一、实验目的
掌握动物细胞活体染的原理和相关的技术。
二、实验原理
活体染是指对生活有机体的细胞或组织着但又无害的一种染法。它的目的是显示生活细胞内某些结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。 詹纳斯绿B（Janus green B）是毒性较小的碱性染料，可专一的对线粒体进行超活染，这是由于线粒体内的细胞素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态（即有状态），呈蓝绿；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无的基（即无状态）。
三、实验用品
铑粉
1.材料：
集束天线小白鼠肝脏
2.试剂：
Ringer溶液：NaCl 0.85g + KCl 0.25g + CaCl2生殖器疱疹新药 0.03g + 蒸馏水100ml
1%、1/5000詹纳斯绿B溶液：称取50mg詹纳斯绿B溶于5ml Ringer溶液中，30-40℃加热，使之溶解，用滤纸过滤后，即为1%原液。取1%原液1ml加入49ml Ringer溶液，即为1/5000工作液装入棕瓶中备用。
3.器材：
显微镜、解剖盘、剪刀、吸管、载玻片、盖玻片、擦镜纸
四、强氧化剂实验步骤
1.用断头法处死小白鼠，置于解剖盘中，剪开腹腔，取出肝脏，选取边缘较薄的肝组织0.5cm2，放入小烧杯中，用Ringer液冲洗去血污。
2.滴加1/5000詹纳斯绿B溶液于双凹片的凹穴中，再将上述洗净肝组织移入染液，染20-30分钟，以细胞块边缘被染成蓝绿为准。（注意：染时要使组织块上面部分半露在染液外，不可完全淹没，以便使线粒体酶系得到氧化）
3.吸去染液，将肝组织重置小烧杯中，滴加Ringer溶液0.5ml，用剪刀将组织充分剪碎制悬液。
4.取上述细胞悬液滴片，加盖玻片，高倍镜下观察。
仿形切割机
五、实验结果
在高倍镜下观察到了小鼠肝细胞，每个细胞中都有一些被染成蓝绿的球状结构，为线粒体。如下页图所示：
高倍镜下线粒体超活染图
六、分析与讨论
1.aveee在取肝脏时要注意大小，大概为指甲盖的1/3左右为宜，且不宜太厚，防止里面的线粒体不宜被染，影响实验结果的观察。
2.在染过程中要注意不可把肝脏小块全部浸没在染液下，这样会使肝脏小块进行有氧呼吸，则詹纳斯绿B无法被细胞素氧化酶充分氧化，导致实验失败。
3.染过程中要注意滴加染液，防止染液挥发干，使肝脏小块充分染。
4.观察时要注意区分肝细胞和红细胞，肝细胞体积相对于红细胞来说较大。
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