常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方
LB液体培养基:
Bacto-蛋白胨
高压阻尼线
10g
酵母抽提物
5g
轮胎帘布
氯化钠
10g
 
 
加950ml蒸馏水溶解,用5N氢氧化钠调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌保存
LB固体培养基:
每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。
SOB液体培养基
Bacto-蛋白胨    20g
酵母抽提物    5g
NaCl    0.5g
加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基
SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基
每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。
NA固体培养基
牛肉浸膏
3g
酵母浸膏
1g
蛋白胨
蔗糖
琼脂粉
5g
10g
15g
 
 
加950ml蒸馏水溶解,调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
TB培养基 :
将下列组分溶解在0.9L水中:
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Bacto-蛋白胨
12g
酵母抽提物
玉米割晒机
24g
甘油
4ml
 
 
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ
葡萄糖 2.25 g    50mmol/L
1mol/L Tris·Cl(pH8.0)  6.25ml    20mmol/L
0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml    10mmol/L
调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ
10 mol/L NaOH    2ml
10%  SDS    10ml
用水定容至100 ml,现配现用。
溶液Ⅲ
5 mol/L 醋酸钾    60ml
冰醋酸    11.5ml
水    28.5ml
高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液
10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*
0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*
1mol/L NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB抽提液
2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)
100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *
1.4mol/L NaCl
于室温保存(可在几年内保持稳定)
CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl)
在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。如果需要,可加热至65℃溶解。定容终体积至100ml.
CTAB沉淀液
1%(w/v) CTAB
50mmol/L Tris.Cl, pH 8.0
10mmol/L EDTA, pH8.0
PBS缓冲液:
十二水磷酸氢二钠
15g
磷酸二氢钾
1g
氯化钠
40g
氯化钾
1g
 
 
定容至5000ml, 调pH至7.2。
ELISA包被液:
碳酸钠
1.59g
碳酸氢钠
2.93g
 
 
定容至1000ml,调pH至9.6。
碳纤维尾翼
ELISA洗涤液(0.01M PBST):
5000ml PBS中加2.5ml吐温-20
显液(底物溶液-邻苯二胺溶液):
pH5.0 磷酸盐-柠檬酸缓冲液:0.1 M 柠檬酸(19.2 g/L) 24.3 ml、0.2 M Na2HPO4 (28.4 g/L) 25.7 ml、 临用时取上述溶液10 ml, 加邻苯二胺(OPD)4 mg,溶解后加入30%H2O2 15 μl;
终止液:2 M H2SO4
TE缓冲液(pH8.0):
Tris·HCl(pH8.0)
10mmol/L
EDTA(pH8.0)
1mmol/L
 
 
高压灭菌。
10% SDS:
10g十二烷基硫酸钠溶于90ml水中,加热至68℃溶解,加几滴浓盐酸调pH至7.2,定容至100ml,过滤除菌。
气体混合器50×TAE缓冲液
Tris    242 g
冰醋酸    57.1 ml

本文发布于:2024-09-21 22:15:47,感谢您对本站的认可!

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