抗肿瘤双吲哚甲烷衍生物化合物以及制备方法和应用与流程

1.本发明属于化学合成技术领域，尤其涉及一种双吲哚甲烷衍生物，一种抗肿瘤的双吲哚甲烷衍生物的制备方法，一种肿瘤抑制剂。

背景技术：

2.双吲哚甲烷(bims)生物碱，特别是3,3
’‑
双吲哚甲烷和3,2
’‑
双吲哚甲烷是存在于许多天然生物碱和生物重要化合物中的特征结构基元,如fluevirinese,(
±
)-gelliusines,isatindigobisindolosidesa,mucronatina,echinosulfonicacidsa-d等。因此，bims的构建引起了人们的广泛关注。尽管近年来双吲哚甲烷的合成方法得到了不断的发展，但不对称bims的合成仍然具有挑战性，特别是具有全碳四元立体中心的bims。
3.游书力课题组报告了构建手性3,3'-双吲哚甲烷的开创性工作(式1)，他们开发了手性磷酸(cpa)催化的对映选择性friedel-crafts型吲哚与(3-吲哚基)甲胺的烷基化反应，具有中等的对映选择性。(参见：f.-l.sun,x.-j.zheng,q.gu,q.-l.heands.-l.you,eur.j.org.chem.2010,2010,47-50.)
[0004][0005]
式1手性磷酸催化的对映选择性f-c型吲哚与(3-吲哚基)甲胺的烷基化反应
[0006]
2014年，张锁秦课题组开发了一种手性亚氨基二磷酸催化吲哚与o-tms保护的3-吲哚甲醇的对映选择性friedel-crafts型烷基化(式2)合成3,3'-双吲哚甲烷的高效工艺。(参见：m.-h.zhuo,y.-j.jiang,y.-s.fan,y.gao,s.liuands.zhang,org.lett.,2014,16,1096-1099.)
[0007][0008]
式2手性亚氨基二磷酸催化的对映选择性f-c型烷基化反应
[0009]
同样应用吲哚化合物的friedel-crafts烷基化策略，郭其祥课题组和张锁秦课题
组分别发展了带有全碳四元立体中心的手性3,3'-双吲哚甲烷的策略(式3-5)，他们使用3-吲哚叔醇或3-乙烯基吲哚作为吲哚亚胺甲基(iims)前体。(参见：y.zhang,s.-x.zhang,l.-n.fu,q.-x.guo,chemcatchem,2017,9,3107-3110；m.-h.zhuo,g.-f.liu,s.-l.song,d.an,j.gao,l.zhengands.zhang,adv.synth.catal.2016,358,808-815；x.-k.guan,h.zhang,j.-g.gao,d.-y.sun,x.-s.qin,g.-f.jiang,g.-l.zhangands.zhang,j.org.chem.,2019,84,12562-12572.)
[0010][0011]
式3郭其祥课题组使用乙烯基吲哚构建带有全碳四元立体中心的手性3,3'-双吲哚甲烷
[0012][0013]
式4张锁秦课题组使用3-吲哚叔醇构建带有全碳四元立体中心的手性3,3'-双吲哚甲烷
[0014][0015]
式5张锁秦课题组使用乙烯基吲哚构建带有全碳四元立体中心的手性3,3'-双吲哚甲烷
[0016]
相比之下，对映体富集的3,2
’‑
双吲哚甲烷的不对称合成研究仍较少。2014年，韩福社课题组报道了一个cpas催化的2-吲哚甲醇与吲哚不对称反应合成3,2
’‑
双吲哚甲烷(式6)，但需要在2-吲哚甲醇的c3-和n-位上有取代基，严重限制了反应的底物适用性。(参
见：s.qi,c.-y.liu,j.-y.dingandf.-s.han,chemmun.,2014,50,8605-8608.)
[0017][0018]
式6韩福社课题组使用2-吲哚甲醇构建带有全碳四元立体中心的手性3,3'-bims
[0019]
石枫课题组实现了3-甲基吲哚与靛红衍生的3-吲哚甲醇的催化对映选择性friedel-crafts型烷基化(式7)，得到了含手性全碳四元立体中心的3,2
’‑
双吲哚甲烷，产率高，对映选择性为60-82％ee。(参见：s.qi,c.-y.liu,j.-y.dingandf.-s.han,chemmun.,2014,50,8605-8608.)
[0020][0021]
式7石枫课题组使用靛红衍生的3-吲哚甲醇构建手性3,2'-双吲哚甲烷
[0022]
最近，鲁桂课题组设计了一种cf3取代的3-吲哚叔醇(式8)，它可以作为具有全碳四元立体中心的对映体富集型3,3
’‑
，3,2
’‑
和3,1
’‑
双吲哚甲烷的亚甲基吲哚亚胺前体。但是当r3为苯基时，对映的产物只有中等的ee值。(参见：w.-r.zhu,q.su,x.-y.deng,j.-s.liu,t.zhong,s.-s.meng,j.-t.yi,j.wengandg.lu,chem.sci.,2022,13,170-177.)
