粘膜免疫中发挥重要作用的ＩｇＡ的分泌。机制是ｉＮＯＳ既可以通过调控ＴＧＦβ受体的表达而调控Ｔ细胞依赖性的ＩｇＡ类别转换重排，也可以通过调控增殖诱导配体（ａｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ，ＡＰＲＩＬ）和Ｂ细胞激活因子（Ｂｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＢＡＦＦ）的生成来调控不依赖Ｔ细胞的ＩｇＡ类别转换重排。而敲除ｉＮＯＳ后，小鼠的ＩｇＡ类别转换重排明显减少，ＩｇＡ产生减少。该结果提示树突细胞ｉＮＯＳ来源的ＮＯ促进ＩｇＡ的产生。
２０１４年，Ｇｉｏｒｄａｎｏ等［９］在ｉＮＯＳ敲除鼠中又发现了相悖的现象。他们发现ｉＮＯＳ敲除鼠在Ｔ细胞依赖性抗原ＮＰ ＣＧＧ免疫后，Ｔ细胞依赖性抗体反应轻度增加，但在Ｔ细胞不依赖的２型（ＴＩ ２）抗原ＮＰ Ｆｉｃｏｌｌ免疫后，小鼠脾脏边缘Ｂ细胞、浆细胞和腹膜Ｂ１ｂ细胞的数量明显增加，ＴＩ ２型抗体反应增加２～３倍。机制上认为，ｉＮＯＳ敲除的Ｌｙ６Ｃｈｉ单
核细胞和单核细胞来源的树突细胞产生ＢＡＦＦ的水平明显增强，导致对Ｂ细胞的激活和浆细胞化增强。因此，单核细胞和单核细胞来源树突细胞的外源性ＮＯ能够抑制对ＢＡＦＦ的产生，从而抑制Ｂ细胞功能。
五、ＮＯ在Ｔ、Ｂ细胞相互作用中的角
作为适应性免疫的两种主要组成细胞，Ｂ细胞分化、增殖、激活等过程离不开Ｔ细胞的辅助。同时，Ｂ细胞来源信号也是Ｔ细胞功能的重要调控因素。由于目前缺乏ＮＯ调控Ｔ Ｂ相互作用的直接证据。所以这部分仅提供一些相关的提示和线索。
Ｂ细胞是专职的抗原呈递细胞。主要组织相容性复合体ＩＩ（ｍａｊｏｒｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｏｍｐｌｅｘＩＩ，ＭＨ ＣＩＩ）是Ｂ细胞抗原呈递的重要介导分子。有研究表明，抗原呈递细胞（ａｎｔｉｇｅｎｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇｃｅｌｌｓ，ＡＰＣｓ）来源的ＮＯ能显著抑制ＣＤ８＋Ｔ的增殖和ＩＦＮγ分泌；ＤＣｓ在脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）刺激下可产生大量ＮＯ，能够显著抑制ＣＤ４＋Ｔ细胞的ＩＦＮ γ分泌（Ｈｏｆｆｍａｎ等．２００２）。这些研究提示我们ＮＯ可能参与Ｔ细胞与抗原呈递细胞（或许包括Ｂ细胞等）间的相互作用。
另一项研究发现李斯特菌感染小鼠后会导致其Ｂｒｅｇ细胞的快速扩增，Ｂｒｅｇ以ＩＬ １０依赖的
方式抑制炎症状态。用ＣＤ２２单克隆抗体清除小鼠Ｂｒｅｇ细胞，其巨噬细胞吞噬作用增强，产生ＩＦＮ γ、ＴＮＦ α和ＮＯ的能力也显著增强。巨噬细胞对病原的有效清除导致抗原特异的ＣＤ４＋Ｔ细胞的增殖和细胞因子产生明显减少；当Ｂｒｅｇ细胞缺乏ＩＬ １０、ＭＨＣＩＩ或ＩＬ ２１受体时对病原的清除作用消失［１０］。这些结果表明Ｂｒｅｇ细胞可通过ＩＬ １０抑制固有免疫细胞对ＣＤ４＋Ｔ细胞的激活，而Ｂ细胞自身ＭＨＣＩＩ介导的抗原呈递可能也参与其中。
六、ＮＯ在适应性免疫细胞功能相关疾病中的作用
（一）Ｔ细胞ＮＯ与相关疾病
