内江职业技术学院生物技术系陈霞
（一）实训目的
实验中所使用的玻璃仪器及塑料器皿清洁与否，直接影响实验结果，往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，实验用器皿洗涤清洁工作是十分重要的基本操作，是做好实验的前提及实验成败的关键之一。通过本次授课，掌握实验不同器皿的洗涤方法，及洗液的配置与保存。 （二）实训用具
钾、浓硫酸、洗衣粉、钢丝刷、脏污培养瓶、脏污手术剪、脏污镊子、重铬酸、烘箱、培养皿、三角瓶、试管、培养瓶、纯净水、镊子、剪刀、等金属器械
（三）实践学时与场地
6学时，植物组培实验室。
（四）实训步骤
第一、洗涤液准备
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实验室常用洗涤剂有洗衣粉、合成洗涤剂和铬酸洗液。
1、洗衣粉是碱性去污剂，易溶于水，去油脂力较强，常用于三角瓶、果酱瓶、烧杯以及金属器械的洗涤，由于价格低廉、使用方便，是首选洗涤液。
环保万能胶2、铬酸洗涤液
铬酸洗液是强氧化剂，去污力很强，但对油脂类物质无效，不能用于金属器皿的洗涤，一般情况下是用较少，必要时用于移液管、容量瓶、滴管等口径较小的玻璃器皿以及载玻片、盖玻片等物品的洗涤。
配制方法：重铬酸钾：水：硫酸=1：2：20的配方去污效果最好。用重铬酸钾(K 2Cr 2O 7)25g 溶解在50ml60度热水中，然后向溶液中缓缓加入浓硫酸(H2SO4)450ml，边加边搅，配制时要小心。新配置的铬酸洗涤液呈棕红，有均匀的红小结晶，贮存于防酸、耐热、开口较大的塑料或玻璃容器内，当洗液用久后变为黑绿，即说明洗液无氧化洗涤力。 3、浓HCl（工业用）：常用于洗去水垢或某些无机盐沉淀。
4、1%—2%HCl 溶液：新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质
5、浓HNO3：常用于洗涤除去金属离子。
6、硫酸及发烟硝酸（98%的硝酸）混合物：适用于特别油污、肮脏的玻璃器皿。
7、8mol•L-1尿素溶液（PH1.0）：新购买的塑料器皿
8、1mol•L-1KOH溶液：新购买的塑料器皿
9、100~150g/L的氢氧化钠(钾)溶液：除去玻璃器皿上的碳质残渣。
制造业采购10、10-3mol•L-1EDTA溶液：用于除去塑料容器内壁污染的金属离子。
11、10g/LEDTA的20g/L氢氧化钠溶液：用此溶液浸泡洗净的玻璃器皿，能除去容器表面吸附的一些微量金属离子。
12、5%—10%磷酸三钠（Na3PO4•12H2O）溶液：用于洗涤油污物。为除去玻璃器皿上的碳质残渣，可将器皿在此溶液里浸泡几分钟，然后用刷子除去残渣。
13、高锰酸钾的碱性溶液：少量高锰酸钾溶于100~200g/L的氢氧化钠溶液中。适于洗涤带油污的玻璃器皿，但余留的二氧化锰沉淀物需用盐酸或盐酸加过氧化氢洗去。
14、氢氧化钠(钾)乙醇溶液：把约1L95%的乙醇加到含120g氢氧化钠(钾)的120mL水溶液中，就成为一种去污力很强的洗涤剂，玻璃磨口长期暴露在这种洗液中易被损坏。
15、盐酸乙醇溶液：1份盐酸和2份乙醇的混合物，用以洗涤有机试剂染的器皿。
16、碱性乙醇洗液：将25克氢氧化钾溶于少量水中，在用乙醇稀释至1升。此溶液也适于洗涤玻璃器皿上的油污。
（10）有机溶剂：丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗脱油漆类污垢。
第二、洗涤方法
把组织培养用的培养皿、三角瓶、试管等玻璃器皿进行彻底清洗。洗涤液为洗衣粉，如器皿上粘有机污物，则用有机洗涤剂清洗。
1、玻璃器皿洗涤
凡洗净的玻璃器皿，其壁上不沾有水珠，否则表示尚未洗净，应按上述方法重新洗涤。量具玻璃仪器不能烘烤，只能晾干或风干。
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(1)新玻璃器皿
新购置的玻璃仪器表面常附着有游离的碱性物质，可先用去垢剂（0.5%水溶液）或肥皂水洗刷，再用自来水洗净。然后浸泡1%—2%HCl溶液中过液，次日取出用自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水漂洗数次，置烘箱内烘干或倒置晾干备用。
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(2)脏污器皿
先将器皿中的残渣清除去，清水洗净，如有油脂，先用吸水纸将其擦去，然后置于洗衣粉溶液中浸泡10-15min，用毛刷反复洗刷，清水冲干净，烘干或晾干，应达到透明几净、不卦水珠。
(3)脏污吸管、滴管等内径狭小的玻璃制品
四甲基环丁烷需洗涤物品先放入铬酸洗涤液浸泡12小时，流水冲洗0.5小时，烘干或晾干。
(4)载玻片和盖玻片
载玻片和盖玻片不能用力洗，清水冲洗，铬酸洗涤液浸泡几小时或稀铬酸洗涤液煮沸0.5小时，取出清水冲洗，贮藏在95%酒精中。
2、塑料用品洗涤
一般用合成洗涤剂洗涤，附着力强，冲洗时应反复多次，最后蒸馏水冲洗。
新购买的塑料器皿一般先用自来水清洗后，应以8mol•L-1尿素溶液（PH1.0）洗涤，再用蒸馏水漂洗。随后用1mol•L-1KOH溶液洗涤，再用蒸馏水漂洗。然后用10-3mol•L-1EDTA 溶液洗涤，以除去污染的金属离子，最后用双蒸馏水充分漂洗，倒置晾干备用。
经过上述洗涤步骤处的器皿，每次使用后可以0.5%去垢剂溶液洗涤，再分别用自来水充分冲洗和蒸馏水漂洗，晾干后即可使用。如果必要也可按碱→尿素→EDTA洗涤顺序处理，以除去器皿上的污染物。
3、金属用品洗涤
一般不宜用各种洗涤剂洗涤，需要清洗时，一般用酒精擦洗，并保持干燥。
第三、注意事项
1、铬酸洗液氧化性强，使用时必须注意安全，保护皮肤。
2、第一次用少量水冲洗刚浸洗过的仪器后的废液主要成分是硫酸铬，Cr2(SO4)3.nH2O，硫酸，和水等。为避免造成环境污染，应集中储存在废液瓶中，首先在废液中加入硫酸亚铁，使残留有毒的六价
铬还原成无毒的三价铬，再加入废碱液或石灰使三价铬转化为Cr(OH)3沉淀，埋于地下。废水不要倒在水池里和下水道里，长久会腐蚀水池和下水道，应倒在废液缸中，缸满后倒在垃圾里，如果无废液缸，倒入水池时，要边倒边用大量的水冲洗.
3、洗液倒入要洗的仪器中，应使仪器周壁全浸洗后稍停一会再倒回洗液瓶，铬酸洗液氧化反应时间长，可反复使用，直至洗液呈黑褐为止。如无备用的K2Cr2O7加入，可加一些工业用的KMnO4，可起部分恢复作用。
（六）评分标准
洗涤液配制准确，洗涤方式正确，洗涤器皿干净。高压灭菌程序正确，操作熟练，严格按安全操作进行，排压、稳压准确无误。
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