Dynabeads磁珠历史

1979年,John Ugelstad教授和他的同事发明了一种生产大小一致的多聚体微球技术。通过此项技术,他们生产出了直径在1.5~100μm结构对称的多聚体微球。而在此之前,美国航天航空局的专家们认为只有在无重力的情况下才能达到。现在这种采用复合顺磁物质制成的小球被命名为Dynabead。
Dynabeads生物磁分离技术
* Dynabeads是由γFe2O3和Fe3O4磁性材料合成的均一、超顺磁、单发散性多聚微球。每个微球体包被一层多聚材料,作为吸附和结合各种分子的载体。
* Dynabeads形状和大小的均一性保证了微球表面物理化学性质的一致,而高质量结果的获得和结果的可重现性是建立于它的这些特性上的。
* Dynabeads形状和大小的均一性为其本身与靶物质之间提供最佳的反应动力学,这就大大方便了它们之间快速、高效的结合。在许多情况下,仅需10分钟就可完成结合过程。
* 球形、确定的表面减少了化学粘附和非特异性结合。
* 均一的微球表面保证了目标探针的有效使用和最佳结合。
* Dynabeads的多聚外壳使您的靶物质免遭铁离子的破坏。Dynabeads是超顺磁,它们能够在磁场中表现出磁性而在无磁场时无磁性。
* 不同的Dynabeads类型特殊的亲水和疏水特性能促进分子结合到它们的表面上。
本文来自织梦
Dynal Biotech提供各种在其表面已包被或未包被有配基的磁珠。
Dynabeads的大小
细胞分离和细胞修饰过程中,标准尺度的Dynabeads 磁珠是4.5 μm,可应用于各种样本(如全血、骨髓、白细胞层)的细胞分离。而2.8 μm的Dynabeads通常用于分子水平上,如DNA、RNA、蛋白质的分离等。
Dynal Biotech拥有专门的技术来生产直径为1~10 μm的Dynabeads磁珠,并可接受订制服务。
Dynabeads的使用方法
Dynabeads可加入到不同种类的悬浮液中以结合靶物质(如细胞、核酸、细菌或其他生物分子),形成一种Dynabeads•靶物质混合物,在通过磁分离器(如Dynal MPC)后可以将该混合物从悬液中移去。
Dynal MPC 磁分离器的优点
* 操作简便
* 磁性强久
* 适合多种体积(50μl~50ml)
* 分离迅速
Dynabeads用于细胞分离与细胞修饰
传统的Dynabeads被用于从样本中分离或去除细胞。而现在的Dynabeads可提供更多的功能:
* 各种细胞的分离;
* 分离的细胞纯度达99%,适用于各种用途;
* 温和的细胞分离技术保证细胞的高存活力和产量;
* 可通过信号传导进行细胞修饰。
Dynabeads immunoseparations免疫分离技术 采用包被抗体的磁珠,从全血、骨髓、脐血或准备好的样品如白细胞层、单核细胞(MNC)和组织消化产物中分离细胞。其分离的细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞、单个核细胞、树突状细胞、干细胞、基质细胞和癌细胞等,可分离得到纯度为99%、99%存活力和95%产量的靶细胞。
内容来自dedecms
Dynabeads immunomodifications免疫修饰反应技术 由于Dynabeads的大小(4.5 μm)与细胞的大小相近,所以它能将模拟的体内刺激信号提呈给细胞。如Dynabeads CD3/CD28 T Cell Expander可同时通过CD3抗原呈递一个刺激信号和通过CD28抗原呈递一个共刺激信号给T细胞,促进T细胞克隆增殖。
Dynabeads 细胞分离法
该方法是利用包被在Dynabeads表面的抗体与特异性细胞表面抗原结合来进行的。根据分离的靶细胞类型和靶物质用途的不同,有不同的方法可供选择,而按照应用领域的不同可以将Dynabeads分为研究级Dynabeads、临床用的无菌Dynabeads、体外用的cGMP级Dynabeads。
所有的Dynabeads在保存靶细胞的存活力和增殖力方面的质量是相同的。您可以选择即用型Dynabeads-已包被针对某种特异细胞的一抗,或者选用用户型Dynabeads,用户需将自己选用的特异抗体包被在上面。这一过程并不需要经过离心或昂贵的柱分离,而只需一台磁分离器即可,Dynal MPC是专为磁分离而设计的,并可以根据样品的体积和试管大小来选择不同型号的Dynal MPC。
细胞分离产品可分为如下两类
1. Ready-to-use primary products即用型产品该产品已包被有针对一定范围的人类细胞表面标志的高质量、纯化的单克隆抗体。
内容来自dedecms
2. Dynabeads for use with your own antibodies用户型产品 该产品适用于分离各种类型的细胞,这些磁珠已经包被有纯化的二抗以识别如小鼠、大鼠、兔等的一抗,或磁珠表面已活化并可直接与蛋白质结合。
以上两类Dynalbeads 产品均适用于阳性或阴性分离。
阳性分离
槐木可以做防腐木吗已包被有抗体的Dynabeads可以直接从混匀的细胞样品中选择性吸附靶细胞。在2~8℃,Dynabeads 在15~30分钟内可与细胞完成结合,形成Dynabeads•靶细胞复合物。然后置于Dynal MPC磁分离器中,与磁珠结合的细胞就会被吸附在靠近磁分离器的试管壁上,用移液器移去上清液就可以获得您要的细胞。
优点
* 简便、快捷;
* 高纯度(99%)、高产量(95%);
* 通过与Dynabeads 结合来获得靶细胞;
* 可方便地将与细胞结合的Dynabeads 去除;
所获得的细胞应用范围广。
注:在许多领域中,如分子研究或细胞培养等可不必去除Dynabeads,但在某些后续应用研究,如流式细胞术等,则需要将Dynabeads 与靶细胞分离。
我们提供以下两种系统,可有效地从阳性筛选细胞中去除Dynabeads:
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恶劣的太阳
 
