一、常规染技术（HE染）
苏木素-伊红染简称HE染，是最常用的染方法，苏木素是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫，伊红是一种酸性染料，能将细胞质染成红或淡红。HE染可以显示肾小球的细胞增生、炎细胞浸润。还能很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质水肿情况。
（一）需要试剂
①苏木素染液；②1%盐酸乙醇液；③氨水；④1%伊红液。
（二）具体染步骤
2.苏木素染细胞核1～2min，水洗。
3.入1%盐酸乙醇分化数秒，水洗。
4.氨水返蓝数秒。
5.流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝。
%伊红染数秒，水洗。
7.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。
染结果：胞核呈蓝，胞浆呈红，红细胞呈橘红，其他成分呈深浅不同红。
（三）注意事项
1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着，影响观察。 3.染后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
二、特殊染技术
（一）过碘酸-希夫氏染（PAS染）
PAS染可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染。
1.需要试剂 ①1%过碘酸；②schiff氏液染；③苏木素染液；④氨水。
2.具体染步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1%过碘酸氧化10～15min，水洗。
（3）入schiff氏液染10～30min，水洗。
（4）苏木素染细胞核1～2min，水洗。
（5）入1%盐酸乙醇分化数秒，水洗。
（6）氨水返蓝数秒。
（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝，基底膜染成粉红。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染结果 PAS阳性物质（多糖和糖原）呈红，核呈蓝。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着。
（2）Schiff氏液染的时间需严格控制。时间过长标本基底膜着过深，时间过短标本基底膜着淡。
（3）入1%盐酸乙醇分化时间要短，时间长容易使标本退。
（4）染后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
实验室分析天平（二）六胺银-马松染（PAM-Masson染）
PAM-Masson染能更清晰地显示基底膜、免疫复合物和胶原纤维，免疫复合物的定位更为精确。
1.需要试剂
①1%过碘酸；②六胺银液；③苏木素染液；④氨水；⑤Masson液；⑥1%亮绿液。
2.具体染步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1%过碘酸氧化10～15min，水洗5min。
（3）入六胺银液72℃染30～50min，以显微镜下见基底膜呈黑即可。
（4）加2%氯化金数滴于组织，5%硫代硫酸钠洗。
（5）苏木素染细胞核1～2min，1%盐酸乙醇分化，氨水返蓝。
（6）入Masson液约10min，1%醋酸洗。
（7）入1%亮绿5～8min，1%醋酸洗。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染结果 基底膜及系膜基质黑，免疫复合物红。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着。
（2）染时间与室温和切片厚度有关，室温低、切片厚需染时间长，反则需染时间短。入六胺银液染的时间需严格控制。时间过长基底膜着过深，时间过短基底膜着淡。
（3）2%氯化金分化时间要短，时间长容易使银染退。
（4）染后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
（三）马松染（Masson染）
Masson染能显示各部位的免疫复合物，肾小球硬化和肾间质纤维化程度。
1.需要试剂 ①苏木素染液；②氨水；③Masson液；④防爆电动紧急切断阀1%亮绿液。
2.具体染步骤合成氨工艺流程
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）媒染剂（10%重铬酸钾、10%三氯醋酸等量混合）染10～30min，水洗。
（3）苏木素染细胞核1～2min，水洗。
（4）入1%盐酸乙醇分化数秒，水洗，氨水返蓝数秒，水洗。
纸浆模具（5）入Masson液约10min，水洗，1%醋酸洗。
（6）入%磷钨酸约30s，水洗，1%醋酸洗。
（7）入2%橘黄G约2min，水洗，1%醋酸洗。
（8）入1%亮绿5～8min，1%醋酸洗。
（9）入100%乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染结果 细胞核红，胶原纤维绿，免疫复合物红。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着。
（2）入Masson液染的时间需严格控制。时间过长着过深，时间过短着淡。
（3）入1%亮绿染时间需要镜下控制，时间长容易覆盖Masson液红。
（4）染后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
（四）刚果红染
在肾脏病理染中，刚果红染能够将淀粉样物质染成砖红，是诊断淀粉样变肾
病的常用染方法之一。
1．需要试剂 ①高锰酸钾—硫酸液；②苏木素染液；③氨水；④碱性刚果红液。
2．具体染步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）高锰酸钾-硫酸混合处理3min，水洗。
（3）5%草酸处理3min，水洗。
（4）苏木素染核2min，水洗，蓝化。
（5）碱性刚果红液染10～30min。
（6）入100%buck降压电路乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3．染结果 细胞核蓝，淀粉样物质呈砖红（图3-12）。
4．注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着。
（2）碱性刚果红液染时间应该镜下控制，染液现配现用着好。
（4）染后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
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