LB液体培养基:
Bacto-蛋白胨 | 高压阻尼线 10g |
酵母抽提物 | 5g 轮胎帘布 |
氯化钠 | 10g |
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加950ml蒸馏水溶解,用5N氢氧化钠调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。 LB固体培养基:
每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。
SOB液体培养基
Bacto-蛋白胨 20g
酵母抽提物 5g
NaCl 0.5g
加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基
SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基
每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。
NA固体培养基
牛肉浸膏 | 3g |
酵母浸膏 | 1g |
蛋白胨 蔗糖 琼脂粉 | 5g 10g 15g |
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加950ml蒸馏水溶解,调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
TB培养基 :
将下列组分溶解在0.9L水中:
Bacto-蛋白胨 | 12g |
酵母抽提物 玉米割晒机 | 24g |
甘油 | 4ml |
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各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ
葡萄糖 2.25 g 50mmol/L
1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L
0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L
调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ
10 mol/L NaOH 2ml
10% SDS 10ml
用水定容至100 ml,现配现用。
溶液Ⅲ
5 mol/L 醋酸钾 60ml
冰醋酸 11.5ml
水 28.5ml
高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液
10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*
0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*
1mol/L NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB抽提液
2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)
100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *
1.4mol/L NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl)
在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。如果需要,可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml.
CTAB沉淀液
1%(w/v) CTAB
50mmol/L Tris.Cl, pH 8.0
10mmol/L EDTA, pH8.0
PBS缓冲液:
十二水磷酸氢二钠 | 15g |
磷酸二氢钾 | 1g |
氯化钠 | 40g |
氯化钾 | 1g |
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定容至5000ml, 调pH至7.2。
ELISA包被液:
定容至1000ml,调pH至9.6。
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ELISA洗涤液(0.01M PBST):
5000ml PBS中加2.5ml吐温-20
显液(底物溶液-邻苯二胺溶液):
pH5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液:0.1 M 柠檬酸(19.2 g/L) 24.3 ml、0.2 M Na2HPO4 (28.4 g/L) 25.7 ml、 临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺(OPD)4 mg,溶解后加入30%H2O2 15 μl;
终止液:2 M H2SO4
TE缓冲液(pH8.0):
Tris·HCl(pH8.0) | 10mmol/L |
EDTA(pH8.0) | 1mmol/L |
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高压灭菌。
10% SDS:
10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中,加热至68℃溶解,加几滴浓盐酸调pH至7.2,定容至100ml,过滤除菌。
气体混合器50×TAE缓冲液
Tris 242 g
冰醋酸 57.1 ml