DETACHaBEAD DETACHaBEAD是Dynal Biotech的专利技术。它是一种抗Fab多克隆抗体,可特异地与几种包被在Dynabeads表面的一抗结合。在吸附有磁珠的细胞中加入DEACHaBEAD后,它可以在细胞表面竞争抗原/抗体结合,最终将包被有抗体的磁珠从细胞表面释放出来,保证分离的细胞表面无抗体吸附且活力正常。该产品适用于人的CD4、CD8、CD19和CD34细胞的分离。
CELLection Positive Isolation System with Universal Detachment CELLectionTM Dynabeads是专为许多细胞类型的阳性分离而特别设计的。该产品的特点在于磁珠与其表面包被的抗体之间是通过DNA连接的。当获得靶细胞后,可以通过加入该试剂盒提供的DNase释放缓冲液非常容易地将磁珠与靶细胞分离,从而获得纯化的靶细胞用于后续研究。该产品适用于人CD2+的分离或上皮肿瘤细胞的富集,也可用于小鼠的一抗或自选的任何生物素标记的抗体。阳性分离出来的细胞可用于流式或细胞培养。
阴性分离
通过从细胞混合物中去除无用的细胞,从而获得靶细胞。Dynal Biotech阴性分离试剂盒含有经高度优化的抗体混合物加上Depletion Dynabeads,可从MNC样本中去除无用的细胞,获得活体的未致敏靶细胞。该类试剂盒可适用于人的单核细胞、T细胞、B细胞和NK细胞。若需对其它细胞类型进行阴性分离,则可采用自备的抗体混合物和二抗磁珠,如Dynabeads Pan Mouse IgG。 织梦内容管理系统
优点
* 靶细胞仍保持无抗体和磁珠结合的表面;
* 未致敏靶细胞可做任何分析之用;
* 用Dynabeads 除去了无用的细胞;
氚电池>csmate
* 高产量 (95%)、高存活率(95%)。
Dynal用于基础研究产品
用于研究人细胞的Dynabeads产品钣金专用工具
T 细胞扩增剂(目录号 111.31)
Dynabeads CD3/CD28 T cell Expander 提供了一种简单、有效的通用人类T细胞增殖的方法。CD4+ / CD28+或CD8+ / CD28+克隆可被反复刺激5次。经反复刺激后,CD4+ T细胞克隆仍保留抗原特异性,同时CD8+克隆仍保留细胞毒性。不用上调CTLA4,Dynabeads CD3/CD28模拟体内递呈抗原给T细胞,刺激人类T细胞克隆增殖。这一方法不需要大量的自体MHC相匹配的APC和抗原,或异体MNC和有丝分裂原。T细胞克隆不会被MNC污染,Dynabeads 可经磁分离器方便地去除。增殖的克隆培养数月后,可用于研究抗原特异性。
汽车轮胎模具使用Dynabeads增殖的人T细胞克隆。 
与两个Dynabeads D4结合的人CD4+细胞  用Monocyte Negative Isolation Kit从MNC中分离出DC来源的单核细胞  用CD31包被的Dynabeads分离出人肺微脉管内皮细胞。FITC标记的二抗显。
织梦好,好织梦
应用于肿瘤微小残留病研究的Dynabeads产品
Dynabeads产品早已应用到肿瘤微小残留病的研究领域中,为研究人员直接从全血、骨髓或单核细胞悬浮液中快速富集肿瘤细胞提供了简易、灵敏的检测方法。
优点
* 高效地富集肿瘤细胞;
* 高灵敏度-可检测到1ml血液中的单个瘤细胞;
* 适用范围广-所获得的肿瘤活细胞可用于培养、染、FISH、PCR或RT-PCR等方面的研究。
两个主要步骤
1. 从初始样品中富集瘤细胞;
2. 对富集后的瘤细胞分析。
富集程序
该方法可用于筛选大体积的样本(或大量细胞)以提高检测的灵敏度。例如,当原发肿瘤释放到外周血时,肿瘤细胞数量很低(10个/ml)。使用Dynabeads不需将样品制成单细胞悬浮液便可直接从全血或骨髓中富集肿瘤细胞,这样就可以避免在密度梯度离心过程中可能发生的肿瘤细胞的丢失。
富集技术
* 用于细胞水平研究的上皮肿瘤细胞的阳性分离;
* 用于分子水平研究的上皮肿瘤细胞的阳性分离;
* 肿瘤细胞的阴性分离;
* 自备抗体对肿瘤细胞的阳性分离。
肿瘤细胞的分析技术
经Dynabeads获得的纯化肿瘤活细胞可用于细胞水平研究如细胞培养或免疫细胞化学,也可用于分子水平研究包括针对特异标记物的RT-PCR和PCR。 本文来自织梦
使用250μl CELLection Epithelial Enrich从5ml全血中分离出的上皮肿瘤细胞。
 
自备抗体的Dynabeads产品
如果Dynabeads即用型产品已无法满足于您所选择的细胞类型,Dynabeads还可以提供一系列的产品让您可以使用自备的抗体对各种细胞类型进行阳性或阴性的分离。

本文发布于:2024-09-22 21:34:55,感谢您对本站的认可!

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