随着环境污染的加剧和人类活动的不断扩张,许多河湖水域植物的生长受到了极大的影响,其中沉水植物更是受到了严重的威胁。绿羽毛狐尾藻(Ceratophyllum demersum)是一种重要的沉水植物,因其能对水体起到调节水质、增氧作用,并能为水生动物提供适宜的栖息和觅食场所而备受关注。为了保护和利用绿羽毛狐尾藻,需要建立其有效的组织培养体系,为其的保育和利用提供支持。手提式割草机
一、材料与方法
1.材料
本实验使用的绿羽毛狐尾藻为太湖水系产地的优良品种,收集于深度约1.5m的水域。侧枝段为外植体,以此作为培养植物材料。组织培养基为MS基础培养液(Murashige和Skoog,1962年),加入1.5%(w/v)蔗糖和0.8%(w/v)琼脂糖后调节为pH值为5.8 ± 0.1。 2.方法
NFJ防静电不发火地面 将绿羽毛狐尾藻外植体从水中取出,洗净后剪成约1-2cm长的小段,用70%的乙醇进行表面消毒,每30s更换一次乙醇,消毒时间为5min。消毒结束后用蒸馏水洗涤外植体三次,每次5min,再用蒸馏水浸泡至少3h。
2.2.植物组织培养
消毒后的外植体取出后,用无菌技术在无菌工作台内将外植体移植到含有MS培养基的琼脂糖固化板上,并在25℃±2℃、光照强度为3000 Lux、光照时间12h/d的条件下培养。将各个组织培养瓶中的外植体按照不同的处理方式分组,一组设3个瓶,每瓶20个外植体,每个处理重复三次。各组处理如下:
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1.不添加激素培养:MS培养液基础上 不添加任何的激素,培养45 d; 3.添加生长素和激素培养:MS培养液基础上 加入0.5 mg/L生长素和0.05 mg/L NAA(1-naphthylacetic acid),培养45 d。
2.3.形态学观察
按照预设的实验时间,取出各组培养瓶中的组织外植体,记录其外观和发育情况,并做相应的形态学观察。
二、结果与分析
经过70%乙醇消毒、蒸馏水洗涤以及浸泡,绿羽毛狐尾藻外植体表面的杂菌得到有效地去除,消毒后的外植体能够生长良好,这保证了组织培养的成功进行。增大药剂
2.不同激素对狐尾藻的生长影响
陈皮酱 在培养过程中,狐尾藻外植体在MS培养基上生长出了新的小枝,经过不同的激素处理后,其外观和发育情况有明显的差异(图1)。
添加生长素培养的狐尾藻生长缓慢,在培养45天后,新生出的小枝仅有极少的分支,且较短。添加生长素和激素培养的狐尾藻表现为强烈的分枝生长,分支较多,分支长度也较长。相比之下,不添加激素培养的狐尾藻生长较为健壮,在培养45天后,分支较多,分支长度也较长。
经过比较三种不同处理方法的发育情况,可以发现,不添加激素的MS培养液对狐尾藻的生长影响较好。在外植体的生长和分枝发育方面,都表现出较为良好的生长状态和较强的发育能力。在这种培养基的基础上,还可以通过调节培养条件,如光照时间和强度、CO2浓度、O2浓度等对狐尾藻的生长进行促进。
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三、结论
本实验建立了绿羽毛狐尾藻的有效培养体系,并验证了不同激素对狐尾藻生长发育的影响。通过比较不同处理的发育情况,发现不添加激素的MS培养液对于狐尾藻的生长表现较好。这为后续研究狐尾藻的生理代谢、生态适应性以及保护与利用提供了有力的技术支持。