植物细胞培养基组成和培养条件

植物细胞培养基组成和培养条件
培养基的组成对植物细胞的生长和代谢物质的生产影响极大。典型的培养基有Murashige-Skoog(MS),Linsmaier-Skoog(LS),white和B5等四种。
琉璃砖无机盐类:在无机盐中,磷酸根及氮源(NH4+或N03-)的含量对细胞的生长与物质生产有明显的影响。另外,一些金属离子如Ca2+、Cu2+、 Mg2+等的含量往往也有重要影响。---碳源:通常使用2―3%的蔗糖作碳源,也有使用葡萄糖或果糖。使用单糖的优点是方便分析测定,且有助于细胞生长动力学分析。
植物生长调节物质:植物生长调节物质对植物细胞的生长和代谢物质生产的影响十分大。它可分为两大类:植物生长素类有2,4―D(二氯苯氧基乙酸)、IAA(吲哚基醋酸)、NAA(萘乙酸)等,细胞激动素类有BA(苄基腺凛吟)、动力精和玉米素。清水植物黑发
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颗粒冷却塔其他因素:植物细胞培养的影响因素还有培养系统内气相组成(CO2和乙烯含量)、前体物质、氨基酸、维生素及诱导剂等。
培养条件
温度:培养温度对植物细胞生长及二次代谢产物生成有重要影响。通常,植物细胞培养采用25℃。
氧化锡搅拌:在摇瓶实验中,通常摇床的转速取90―120r/min。
pH值:通过细胞膜进行的H+离子传递对细胞的生育环境、生理活性来说无疑是重要的。在培养过程中,通常pH作为一个重要参数被控制在一定范围内。植物细胞培养的适宜pH值一般为5―6。
通气:通气是细胞液体深层培养重要的物理化学因子。好气培养系统的通气与混合及搅拌是相互关联的。对摇瓶试验,通常500m1的三角瓶内装80―200m1的植物细胞培养液较适宜。当然,气液传质还与瓶塞的材料有关。试验表明,从溶氧速率考虑,以棉花塞最好,微孔硅橡胶塞次之,铝箔塞最差。
光:光对植物有着特殊的作用。光照射条件不仅通过光照周期、光的质量(即种类、波长)而且通过光照量(光强度)的调节来影响植物细胞的生理特性和培养特性。研究表明,光调节着细胞中的关键酶的活性,有时光能大大促进代谢产物的生成,有时却起着阻害作用。
网上冲印系统细胞龄:在培养过程的不同时期,细胞的生理状况、生长与物质生产能力差异显著。而且,使用不同细胞龄的种细胞,其后代的生长与物质生产状况也会大不一样。通常,使用处于对数生长期后期或稳定期前期的细胞作为接种细胞较合适。
接种量:在植物细胞培养中,接种量也是一个影响因素。在再次培养中,往往取前次培养液的5―20%作为种液,也以接种细胞湿重为基准,其接种浓度为15―50g(湿细胞)/L。由于接种量对细胞产率及二次代谢物质的生产有一定影响,故应根据不同的培养对象通过试验,确定其最大接种量。

本文发布于:2024-09-23 11:22:53,感谢您对本站的认可!

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