[0023][0024]
式8鲁桂课题组使用cf3取代的3-吲哚叔醇构建手性3,2'-双吲哚甲烷
[0025]
考虑到对映体富集的3,2
’‑
双吲哚甲烷的不对称合成案例报道较少，利用cpas催化的2-乙烯基吲哚的对映选择性氢芳基化反应，通过2-亚甲基吲哚亚胺中间体(2-iims，式9)制备了带有全碳四元立体中心的手性3,2
’‑
双吲哚甲烷，具有良好的产率和对映选择性，能够为更复杂的3,2'-双吲哚甲烷的不对称合成提供全新的合成技术。
[0026][0027]
式92-iims中间体
[0028]
目前，癌症仍然是人类健康面临的最严峻挑战之一。对于癌症的,药物即化疗是目前临床中的较为常见的手段,尽管能够一定程度缓解癌症的进一步恶化和扩散，但是对于癌症的治愈仍然面临着巨大的问题和挑战。一方面，化疗中所使用的药物分子需要具有能够高效地作用于癌细胞或病原微生物，通过与其作用而杀灭大比例的癌细
胞；另一方面，由于药物自身的毒副作用，其杀死癌细胞同时也会对正常细胞造成较大的损伤。另外，抗癌药物分子一般为较为复杂的有机分子，合成成本较高，给患者带来巨大的经济负担。因此，针对目前癌症所面临的现状，开发高效且低毒副作用的新型骨架的化学药物是值得探索的研究方向。双吲哚甲烷具有重要的生物活性，有望在潜在的癌症药物的开发中获得突破。

技术实现要素：

[0029]
本发明的目的在于提供一种含季碳手性中心的3,2
’‑
双吲哚甲烷化合物的制备方法，旨在解决抗肿瘤分子合成低效、药物疗效低、对正常细胞毒副作用大等技术问题。
[0030]
本发明的另一目的在于提供一种抗肿瘤的双吲哚甲烷。
[0031]
本发明的再一目的在于提供一种肿瘤抑制剂。
[0032]
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
[0033]
一种含季碳手性中心的3,2
’‑
双吲哚甲烷衍生物化合物的制备方法,包括以下制备步骤：
[0034]
获取式ⅱ化合物和式ⅲ化合物，将所述式ⅱ化合物和所述式ⅲ化合物溶解在有机溶剂中，在温度为室温，手性磷酸催化剂的条件下进行合成反应，得到式ⅰ抗肿瘤的双吲哚甲烷衍生物；
[0035][0036]
进一步，具体的反应过程为：将式ⅱ化合物和手性磷酸溶解于有机溶剂中，得混合液，并向其中加入式ⅲ化合物，室温下搅拌10～14小时后，et3n淬灭反应，然后，将反应物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚和乙酸乙酯混合)进行纯化，得到化合物ⅲ。
[0037]
式ⅱ化合物和式ⅲ化合物的摩尔用量比为1：2。
[0038]
其中，式ⅱ和式ⅲ连接位点的不同与ar确保了式ⅰ抗肿瘤的双吲哚甲烷具有手性，确保了双吲哚甲烷具有独特的球状立体构型和多芳基的特征，通过氢键作用、芳基堆叠作用等方式与细胞内物质作用，抑制细胞内特定酶的产生，干扰细胞的代谢途径,从而有利于提升双吲哚甲烷抗癌效果。
[0039]
其中，r和r1分别独立选自氢、卤素、杂原子取代基、烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种，ar独立选自芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种。
[0040]
优选地，芳基选自苯基、萘基、菲基、蒽基、苊烯基、苊基、笏基、芘基和荧蒽基中的至少一种；和/或，
[0041]
杂芳基选自吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、恶唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹啉基、异喹啉基和嘌呤基中的至少一种；和/或，
(ipr)3c6h2。
[0048]
优选地，手性磷酸催化剂的使用量为式ⅱ化合物摩尔质量化合物摩尔质量
[0049]
优选地，双吲哚甲烷自如下化合物中的至少一种：
[0050][0051]
上述方法制备的抗肿瘤的双吲哚甲烷或上述的抗肿瘤的双吲哚甲烷在在制备肿瘤抑制剂中的应用。
[0052]
优选地，肿瘤包括：宫颈癌细胞系、肺癌细胞系、卵巢癌细胞系、乳腺癌细胞系和结肠癌细胞系。
[0053]
优选地，肿瘤抑制剂还包括：甘油、聚山梨酯、聚乙二醇、高酰基结冷胶、黄原胶、卡拉胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、交联聚维酮、聚丙烯酸树脂类聚合物、红花籽油、软磷脂和蜂蜡中的至少一种医药学上可接受的辅料；和/或，
[0054]
肿瘤抑制剂的剂型包括：口服液、胶囊剂、片剂、膏剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、栓剂、植入型制剂、定位靶向制剂、缓释制剂和控释制剂中的至少一种医药学上可接受的剂型。
[0055]
本发明抗肿瘤的双吲哚甲烷的制备方法中，在手性磷酸催化剂室温的催化条件下能直接一步催化得到高光学纯的式ⅰ抗肿瘤的双吲哚甲烷，该式ⅰ抗肿瘤的双吲哚甲烷将具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗高血压等生物活性的双吲哚甲基基团引入具有全碳四元立体中
心的骨架中，构建基于吲哚的双吲哚甲烷化合物，该构型的双吲哚甲烷具有独特的球状立体构型和多芳基的特征，可通过氢键作用、芳基堆叠作用等方式与细胞内物质作用，抑制细胞内特定酶的产生，干扰细胞的代谢途径，并通过影响和阻碍核酸、dna转录和细胞器的分化等，达到杀灭和抑制肿瘤细胞分化。另外，本发明通过肿瘤活性实验，证实了此类双吲哚甲烷具有显著地抗肿瘤活性，对多类癌细胞能够高效的杀灭；并且，对于正常人体细胞损伤较小，毒副作用小，具有良好的抗肿瘤选择性。本发明提供的一种手性双吲哚甲烷的制备方法,操作简单实用，产率好，制备过程具有绿经济性，对环境友好，易于工业化的特点，而且该制备方法可扩大升级到克以上级别后产物的产率和立体选择性仍然保持，因此在合成和药物开发领域具有很好的应用前景。
具体实施方式
[0056]
为使本发明实施例的目的、技术方案和技术效果更加清楚,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。结合本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
[0057]
在本发明的描述中，“卤素”是指氟、氯、溴、碘中的一个或多个取代；“杂原子取代基”是指杂原子直接相连的取代基，包括但不限于如氧、氮、硫、磷以及其它杂原子；“烷基”是指一种链状的基团，包括但不限于如甲基、乙基、多碳直链和支链基团；“芳基”是指一种环状的芳香基团，包括但不限于如苯基、萘基、蒽基、菲基以及其它类似基团；“杂芳基”是指单环或多环或稠环的杂环芳香基团，其中的一个或多个碳原子已被如氮、氧或硫等杂原子取代；“取代”指一基团内的一个或多个氢原子可独立地替换为相同或不同的取代基。