１．肿瘤：Ｔ细胞在肿瘤的发生发展中扮演着重要角。细胞毒性ＣＤ８＋Ｔ细胞耗竭、免疫抑制性Ｔｒｅｇ细胞的累积等会导致机体对肿瘤细胞的监控和清除能力降低。其中ＮＯ对Ｔ细胞介导的适应性免疫的功能调控也在Ｔ细胞参与的抗肿瘤作用中扮演重要角。
有报道表明肿瘤局部表达肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ受体的巨噬细胞与ＣＤ８＋Ｔ细胞接触后，激活ＣＤ８＋Ｔ细胞使其释放γ干扰素（ｉｎｔｅｆｅｒｏｎ ｇａｍａ，ＩＦＮ γ），后者作用于巨噬细胞，诱导ＮＯ的产生。而巨噬细胞来源ＮＯ具有很强的促ＣＤ８＋Ｔ细胞凋亡的作用，减弱ＣＤ８＋Ｔ细胞对肿瘤的杀伤作用。这表明ＮＯ信号参与Ｔ细胞抗肿瘤过程。另外，ＣＤ４＋Ｔ细胞表达ｉＮＯＳ可抑制ＴＧＦβ产生，
抑制ＣＤ４＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇ细胞的分化，进而减少肿瘤耐受作用。通过给予负载肿瘤小鼠环磷酰胺和ｉＮＯＳ抑制剂Ｌ Ｎ６ 亚氨乙基 赖氨酸（Ｌ Ｎ６ ｌｙｓｉｎｅｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ，Ｌ ＮＩＬ）可显著降低肿瘤微环境中ＭＤＳＣｓ，增多ＣＤ８＋Ｔ细胞，抑制肿瘤生长。Ｔ细胞过继免疫（ａｄｏｐｔｉｖｅＴ ｃｅｌｌｔｈｅｒａｐｙ，ＡＣＴ）中，在小鼠Ｂ１６黑素瘤模型回输的Ｔ细胞可在３天到达肿瘤部位，分泌ＩＦＮ γ，发挥抗肿瘤作用。但在第５天会有ＭＤＳＣｓ以趋化因子ＭＣＰ／ＣＣＬ２受体ＣＣＲ２依赖的方式迁移浸润在肿瘤局部，并产生ＮＯ、Ａｒｇ１和ＲＯＳ，抑制肿瘤特异的ＣＤ８＋Ｔ细胞增殖，对于ＡＣＴ抗肿瘤效应起抑制作用［１１］。另一项研究表明ＣＤ８＋Ｔ细胞抗肿瘤过继疗法也伴随着可同时产生ＴＮＦ和ｉＮＯＳ的ＤＣ细胞（ＴＮＦａｎｄｉＮＯＳ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇＤＣ，Ｔｉｐ ＤＣ）的扩增［１２］。由此可知，ＮＯ在Ｔ细胞介导的抗肿瘤效应中发挥着重要作用。
２．自身免疫病：自身免疫病是适应性免疫细胞获得自身抗原反应性，造成机体多种器官、组织受损的一大类疾病。众多研究表明，自身免疫病的发生与ＮＯ调控适应性免疫相关。
（１）系统性红斑狼疮：Ｔ细胞内源性ＮＯ对系统性红斑狼疮（ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ，ＳＬＥ）具有一定拮抗作用。ｅＮＯＳ缺失抑制ＮＯ的产生和钙离子浓度的增加，加速ＳＬＥ的发生［１３］。虽然在一项研究中发现，自发性ＳＬＥ的模式动物ＭＲＬ／ｌｐｒ小鼠中的ＣＤ４＋Ｔ细胞的线粒体表现为高极化状态，ＮＯ、超氧化物产生增加，钙离子浓度增加，
可能在发病初期抑制ＳＬＥ的进程。此外，在ＳＬＥ模型中，间充质干细胞（ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）ｉＮＯＳ来源的ＮＯ可抑制滤泡辅助性Ｔ细胞（Ｔｆｏｌｌｉｃｕｌａｒｈｅｌｐｅｒｃｅｌｌｓ，Ｔｆｈｃｅｌｌｓ）的增殖，对疾病起保护作用［１４］。
