薄层谱法标准操作规程

薄层谱法标准操作规程
1、目的
进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定
2scm文件、原理:
    薄层谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均匀薄层。等点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的谱图作对比,用以进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定的方法。
3、仪器与材料
3.1 玻璃板:除另有规定外,用5cm×20cm10cm×20cm20cm×20cm的规格,要求光滑,平整、洗净后的不附水珠,晾干。
3.2 固定相或载体:最常用的有硅胶G、硅胶GF、硅胶Hrace实验、硅胶HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。其颗粒大小,一般要求直径
10—40µm。薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的粘合剂,一般常用10—15%煅石膏(CaSO4·2H2O1404小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5—0.7%)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。也有含一定展开液或缓冲液的薄层。
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3.3 变压器防盗器涂布器:应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。
3.4 点样器:常用具支架的微量注射器或定时毛细管,应能使点样位置正确集中。
3.5 展开室:应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层谱展开缸,并有严密盖子,除另有规定外,底部应平整光滑,应便于观察。
4、操作方法
4.1 薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2—0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干,后在110耐热粘合剂30分钟。即
置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。
4.2 点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.0cm,点样直径为2——4mm,点间距离约为1.5—2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
4.3 展开:展开室如需预先用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖,使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5—1.0cm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,等展开至规定距离(一般为10—15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。
注:如需用薄层扫描仪对谱斑点作扫描检出,或直接在薄层上对谱斑点作扫描定量,则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法,除另有规定外,可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明,结合具体情况,选择吸收法或荧光法,用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多,故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性的情况下,将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描,进行比较并计算定量,以减少误差。各种供
试品,只有得到分离度和重现性好的薄层谱,才能获得满意的结果。
5、注意事项
5.1 所用玻璃板应洗净不挂水珠,光滑平整。
5.2 铺板要均匀,厚度适宜,并于室温下晾干后在110团队监控活化30分钟,置于有干燥剂的干燥箱或干燥器中备用。
5.3 点样点一般为圆点,不能太大。

本文发布于:2024-09-23 04:25:16,感谢您对本站的认可!

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