糖尿病大鼠造模过程

糖尿病大鼠造模过程弯板机
1 材料与方法
1. 1 实验动物
SPF级SD雄性大鼠39只, 10周龄, 体重180~200 g。
1. 2 试剂与高脂饲料配方
STZ购自Sigama公司, 胆固醇、胆酸钠由上海蓝季科技发展有限公司提供。
高脂饲料配方: 2%胆固醇, 0. 3%三号胆盐,20%蔗糖, 10%猪油, 67. 7%基础饲料。
1. 3 动物分组与饲养萝卜切条机
SPF级雄性3周龄SD大鼠39只, 体重180g~200g, 适应性饲养一周后, 随机分为正常对照组10只, 模型组34只。模型组大鼠禁食12h后, 单次腹腔注射35mg /kg的STZ。STZ用灭菌的0. 1mmo l/L, pH4. 4d的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液配成2%溶液, 现配现用。正常组只注射等量的缓
冲液。72h后取尾静脉血测空腹血糖高于7. 0mmo l/L 和餐后血糖均高于11. 1mmo l/L为糖尿病模型建立。一次注射未成模, 立即仍按原剂量补注一次STZ, 未成者淘汰,成模但缓解者淘汰。糖尿病大鼠成模后给予要付,分别是药物A+多糖1组(25ug/ml/天,灌胃给药)10只;药物B+多糖1组(25ug/ml/天,灌胃给药)5只;药物C+多糖1组(25ug/ml/天,灌胃给药)5只;药物A+多糖2组(25ug/ml/天,随饮水给药)5只;药物B+多糖2组(25ug/ml/天,随饮水给药)5只;药物C+多糖2组(25ug/ml/天,随饮水给药)5只;正常对照组(5只),多糖组和二甲双胍组给予每天灌胃,七叶皂甙钠组给予腹腔注射。除
高压氮气压缩机正常对照组外其他SD大鼠给予高脂高糖饲料喂养。
1. 4 标本采集
4周后,除取材组外,其他大鼠进行尾静脉取血,约300微升,30min 后用3000r /min 离心15min, 分离血清。并且对糖尿病模型组3只,正常对照组1只进行取材(肾脏、胰腺、血管和心脏),动物称重后,分别于空腹状态下予水合氯醛麻醉(1ml/kg),腹主动脉脉采血10mL, 30min后用3000r /min 离心15min, 分离血清。其他组织分为两部分,一部分组织于-80°C冻存,另一部分组织生理盐水清洗后,用4%多聚甲醛固定固定24h, 常规脱水包埋,
水溶液锂电池连续切片4μm, 切片固定于载玻片上, HE染,免疫组化,并进行光镜观察。
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8周后正常对照组2只,糖尿病模型组3只进行尾静脉取血,约300微升,30min后用3000r /min 离心15min, 分离血清。其余大鼠进行取材(肾脏、胰腺、血管和心脏),称重后,分别于空腹状态下予水合氯醛麻醉(1ml/kg),腹主动脉脉采血10mL, 30min后用3000r /min 离心15min, 分离血清, 用于备检胰岛素含量。其他组织分为两部分,一部分组织于-80°C冻存,另一部分组织生理盐水清洗后,用4%多聚甲醛固定固定24h, 常规脱水包埋, 连续切片4μm, 切片固定于载玻片上, HE染,免疫组化,并进行光镜观察。
ir油墨12周后对正常对照组2只和糖尿病模型组3只进行取材,称重后,分别于空腹状态下予水合氯醛麻醉(1ml/kg),腹主动脉脉采血10mL, 30min后用3000r /min 离心15min, 分离血清, 用于备检胰岛素含量。其他组织分为两部分,一部分组织于-80°C冻存,另一部分组织生理
盐水清洗后,用4%多聚甲醛固定固定24h, 常规脱水包埋, 连续切片4μm, 切片固定于载玻片上, HE染,免疫组化,并进行光镜观察。实验结束时将各组动物处死。

本文发布于:2024-09-22 02:02:41,感谢您对本站的认可!

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