线粒体是细胞的“能量工厂”，也是生物合成的重要细胞器。ｅＮＯＳ来源的ＮＯ能够以ｃＧＭＰ依赖的方式促进过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子 １α（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ ａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ γ（ＰＰＡＲγ）ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒ１α，ＰＧＣ １α），促进线粒体生物合成，产生更多线粒体ＤＮＡ及新的具有功能活性的线粒体，促进氧化磷酸化介导的ＡＴＰ生成［１５］。有报道显示ＳＬＥ模型小鼠ＣＤ４＋Ｔ细胞糖酵解和线粒体氧化磷酸化水平均明显升高，如纠正ＣＤ４＋Ｔ细胞的代谢状态能够改善自身免疫病ＳＬＥ［１６］。这提示我们Ｔ细胞线粒体生物合成可能通过影响能量代谢参与ＳＬＥ的发生发展。
线粒体融合和分裂是线粒体维持稳态的重要方式。Ｔ细胞线粒体分裂诱导蛋白Ｄｒｐ１的缺失会造成线粒体分裂障碍，促进ＳＬＥ的发生［１７］。而ＮＯ能够对Ｄｒｐ１进行巯基亚硝基化修饰（Ｃｈｏ等．２００９）。在Ｔ细胞中巯基亚硝基化的Ｄｒｐ１能够促进ＲＯＳ产生，激活ＮＦ κＢ信号，促进Ｔ细胞增殖及激活诱导的细胞死亡（Ｒｏｔｈ等．２０１４）。因此，ＮＯ可能通过巯基亚硝基化Ｄｒｐ１的方式调控Ｔ细胞线粒体分裂和氧化信号，影响ＳＬＥ的发生发展。能效监测终端
（２）其他自身免疫病：在实验性自身免疫性心肌炎模型中，ＩＦＮ γ受体缺失会导致ＣＤ４＋Ｔ细胞ｉＮＯＳ表达受到抑制，小鼠会发生更严重的心肌炎。同样，ＮＯＳ抑制剂Ｌ ＮＡＭＥ会促进ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖，延缓小鼠损伤修复过程，促进心肌炎的发生（Ｅｒｉｋｓｓｏｎ等．２００１）。而ＴＬＲ２介导的固有免疫信号能够促进单核细胞向Ｔｉｐ ＤＣ的分化，Ｔｉｐ ＤＣｉＮＯＳ来源的ＮＯ进而抑制ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖，从而抑制自身免疫性心肌炎的发生（Ｋａｎｉａ等．２０１３）。
在实验性自身免疫性脑脊髓炎模型中，ＮＯ供体ＧＳＮＯ抑制ＳＴＡＴ３磷酸化和ＲＯＲγ表达，从而抑制Ｔｈ１７细胞的分化，减轻脑脊髓炎的症状（Ｎａｔｈ等．２０１０）。ｉＮＯＳ敲除小鼠则加重自身免疫性脑脊髓炎，机制为Ｔ细胞自身来源的ＮＯ减少而增强芳香烃受体（ａｒｙｌｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＨＲ）及其下游ＩＬ ２２、ＩＬ ２３受体、Ｃｙｐ１ａ１受体等的表达或分泌，从而增强Ｔｈ１７细胞的增殖和效应功能［１８］。
在胶原诱导的关节炎模型中，表达ｉＮＯＳ的ＭＤＳＣｓ以ＣＣＲ２依赖的方式在炎症局部累积，通过释放ＮＯ抑制ＣＤ４＋Ｔ细胞增殖，从而抑制关节炎的发生发展［１９］。
３．心血管疾病：ＮＯ信号在血管舒张及相关心血管疾病中的作用已有充分阐释，但对于Ｔ细胞ＮＯ信号是否参与其中仍鲜有报道。２０１８年，我们实验室曾报道高同型半胱氨酸血症（ｈｙｐｅｒｈ