[0058]
本发明实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本发明实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本发明实施例说明书公开的范围之内。具体地，本发明实施例说明书中所述的重量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。
[0059]
2-烯基吲哚底物的合成(式ⅱ)
[0060][0061]
实施案例中的2-烯基吲哚底物的合成路径如下：
[0062]
步骤一：
[0063][0064]
步骤二：
[0065][0066]
步骤三：
[0067][0068]
合成步骤：
[0069]
步骤一：在0℃，氮气保护下，向装有吲哚-2-羧酸s1(25mmo1，1.0equiv)、1-羟基苯并三氮唑(hobt,336mg,2.5mmol,0.1equiv)、n，o-二甲基羟胺(2.42g,25mmol,1.0equiv)、三乙胺(7.0ml,50mmol,2.0equiv)以及dcm(50ml)的圆底烧瓶中滴加二甲氨丙基碳二亚胺盐酸盐(edci,5.27g,27.5mmol,1.2equiv)的dcm溶液(20ml)。混合物在室温下搅拌12h，然后用50ml水淬灭，无水na2so4干燥，减压浓缩。残留物经硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝1：1)纯化，得到所需的weinreb酰胺s2。
[0070]
步骤二：在n2和-78℃下，向装有芳基溴arbr(20mmol,2.0equiv)和thf(20ml)的圆底烧瓶中滴加正丁基锂的正己烷溶液(2.4m,8.3ml,20.0mmol,2.0equiv)。将混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后通过注射器将上述weinreb酰胺s2(10mmol，1.0equiv)的thf溶液(20ml)缓慢加入到冷溶液(-78℃)中。然后将所得混合物升温至室温并持续搅拌1小时，然后用nh4cl水溶液(20ml)淬灭并用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并的有机层用水(30ml
×
2)洗涤，用无水na2so4干燥，减压浓缩。通过硅胶柱谱法(石油醚/etoac＝5:1)纯化残余物，得到所需的酮衍生物s3。
[0071]
步骤三：在室温，n2保护下，将溴化甲基三苯基鏻(5.34g,15mmol,3.0equiv)和t-buok(1.68g,15mmol,3.0euqiv)和thf(20ml)加入到圆底烧瓶中，搅拌10分钟，然后加入s3(5mmol，1.0euqiv)的thf(10ml)溶液。将混合物在50℃下搅拌12小时，然后通过硅藻土垫过滤。减压浓缩滤液。残余物通过硅胶柱谱纯化，得到所需的2-烯基吲哚底物ⅱ。
[0072][0073]
5-methoxy-2-(1-phenylvinyl)-1h-indole(ⅱa)：根据一般步骤，经3步得到化合物ⅱa，黄固体1.37g，计算产率为88％。(谱洗脱液：石油醚/etoac＝15:1)。
[0074]
核磁数据：
[0075]1h nmr(400mhz,acetone-d6)δ10.31(s,1h),7.52-7.46(m,2h),7.45-7.38(m,3h),7.28(d,j＝8.8hz,1h),7.01(d,j＝2.5hz,1h),6.77(dd,j1＝2.5,j2＝8.8hz,1h),6.24(d,j＝1.4hz,1h),5.73(s,1h),5.30(s,1h),3.77(s,3h)ppm.
[0076]
13
c nmr(101mhz,acetone-d6)δ154.7,142.7,141.2,139.0,133.0,129.5,128.9(2c),128.7(2c),128.5,113.2,112.2,112.0,103.5,102.3,55.4ppm.
[0077]
hrms(ci
+
)calcd for c
17h16
no[m+h]
+
:250.1232,found:250.1241.
[0078][0079]
5-fluoro-2-(1-phenylvinyl)-1h-indole(ⅱb)：根据一般步骤，经3步得到化合物ⅱb，黄固体454mg，计算产率为56％。(谱洗脱液：石油醚/etoac＝15:1)。
[0080]
核磁数据：
[0081]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.04(s,1h),7.50-7.33(m,5h),7.21-7.15(m,2h),6.91(td,j1＝2.3,j2＝9.1hz,1h),6.45(s,1h),5.58(s,1h),5.37(s,1h)ppm.
[0082]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ158.0(d,j＝234.6hz),141.3,139.7,139.5,132.9,128.9(d,j＝10.3hz),128.4(4c),128.3,113.4,111.4(d,j＝9.7hz),110.9(d,j＝26.4hz),105.4(d,j＝23.4hz),103.2(d,j＝4.7hz)ppm.
[0083]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-124.3ppm.
[0084]
hrms(ci
+
)calcd for c
16h13
fn[m+h]
+
:238.1032,found:238.1038.
[0085][0086]
2-(1-(4-fluorophenyl)vinyl)-1h-indole(ⅱc)：根据一般步骤，经3步得到化合物ⅱc，黄固体280mg，计算产率为76％。(谱洗脱液：石油醚/etoac＝12:1)。
[0087]
核磁数据：
[0088]1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ11.32(s,1h),7.54-7.44(m,3h),7.38(dd,j1＝0.7,j2＝8.1hz,1h),7.29-7.21(m,2h),7.15-7.08(m,1h),7.00-6.93(m,1h),6.19(d,j＝1.5hz,1h),5.81(s,1h),5.33(s,1h)ppm.
