胶原染法——精选推荐

结締组织染胶原纤维染法
一般而言,疏松结缔组织、致密结缔组织、脂肪组织、网状纤维组织、软骨组织、骨组织和血液均属结缔组织。
结缔组织由细胞和大量的细胞间质构成。间质包括基质和纤维两种成分。疏松结缔组织和致密结缔组织的纤维有胶原纤维,弹力纤维和网状纤维。
光学技术切片的结缔组织染是指胶原纤维,弹力纤维和网状纤维染,而通常所说的结缔组织染多指胶原纤维染。
胶原纤维染法:胶原纤维由纤维母细胞分泌产生。纤维母细胞,纤维粗细不等直径在1-2微米之间,呈分枝状,相互交织,少量常呈明显的纤维状;成熟的和大量存在于组织时,则显均质性,具较强的的嗜酸性,在苏木素—伊红染(简称HE染)的切片上易于识别。但在某些情况下,它与肌纤维的鉴别是有困难的。例如纤维瘤或纤维肉瘤与平滑肌瘤或平滑肌肉瘤及横纹肌瘤及横纹肌肉瘤的鉴别。为此,适宜的采用某些特殊染就十分必要了。如V en Gieson氏染法(胶原纤维呈红,肌纤维呈黄);Masson氏三染法(胶原纤维呈绿或兰,肌纤维呈红)。
1 结締组织染
1.1 胶原纤维染法
1.1.1.Van Gieson氏染法
[固定]
10%甲醛,Zenker氏液,酒精等。
[试剂]
Weigert氏铁苏木精液
1%盐酸酒精(70%)溶液
V an Gieson氏染液:
1%酸性品红液10ml
饱和液(约1.22%)90ml
(分瓶盛放,临用前按比例混合)
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.Weigert氏铁苏木精液内染5-10分钟。
3.流水稍冲洗。
4.1%盐酸酒精溶液迅速分化,自来水充分冲洗。。
5.V an Gieson氏液内30-60秒钟。钢制汽车尾板
6.蒸馏水速洗,用滤纸吸干(或从染液内将切片取出,直接用95%洒精分化数秒)。
7.常规脱水,透明,封固。
[结果]
胶原纤维呈红至粉红;肌肉和神经胶质呈黄;细胞核呈蓝至蓝黑。
1.1.2 改良Van Gieson氏染法
[固定]
10%甲醛,Zenker氏液,酒精等。
[试剂]
天青石蓝液:
天青蓝B 0.5g
硫酸铁铵5g
甘油14ml
蒸馏水100ml
配制:硫酸铁铵溶于蒸馏水中,放置12~24小时后加入天青石蓝,稍加温煮沸,冷却后过滤,再加甘油。
Harri氏铁苏木精液
V an Gieson氏染液:
1%酸性品红液20ml
饱和液(约1.22%)80ml
蒸馏水100ml
(分瓶盛放,临用前按比例混合加等量之蒸馏水煮沸,冷却后使用)
95%酒精饱和液(89%)
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.天青石蓝液染5分钟,蒸馏水洗。
3.Harri氏铁苏木精液内染5-10分钟。
4.自来水充分冲洗,蒸馏水洗。
5.V an Gieson氏液内3-5分钟。
6.-酒精饱和液分化数秒钟。
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7.无水酒精迅速脱水,透明,封固。开关柜测温装置
[结果]
胶原纤维呈红至粉红;肌肉和神经胶质呈黄;细胞核呈蓝至蓝黑。[临床应用]
用于区别胶原纤维,神经纤维和平滑肌等。
[注意事项]
V an Gieson氏染液为水溶液配制,对碱性染料具有很强的脱能力,常用的明矾苏木精染核易被脱,所以选用铁苏木精染核。红可被水洗掉,应选用蒸馏水;的黄可被酒精脱掉,以酒精脱水时应迅速。
1.1.3 Mallory氏三染法
[固定]
Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。甲醛固定的组织必须经过二次固定,以重铬酸钾-醋酸液处理15-60分钟。
[试剂]
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Lugol氏碘液
Mallory氏苯胺蓝液:
苯胺蓝0.5g
橘黄G    2.0g
1%磷钨酸水溶液100ml
配制:苯胺蓝以1%磷钨酸液50ml水浴加热溶解;橘黄G以1%磷钨酸液50ml 加热溶解, 冷却后分别过滤后混合.
0.5%酸性复红水溶液
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.Lugol氏碘液脱汞盐结晶,充分水洗。
3.明矾苏木精常规染,分化,水洗。
4.0.5%酸性复红水溶液染1—5分钟。
拐角5.自来水洗30秒钟或较长,直至纤维将近无为止,蒸馏水洗。
6.Mallory氏苯胺蓝液染约20分钟(勿水洗)。
7.直接以95%酒精分化(镜下控制)。
8.无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
[结果]
胶原纤维,网状纤维,盐基性颗粒呈深蓝;软骨,粘液,淀粉样物质呈淡蓝;纤维素,神经胶质原纤维酸性颗粒呈红;红细胞,髓鞘呈橘黄至橙红;细胞核呈紫蓝。
1.1.4 Mallory氏磷钼酸苏木精染法
[固定]
Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。甲醛固定的组织必须经过二次固定,以重铬酸钾-醋酸液处理15-60分钟。
[试剂]
磷钼酸苏木精溶液
95%酒精溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.磷钼酸苏木精溶液染12~24小时,或54C温箱内染2~3小时。
3.95%酒精溶液分。
4.无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
[结果]
结缔组织呈深蓝。
1.1.5 Mallory氏磷钨酸苏木精染法
Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。甲醛固定的组织必须经过二次固定,以重铬酸钾-醋酸液处理15-60分钟。
[试剂]
Lugol氏碘液
5%硫代硫酸钠水溶液
Mallory氏磷钨酸苏木精液
95%酒精溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.Lugol氏碘液媒染2~3小时。
3.蒸馏水洗。
4.5%硫代硫酸钠水溶液脱碘。
5.Mallory氏磷钨酸苏木精液染2~3小时。
6.95%酒精溶液分。
7.无水酒精脱水,二甲苯透明,封固。
[结果]
结缔组织呈深蓝。
1.1.6 Masson氏三染法六六六滴滴涕
[固定]
Zenker氏液及Bouin氏液固定最好。甲醛固定的组织必须经过二次固定,以重铬酸钾-醋酸液处理15-60分钟。
[试剂]
酸性复红液:
酸性复红0.3g
丽春红0.7g
冰醋酸  1.0ml
蒸馏水100ml
苯胺蓝液:

本文发布于:2024-09-24 04:20:38,感谢您对本站的认可!

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