维生素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定
2010级药学一班 陶磊 2010102135
[摘要] 维生素C (Vitamin C ，Ascorbic Acid)又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素，能够坏血病并且具有酸性。在化学结构上和糖类十分相似，有4种光学异构体，其中以L-构型右旋体生物活性最强。ChP2010收载有维生素C原料及其片剂、泡腾片、颗粒剂、泡腾颗粒剂、注射剂和复方制剂维生素C银翘片〔1〕。本文通过查阅文献资料总结了维生素C原料药及各种剂型的鉴别，杂质检查，含量测定，并结合实验室实际情况确定实验方法。
[关键词]维生素C；鉴别；杂质检查；含量测定
1仪器及试剂
1.1仪器 754型紫外可见分光光度计；高效液相谱仪；电炉；250 mL碘量瓶；分析天平；电子天平；碱式滴定管；移液管等。
1.2试剂 0.1 mol/L HNO3、硝酸银试液（0.1 mol/L AgNO3）、0.05 mol/L H2SO4、0.1 mol/
L HCl、二氯靛酚钠、稀硝酸、草酸、氢氧化钠试液、氯化钙试液、盐酸、淀粉指示液、碘滴定液、0.05%亚甲蓝乙醇液、醋酸盐缓冲液（pH=3.5）、碱性酒石酸铜、标准铁溶液、标准铜溶液、醋酸铵、醋酸钠、醋酸、磷酸二氢钾, 均为分析纯; 甲醇、乙腈, 为谱纯; 蒸馏水,维生素C对照品等。部分试剂的配制如下： （1）淀粉指示剂：称取0.5 g可溶性淀粉，加水5 mL搅拌均匀，缓缓加入100 mL沸水中，边加边搅拌，煮沸2 min，放冷，取上清液，应新鲜配制。
（2）稀醋酸：量取冰醋酸6 mL，加水定容至100 mL喷射装置。
（3）碱性酒石酸铜：称取硫酸铜结晶6.93 g,加水溶解定容至100 mL；称取酒石酸碱钠34.6 g,氢氧化钠10 g,加水溶解定容至100 mL；用时等量混合。 2 方法
2.1 鉴别
2.1.1与硝酸银反应: 除维生素C钙、维生素C钠、维生素注射液、维生素C银翘片，其余制剂均可用此方法。
取维生素C 0.2 g,加水10 mL溶解。取该溶液5 mL，加硝酸银试液0.5 mL,即生成金属银的黑沉淀。
2.1.2与二氯靛酚钠反应：除维生素C注射液和维生素C钠制剂，其余均可用此方法。
（1）取维生素C 0.2 g，加水10 mL溶解。取该溶液5 mL，加二氯靛酚钠1～2滴，试液的颜即消失。
（2）取维生素C银翘片10片，除去糖衣，精密称定，研细，混匀，充分研磨，精密称定适量(约相当于维生素C 0.2 g)，置100 mL量瓶中，加新煮沸的冷开水10 mL、稀醋酸10 mL，振摇使充分溶解，用水稀释至刻度，摇匀滤过，取续滤液适量，用氨试液调节pH至中性，加入适量活性炭（每30mL续滤液中加0.5 g活性炭），加热至沸，滤过。取二氯靛酚钠试液数滴置点滴板，滴加滤液数滴，试液的蓝即消退。 水溶性聚氨酯2.1.3与其他氧化剂的反应：
（1）取维生素C注射液，用水稀释制成l mL 中含维生素C l0 mg的溶液，取4 mL，加0.l mol/L的盐酸溶液4 mL，混匀，加0.05 %亚甲蓝乙醇溶液4滴，置4 0 ° C水浴中加热，3分
钟内溶液应由深蓝变为浅蓝或完全褪。
苹果削皮机（2）取维生素C钠水溶液4mL，加0.1mol/L盐酸溶液1mL，加碱式酒石酸铜试液数滴，加热，生成红沉淀。
2.1.4薄层谱法：此方法主要用于维生素C 制剂的鉴别。
（1）取维生素C颗粒细粉适量（ 约相当于维生素C l0mg)，加水10 mL，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对照品， 加水溶解并稀释制成l mL 中约含l m g 的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法，吸取上述两种溶液各2uL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（541)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254 nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜应与对照品溶液的主斑点相同。
ext前端框架（2）取维生素C注射液，用水稀释制成l mL中含维生素C l mg 的溶液，作为供试品溶液；另取维生素C对照品，加水溶解并稀释制成l mL中约含l m g 的溶液， 作为对照品溶液。照薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各2 uL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸
乙酯-乙醇-水（541 )为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254 nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜应与对照品溶液的主斑点相同。
（3）取维生素C颗粒细粉适量（ 约相当于维生素C l0 mg)，加水10 mL，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对照品， 加水溶解并稀释制成l mL中约含l mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法（附录V B)试验，吸取上述两种溶液各2 uL,分别点于同一硅胶G F 2 5 4薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（541)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254 nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜应与对照品溶液的主斑点相同。
（4）取维生素C泡腾颗粒细粉适量（ 约相当于维生素C lO mg)，加水10 mL，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对照品， 加水溶解并稀释制成l mL中约含l mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各2 uL，分别点于同一珪胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（541)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254 nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜应与对照品溶液的主斑点相同。