[0089]
13
c nmr(75mhz,dmso-d6)δ162.0(d,j＝244.4hz),140.1,137.5,137.1,136.6(d,j＝3.1hz),130.3,130.1,127.9,122.2,120.4,119.2,115.3,115.0,113.1,111.1,102.8ppm.
[0090]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-113.8ppm.
[0091]
hrms(ci
+
)calcdfor c
16h13
nf[m+h]
+
:238.1032,found:238.1035.
[0092][0093]
2-(1-(4-chlorophenyl)vinyl)-1h-indole(ⅱd)：根据一般步骤，经3步得到化合物ⅱd，黄固体587mg，计算产率为80％。(谱洗脱液：石油醚/etoac＝15:1)。
[0094]
核磁数据：
[0095]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.03(s,1h),7.54(d,j＝7.8hz,1h),7.41-7.25(m,5h),
＝6.8hz,1h),7.88(d,j＝8.4hz,2h),7.59(d,j＝8.2hz,2h),7.51-7.42(m,2h),7.36(d,j＝8.1hz,1h),7.21(t,j＝7.6hz,1h),7.12(t,j＝7.5hz,1h),6.57(d,j＝2.1hz,1h),5.70(s,1h),5.49(s,1h)ppm.
[0114]
13
c nmr(75mhz,acetone-d6)δ141.9,139.6,138.9,138.2,137.5,135.6,135.5,128.7,127.6,127.2,124.7,122.9,122.6,122.3,122.1,121.6,120.5,119.5,112.4,111.1,111.0,103.2ppm.
[0115]
hrms(ci
+
)calcd for c
22h16
ns[m+h]
+
:326.1003,found:326.1003.
[0116][0117]
2-(1-(naphthalen-2-yl)vinyl)-1h-indole(ⅱk)：根据一般步骤，经3步得到化合物ⅱk，黄固体120mg，计算产率为23％。(谱洗脱液：石油醚/etoac＝15:1)。
[0118]
核磁数据：
[0119]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.19(s,1h),7.98(s,1h),7.93-7.84(m,3h),7.64-7.59(m,2h),7.56-7.51(m,2h),7.35(d,j＝8.1hz,1h),7.23(t,j＝7.5hz,1h),7.14(t,j＝7.4hz,1h),6.59(s,1h),5.72(s,1h),5.52(s,1h)ppm.
[0120]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ141.5,137.8,137.4,136.4,133.2,133.2,128.6,128.2,127.9,127.6,127.4,126.5,126.3,126.3,122.7,120.8,120.1,113.3,110.8,103.4ppm.
[0121]
hrms(ci
+
)calcd for c
20h16
n[m+h]
+
:270.1283,found:270.1284.
[0122]
实施例1
[0123]
一种双吲哚甲烷ia，由以下制备步骤：
[0124]
室温下，将r1为5-甲氧基，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱa)(74.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝5：1)进行纯化，得到化合物ia，黄固体107.6mg,计算产率为98％。
[0125]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0126]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0127]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％
i-proh的hexanes；0.5ml/min；保留时间：71.0min(minor),67.8min(major)。计算结果为96％ee。
[0128]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0129]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.98(s,1h),7.86(s,1h),7.35(d,j＝8.2hz,1h),7.30-7.22(m,6h),7.16(t,j＝7.6hz,1h),7.11(d,j＝8.0hz,1h),7.07(d,j＝2.2hz,1h),7.02(d,j＝8.7hz,1h),6.95(t,j＝7.6hz,1h),6.72(d,j＝2.3hz,1h),6.38(s,1h),3.85(s,3h),2.28(s,3h)ppm.
[0130]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ154.0,147.0,146.4,137.0,130.9,128.7,128.1(2c),127.5(2c),126.5,126.0,123.4,123.0,121.9,121.2,119.6,111.4,111.3,111.2,102.2,100.0,55.9,44.5,28.8ppm.
[0131]
hrms(ci
+
)calcd for c
25h23
n2o[m+h]
+
:367.1810,found:367.1808.
[0132]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ia。
[0133]
实施例2
[0134]
一种双吲哚甲烷ib，包括以下制备步骤：
[0135]
室温下，将r1为5-氟，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱb)(71.2mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液，室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物ib，黄固体102.1mg,计算产率为96％。
[0136]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0137]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0138]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：25.6min(minor),23.5min(major)。计算结果为96％ee。
[0139]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱、氟谱和高分辨质谱。
[0140]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.98(s,1h),7.87(s,1h),7.36(d,j＝8.2hz,1h),7.30-7.13(m,7h),7.07(d,j＝8.1hz,1h),7.02(dd,j1＝4.4,j2＝8.7hz,1h),6.94(t,j＝7.5hz,1h),6.81(td,j1＝2.2,j2＝9.1hz,1h),6.73(d,j＝2.3hz,1h),6.41(s,1h),2.26(s,3h)ppm.
[0141]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ157.8(d,j＝233.6hz),147.4,146.7,137.0,132.1,128.6(d,j＝10.2hz),128.2(2c),127.5(2c),126.6,125.9,123.4,122.8,122.1,121.1,119.7,
111.4,111.2(d,j＝9.8hz),109.4(d,j＝26.2hz),105.0(d,j＝23.3hz),100.4(d,j＝4.4hz),44.5,28.9ppm.
[0142]
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-125.07ppm.
[0143]
hrms(ci
+
)calcd for c
24h20
n2f[m+h]
+
:355.1611,found:355.1604.
