产品说明书 / Specification Sheet
222a2产品编号：BSP053
产品简介：
本试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时，采用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行沉淀，并使用广谱蛋白酶抑制剂抑制蛋白酶活性，最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性。而且最终的蛋白抽提物呈干粉状，有利于蛋白质的长期稳定保存。提取的蛋白，包括膜蛋白，核蛋白，胞质蛋白以及在植物组织中含有的稀有蛋白在内的全蛋白。分离得到的蛋白组分可应用于SDS-PAGE、Western blot等。每次可以提取100mg植物组织，本试剂盒可以使用50次。 产品特点：
1．提取的蛋白质是包括稀有蛋白在内植物细胞的全蛋白质。
2．可以进行50x100mg植物组织。
3．经过适当处理后，可以用于2D电泳，等电点聚焦等实验。
4．对植物细胞的裂解效果和植物细胞的非蛋白质成分去除效果高。
5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。
运输和保存条件：
常温下运输，收到后将Solution C和Solution D在-20度的条件下保存，Solution A和B 在2-8度的条件下保存，保质期一年。
铅板加工组成：
本试剂盒由Solution A和Solution B构成，可以使用50次。
豆袋弹1、BSP053-1 Solution A 50 ml
2、BSP053-2 Solution B 100ml
3、BSP053-3 Solution C 120ul
4、BSP053-4 Solution D 1ml
使用方法：
1、实验前，将研钵和研槌置于-20℃冰箱中预冷；将植物组织置于-80℃冰箱中冷冻保存以备后用。
2、当植物组织仍处于冷冻状态时，用剪刀将植物组织剪碎。
3、将剪碎的植物组织置于预冷的研钵中，加入液氮保持植物组织处于冷冻状态，用研槌尽快地将植物组织
研磨成粉末状。
4、取大约100mg的组织粉末，加入1ml Solution A和0.7ul Solution C的，将粉末悬浮后，置于-20℃冰箱
中，静置45min。
5、16000rpm，4℃，离心15min，取沉淀。
6、往沉淀中加入1ml Solution B,10ul的Solution D和0.7ul Solution C，并将沉淀重悬后，置于-20℃冰箱
中，静置1h。
7、16000rpm，4℃，离心15min，取沉淀。
8、往沉淀中加入1ml Solution B，10ul的Solution D和0.7ul Solution C并将沉淀重悬后，立即16000rpm，
离心15min，取沉淀。
产品说明书 / Specification Sheet
9、取沉淀进行冷冻干燥，-80℃保存。
10．根据下游实验的要求，选择合适的样品缓冲液对冷冻干燥的样品进行溶解,4℃ ,16000 RPM离心5min。
11．取上清，-20℃保存，取适量体积用于各种实验。
注意事项：
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1、使用液氮时，请注意戴上防冻手套，避免液氮冻伤。若研磨的组织量较多，可多次加入液氮，保持植物
组织处于充分冷冻状态时研磨。
2、植物细胞壁的破碎程度会影响蛋白的抽提效果。故在步骤3中，尽量将植物组织充分研磨粉碎，以破碎
细胞壁，促进细胞蛋白的释放，同时尽量不要取植物的唯管组织。
3、步骤9中冷冻的固体样品中含有或多或少的植物纤维，在加入适当的样品缓冲液对冷冻干燥固体溶解离
心后，会产生植物纤维沉淀，不影响下游实验。
4、用含有SDS，尿素，SB3-10等的样品缓冲液对冷冻干燥的样品进行溶解，有助于疏水性蛋白质的完全溶
解。
5、如果用于2D电泳，可以将蛋白质沉淀用乙醚：乙醇（1：1 V/V）对进行震荡洗涤，可以进一步减少沉淀
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中的盐和有机物残留，或用2D样品清洁试剂盒（786-124），减少盐和有机物残留，一般情况下没有必要。
6、可以采用我公司生产的非干扰型蛋白质浓度定量试剂盒（SK3071）或改良型Lowry法蛋白质浓度定量试
剂盒（SK4041）对提取样品中的蛋白质进行定量。
ip调度系统7、对于SDS-PAGE电泳，可以采用我公司生产的新型快速考马斯蓝染液（BSP015）或新蛋白质考马斯亮
蓝染试剂盒（BSP007）对胶进行染。
8、Solution A和Solution B易挥发，有一定的腐蚀性，刺激性气味和易燃性，实验时避免与皮肤接触且具有一
定的，请戴上一次性手套，在化学通风橱中进行，并注意远离明火。
9、使用后，请立即旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气的物质发生化学反应。
10、本试剂盒只能够用于体外实验，不能够用于临床、和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担
责任。
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