碳酸盐缓冲液(CarbonateBicarbonate Buffer)
由于碳酸盐pH值偏碱，因此，常⽤于pH>9得缓冲液配制(附表1)。
附表1、 0、2 mol/L碳酸盐缓冲液(pH9、2～10、7)
磷酸缓冲液(Phosphate Buffers,PB)
磷酸盐就是使⽤最⼴泛得⼀种缓冲剂，由于它们就是⼆级解离，有⼆个pKa
PO4:pKa1＝2、12,pKa2＝7、21; 值，所以⽤它们配制得缓冲液,pH 范围最宽。NaH
2
HPO4:pKa1＝7、21,pKa2＝12、32。
Na
2
另外，磷酸盐还有钾盐分⼦形式,⼀般来说，低温时钠盐难溶，钾盐易溶，因此，配制细胞培养⽤试剂时常常添加钾盐试剂，但若配制⼗⼆烷基硫酸钠(SDS)聚丙
烯酰胺凝胶电泳得缓冲液时，只能⽤钠盐⽽不能⽤钾盐，因为SDS会与磷酸钾⽣
成难溶得⼗⼆烷基硫酸钾。
磷酸缓冲液得优点为:①可配制成不同离⼦强度得缓冲液;②适⽤pH缓冲范围较宽;③受温度影响缓冲液pH值变化较⼩;④离⼦强度对缓冲液pH影响较⼩，如0、1mol/L缓冲液稀释10倍其pH变化⼩于0、1。
磷酸缓冲液得缺点就是:①磷酸盐易与钙离⼦(Ca2+)、镁离⼦(Mg2+)及重⾦属离⼦结合⽣成不溶得沉淀物;②可能⼲扰某些⽣物化学反应过程，如对某些酶得催化活性具有⼀定程度得抑制作⽤。
NaH
2PO
4
得pH值偏碱性，可⽤作pH>10得缓冲液。
⽽pH＝6～8得中性缓冲液就是更常⽤得缓冲液，需要NaH
2PO
机器人焊接
4
与Na
2
HPO
4
两种
磷酸盐混合配制(附表2)。
附表2、 0、2 mol/L磷酸盐缓冲液(pH5、7～8、2)
kawd-445
磷酸盐缓冲溶液(Phosphatebuffered saline, PBS)
磷酸盐缓冲液就是在磷酸缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液得渗透压，因此,PBS适⽤于做细胞缓冲液，常⽤PBS配制如下。NaCl 8g
KCl 0、2g不用充电的手电筒
氧浓度传感器
Na
2PO
接种棒4
0、24g
在800ml蒸馏⽔中溶解,⽤HCl调节溶液得pH值⾄7、2～7、4加⽔定容⾄1L,15psi(1、05kg/cm2)⾼压灭菌20min，室温保存备⽤。 Tris缓冲液(TrisHCl Buffer, TB)
Tris得pH值偏于碱性，因此，通过添加HCl调节pH⾄所需值,TrisHCl缓冲液得离⼦强度(mol/L)就是专指
Tris得浓度，如某⼀特定pH 得0、05 mol/L Tris 缓冲液得配制就是将50ml 0、1 mol/L Tris碱溶液与附表3所⽰相应体积(ml)得0、1 mol/L HCl混合，加⽔⾄将体积100ml，即为0、05 mol/L Tris缓冲液。
另外，按附表3制备得缓冲液，由于试剂来源得不同，缓冲液pH可能与所需略有差异，此时可通过稍许减少或增加HCl⽤量，精细调节pH⾄所需值。
附表4、 0、05 mol/L Tris缓冲液
Tris盐缓冲液(TBS):
Tris盐缓冲液就是在Tris缓冲液基础上添加NaCl以维持溶液得渗透压，因此,TBS也适⽤于做细胞缓冲液，常⽤TBS配制如下。
8g NaCl、0、2g KCl以及3g Tris溶解于800ml蒸馏⽔中，加⼊0、015g酚红并⽤HCl调pH⾄7、4⽤蒸馏⽔定容⾄1L，分装后在15psi(1、05kg/cm2)⾼压灭菌20min，室温保存。
现在常⽤Tris盐缓冲液通常不加pH指⽰剂,⽽且该溶液如果不⽤于细胞培养，通常不加KCl及酚红。
Hank’s液 (Hank’s Balanced Salt Solution)
Hank’s液就是⼀种平衡盐溶液，主要⽤于细胞培养取材时组织块得漂洗、细胞得漂洗等。
贮存液A液:
(I)NaCl 80g
KCl 4g
2
O 1g
MgCl
人造细胞2·6H
2
O 1g
⽤双蒸馏⽔定容⾄450ml。
(II)CaCl
2 1、4g (或CaCl
2
·2H
2
O 1、85g)
⽤双蒸馏⽔定容⾄50ml。
将I与II液混合，即成A液。贮存液B液:
Na
2HPO
4
·12H
2
O 1、52g,
KH
2PO
4
0、6g,
酚红 0、2g,
葡萄糖 10、0g,
酚红应先置研钵内磨细，然后按配⽅顺序⼀⼀溶解,⽤双蒸馏⽔定容⾄
500ml。
(3)应⽤液:A、B储存液分别经112、6℃湿热灭菌20min，取A与B液各25ml，加⽆菌双蒸馏⽔⾄450ml，使⽤前⽤⽆菌得3、5%或5、6% NaHCO
3
调⾄所需pH。
注意：药品必须全部⽤A、R试剂，并按配⽅顺序加⼊,⽤适量双蒸⽔溶解，待前⼀种药品完全溶解后再加⼊后⼀种药品，最后补⾜⽔
NaCl 80g,
KCl 4g,
Na
2HPO
4
·12H
2
O 1、52g,
KH
2PO
4
0、6g,
葡萄糖 10g,
⽤双蒸馏⽔溶解后，加⼊0、4％酚红溶液50ml，再加⼊双蒸⽔⾄1000ml,112、6℃湿热灭菌20min,4℃冰箱保存。临⽤前将原液⽤⽆菌双蒸⽔作1:10倍稀释,
⽤⽆菌得3、5%或5、6% NaHCO
3
调⾄所需pH。
pH7、2柠檬酸盐缓冲液(Citrate Buffer)
柠檬酸 0、327g
柠檬酸钠 2、63g
磷酸氢钠 0、222
葡萄糖 0、00255mg
蒸馏⽔加⾄100ml。
pH3、3枸橼酸磷酸盐缓冲液(Citric acid Phosphate Buffer)
0、131mol/L citrate acid,0、066mol/L Na
2HPO
4
，等量混合，调节pH⾄3、
3。
0、5 mol/L EDTA, pH 8、0
EDTA·2H
2
O 186、1 g
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