[0144]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ib。
[0145]
实施例3
[0146]
一种双吲哚甲烷ic，包括以下制备步骤：
[0147]
室温下，将r1为氢，ar为4-氟苯基的2-烯基吲哚(ⅱc)(71.2mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物ic，黄固体103.1mg,计算产率为97％。
[0148]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0149]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0150]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：22.5min(minor),18.5min(major)。计算结果为95％ee。
[0151]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱、氟谱和高分辨质谱。
[0152]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.89(s,1h),7.75(s,1h),7.67-7.60(m,1h),7.31(d,j＝8.2hz,1h),7.27-7.10(m,7h),7.02-6.92(m,3h),6.65(s,1h),6.48(s,1h),2.28(s,3h)ppm.
[0153]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ161.3(d,j＝245.2hz),145.3,142.7(d,j＝3.1hz),136.9,135.7,129.1,129.1,128.2,125.8,123.2,122.6,122.0,121.4,121.0,120.3,119.7,119.7,114.9,114.7,111.4,110.8,100.2,43.9,29.0ppm.
[0154]
19
f nmr(376mhz,cdcl3)δ-116.7ppm.
[0155]
hrms(ci
+
)calcd for c
24h20
n2f[m+h]
+
:355.1611,found:355.1609.
[0156]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ic。
[0157]
实施例4
[0158]
一种双吲哚甲烷id，包括以下制备步骤：
[0159]
室温下，将r1为氢，ar为4-氯苯基的2-烯基吲哚(ⅱd)(76.1mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物id，黄固体105.7mg,计算产率为95％。
[0160]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0161]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0162]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：23.0min(minor),20.2min(major)。计算结果为94％ee。
[0163]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0164]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.99(s,1h),7.85(s,1h),7.61-7.55(m,1h),7.36(d,j＝8.1hz,1h),7.25-7.14(m,6h),7.12-7.05(m,3h),6.95(m,1h),6.75(d,j＝2.5hz,1h),6.43(d,j＝1.5hz,1h),2.25(s,3h)ppm.
[0165]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ145.6,145.0,137.0,135.8,132.3,129.0(2c),128.2(2c),128.2,125.8,123.4,122.4,122.1,121.4,121.0,120.3,119.8,119.7,111.4,110.8,100.3,44.1,28.9ppm.
[0166]
hrms(ci
+
)calcd for c
24h20
n2cl[m+h]
+
:371.1315,found:371.1309.
[0167]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物id。
[0168]
实施例5
[0169]
一种双吲哚甲烷ie，包括以下制备步骤：
[0170]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱe)(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为6-甲基的吲哚(78.7mg,
0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物ie，黄固体98.8mg,计算产率为94％。
[0171]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0172]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0173]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱as-h柱；5％i-proh的hexanes；0.5ml/min；保留时间：90.6min(minor),96min(major)。计算结果为95％ee。
[0174]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0175]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.93(s,1h),7.70(s,1h),7.68-7.63(m,1h),7.38-7.27(m,5h),7.20-7.12(m,4h),7.04(d,j＝8.2hz,1h),6.85(d,j＝8.2hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,1h),6.53(d,j＝2.2hz,1h),2.49(s,3h),2.32(s,3h)ppm.
[0176]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ147.0,145.6,137.4,135.6,131.8,128.3,128.1(2c),127.5(2c),126.4,123.9,122.7,122.7,121.3,121.2,120.8,120.2,119.5,111.3,110.7,100.1,44.4,28.9,21.5ppm.
[0177]
hrms(ci
+
)calcd for c
25h23
n2[m+h]
+
:351.1861,found:351.1858.
[0178]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ie。
[0179]
实施例6
[0180]
一种双吲哚甲烷if，包括以下制备步骤：
[0181]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱe)(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为6-溴的吲哚(117.6mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物if，黄固体100.9mg,计算产率为81％。
[0182]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0183]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0184]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：27.6min(minor),23.6min(major)。计算结果为90％ee。
[0185]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0186]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.90(s,1h),7.87(s,1h),7.68-7.60(m,1h),7.45(d,j＝1.3hz,1h),7.35-7.27(m,5h),7.23-7.10(m,3h),7.05(dd,j1＝1.5,j2＝8.6hz,1h),6.96(d,j＝8.6hz,1h),6.66(d,j＝1.8hz,1h),6.47(d,j＝1.6hz,1h),2.28(s,3h)ppm.
[0187]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ146.4,145.1,137.7,135.7,128.2(2c),128.1,127.4(2c),126.6,124.8,123.9,123.1,122.8,122.3,121.4,120.3,119.7,115.5,114.2,110.7,100.3,44.3,28.8ppm.
[0188]
hrms(ci
+
)calcd for c
24h20
n2br[m+h]
+
:415.0810,found:415.0801.
[0189]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物if。
[0190]
实施例7
[0191]
一种双吲哚甲烷ig，包括以下制备步骤：
[0192]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱe)(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为5-三氟甲基的吲哚(111.1mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化,得到化合物ig，黄固体78.8mg,计算产率为65％。
[0193]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0194]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0195]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；5％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：45.7min(minor),48.2min(major)。计算结果为94％ee。
[0196]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱、氟谱和高分辨质谱。
[0197]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.12(s,1h),7.78(s,1h),7.61-7.54(m,1h),7.42-7.34(m,3h),7.28(t,j＝9.1hz,5h),7.18(d,j＝6.8hz,1h),7.14-7.05(m,2h),6.74(d,j＝2.1hz,1h),6.41(s,1h),2.29(s,3h)ppm.
[0198]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ146.2,145.0,138.4,135.9,128.4,128.3,127.6,126.9,125.3,125.1,124.3,123.3,120.0(q,j＝31.5hz),121.6,120.4,119.8,118.9(q,j＝3.8hz),111.7,110.8,100.6,44.5,28.8ppm.