ｏｍｏｃｙｓ ｔｅｉｎｅｍｉａ，ＨＨｃｙ）促进Ｔ细胞ＧＳＮＯＲ表达，进而降低ＡＫＴ巯基亚硝基化水平，上调其磷酸化，促进Ｔ细胞炎性激活介导的动脉粥样硬化发生。而敲除ＧＳＮＯＲ能有效抑制以上过程［２０］。干预Ｔ细胞ＧＳＮＯＲ可能为动脉粥样硬化提供新的思路。另外一项研究表明，ＣＤ４＋Ｔ细胞来源的ＩＬ １７Ａ通过影响血管ＮＯ ｃＧＭＰ信号导致其舒张功能异常［２１］。这也表明，在Ｔ细胞参与心血管疾病的发生发展中，ＮＯ起到了介导作用。
４．病毒、寄生虫感染：Ｔ细胞在介导感染和炎症的过程中发挥重要作用。ＭＤＳＣｓ在肿瘤和炎性疾病中维持免疫耐受，其产生ＮＯ而调控Ｔ细胞功能是机制之一。在伴刀豆球蛋白Ａ诱导的肝炎模型中，ＳＳＣｈｉｇｈＣＤ１１ｂｈｉｇｈＬｙ ６ＣｈｉｇｈＬｙ ６Ｇｌｏｗ髓系细胞ｉＮＯＳ来源的ＮＯ抑制过度激活的ＣＤ４＋Ｔ细胞反应，减少肝炎引起的并发损伤［２２］。在克氏锥虫感染的患者体内单核细胞糖酵解被激活，ＮＯ产生增加，进而抑制ＣＤ８＋Ｔ细胞的增殖的效应功能［２３］。人类免疫缺陷病毒（ｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ，ＨＩＶ）感染ＣＤ４＋Ｔ细胞会降低细胞内ＮＯ的含量。当外源性补充ＮＯ，ＣＤ４＋Ｔ细胞ＰＫＣ Ｓｒｃ ＡＫＴ信号通路会被激活，进而促进ＨＶ １病毒的复制［２４］。因此ＮＯ信号也参与Ｔ细胞对抗病毒、寄生虫感染的过程。
（二）Ｂ细胞ＮＯ与相关疾病 ｉＮＯＳ敲除小鼠在甲型流感病毒感染中，其肺部的病毒滴度明显低于野生型小鼠，表现出更强的抵抗力，生存率明显增加。之前将此现象归因于ＩＦＮ γ（Ｋａｒｕｐ
ｉａｈ等．１９９８）。直至２００６年，Ｊａｙａｓｅｋｅｒａ等［２５］发现，ｉＮＯＳ敲除鼠在接受流感病毒感染后，在清除病毒过程中扮演重要角的ＣＤ８＋Ｔ细胞和ＮＫ细胞的杀伤性并未发生明显改变，但ｉＮＯＳ敲除小鼠血浆中病毒特异性ＩｇＧ２ａ水平明显高于野生型小鼠，而其他ＩｇＧ亚型无显著改变。随后发现，ｉＮＯＳ缺失的Ｂ细胞能够通过大量增殖，快速响应流感病毒的感染，并可以有倾向性地产生大量ＩｇＧ２ａ，对病毒的清除起到关键作用。同时，ｉＮＯＳ缺失的脾脏细胞产生更多的ＩＦＮ γ，可能也参与调控ＩｇＭ向ＩｇＧ２ａ的类别转换。
２０１１年，Ｆｒｉｔｚ等［２６］发现肠道粘膜组织ＩｇＡ＋浆细胞自身即可感知细菌的刺激，产生抗菌介质ＴＮＦα和ｉＮＯＳ。而ＴＮＦ和ｉＮＯＳ对浆细胞产生ＩｇＡ起促进作用。敲除ＴＮＦ和ｉＮＯＳ后，ＩｇＡ产生明显减少，对细菌感染的抵抗力明显减弱。
２０１６年，Ｐａｒｋ等［２７］发现，髓系来源抑制细胞（ＭＤＳＣｓ）与脾脏细胞共培养能够显著促进Ｂｒｅｇ细胞的扩增，在ＳＬＥ模型中给小鼠回输ＭＤＳＣｓ能够显著改善疾病状态。而ＭＤＳＣｓ的ｉＮＯＳ正是其中的重要介导分子。而后研究者也发现人类ＭＤＳＣｓ也可通过Ａｒｇ１、ＮＯ、ＲＯＳ对Ｂ细胞增殖和抗体分泌起抑制作用［２８］。
淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）能够逃避早期的抗体反应。当ＬＣＭＶ感染小鼠后，对ＬＣ ＭＶ特异的Ｂ细胞会快速迁移到感染的淋巴结处，与迁移至此的ＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃｈｉ的促炎单核细胞相互
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