（5）取维生素C泡腾片细粉适量（ 约相当于维生素C Lo mg)，加水10 mL，振摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对照品， 加水溶解并稀释制成l mL中约含l m g 的溶液，作为对照品溶液。照薄层谱法试验，吸取上述两种溶液各2 uL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（541)为展开剂，展开，晾干，立即（1小时内）置紫外光灯（254 nm)下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜应与对照品溶液的主斑点相同。
2.1.5紫外光谱法：维生素C在0.01 mol/L盐酸溶液中在243 nm波长处有惟一的最大吸收，可采用此方法进行特征鉴别。
2.1.6红外光谱法：维生素C的原料药的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集450图）一致。维生素C的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集1039图）一致。维生素C的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集451图）一致。
2.2 杂质检查
ChP2010规定应检查维生素C及其片剂、注射剂的澄清度与颜，对维生素C原料中的铜、铁离子进行检查，对维生素C 及其注射液进行草酸检查。
2.2.1溶液的澄清度与颜检查
（1）取维生素C供试品3.0 g ，加水15 mL，振摇使溶解，溶液应澄清无；如显，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法，在420 nm的波长处测定吸光度，不得过0.03。维生素C制剂在加工过程中有杂质增加，限量比原料药宽一些，维生素C片的测定波长为440 nm。
（2）取维生素C注射液，用水稀释制成每lml中含维生素C 50 mg的溶液，照紫外-可见分光光度法，在420 nm的波长处测定，吸光度不得过0.06。
新型化粪池（3）取维生素C 细粉适量（ 相当于维生素C l.0 g)，加水20 mL ，振摇使维生素C溶解，滤过，滤液照紫外-可见分光光度法, 在440 nm的波长处测定吸光度，不得过0.07。
（4）取维生素C钙3.0 g，加水30 mL使溶解，溶液应澄清无；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显，经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法，在420 nm的波长处测定吸光度，不得过0.06。
（5）取维生素C钠l.0 g ，加水10 mL使溶解，溶液应澄清无；如显浑浊，与1号浊度标
准液比较，不得更浓；如显，经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，照紫外-可见分光光度法，在420 nm的波长处测定吸光度，不得过0.06。
2.2.2草酸的检查
（1）取维生素C原料药0.25 g ，加水4.5 mL, 振摇使维生素C 溶解，加氢氧化钠试液0.5 mL、稀醋酸l mL 与氯化钙试液0.5 mL ，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75 mg，置500 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，加稀醋酸1 mL与氯化钙试液0.5 mL，摇匀，放置1小时，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0. 3 % )。
（2）取维生素C注射液，用水稀释制成每1 mL中含维生素C 50 mg 的的溶液，精密量取 5 mL，加稀醋酸 1mL 与氯化钙试液 0.5 mL，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；精密称取草酸75 mg ，置500 mL量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，加稀醋酸 1ml 与氯化钙试液 0.5 mL，摇匀，放置 1小时 ，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0.3%）。
（3）维生素C钠0.25 g ，加水5.0 mL，振摇使溶解，加稀醋酸l mL与氯化钙试液0 . 5 mL，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；精密称取草酸75 mg，置500 mL防静电推车量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，加稀醋酸l mL与氯化钙试液0.5 mL,摇匀，放置1小时，作为对照溶液。供试品溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0. 3 % )。
2.2.3铁、铜离子的检查
（1）取维生素C原料药5 . 0 g 两份，分别置2 5 mL量瓶中，一份中加0. l m o l / L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀,作为供试品溶液（B)；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863 mg，置1000 mL量瓶中，加lmol/L硫酸溶液25ml，用水稀释至刻度，摇匀， 精密量取10 mL, 100 mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0 mL，加0. l mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A ) 。照原子吸收分光光度法，在248. 3nm的波长处分别测定，应符合规定[若A和B溶液测得吸光度分别为a和b，则要求b<(a-b)]。
（2）取维生素C原料药2.0 g两份，分别置25 mL量瓶中，一份中加0. l mol /L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）;另一份中加标准铜溶液（精密称取硫酸铜393 mg，置1000 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10 mL，置100 mL
量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）1.0 mL，加0. l mol /L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液(A)。照原子吸收分光光度法,在324.8 nm的波长处分别测定，应符合规定[若A和B溶液测得吸光度分别为a和b，则要求b<(a-b)]。
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