[0199]
19
f nmr(282mhz,cdcl3)δ-60.29ppm.
[0200]
hrms(ci
+
)calcd for c
25h20
n2f3[m+h]
+
:405.1579,found:405.1577.
[0201]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ig。
[0202]
实施例8
[0203]
一种双吲哚甲烷ih，包括以下制备步骤：
[0204]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱe)(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为5，6-二甲氧基的吲哚(106.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化,得到化合物ih，黄固体104.6mg,计算产率为88％。
[0205]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0206]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0207]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱as-h柱；20％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：20.3min(minor),16.5min(major)。计算结果为98％ee。
[0208]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0209]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.93(s,1h),7.85(s,1h),7.61-7.52(m,1h),7.30-7.18(m,5h),7.16-6.99(m,3h),6.72(s,1h),6.63(s,1h),6.43(s,1h),6.28(s,1h),3.81(s,3h),3.44(s,3h),2.22(s,3h)ppm.
[0210]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ147.0,146.7,145.6,144.3,135.6,131.0,128.2,128.0(2c),127.5(2c),126.4,122.5,121.5,121.2,120.2,119.5,118.8,110.7,102.4,100.1,94.3,55.9,55.9,44.3,29.0ppm.
[0211]
hrms(ci
+
)calcd for c
26h25
n2o2[m+h]
+
:397.1916,found:397.1911.
[0212]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ih。
[0213]
实施例9
[0214]
一种双吲哚甲烷ii，包括以下制备步骤：
[0215]
室温下，将r1为6-甲氧基，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱi)(74.8mg,0.3mmol)和手性
磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝5：1)进行纯化，得到化合物ii，黄固体98.9mg,计算产率为90％。
[0216]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0217]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0218]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；20％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：18.3min(minor),15.2min(major)。计算结果为90％ee。
[0219]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0220]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(s,1h),7.75(s,1h),7.44(d,j＝8.6hz,1h),7.35(d,j＝8.2hz,1h),7.30-7.22(m,6h),7.16(t,j＝7.6hz,1h),7.10(d,j＝8.0hz,1h),6.94(t,j＝7.5hz,1h),6.75(dd,j1＝2.2,j2＝8.6hz,1h),6.72(d,j＝2.4hz,1h),6.65(d,j＝1.8hz,1h),6.37(d,j＝1.7hz,1h),3.76(s,3h),2.25(s,3h)ppm.
[0221]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ155.9,147.0,144.3,137.0,136.4,128.1(2c),127.5(2c),126.4,126.1,123.3,123.1,122.5,122.0,121.2,120.8,119.6,111.3,109.4,99.8,94.4,55.6,44.4,28.8ppm.
[0222]
hrms(ci
+
)calcd for c
25h23
n2o[m+h]
+
:367.1810,found:367.1804.
[0223]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ii。
[0224]
实施例10
[0225]
一种双吲哚甲烷ij，包括以下制备步骤：
[0226]
室温下，将r1为氢，ar为4-硫芴基的2-烯基吲哚(ⅱj)(97.6mg,0.3mmol)和手性磷酸(11.3mg,0.015mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物ij，黄固体122.1mg,计算产率为92％。
[0227]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0228]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0229]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：41.4min(minor),32.8min(major)。计算结果为94％ee。
[0230]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0231]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.16(s,1h),8.02(s,1h),7.95(d,j＝7.9hz,1h),7.89(d,j＝8.0hz,1h),7.83(s,1h),7.76(d,j＝8.4hz,1h),7.68(d,j＝5.2hz,1h),7.46(t,j＝7.6hz,1h),7.42(d,j＝8.4hz,1h),7.38(d,j＝7.7hz,1h),7.34(d,j＝8.1hz,1h),7.25-7.14(m,5h),6.99(t,j＝7.5hz,1h),6.68(s,1h),6.57(s,1h),2.43(s,3h)ppm.
[0232]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ145.5,143.5,139.7,137.5,136.9,135.7,135.4,135.4,128.2,126.9,126.6,125.9,124.2,123.4,122.9,122.8,122.4,122.0,121.6,121.3,121.2,120.3,120.1,119.6,119.6,111.4,110.8,100.3,44.5,29.2ppm.
[0233]
hrms(ci
+
)calcd for c
30h23
n2s[m+h]
+
:443.1582,found:443.1580.
[0234]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ij。
[0235]
实施例11
[0236]
一种双吲哚甲烷ik，包括以下制备步骤：
[0237]
室温下，将r1为氢，ar为2-萘基的2-烯基吲哚(ⅱk)(80.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(11.3mg,0.015mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物ik，黄固体109.0mg,计算产率为94％。
[0238]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0239]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0240]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；20％i-proh的hexanes；0.5ml/min；保留时间：31.1min(minor),32.6min(major)。计算结果为98％ee。
[0241]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0242]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ7.97(s,1h),7.74(d,j＝8.0hz,1h),7.70-7.62(m,3h),7.56(t,j＝7.2hz,2h),7.43-7.30(m,3h),7.17(d,j＝7.9hz,1h),7.12-6.97(m,5h),6.83(t,j＝7.5hz,1h),6.51(d,j＝2.4hz,1h),6.42(d,j＝1.7hz,1h),2.28(s,3h)ppm.
[0243]
13
c nmr(101mhz,cdcl3)δ145.5,144.4,136.9,135.7,133.1,132.1,128.2,128.2,
127.7,127.3,126.4,125.9,125.9,125.7,125.6,123.5,122.4,121.8,121.2,121.1,120.2,119.5,119.5,111.4,110.8,100.2,44.6,28.8ppm.
[0244]
hrms(ci
+
)calcd for c
28h23
n2[m+h]
+
:387.1861,found:387.1860.
