1. 目的
为规范使用人正确和正常的使用ABI 7500型核酸扩增荧光定量检测仪，保证扩增及结果分析的标准化、规范化，特制定本规程。
2. 适用范围
适用于本公司ABI7500荧光定量PCR仪的操作。
3. 职责吹管系数
炉灶节能器3.1 使用人员负责本规程的实施。
3.2 设备使用人负责设备维护保养工作；设备责任人负责设备的定期维护保养工作。
3.3 质量监督员负责监督本规程的实施。
4. 内容
4.1 程序设置
4.1.1 打开电脑及仪器电源，待仪器电源项显示power绿状态。
4.1.2 双击电脑桌面上的7500 software V2.3 图标打开程序，打开程序单击OK，待软件连接仪器并测试校准状态后（若有出现连接失败可尝试重启电脑，检查USB线接口），出现如下界面，单击Design Wizard选项，红箭头指示位置有个下拉菜单，如下图所示。 下拉菜单中有一个Advanced Setup（高级设置）选项，如箭头所示：
点击这个选项，可以进入下面这个界面，
如上图所示，红箭头从上到下指示的分别是①实验名称、②仪器型号和③反应程序类型。（带*号 的必需填） 此图是上面图的延续（自己电脑显示不完全），红箭头从上到下指示的分别是①Plate
Setup选项、②探针类型和③程序应用速度类型，一般使用的探针就是TaqMan探针，速度类型选择默认就可以了（如果是7500fast的话则有快速模式可以选择）。下一步我们可以看到左上角的红箭头指示的一个Plate Setup选项，点击这个选项，就可以进入下一个设置界面。
红箭头①和②指的是设定反应探针和反应样品名称，箭头③处可以填写反应探针名称（如P1,HBV,HCV）。箭头⑤是选择报告荧光，一般使用的发光基团是FAM，箭头⑥是选
择粹灭荧光，达安现在使用的是TAMRA荧光，科华现在使用的是BHQ，在这个仪器中无此选择项，那么就选择none。箭头⑧处可以填写样品名称。点击箭头④和箭头⑨处可以添加反应探针体系名称和样品名称。箭头镀铬添加剂⑦和箭头⑩是选择对应探针体系和对应样品的曲线颜，可选择也可以不选。（另：探针跟样品设定后可保存，方便以后实验调用，具体是点击箭头①②下面的Saved Taeget，下次调用则点击 Add Saved就可调出。）
为了方便讲解，我假定有1个反应探针DAAN和1个样本HBV1，如上图所示。设定完成
之后，我们点击红箭头所指的选项，进入下个界面。
偏心轮机构
在上图，我们可以看到一个类似反应板的界面，黑箭头①指示的有玫瑰红下划线那一排在选定反应孔后会显示出样本孔总数，标准品总数和阴性对照总数。从黑箭头②可以看出暂时还有48个反应孔空余。蓝箭头①和②分别是放大这个孔板界面的按钮，蓝箭头③是显示大小还原默认设置按钮。
锚固件开始设置时，首先我们如红箭头①所示选定A1孔，红箭头②指示的是反应探针名称，红箭头③指示的样品类型，选定反应体系后可以在U——未知样本，S——标准样本，N——阴性样本中选择一个。红箭头⑤是个下拉菜单可以选择反应探针，在红箭头④指示的框里单击鼠标，显示打钩就说明选定了反应体系。红箭头⑥指示的是样品名称，红箭头⑧是个下拉菜单可以选择样品名称。在红箭头⑦指示的框里单击鼠标，显示打钩就说明选定了样品名称。红箭头⑨指示的参比荧光，仪器默认是ROX，但是产品一般没有添加ROX荧光，所以必须选择None。红箭头⑩指示的定量标准品的设置，可根据标准曲线的值从4567升序或是从7654降序的排列，单击可弹出以下界面，具体如下。
上图中，红箭头①表示标准品的数量，②万寿菊粉表示标准品是否走重复孔，③表示起始的浓度，④表示10×的话则为升序，按照4567的浓度；1:10的话则为降序，按照7654的浓度。
例如：做了4个标准品，每个标准品做1个（即没有做复孔），起始浓度为10000，选择10×，选择箭头⑤的自己选择孔位，点击左下角的Apply，则在第10排按照4567次方的顺序排列。
此外也可以选择鼠标双击类似反应孔板的那个界面，会出现下面这个界面：
如上图所示，选定反应孔双击后会出现这样一个界面，红箭头①指示的Task—样品反应类型，红箭头②是指示的是Target—反应探针，红箭头③指示的是Sample—样品名称。这三个都是下拉菜单，可以选择前面设置好的反应体系和 样品名称。红箭头④是个文本框，可以备注样本的详细信息。按照样本放置的实际情况设置好之后，可以点击红箭头⑤指示的Run Method选项进入下个界面。
上图的箭头①是设定反应体系体积的，箭头②是添加反应程序阶段的，箭头③是添加反
应程序步骤的，箭头⑤和⑥是制订收集荧光信号的标志，例如箭头⑥所示高亮显示时表示在此步骤收集荧光信号。（切记，收集荧光只能1个地方，若是出现2个收集荧光信号的，则软件上会有出现蓝的错误提示）
设定好循环条件，就可以进行模板保存，以便下次实验时调用程序，点击位于软件中间最右方的键（注：这个键是由于本人电脑不是宽屏的（14寸acer。。。），如果是AB配的E6500电脑则可以在软件上全部显示，不会出现键或是那些滑动条，但是。。字体会小点，，），选择保存运行的模板，命名。下次实验使用的时候就不用再在设条件，直接点击open run method，调出你所需要做的实验的扩增条件。
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