黑龙江神树制药有限公司
箱包手把1、目的
规范检定菌的传代操作，为检定菌种的传代工作提供书面依据，保证检验的质量 2 、责任蟛蜞菊种子
质量管理部、Q C主管、化验室检验员。
3、范围
4.内容
4.1 检定菌：大肠杆菌。
4.2传代用具：电热手提高压蒸汽消毒器，Φ2cm试管、棉塞、接种环、超净工作台、无菌服、酒精灯。 4.4 操作步骤：
打猎机
4.4.1 实验前的准备工作：
4.4.1.1 用具的处理：
4.4.1.1.1 试管：用洗涤剂清洗后，用水冲洗干净，再用去离子水冲洗三次倒立，晾干备用。
4.4.1.1.2 棉塞：121℃高压灭菌20分钟，备用。
4.4.1.1.3 无菌服用水洗涤干净后，晾干。
4.4.1.2 用具的灭菌：
4.4.1.2.1 无菌服用布口袋配套装入，扎紧袋口，用牛皮纸扎好。在115℃±0.5℃蒸汽灭菌30分钟。
usb token4.4.1.3 接种室的清洁与灭菌：
4.4.1.3.1 每次操作前应对接种室作彻底清洁，用2%来苏尔或0.1%新洁尔灭溶液，擦洗工作台面和一些可能污染的死角，再用紫外灯照射至少1小时。
4.4.2 培养基的配制：热流道分流板
4.4.2.1 营养琼脂斜面培养基的配制：称取营养琼脂培养基34g，加水1000ml溶解，分装，115℃灭菌30分钟，斜放，放冷备用。 4.4.3 操作：
4.4.3.1 将注明菌名的菌种斜面从冰箱中取出后在室温放置约30分钟，待温度平衡后再与新配制的营养琼脂斜面一起转移到超净工作台内。
4.4.3.2 点燃酒精灯，左手握住菌种斜面，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒钟，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。
4.4.3.3 右手用无名指、小指及掌部夹住棉塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻
轻拨开棉塞，将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮取少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管口移至火焰旁。
4.4.3.4 堵上棉塞，左手将菌种管放下，取营养琼脂斜面1支，照上述操作打开棉塞，将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部，由底向上轻贴斜面的表面曲折移动，使细菌划在斜面的表面上。
4.4.3.5 取出接种棒，在火焰旁将培养基管棉塞堵上，然后将接种过细菌的接种棒在火焰上烧灼灭菌。
4.4.3.6 将已接种完毕的营养琼脂放在培养箱内培养， 30—35℃培养48小时。
印花胶浆4.4.3.7 取出后放入冰箱0--5℃保存， 3个月转种一次。
4.4.3.8 菌种传代结束，给菌种传代管编号，填写菌种传代记录。
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