Hanks 液

1、Hanks液：

Hanks液是常见的平衡盐溶液(BSS)之一。D-Hanks液则是无钙镁离子的Hanks液。BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致，且配方简单，是组织培养基本用液，常用于配制培养基及其他用液，或洗细胞等，细胞在BSS中可生存几个小时。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一种常用的细胞消化液，原代培养时用于处理组织块，使细胞分离下来。传代时用胰蛋白酶使培养细胞离开所贴附的培养瓶表面，并分散成单个细胞。胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏，呈白粉末状，易潮解，应在低温干燥处保存。胰酶的活力常用一份胰酶解离酪蛋白的份数表示，常用胰酶活力为1：125或1：250。本实验室一般用1：250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长，则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞，导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力，所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时，可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。细胞传代使用的胰酶浓度是0．25％或0

．2％。用于原代细胞培养消化组织块则为0．1％或0．无机砂浆125％。
hanks液和Earle液是多数培养基的基础溶液，两者主要区分是缓冲能力不同。Hanks液中NaHCO3含量较低（0.35g/l），其缓冲能力较弱，一般用空气平衡；Earle液含有高浓度的NaHCO3（2.2g/l），其缓冲能力较强，溶液PH值需在5%的CO2培养箱中才能达到平衡
2、Hanks 液的配制

Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液（Balanced Salt Solutions, BSS），简称HBSS。主要用于配制配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞，组织培养液。

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原液A
	NaCl	160g
	MgSO4·7H2O	2g
	KCl	8g
	Mg Cl2·6H2O	2g
	CaCl2	2.8g
	溶于1000ml双蒸水
原液 B
（1）	Na2HPO4·12H2O	3.04g
地源热泵换热	KH2PO4	1.2g
	葡萄糖	20.0g
	溶于800ml双蒸水
（2）	0.4%酚红溶液：取酚红0.4g，置玻璃研钵中，逐滴加入0.1N NaOH，并研磨，直至完全溶解，约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中，用双蒸水洗下研钵中残留酚红液，并入量瓶中，最后补加双蒸水至100ml。
	将（1）液和（2）液混合，补加双蒸水至1000ml，即为原液B。
硅钢片密度应用液
	原液A	1份
	原液B	1份
	双蒸水	18份
	混合后，分装于200ml小瓶中，10微型直线电机磅高压蒸气灭菌15分钟，临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6

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