[0245]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物ik。
[0246]
实施例12
[0247]
一种双吲哚甲烷il，包括以下制备步骤：
[0248]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(ⅱe)(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(2.3mg,0.003mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为6-甲氧基的吲哚(88.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝5：1)进行纯化，得到化合物il，黄固体92.3mg,计算产率为84％。
[0249]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0250]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0251]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：48.5min(minor),42.1min(major)。计算结果为94％ee。
[0252]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0253]1h nmr(300mhz,cdcl3)δ8.05(s,1h),7.77-7.64(m,2h),7.40-7.29(m,5h),7.22-7.14(m,3h),7.04(d,j＝8.8hz,1h),6.78(d,j＝2.2hz,1h),6.69(dd,j1＝2.3,j2＝8.8hz,1h),6.57(d,j＝2.4hz,1h),6.55(d,j＝2.0hz,1h),3.86(s,3h),2.34(s,3h)ppm.
[0254]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ156.0,146.9,145.6,137.6,135.6,128.2,128.1(2c),127.5(2c),126.4,122.7,122.1,121.6,121.2,120.4,120.2,119.5,110.7,109.3,100.1,94.7,55.4,44.3,28.8ppm.
[0255]
hrms(ci
+
)calcd for c
25h23
n2o[m+h]
+
:367.1810,found:367.1806.
[0256]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物il。
[0257]
实施例13
[0258]
一种双吲哚甲烷im，包括以下制备步骤：
[0259]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(16.9mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加r为氢的吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，得到化合物im，黄固体99.8mg,计算产率为99％。
[0260]
为了进一步验证得到的化合物确实为本实施例中所要制备的目的产物，对所得产物采用测定比旋光度、高效液相谱分析测定ee值、核磁共振进行定性分析,测试的分析如下：
[0261]
1、26℃下d线测定的比旋光度[α]d
26
：(c＝1.0,chcl3)。
[0262]
2、高效液相谱分析测定ee值：手性柱ad-h柱；10％i-proh的hexanes；1.0ml/min；保留时间：26.2min(minor),23.6min(major)。计算结果为99％ee。
[0263]
3、核磁共振分析的氢谱、碳谱和高分辨质谱。
[0264]1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.88(s,1h),7.86(s,1h),7.63-7.54(m,1h),7.33(d,j＝8.2hz,1h),7.26(d,j＝3.5hz,4h),7.23(s,1h),7.16(d,j＝7.3hz,1h),7.15-7.05(m,4h),6.93(t,j＝1.0hz,1h),6.68(d,j＝2.5hz,1h),6.46(d,j＝2.1hz,1h),2.28(s,3h)ppm.
[0265]
13
c nmr(75mhz,cdcl3)δ146.9,145.5,137.0,135.7,128.3,128.2(2c),127.5(2c),126.5,126.0,123.4,123.0,122.0,121.3,121.2,120.2,119.6,119.6,111.3,110.7,100.2,44.5,28.9ppm.
[0266]
hrms(ci
+
)calcd for c
24h21
n2[m+h]
+
:337.1705,found:337.1697.
[0267]
由上述测试结果可知，本发明实施例制得的产物即为化合物im。
[0268]
对比例1
[0269]
与实施例13相比，反应中将手性磷酸替换为(r)-a1，其它操作与实施例13相同。
[0270]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(r)-a1
(11.3mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，产率为99％(99.5mg)，ee仅为16％。
[0271]
对比例2
[0272]
与实施例13相比，反应中将手性磷酸替换为(r)-a2，其它操作与实施例13相同。
[0273]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(r)-a2(13.8mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，产率为99％(100.3mg)，ee仅为7％。
[0274]
对比例3
[0275]
与实施例13相比，反应中将手性磷酸替换为(r)-a3，其它操作与实施例13相同。
[0276]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(r)-a3(13.5mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，产率为99％(100.1mg)，ee仅为57％。
[0277]
对比例4
[0278]
与实施例13相比，反应中将手性磷酸替换为(r)-a4，其它操
作与实施例13相同。
[0279]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(r)-a4(17.1mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，产率为99％(99.7mg)，ee为90％。
[0280]
对比例5
[0281]
与实施例13相比，反应中将手性磷酸替换为(r)-a5，其它操作与实施例13相同。
[0282]
