2014年3月
橡皮弹
青海石油第32卷第1期浅析绝迹稀释法在测定细菌方面的应用段培珍*程丁山
摘要本文针对油田注入水中细菌测定的两个标准进行了对比分析，对两个标准中细菌的读数方法、实验方法进行了分析解读和步骤细化，使实验人员在分析过程中更方便明确的对细菌进行 分析和记数。
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关键词细菌分析读数方法注水水质
阿洛酮糖在油田注入水评价体系中，细菌是其中主要的一个评价指标，对于细菌正确监测是非常关键的，油田注水系统中，细菌给油田生产带来了极大的危害。所以在油田水处理中，往往要对注入水进行细菌监测，这是决定水处理方案的重要依据之一。本文通过对SY/T0532-2012《油田注入水细菌分析方法绝迹稀释法》与SY/T5329-2012《碎屑岩油藏注水水质推荐指标及分析方法》中的细菌分析方法的异同点进行分析比较，并对细菌的测定步骤和读数方法进行了细化。
1．两个标准测定细菌的原理和步骤
（1）原理：SY/T0532-2012标准和SY/T5329-2012标准都是采用绝迹稀释法，即将欲测定水样用无菌注射器逐级注入到测试瓶中进行接种稀释，送实验室培养，根据细菌瓶阳性反应和稀释倍数，计算出细菌的数目。两个标准测定细菌的原理相同。
（2）测定步骤：为较准确的测定细菌含量，应采用二次重复法、三次重复法、四次重复法或五次重复法。二次重复法是对每个水样，每个稀释倍数做两个平行样，三次重复法是对每个水样或每个稀释倍数做三个平行试验，以此类推，水样应稀释至不长细菌的稀释等级为好。
步骤（两标准细菌分析步骤基本相同）：
①将测试瓶排成一组，并依次编上序号。
②操作者的手和注射器进行消毒处理后，取1.0ml水样注入到1号瓶内，充分震荡。
③用另一支无菌注射器从1号瓶内取1.0ml水样注入到2号瓶中，充分震荡。
④再更换一支无菌注射器从2号瓶内取1.0ml水样注入到3号瓶中，充分震荡。
⑤以此类推一直稀释到最后一瓶为止，根据细菌含量决定稀释瓶数，一般稀释到7号瓶。
⑥把上述测试瓶放入恒温培养箱中培养，温度控制在现场水温的±5℃内，7天后读数。
两个标准只有培养温度有所差别：SY/T0532-2012是放入35℃恒温培养箱中培养，SY/ T5329-2012是温度控制在现场水温的±5℃内。
*段培珍，高级工程师，1999年毕业于西南石油大学油田化学专业，硕士研究生学历。
2．细菌的读数方法
根据SY/T0532-2012标准在进行多组测试瓶细菌计数时，确定生长指标应遵循的原则：从出现阳性瓶的稀释等级开始向后选取三个稀释等级，各稀释等级以阳性瓶数量进行计数而得到指数（遇到000时应向前顺推一级计数，不足三个稀释等级时，也需向前顺推至达到三个等级时至），指数再乘以水样的稀释倍数10n ，（n 为指数位置之前所稀释的次数），得出生长指标，查相对应的细菌计数
表，把由指数查的菌数代
入，就得出了水样中该种
细菌含量（个/ml ）。金属焊接
在原版SY/T5329-1994和SY/T0532-1993两
个标准中，细菌的读数方
法差异较大，自2012年3
月1日两个新标准SY/T5329-2012和SY/T0532-2012颁布实施以来。细菌的读数方法统一采用SY/T5329-2012《碎屑岩油藏注水水质指标及分析方法》这一标准的计数方法，也就是这两个标准的细菌计数方法是相同的。具体计数方法见表1。
3．细菌分析在青海油田的应用
在青海油田的水质监测过程中，细菌分析是必不可少的一项指标。根据两个细菌分析的标准和笔者在实验室细菌化验分析方面的经验，推荐细菌检测的分析方法如下：
（1）从低碳环保角度笔者推荐采用二次重复法分析细菌含量。如果是不知道细菌含量的水质样品，推荐进行7级稀释，如果是经常分析的样品，一般建议稀释到细菌瓶不发生阳性反应即可。
（2）细菌培养采用
现场温度±5℃，目前青
海油田的细菌培养温度
采用40℃
（3）对于细菌的计
数方法，从全部没有的
阳性反应的那一级向前推三级进行读数，然后乘以相应的倍数，如果有阳性反应的一共不足三级，直接读数即可，查表可知细菌含量。
以二次重复法，5级稀释，举例如下（见表2）：
示例1：首先到一级全部没有阳性反应的作为定位瓶，即3号瓶第2级，该级前面一共不足三级，取齐三位读数，读数为220，查表得细菌为25个/ml 。
示例2：同上读数为100，查表得细菌含量为0.6个/ml 。表1细菌菌量计数示例表表2细菌计数示例
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2014年3月
青海石油132
第32卷第1期133
段培珍：浅析绝迹稀释法在测定细菌方面的应用
示例3：5号瓶即第4级瓶子全未发生反应，向前推三级读数，读数为221，查表得70×101个/ml。
示例4：五级瓶子全部变，不到定位瓶，只能读出大致的读数≥200×104，即细菌含量≥2.5×104个/ml。数控剪床
4．结论
（1）细菌的培养应该以现场温度为基准，控制在现场温度±5℃的范围内。
（2）细菌分析应该以分析到定位瓶为准，如果没有到，在下一次实验室应该进行更多级次的稀释。
（3）细菌读数时，每一级只读发生阳性反应的细菌瓶数量。
（4）定位瓶向前读三级乘以相应的倍数，查表即得细菌含量；发生阳性反应一共不足三级时直接从零级开始读数，查表即得细菌含量。
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