PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方
不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是我们实验室的配方,供大家参考。
我们实验室的配方:
A液:0.1mol/L磷酸二氢钾:
磷酸二氢钾(KH2PO4,MW136.09)1.361g,加双蒸水至100ml。
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠:
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O,MW177.99)1.78g,加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O,MW358.14)3.58g,加双蒸水至100ml。
pH -- A液 (ml) -- B液(ml) 空气源热泵热水系统
5.60 -- 9.50 -- 0.25
5.91 -- 9.00 -- 1.00
碗形垫片6.24 -- 8.00 -- 2.00
6.47 -- 7.00 -- 3.00
6.64 -- 6.00 -- 4.00
6.81 -- 5.00 -- 5.00
6.98 -- 4.00 -- 6.00
7.17 -- 3.00 -- 7.00
7.38 -- 2.00 -- 8.00
7.73 -- 1.00 -- 9.00
8.04 -- 0.50 -- 9.50
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4•12H2O(磷酸氢二钠)
NaH2PO4•2H2O(磷酸二氢钠)Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可bs认证0.01M
PBS缓冲液
称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异。以下是我的总结: 
母液的配制: 
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:
0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 
若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。 
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :
pH       0.2M NaH2PO4(ml)   0.2M Na2HPO4(ml)
5.7             93.5                          6.5
5.8             92                             8           
5.9             90                             10
6.0             87.7                          12.3
6.1             85                             15
6.2             81.5                          18.5
6.3             77.5                          22.5
6.4             73.5                          26.5
6.5             68.5                          31.5
6.6             62.5                          37.5
6.7             56.5                          43.5
6.8             51                            49
6.9              45                           55
7.0              38                           62
7.1              33                           67
7.2             28                            72
7.3              23                           77
7.4              19ml                         81ml
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7.5              16                           84
7.6              13                           87
7.7             10.5                          0.5
7.8              8.5                          91.5
7.9             7                              93
8.0             5.3                           94.7 
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB),磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)
试剂: NaH2PO4·2H2O    Na2HPO4·12H2O
光纤调整架配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,
可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)
pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)  0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7          93.5                      6.5
林妙可被毒虫咬伤
5.8          92.0                      8.0
5.9          90.0                    10.0
6.0          87.7                    12.3
6.1          85.0                    15.0
6.2          81.5                    18.5

本文发布于:2024-09-22 10:01:40,感谢您对本站的认可!

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