tt2771 目的
建立肺炎支原体抗体 IgM金标检测试剂盒作业指导书，确保生产过程处于受控
状态。
2 范围
适用于肺炎支原体抗体 IgM金标检测试剂盒相关工序的操作者。
3 职责
3.1操作人员应严格执行本作业指导书。
3.2生产主管负责监督检查。
3.3质检部质检员负责抽查执行情况。
4 工作内容
4.1生产工艺流程图
※
胶体金
制备
| | ★ | 胶体 |
| 抗 | 胶 |
| 体 | |
单克隆缩管加工 | 体 | 金反 |
金 |
|
| 应膜 |
抗体 | 检 |
标 |
检测 |
制备进 | 测 线路转换器 | 记 |
|
| | |
| | | |
★
肺炎支
原体重
组抗原
的表达
※
多聚磷酸盐
NC
膜
处
理
兔抗鼠
IgG抗体
制备
抗
原
检
测
NC
膜
检
测
★
NC
膜
包
被
抗
体
检
测
| | | 质 | 装 | 产 |
| 贴 | 切 | 量 | 卡 | 品 |
| | | 分 |
NC | | | 检 | 检 |
板 | 条 | 包 |
反 | 测 | 测 |
| | |
应 | | | |
| | | | |
膜 | | | | | |
检 | | | | | |
测 | sis压片 | | | | |
| | | | | |
入
库
注：※ 关键过程 ★ 特殊过程
4.2 作业内容
4.2.1 胶体金制备（柠檬酸三钠还原法）
氯金酸（HAuCl4）水溶液放入三角瓶内加热至沸腾→加热柠檬酸三钠溶液→混匀，
搅拌煮沸10至15分钟→待胶体金溶液颜由蓝→紫→红，冷却即可。
4.2.2金标抗体（反应膜）制备
以0.1M碳酸钾溶液调胶体金溶液pH8.0-9.0→加入抗人IgM单抗，15分钟后加入
聚乙二醇→离心，调532nm测OD值5～10，方阵滴定法选定标记工作浓度→用无纺布
浸湿胶体金溶液，干燥、平整，检测。
4.2.3 金标抗体反应膜质检
将制备好的金标抗体反应膜按 5‰比例抽检，与标准反应膜匹配组装成品，同时与
标准成品作如下对照检测：
a)符合率：样品稀释液、阴性质控血清无假阳性，阳性质控血清均呈阳性； b)反应强度：+/+++（阳性反应线/阴性反应线）；
c)反应时间：30s～辐照灭菌设备5min。
确认合格后才能转入下一工序。
4.2.4 NC反应膜制备
亲和性高分子硝酸纤维素膜→活化处理 12小时→用水洗5次，每次20分钟→室温
干燥后→取纯化Cpn重组MOPP抗原和兔鼠IgG抗体溶于10%CS中，浓度均为2mg/ml，
用Cpn重组肺炎支原体抗原在 NC膜上包被肺炎支原体抗体阳性检测线→用兔抗鼠 IgG
抗体在NC膜上包被对照线→干燥后，用 BS液封闭，H2O清洗后，室温干燥，备用。
4.2.5 NC反应膜质检
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