室温下，将r1为氢，ar为苯基的2-烯基吲哚(65.8mg,0.3mmol)和手性磷酸(r)-a5(16.2mg,0.0225mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(6.0ml)中，滴加吲哚(70.3mg,0.6mmol)于混合溶液,室温下搅拌12小时后,用几滴et3n淬灭。然后，混合物在减压下浓缩，并通过硅胶柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝8：1)进行纯化，产率为99％(99.9mg)，ee为-91％。
[0283]
进一步的，为了验证本发明实施例制备的双吲哚甲烷对肿瘤的抑制效果的进步性,本发明实施例制备的化合物进行了肿瘤细胞抑制试验。
[0284]
本发明实施例以市售药物阿霉素(doxorubicin)为对照组，以化合物本发明实施例以市售药物阿霉素(doxorubicin)为对照组，以化合物为实验组，以小鼠乳腺肿瘤细胞(4t1)、人类宫颈癌细胞(hela)和肺癌细胞(a549)为肿瘤测试对象。采用mtt法检测细胞活性：取对数生长期细胞，消化、计数，并接种于96孔培养板，培养24h后，将不同浓度的化合物与肿瘤细胞共孵育72h后，去上清液,加入100μl的mtt溶液(5mg/ml),继续孵育4h,去上清液，每孔加入150μldmso,振荡混匀,然后用酶标仪测量在550nm和700nm的吸收。计算化合物对肿瘤细胞的抑制率。计算公式：抑制率(％)＝(对照组吸光度值-给药组吸光度值)/(对照组吸光度值-空白组吸光度值)
×
100％。
[0285]
采用ic
50
计算软件(中国药科大学)求出半数抑制浓度(ic
50
)。化合物)。化合物对不同肿瘤细胞的半数抑制浓度(ic
50
)如下表1所示：
[0286]
表1
[0287][0288][0289]
本发明实施例1
ゲ
8制备的化合物ia
ゲ
ih,筛选了它们在小鼠乳腺肿瘤细胞(4t1)、肺癌细胞(a549)和人类宫颈癌细胞(hela)中的细胞毒性。如表所示，一方面,这些化合物都对小鼠乳腺肿瘤细胞(4t1)细胞具有良好的细胞毒性，均在低微摩尔范围具有半数最大抑制浓度(ic
50
)值，与药物阿霉素相当。另一方面，在人类肺癌细胞(a549)和人类宫颈癌细胞(hela)中也表现出了一定的细胞毒性。与药物阿霉素相比，也显示出非常不错的毒杀活性。上述案例充分展示了本发明合成的手性双吲哚甲烷化合物具有成为抗肿瘤药物的潜力。
[0290]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：

1.一种手性双吲哚甲烷衍生物的制备方法，其特征在于，将式ⅱ化合物和式ⅲ化合物溶解在有机溶剂中，在温度为室温，手性磷酸催化剂的条件下进行合成反应，得到式ⅰ手性双吲哚甲烷衍生物；其中，r和r1分别独立选自氢、卤素、杂原子取代基、烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种，ar独立选自芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种。2.根据权利要求1所述手性双吲哚甲烷衍生物的制备方法，其特征在于，所述芳基选自苯基、萘基、菲基、蒽基、苊烯基、苊基、芴基、芘基和荧蒽基中的至少一种；和/或，所述杂芳基选自吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、恶唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹啉基、异喹啉基和嘌呤基中的至少一种；和/或，所述取代的芳基和取代的杂芳基中的取代基分别独立选自氟、氯、溴、碘、氰基、羟基、氨基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、硝基、巯基、羟基烷基、羟基烷氧基、氨基烷氧基、烷基酯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、环烷基、芳氧基、杂芳氧基、卤代烷基氧基和环烷基烷基中的至少一种。3.根据权利要求1所述手性双吲哚甲烷衍生物的制备方法，其特征在于，所述手性磷酸催化剂选自：基于联萘的手性磷酸催化剂、基于八氢联萘的手性磷酸催化剂和基于螺环骨架的手性磷酸催化剂中的至少一种；所述有机溶剂选自：二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、、四氯甲烷、氯苯、氟苯、甲苯和三氟甲苯中的至少一种；式ⅱ化合物和式ⅲ化合物的摩尔用量比为1：2；反应时间为10～14小时。4.如权利要求3所述手性双吲哚甲烷衍生物的制备方法，其特征在于，所述手性磷酸催化剂的结构式为：手性磷酸催化剂的使用量为式ⅱ化合物摩尔数的0.5～l0mol％。5.如权利要求1-4任一项所述方法制备的手性双吲哚甲烷衍生物，其特征在于，所述手性双吲哚甲烷衍生物结构式如下所示：
其中，r和r1分别独立选自氢、卤素、杂原子取代基、烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种，ar独立选自芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种。6.如权利要求5所述手性双吲哚甲烷衍生物，其特征在于，所述芳基选自苯基、萘基、菲基、蒽基、苊烯基、苊基、芴基、芘基和荧蒽基中的至少一种；和/或，所述杂芳基选自吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、恶唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并恶唑基、喹啉基、异喹啉基和嘌呤基中的至少一种；和/或，所述取代的芳基和取代的杂芳基中的取代基分别独立选自氟、氯、溴、碘、氰基、羟基、氨基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、烯基、炔基、硝基、巯基、羟基烷基、羟基烷氧基、氨基烷氧基、烷基酯基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基、杂环基烷基、环烷基、芳氧基、杂芳氧基、卤代烷基氧基和环烷基烷基中的至少一种。7.如权利要求5所述的手性双吲哚甲烷衍生物，其特征在于，手性双吲哚甲烷衍生物结构式如下所示：8.一种肿瘤抑制剂，其特征在于，所述肿瘤抑制剂由权利要求1～4任一所述的方法制备的双吲哚甲烷或如权利要求5～7任一所述的双吲哚甲烷制备得到。9.如权利要求8所述的肿瘤抑制剂，其特征在于，所述肿瘤包括宫颈癌细胞系、肺癌细胞系、卵巢癌细胞系、乳腺癌细胞系和结肠癌细胞系中的一种或多种。10.如权利要求8所述的肿瘤抑制剂，其特征在于，所述抗肿瘤药物的剂型包括：口服液、胶囊剂、片剂、膏剂、粉剂、颗粒剂、丸剂、栓剂、植入型制剂、定位靶向制剂、缓释制剂和
控释制剂中的至少一种医药学上可接受的剂型。

技术总结

本发明属于化学合成技术领域，尤其涉及抗肿瘤双吲哚甲烷衍生物化合物以及制备方法和应用，包括步骤:获取式Ⅱ化合物和式Ⅲ化合物，将所述式Ⅱ化合物和所述式Ⅲ化合物溶解在有机溶剂中，在温度为室温，催化剂为手性磷酸的条件下进行合成反应,得到式Ⅰ抗肿瘤的双吲哚甲烷；其中，R和R1分别独立选自卤素、杂原子取代基、烷基、芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种，Ar独立选自芳基、杂芳基、取代的芳基和取代的杂芳基中的任意一种。本发明提供的制备方法,具有操作简单实用，产率好，对映选择性高，绿经济性，环境友好，易于工业化的特点。化的特点。化的特点。