大肠杆菌检测实验报告

男式接尿器国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数
实验目的
实验原理:国标法操作的原理
实验器材:
培养箱,10只移液管,1只250ml锥形瓶,5只大试管,试管架,4个平皿,500ml
大烧杯1个,电子天平,纱布,脱脂棉,灭菌锅,PH计或PH试纸,100ml量筒,橡皮手套,超净台
实验药品:
磷酸盐缓冲液,蒸馏水,LB培养基,琼脂,5%NaOH,5%HCl
实验步骤:
一:
10只移液管,1只250ml锥形瓶,5只大试管,4个平皿,500ml大烧杯1个,100ml量筒进行洗涤,然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干,完成后放入超净台中。
塑料角码
用酒精擦拭超净台,紫外消毒30min
二:
1:用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。
2:用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中,制成培养基。
酚醛纸板3:用棉花堵住该锥形瓶的瓶口,用牛皮纸包住瓶口,用橡皮筋扎牢,再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。
4:灭完菌后放入超净台中备用。
三:
1:取1只无菌250ml锥形瓶,用量筒向其中加入49ml PBS
2:将1ml样品加入到该锥形瓶中,摇匀制成1:50的细菌溶液。
3:取4只试管,编号1—4
4:用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS
5:用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。
6:用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中,摇匀
7:用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取1ml细菌溶液,加入3中,摇匀......以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。
9:取4只平皿,编号1—4
10:分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取1ml的菌液置于4只平皿中,加入45—50摄氏度温度下的培养基,约15mm厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀;待培养基冷凝后倒置。
11:将培养基在36摄氏度条件下培养12小时。样本制作
12:取出培养皿,选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数。
四:实验结果(记得在操作过程和得到结果时拍照)
1号,2号菌落个数多不可计,舍弃
4号平皿中菌落数目小于10 cfu ,舍弃
3号平皿中菌落分布较均匀,数3号中的菌落数,一共有210个cfu 。
计算样品中细菌浓度为:1.05 ×105 Cfu/ml
点评
超净台中的实验步骤讲述详细,明确,不错。前面的步骤叙述有点乱,建议按照如下标题重新调整顺序。
实验步骤:
1、仪器清洗
将烧杯,培养皿、试管等仪器用洗衣粉清洗,超声5min.然后用清水清洗,超声5min,最后用三蒸水清洗,放入烘箱中烘干。
2、培养基配制
精确称量。。。。。。。。。。放入锥形瓶中,加入。。。。mL蒸馏水,摇匀
3,灭菌
包扎、灭菌,烘干备用
3、超净台中的操作(如上)
高压变频柜除了实验步骤和结果,还要有讨论和注意事项
例如:实验讨论:
捕虾笼
1、评价该方法(操作简易程度,灵敏度如何,适用性)
2、为何选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数?
注意事项
比如各种仪器的使用注意事项,以及保持洁净,防止染菌等。
如有侵权请联系告知删除,感谢你们的配合!

本文发布于:2024-09-21 21:49:33,感谢您对本站的认可!

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标签:实验   细菌   放入   试管   平皿
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