山东省科学院生物中心
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感谢您选用由山东省科学院生物中心研制、获得国家发明专利的“全自动还原糖测定仪”。
本技术是根据费林试剂测定原理设计而成的全自动测定仪。测定的各种条件由计算机控制,操作者只需用移液器将微量样品注入反应池即可全自动完成测定过程,自动显示和打印结果,操作简单,使用方便,测定周期短,准确度高。 一、基本原理
斐林试剂是一种氧化剂,由甲、乙液组成。测定时一定量的甲、乙液混合,首先形成氢氧化铜,然后形成酒石酸钾铜络合物。次甲基蓝作为滴定终点指示剂,在氧化溶液中呈蓝,被还原后呈无。用标准还原糖滴定时,还原糖首先使铜还原,至铜被还原完毕,糖才使次甲基蓝还原成无,即为滴定终点。 在滴定过程中,溶液颜逐渐变化:蓝→深蓝→浅蓝→
紫红→淡紫红→在终点时突然变化至无透明。
用特定波长的光电转换装置,检测滴定过程中透光率的变化(见图1)。根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点。根据终点时消耗标准还原糖的量,由控制系统自动计算出样品中的还原糖含量,并显示和打印结果。
滴定过程的电信号变化及控制原理如下:
图2、自动控制系统
二、仪器结构
仪器由反应系统、自动控制系统和机壳三部分组成。
加热 进样 滴定
清洗羊毛抛光轮
温度传感器
光源 光电转换
试剂 排空
搅拌电机
图3、反应池结构图
滴定反应系统由滴定池主体构成;滴定池左右两侧有入射光源和光电转换器,滴定池前后两侧有液体进出管道,滴定池内侧有温度传感器和液体加热电极,根据需要调整液体温度;滴定池底部有电磁搅拌器,使滴定液体均匀混合;上部是进样口,可用微量注射器将被测样品注入滴定池(图3)。柱塞泵自动加入标准液、滴定液、两个蠕动泵(图4)可自动完成清洗和排空。
自动控制系统包括电源电路、控制电路、控制面板、微型打印机,按设定程序控制滴定池
液体的进出、液体温度、搅拌、光电反应信息的收集和转换、计算、测定结果显示及打印。
双柱塞泵 弹簧 泵头 凹型模块 泵管 单柱塞泵
透风窗
蠕动泵1 蠕动泵2
图4、泵系统
三、操作步骤
(一)参数设置
1、 模式选择:主程序为滴定过程中电压信号由低到高变化,模式灯亮;按模式健后,模式灯灭,滴定过程电压信号由高到低变化。
2、 参数意义:
F0-----排空泵(1)(默认值为22秒),设定排空泵转动时间。
F1-----排空泵(1)+ 清洗泵(2秒)(默认值为 4),设定排空泵、清洗泵转动时间 。
F2-----清洗泵(2)(默认值为9秒),设定清洗泵转动时间。
F3-----试剂泵(3)(默认值为40秒),设定试剂泵转动时间。
F4-----泵3复位时间(默认值为48秒)。
F5-----泵4预推时间(默认值为8秒)。
F6-----泵4复位时间(默认值为99秒)。
F7-----时钟(暂时不用)。
F8-----G1设备集电环值(默认值为0),测定样品的线形范围。
F9-----G2值(默认值为10),测定样品的线形范围
FA----采样电压,根据不同的样品选择(默认值为3)。
FB----连续测定次数(默认值为10次)。
(二)操作步骤
1 插上电源,打开后盖上的开关,屏幕上显示出 0000.
2 重复按压[功能]键进行各参数值设定(如不输入参数值,各参数值则为仪器的初始默认值),按[输入]键完成参数输入。
3 按[开关]键,启动程序,仪器自动进入稳定程序及定标,T1值的确定。
4 微型打印机打印出T1值之后进行T2值的标定。待进样指示灯亮时,用移液器吸取500微升定标用标准葡萄糖(1%)溶液注入反应池进行定标,反应完成后仪器打印定标T2值。
5 定标完成后,自动进入测定程序。用取液器吸取500微升待测液, 待进样指示灯亮时将待测液注入反应池,反应结束后仪器自动打印测定结果。
6 反应结束后蠕动泵1受机和蠕动泵2动作,排空、清洗,完成一个样品测定程序自动进入下一个测定循环。
7 按照测定次数设定值完成一个测定周期后,直接按[测定]键,进入下一个测定循环。
8 测定过程中如果需要暂停,可在显示屏数字闪烁时按下[测定]键,该反应完成后,自动停机;再次测定只需按下[开关]键,继续测定,无需重新定标。
破窗锤
9 测定结束后,关掉电源即可关机。
(三)复位设置
进样器内有较大气泡时进行复位操作。甲、乙液泵按复位Ⅰ实现复位,卸下进样器手工排出气泡;标准葡萄糖泵按复位Ⅱ实现复位,卸下进样器手工排出气泡。
(四)标准试剂: